表皮生长因子及其受体在腋(臭)区顶泌汗腺中的表达及临床意义
- 格式:doc
- 大小:24.50 KB
- 文档页数:5
表皮生长因子及其作用机制
胡莹莹;王琦;陈瑛
【期刊名称】《哈尔滨师范大学自然科学学报》
【年(卷),期】2013(029)003
【摘要】表皮生长因子及其受体的研究成为近年来生物化学研究的热点之一,其具有多种生物学活性和丰富的临床应用前景.重点综述了表皮生长因子分子结构、生物学作用及其作用机制,为更深入地探索开发表皮生长因子的应用价值提供理论基础和参考.
【总页数】5页(P91-95)
【作者】胡莹莹;王琦;陈瑛
【作者单位】哈尔滨师范大学;哈尔滨师范大学;哈尔滨师范大学
【正文语种】中文
【相关文献】
1.水通道蛋白3在表皮生长因子诱导的乳腺癌细胞迁移中的作用机制研究 [J], 杨泉涌;张颖;张伟然;杨毅;牛瑞芳;张斌;张霖
2.结肠癌细胞中组织因子/活性凝血因子Ⅶ-表皮生长因子受体通路间交互作用机制[J], 陈贺凯;戴芸;吴婷;汪欣;万远廉;汤坚强
3.表皮生长因子受体抑制剂放射增敏作用机制的研究 [J], 丁锐;黄荣清;肖炳坤;杨建云
4.表皮生长因子对动物肠道黏蛋白分泌的影响及其作用机制 [J], 汤小朋; 熊康宁
5.表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂AG1478对卵巢癌细胞生物活性及纤溶酶原激活物抑制物1的作用机制研究 [J], 丁伯勇;王玮;昝瑛
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
表皮生长因子及其作用机制1962年,CohenS用羧甲基纤维素从雄性小鼠颌下腺腺管分离出纯化神经生长因子(NGF)后发现另一类物质可使新生小鼠眼睑早开、牙齿早萌、体重减轻和毛发生长延迟,他提纯了这种由53个氨基酸构成的单链多肽称之为表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)[1-3]1979年,Carpenter等人报道了人表皮生长因子(hEGF)的氨基酸残基组成同年,Gregory从人尿中发现了能够抑制胃酸分泌的抑胃素,称之为尿抑胃素(Urogastrone,UG),并发现EGF与UG的化学结构与生物活性极为相似,于是人们把EGF和UG这两种多肽看成同一物质,一般称之为上皮生长因子—尿抑胃素(EGF—UG)随后,在大白鼠、猪等生物体中均发现了表皮生长因子mEGF和pEGF 这之后关于EGF的生物学功能开展了大量研究经研究发现EGF 具有促进细胞分裂、与某些癌性病变密不可分,除此之外,对呼吸系统、生殖系统也有很重要的作用尤其是EGF可以促进上皮细胞分裂增殖,Imanish J,Kamiyama K Iguchi等人在2021年发现应用EGF可以明显增加创面的内胶原和细胞DNA含量,加速创面愈合随后EGF 不论在临床应用还是美容领域都得到广泛应用近年来,对EGF及其受体(EGF receptor,EGFR)的研究成为生物化学研究的热点之一,对于其作用机制、影响因子和如何提高其生物学功能进行了广泛的研究1表皮生长因子家族、分子结构及其生物学效应11表皮生长因子家族在发现EGF后的40多年时间里,又先后发现了一些与EGF密切相关的生长因子,大小都在50~80个氨基酸之间,被称为EGF家族包括1976 年Todaro和Delareo在肉瘤病毒转化的3T3成纤维细胞培养介质中发现一种具有EGF活性的生长因子,命名为转化生长因子α(transforming growth factor α,TGF α)、之后又发现了牛痘病毒生长因子(vaccinia growth factor,VGF)、休普氏纤维瘤生长因子(shope fibroma growth