药物血浆半衰期的测定实验报告

药物血浆半衰期的测定实验报告

【实验目的】

掌握药物半衰期的测定方法

【实验原理】

药物消除半衰期就是血浆药物浓度下降一半所需要的时间。其长短可反映体内药物消除速度,根据半衰期可确定给药间隔时间。按一级动力学消除的药物,其血浆半衰期就是一个固定的值,不受药物初始浓度与给药剂量的影响,仅取决于值(一级动力学的消除速率常数)的大小。

=

磺胺嘧啶(SＤ)的测定原理:磺胺类药物为氨基苯类化合物,在酸性溶液中可与亚硝酸钠起重氮反应生成重氮盐,此盐在碱性溶液中与麝香草酚溶液起偶联反应形成橙红色偶氮化合物,将该化合物在525nm波长下比色,其光密度与磺胺类药物的浓度成正比(朗伯比尔定律)。

【实验对象】

家兔。体重1.5～2、5ｋg。

【实验试剂】

１0%磺胺嘧啶钠,肝素,7、5%三氯醋酸,０、5%麝香草酚,0、5%亚硝酸钠,蒸馏水。

【实验器材】

离心机,分光光度计,离心管,试管,注射器,移液管,吸球,烧

杯,玻璃棒。

【实验方法】

(1)取药前血

取家兔１只称重,０.5%肝素生理盐水润湿注射器与抗凝瓶,由耳缘静脉取药前血2ml(空白对照)于抗凝瓶内。

(2)给药

由一侧耳缘静脉注射１0%磺胺嘧啶钠溶液3ml/ｋg(药物浓度为20０mg／１0ml)准确记录给药结束时间。

(3)取药后血

分别于给药后5min与３５ｍin,取另一侧耳缘静脉血各２ml分别置于抗凝瓶内(每次取血后,洗净注射器并用肝素生理盐水湿润备用)。准确记录实际采血时间。

(4)测定血液样本SD浓度

3次血液样本各准确吸取０、２ｍl,分别加至编号的含7、5%三氯醋酸2、8ml离心管中,混匀。300０ｒ/mｉn,离心10m ｉn。

准确吸取离心管各管上清液1.5ml,分别至相应编号的试管中。各管分别加入0、5%亚硝酸钠溶液0、5ml,充分混匀;再加入0、５%麝香草酚溶液1ml,混匀。

以给药前的空白管作参比,使用分光光度计在5２5nm波长处测定各管光密度值,按下列公式计算血中SD浓度。

血中ＳD浓度()＝

(5)半衰期的计算

=

代入上述公式:

公式中T为给药后两次取血的间隔时间,、分别为给药后两次取血的血浆药物浓度。

(6)计算零时浓度()

(7)计算表观分布容积()

计算本次实验的半衰期、预期零时浓度及表观分布容积。【注意事项】

1、采血量要准确。采血时可用食指轻弹兔耳根部,使兔耳充

血后有助于家兔耳缘静脉取血。若耳缘静脉采血不畅,可用刀片划破耳缘静脉采血或心脏取血。若未能及时采血,须以实际采血间隔时间代入公式计算。每次采血应避免采血器械交叉污染。

2、离心管及试管要注意标记编号,以免实验操作中混淆。

3、血液样本ＳＤ浓度测定时,注意所加溶液的正确顺序。【思考题】

测定药物血浆半衰期有何临床意义？

原始数据

体重:2、７ｋg 给药:８、1ｍl

给药结束时间:15:3４

第一次取血结束时间:１5:52

第二次取血结束时间:１6:44

18ｍin,70、7miｎ,T=５2、7miｎ

实验室结果

OＤ值

组别

5ｍin 35mｉｎ

10、5４5 0、452

20.327 0、2７0

30、753 0.46０

40、590 0、3２８

50、822 ０、9２4

60、92０0、7１9

70、582 0.４１3

8０、91３0、784

本组实验数据为第８组数据,实验数据处理如下:23１.5mｉｎ

9６3、５g/ml ６０/9６３、5=０.0６2l／kｇ

思考与讨论:

实验过程中,存在一些因素使药物浓度降低,进而影响半衰期大小,这些因素可能就是:

1.加三氯醋酸过程中未立即摇匀,出现凝血块,血液样本中少

量药物可能与蛋白结合被沉淀。

2.给药过程中,有少许药物流落未注入耳缘静脉。

3.注射器取血、释血过程中残留少许全血于器壁。

此外,采血过程中,2次采血时长(18min,5２、7miｎ)均超过规定时长(5miｎ,３５min)血药浓度会因药物代谢的变化而产生较大误差,再者,在吸取上清液的过程中,不慎吸入少量沉淀物,沉淀杂质影响药物浓度测量。

本组药物SD浓度值变动不大,可能就是比色皿里的溶液混合不均匀,或就是受残余药物的影响,也可能就是从吸取上清液至比色的过程中,上清液浸于酸性、碱性溶液的时间较短、混合程度不够,影响药物相关化合物的合成,进而影响浓度测定。

测定药物血浆半衰期的意义:

1.确定给药的间隔时间(半衰期短,则给药间隔时间短)。

2.预测达到稳态血药浓度的时间。

3.预测药物基本消除时间。