factor,MGF)、粘液瘤生长因子(myxoma growthfactor,MGF)、两性调节蛋白(ampiregulin)、双向调节素(arnphireguli,AR)、betacellulin(BTC)、epiregulin(EPl)、结合肝素的EGF样生长因子(heparin-bingingEGF-likegrowth factor,HB-EGF)、痘苗病毒生长因子(vaccinia virus growth factor,VVGF)等12表皮生长因子的分子结构特点EGF是最早确立结构的生长因子1986年Bell等人通过基因克隆及重组分析,阐明了EGF 的基因位点及其编码序列,小鼠和人的EGF 基因均为单拷贝基因编码小鼠和人EGF的基因分别位于第3号和第4号染色体的长臂上hEGF 以hEGF-β和hEGF-γ两种形式存在,hEGF-β和hEGF-γ两者有98%的同源性和相似的分子结构,而且它们作用于同一个受体,并产生相同的生物学效应EGF的mRNA序列由4871bp组成,编码一个1217个氨基酸残基的大分子蛋白前体,有一个长3621bp的开放阅读框,编码1207个氨基酸残基EGF前体有两个类似疏水袋的序列,一个位于前体的N 末端,作为生物合成时的信号肽,在转录后很快被除去;另一个在前体的C端附近的成熟EGF序列之后,由于这一疏水序列后又跟有一个含大量碱性氨基酸的短序列,因而这段序列可能是固定在膜上的跨膜蛋白,类似于一个跨膜受体,被广泛的认为EGF就是在膜表面通过蛋白酶水解后由前体加工而来hEGF前体除具有产生成熟hEGF外,其可能本身也具有生物活性,如hEGF分子的C结构域可能与受体结合来刺激细胞增殖,也有人推测它可能作为一种膜蛋白,在离子转运及细胞识别中起识别作用EGF家族的成员在一级结构上相差甚大,有30%的同源性,但在空间结构上具有一定的保守性,EGF家族内存在着11个保守的氨基酸残基,其中完全保守的6个半胱氨酸残基,在分子内部形成3对二硫键,使得这些分子具有相似的空间构象,因而都能够与EGF受体结合,并且在生物学的功能上也表现出一定的相似性,因此把它们归为一个家族,称为EGF家族EGF 家族的结构特征可以从两方面来认识:一是它的一级结构,从中人们发现了多种吸引广大学者的序列;二是它的空间结构,借助高分辨率的核磁共振(NMR)分析技术已对EGF 的空间构象有了更深刻的了解和认识成熟的hEGF是具有53个氨基酸残基的不可透析的单链多肽,等电点(PI)为46,分子量为6045Da,对热稳定,含3个链内二硫键,从而在6~20、14~3l和33~42之间分别形成三个环,这些环状结构使EGF对蛋白酶具有较高的稳定性,活性中心位于48~53个氨基酸残基之间,该二硫键对EGF生物学活性的发挥起重要作用成熟的小鼠表皮生长因子(mEGF)是一种水溶性、低分子量、对酸对热稳定、不可透析的单链多肽,由53个氨基酸组成,不含丙氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸,含有3个链内二硫键,分子量约为6040Da,等电点为46,消光系数(280nm)为309,沉淀常数125s早期圆二色谱分析表明,mEGF的二级结构是致密的球状结构,其中约25%为β-片层结构,75%为无规则的螺旋卷曲,无α-螺旋后经核磁共振(NMR)研究证实其肽骨架中仅存在反平行的β-片层[19-20]mEGF在盐酸胍中的伸展动力学研究表明,mEGF是已知的最稳定的蛋白之一EGF对热稳定,在-20 ℃中能保持长期稳定;在中性溶液中100 ℃煮沸30 min仍保持稳定,但在100℃的01NNaOH或02NHCI中失活耐胰蛋白酶、糜蛋白酶和胃蛋白酶的消化EGF分子中不含丙氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸第53位精氨酸和第52位亮氨酸常被蛋白酶去除,因此EGF氨基端40多个氨基酸即具有该因子的全部活性EGF分子的空间结构可分为相对独立的N段和C段,这两部分较为刚性,分别由两对和一对相对柔性的二硫键相连,因此两部分的空间位置相对可变,整个分子较为柔性13表皮生长因子的生物学效应EGF对表皮、间皮、内皮细胞在体内外都起作用,还影响组织器官的生长和分化人们首次发现的EGF作用是能使乳鼠眼睑早开6~7 d,牙齿早萌5~6 d,并伴有牙齿体积减小现象此外,EGF还可促进心包膜、肾被膜、胆管和肺的发育(1)促进上皮细胞分裂增殖EGF具有促进细胞的增殖和上皮再生的功能,可以促进细胞有丝分裂以及糖、蛋白质、DNA、RNA合成,在临床上与很多疾病,如免疫性皮肤病、创面组织修复及牙周炎等的治疗密切相关,而在毛发囊泡细胞、鳞癌细胞中EGF却有抗增殖效应;EGF可以明显的增加创面的内胶原和细胞DNA含量,具有促进创面愈合作用,如促进外伤、手术、烧烫伤及各种激光损伤等引起的皮肤创伤愈合中有明显的效果;促进角膜上皮细胞的增殖,用来治疗角膜损伤EGF强烈的表达于角膜上皮的深层细胞和角膜缘上皮细胞、部分结膜上皮细胞和结膜下结缔组织内成纤维细胞等眼表层组织以自分泌或(和)旁分泌的方式与EGFR相结合,促进角膜损伤修复;EGF是组织修复和细胞保护作用的内源性物质,在人类胃肠道、十二指肠粘膜溃疡愈合过程中起着十分重要作用,在治疗肿瘤方面,最近国外用大量hEGF与毒素结合治疗神经胶质瘤、乳腺瘤、皮肤瘤,已取得一定疗效同时临床上还可以应用EGFR单克隆抗体拮抗EGF对人牙龈上皮细胞的促增殖作用,为防止牙周炎提出了新的思路及其理论依据EGF促进组织修复的功能越来越受人们的重视,已被用于角膜、胃、肠道、肝脏、骨骼、神经等多种组织创伤的研究其研究和技术的进展即将在临床上广泛应用(2)EGF与某些癌性病变密不可分研究表明EGF与肿瘤有三方面的关系:①某些肿瘤细胞可以自分泌EGF 直接作用于胞膜上EGF受体,加速其无抑制地异常增殖②EGF受体的氨基酸排列和组成,与某些癌基因的产物具有高度的同源性,如EGF受体与病毒致癌基因src家族的产物有同源性,因此EGF受体不依赖EGF也能被激活,这种受体的持续激活可导致细胞不断生长,这可能是导致细胞恶变的原因之一③多种肿瘤细胞的EGF受体有过度表达现象,如鳞癌、多形性脑胶质细胞瘤、喉乳头状瘤等(3)EGF调节内分泌腺EGF与多种内分泌腺之间有密切的相互调节的关系,可直接或间接影响多种内分泌腺的分泌EGF可以促进GnRH、CRF、GH、ACTH、LH、hCG、hCS、PRL、皮质醇等的分泌,抑制翠酮、雌二醇、甲状腺素等的分泌另外,EGF可刺激人骨肉瘤细胞分泌甲状旁腺激素样肽(PTH-like peptide),并刺激成骨细胞合成前列腺素E2(PGE2),促进胃泌素、胆囊收缩素、促胰酶素等胃肠道激素的分泌,并参与消化机能的调节(4)对呼吸系统的作用EGF可经自分泌或旁分泌方式对气道上皮细胞的功能进行调控作为一种肺内调节肽,具有抗氧化保护作用它可以上调γ-谷氨酰转肽酶的表达、加速外源性谷胱甘肽(GSH)向细胞内转运和促进GSH 合成、提高细胞的抗氧化能力及清除活性氧等EGF还可通过细胞内信号转导来调控原癌基因bcl-2的转导水平此外,EGF对肺泡Ⅱ型细胞增生有明显的调控作用,如加速肺泡Ⅱ型细胞结构和功能分化,从而合成表面活性物质,促进胎肺成熟,进而参与肺损伤修复过程(5)EGF在糖尿病及糖尿病肾病(DN)的发生发展中起重要作用其检测对DN的早期诊断、病情分析及临床治疗有一定的理论价值对EGF与糖尿病性腺轴的损伤关系的研究表明,胰岛素的作用部分由EGF调节;胰岛素或睾酮不足可导致EGF缺乏,而EGF缺乏可能是直接引起生精障碍的重要原因(6)EGF对生殖系统的主要作用①影响睾丸发育和精子发生②调节卵巢的发育与生殖功能刺激卵母细胞发育、抑制人绒毛膜促性腺激素诱发的排卵效应、刺激颗粒细胞增殖、影响颗粒细胞的甾体激素分泌与肽类因子的分泌③促进合子发育④ 作为胚胎营养因子调节早期胚胎发育既可通过EGFR提高早期胚胎卵裂率和囊胚发育率;又可活化Na/KaATP酶,加快囊胚腔内液体的积聚,促进囊胚腔的形成与扩展;还可间接地使肌动蛋白发生磷酸化,引起细胞粘着性以及胚胎卵裂球的分化发生改变⑤ 通过激活胚泡和调节子宫接受性等途径启动胚泡植入(7)EGF作为具有神经营养活性的因子,在神经损伤后可以保护相应的背根神经节感觉神经元此外,EGF还是一种脑肠肽神经递质2EGF作用机制EGF通过与其细胞膜受体结合,在细胞内传递中构成一个复杂的代谢网络,诱导受体自身磷酸化,激活受体酪氨酸蛋白激酶活性,催化多种底物蛋白酪氨酸残基(Tvr)磷酸化,启动、催化、维持与细胞生长、增殖有关的一系列生化过程21基本作用机制Ullrich 等人[30-31]提出二聚体学说,即EGF与EGFR结合后相邻受体相互靠近形成二聚体,聚集的受体相互进行催化,使自身酪氨酸磷酸化,从而使受体的激酶区激活的观点,该学说已得到了证实EGF首先与EGFR的胞外结合部位结合,导致受体分子发生二聚化,促使EGFR羧基末端的三个酪氨酸残基(Tyr)自身磷酸化位点发生磷酸化,使受体酪氨酸激酶活化,从而磷酸化受体本身及下游的信号分子;磷酸化的受体通过其磷酸化酪氨酸残基可与蛋白质的SH2结构域相互作用,结合胞内的信号转导分子已知EGFR的活化可以使细胞内三磷酸肌醇和二酰基甘油增多,结果引起细胞内游离钙离子增多,激活磷酸蛋白激酶c和磷酸蛋白激酶A,从而介导各种信号转导途径,使细胞增殖和功能发生改变诱导EGFR自身磷酸化的位点是在其羧基端1068、148、1173和氨基端一个位点的四个Tyr残基关于信息传递的过程,目前认为这种信息传递是以逐级放大形式来进行的即被激活的一级信息分子去激活下一级信息分子,以此类推,每一次传递都是激活过程而磷酸化的受体激酶区一方面能特异地与配体结合被磷酸化,另一方面又启动另外的信息分子,依次将信息传递到效应分子,使细胞内第二信使三磷酸肌醇和二乙酰甘油增多,引起细胞内游离Ca2+增多,激活蛋白激酶C和腺苷酸环化酶,改变细胞的骨架结构,使细胞分化、分裂和增殖等但时至今日,有关EGF的作用机理仍有许多问题有待进一步阐明22三种蛋白酶的激活(1)酪氨酸蛋白激酶(TPK)的激活:EGF受体的第三结构区具有特异性的TPK活性对此酶底物的研究是了解EGF如何刺激细胞增殖的信号传导过程的关键所在,EGF与受体结合诱导受体磷酸化,激活*****不仅能自身磷酸化,而且还使依赖于Ca2+离子的蛋白质或磷脂酰肌醇的磷酸化利用定位突变的方法已经证明:TPK磷酸化与否对酶活性有重要调节作用,高活性的TPK可促使细胞增殖或癌变(2)C激酶(PKC)的激活:EGF与受体结合从而诱导受体结构产生变化,通过G蛋白降低受体TPK活性,从而导致EGF与受体复合物的高亲合性结合快速下降,使受体受到功能上的下降调节,说明PKC活性与EGF密切相关,EGF表现的促细胞增殖、促癌作用有可能都是通过激活PKC来表现的,也可说明通过下降调节的反馈作用抑制了EGF受体促进细胞增殖的力可能正是由于PKC这种反馈抑制作用才使得正常细胞中EGF受体不会导致细胞异常增生(3)CAPK的激活:可能核内EGF受体或OAG(1-油酰-2-乙酰-消旋甘油)以外的其它第二信使来增强NC3H/10的染色体蛋白激酶(CAPK)的活性,EGF对CAPK的活性的影响有助于说明核内EGF的作用过程以上三种蛋白激酶的激活,从而保障了EGF受体复合物的一系列生理功能EGF的发现和研究的历史十分短暂,但其特殊的生物学效应决定了它的广泛应用随着研究的深入和临床上的广泛应用,一些疑难病症,如重度烧伤、大面积创伤、消化道溃疡、角膜严重损伤等,均有望迅速治愈甚至目前的一些不治之症:如神经损伤、恶性肿瘤、AIDS 病等,也可能通过EGF 的使用而有所缓解和恢复可以预言,EGF 的应用必将为今后生命科学研究带来重大的飞跃。
p53、Ki67、EGFR、Nm23在乳腺癌组织中的表达及临床意义张朝林;李宏;李金平【摘要】目的分析p53、Ki67、EGFR、Nm23在乳腺癌组织中的表达,并探讨其与临床病理特征之间的关系.方法采用SP免疫组织化学法检测p53、Ki67、EGFR、Nm23在176例乳腺癌组织中的表达情况,并结合其临床和病理资料进行回顾性分析.结果乳腺癌组织中p53的表达与组织学分级、淋巴结是否转移有显著关系(P<0.05),且与Ki67 (r=0.157,P<0.05)呈正相关,与ER呈负相关(r=-0.168,P<0.05); Ki67表达与淋巴结是否转移及pTNM分期有显著关系(P<0.05),与HER-2呈正相关(r=0.1756,P<0.05); EGFR表达与淋巴结是否转移、pTNM分期有显著关系(P<0.05),同时与ER (r=-0.290,P<0.05)、PgR(r=-0.239,P<0.05)呈负相关;Nm23表达与肿瘤大小、组织学分级、淋巴结是否转移有显著关系,表达差异有统计学意义(P<0.05),且与Ki67呈负相关关系(r r=-0.178,P<0.05).结论 p53、Ki67、EGFR、Nm23的检测对乳腺癌的治疗及预后评估有重要意义.【期刊名称】《海南医学》【年(卷),期】2014(025)001【总页数】3页(P15-17)【关键词】乳腺癌;p53;Ki67;EGFR;Nm23【作者】张朝林;李宏;李金平【作者单位】宁夏医科大学总医院肿瘤医院肿瘤外科,宁夏银川 750004;宁夏医科大学总医院肿瘤医院肿瘤外科,宁夏银川 750004;宁夏医科大学总医院肿瘤医院肿瘤外科,宁夏银川 750004【正文语种】中文【中图分类】R737.9乳腺癌是一种异质性较强的恶性肿瘤,同时乳腺癌又具有临床多样性,不同乳腺癌组织基因表达也不同。
近年来,乳腺癌的发病率呈逐年增高趋势,已成为世界女性排名第一的常见恶性肿瘤,其预后受到人们越来越多的关注。
创面血管内皮生长因子、血管内皮生长因子受体2水平表达与Ⅱ期肛裂患者术后创面愈合时间的关系研究陶一秋;张冬梅;沈菲菲;杜佳琦【期刊名称】《河北医科大学学报》【年(卷),期】2024(45)5【摘要】目的探讨创面血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)-2表达与Ⅱ期肛裂术后创面愈合时间的关系。
方法选取在我院进行手术治疗的Ⅱ期肛裂患者104例为研究对象。
术后1周换药时采集创缘肉芽组织检测VEGF、VEGFR-2水平。
统计患者术后创面愈合时间,根据患者术后创面愈合时间三分位数分3组,对比3组临床资料及创面VEGF、VEGFR-2水平。
分析VEGF、VEGFR-2与术后创面愈合时间的相关性及术后创面愈合时间的影响因素。
结果3组创面VEGF及VEGFR-2水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);创面VEGF、VEGFR-2水平愈低,其创面愈合时间愈长(P<0.05);VEGF、VEGFR-2与术后创面愈合时间呈负相关(P<0.05);便秘、手术时间、开放切口、创面纵径、创面横径为术后创面愈合时间的独立危险因素,VEGF、VEGFR-2均术后创面愈合时间的独立保护因素(P<0.05)。
结论创面VEGF、VEGFR-2水平与Ⅱ期肛裂术后创面愈合时间呈负相关,可通过检测两指标水平判断患者创面愈合情况,为术后治疗方案的完善提供指导。
【总页数】6页(P595-600)【作者】陶一秋;张冬梅;沈菲菲;杜佳琦【作者单位】上海中医药大学附属曙光医院肛肠科【正文语种】中文【中图分类】R657.14【相关文献】1.雷公藤多苷对胶原诱导性关节炎大鼠组织中血管内皮生长因子及血管内皮生长因子受体2mRNA表达水平的影响2.壮药拔毒生肌膏对糖尿病大鼠创面愈合及表皮生长因子、血管内皮生长因子、溶菌酶表达水平的影响3.研究多奈哌齐联合丁苯酞治疗多发性脑梗死性痴呆对患者血清中血管内皮生长因子(VEGF),血管内皮生长因子受体(VEGFR)水平及预后影响4.紫草油联合化瘀生肌方对老年压力性损伤患者创面愈合时间及血管内皮生长因子表达的影响5.祛毒生肌汤联合耳穴贴压对肛周脓肿术后患者创面愈合、尿潴留及血管内皮生长因子的影响因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
人表皮细胞生长因子及其在皮肤科中的应用张秀丽;张理涛【摘要】人表皮生长因子(hEGF)是一种广泛存在于人类皮肤细胞的小分子蛋白,是使用重组技术人工合成的可促进多类细胞生长的多肽类物质,广泛用于皮肤科和美容领域,综述人表皮细胞生长因子的简介、生物学作用、临床应用进展等.【期刊名称】《中国中西医结合皮肤性病学杂志》【年(卷),期】2016(015)005【总页数】4页(P318-321)【关键词】人表皮生长因子;皮肤;临床;应用【作者】张秀丽;张理涛【作者单位】天津医学高等专科学校,天津300222;天津市中医药研究院附属医院,天津300120【正文语种】中文【中图分类】R622.1表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)是一种体内活性物质,最初由Cohen[1]从1962年首次提取和分离的颌下腺小鼠中发现,在1975年,人们发现了在人的尿液中有表皮生长因子EGF的存在。
1979年,Carpenter等[2]报道了EGF的氨基酸残基组成等。
同年,Gregory发现了人类尿液中的胃抑素可以抑制胃酸分泌,实际上与EGF的物质相同。
1986年,Cohen由于在EGF的突出贡献获得了诺贝尔医学与生理学奖[3]。
人表皮生长因子(Humanepidermalgrowthfactor,hEGF)是一种广泛存在于人类皮肤细胞的小分子蛋白质,分子质量为6.2 ku,由53个氨基酸活性肽。
hEGF 是利用重组技术合成的多肽物质,可以促进多种细胞生长,其结构和生物活性天然产物高度一致[4]。
hEGF作为强大的细胞分裂促进因子,其生物效应包括:①活化糖酵解作用以增加呼吸代谢,激活磷酸果糖激酶;②促进低分子质量化合物从细胞外到细胞内,增加细胞营养;③活化RNA和蛋白质合成;④刺激细胞外大分子合成,如透明质酸和糖蛋白;⑤促进细胞增殖,促进身体的一些材料如果酸、前列腺素的合成等;⑥促进DNA合成[5]。
HER-2和Ki67在激素依赖性乳腺癌中的表达及其临床意义胡传朋;刘勇;程宝智;张舰;张泽俊【摘要】目的探讨激素依赖性乳腺癌中人表皮生长因子-2(HER-2)、增殖细胞核抗原Ki67的表达与临床病理因素的关系及临床意义.方法选取安徽医科大学附属六安医院2012年10月至2016年10月接受标准手术治疗的激素依赖性乳腺癌患者术后组织标本,采用免疫组化En Vision二步法检测93例激素依赖性乳腺癌组织标本HER-2和Ki67表达情况,免疫组化结果为HER-2(++)标本给予FISH检测进一步验证HER-2表达,分析HER-2和Ki67表达与临床病理因素的关系.结果HER-2和Ki67阳性表达率分别为22.58%(21/93)和67.74%(63/93),两者共同阳性表达率为20.43%(19/93),不同年龄、淋巴结有无转移、不同临床分期组间HER-2阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05),不同肿瘤直径组间HER-2阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄、不同肿瘤直径、淋巴结有无转移、不同临床分期组间的Ki67阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05);HER-2和Ki67共同阳性表达率在不同肿瘤直径组间差异有统计学意义(P<0.05),在不同年龄、淋巴结有无转移、不同临床分期组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 HER-2和Ki67可用作判断激素依赖性乳腺癌生物学行为的标志物.【期刊名称】《安徽医学》【年(卷),期】2017(038)004【总页数】4页(P450-453)【关键词】激素依赖性乳腺癌;人表皮生长因子-2;增殖细胞核抗原【作者】胡传朋;刘勇;程宝智;张舰;张泽俊【作者单位】237000 安徽六安安徽医科大学附属六安医院肿瘤内科;237000 安徽六安安徽医科大学附属六安医院肿瘤内科;237000 安徽六安安徽医科大学附属六安医院肿瘤内科;237000 安徽六安安徽医科大学附属六安医院乳腺外科;237000 安徽六安安徽医科大学附属六安医院乳腺外科【正文语种】中文乳腺癌在全球女性常见的恶性肿瘤中发病率和病死率均居第一位[1]。
表皮生长因子及其受体在腋(臭)区顶泌汗腺中的表达及临床意义作者:谢群陕声国孙文涛刘璇来源:《中国美容医学》2010年第10期[摘要]目的:研究表皮生长因子(EGF)及其受体(EGFR)在腋(臭)区顶泌汗腺细胞中的表达情况及其临床意义。
方法:采用免疫组织化学方法(S-P法)检测腋臭患者和正常人腋区顶泌汗腺细胞中EGF 和EGFR的表达水平。
利用计算机图像分析技术测量腋臭患者和正常人腋区顶泌汗腺细胞EGF 和EGFR表达的平均光密度。
结果:①EGF在腋臭患者顶泌汗腺组织中的表达显著高于正常人(P[关键词]EGF;EGFR;腋臭;免疫组化[中图分类号]R758.74[文献标识码]A[文章编号]1008-6455(2010)10-1490-03Expression of EGF and EGFR in apocrine glands of human axillae in osmidrosisXIE Qun1,SHAN Sheng-guo2,SUN Wen-tao3,LIU Xuan3(1.Department of Plastic Surgery,the Central Hospital of Xiangfan,Xiangfan 441021,Hubei,China;2.Department of Plastic Surgery,the Renmin Hospital,Wuhan University;3.Department of Plastic Surgery,the Fisrt Hospital of Yichang)Abstract: ObjectiveTo investigate the expression and clinical significance of EGF and EGFR in apocrine glands from human axillae of osmidrosis.MethodsThe immunohistochemical S-P method was used to examine the expression of EGF and EGFR of apocrine glands from osmidrosis patient and health adult. Image analysis system was applied to measure the expression level of EGF and EGFR of apocrine glands from human axillae of osmidrosis and health adult.Results①The expression of EGFin apocrine glands of experimental group were found significantly higher than control group (PKey words: EGF; EGFR; osmidrosis; immunohistochemistry腋臭症( axillary osmidrosis ) 是由腋窝顶泌汗腺(大汗腺)产生的分泌物,排出体外后经细菌分解,产生一种难闻的气味,严重者影响患者的社会人际交往。
EGF具有多种生物学活性和丰富的临床应用前景。
EGF存在于人体的许多组织中,特别是腺体细胞中。
EGF与靶细胞膜上的受体结合后,通过直接诱导磷酸化从而介导各种信号转导途径来发挥生物学效应[1]。
在复杂的机体物质代谢过程中,推测EGF和EGFR介导的磷酸化过程可能在胆固醇和脂肪酸合成过程中起到调控作用。
为了进一步探讨腋臭的发病机制,本研究采用免疫组化和图像分析的方法对EGF和EGFR在腋臭患者腋区顶泌汗腺组织中的表达情况进行了半定量研究。
1材料和方法1.1 实验对象:实验组:取2007年3月~2007年8月进行手术治疗腋臭的患者40例,其中女性30例,男性10例,中位年龄25.2(16~38)岁。
对照组:同期行腋部切口隆乳手术的患者10例,均为女性,中位年龄 28.7(26~34)岁。
1.2 方法:获取试验对象腋区皮肤及皮下汗腺组织,处理、固定标本,制作来源于同一标本不同部位的顶泌汗腺的蜡块、制备切片,石蜡切片常规脱蜡、水化后用PBS冲洗,过氧化物酶阻断剂封闭内源性过氧化物酶活性,加入一抗,室温孵育,加生物素标记的第二抗体,加链霉亲和素的过氧化物酶溶液,孵育后滴加DAB显色,苏木素复染,常规脱水、透明、封压。
按照随机化的原则,取其中1个部位的切片相对应的组织块作为免疫组织化学染色的目标对象。
1.3 试剂:浓缩型鼠抗人EGF多克隆抗体、浓缩型鼠抗人EGFR多克隆抗体以及免疫组化试剂盒均购于武汉博士德生物工程有限公司。
1.4 结果判定:在200×光镜下,运用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文报告管理系统,对EGF和EGFR抗原在腋区顶泌汗腺细胞中的表达进行半定量分析。
每张切片随机选取5个完整且不重叠的视野行定量分析,测定每个视野下阳性反应的平均光密度。
以每例5个视野的平均光密度的平均值作为该例的测量值。
1.5 统计学分析:测量数据均以均数±标准差(x±s)表示,利用SPSS13.0统计分析软件对EGF 和EGFR的实验结果进行t检验,以P2结果2.1组织学观察:在光镜下观察腋区顶泌汗腺HE染色的标本可见,通过比较同一标本不同视野下顶泌汗腺细胞后,发现分泌细胞呈现柱状、立方和扁平形态,其胞核的形态及胞浆中嗜酸性分泌囊泡(颗粒)的数量有不同。
柱状细胞的顶部可见有大量明显嗜酸性小囊泡聚集,部分细胞顶部的分泌物形成较大的圆球状结构凸向管腔;立方细胞的嗜酸性小囊泡的数量较柱状细胞中的数量明显为少,在细胞的顶部未见有圆球状结构形成;扁平细胞的胞质很少,未见有嗜酸性小囊泡分布或仅见极少量囊泡分布其中。
本实验中,每种类型的顶泌汗腺所占的比例是不一样的。
在试验组观察到顶泌汗腺的腺腔呈圆形或略不规则形,以柱状细胞构成的为主,扁平细胞和立方细胞较少,(图1)。
而在对照组中以扁平细胞和立方细胞构成的顶泌汗腺相对较多,柱状细胞很少,腺腔呈不规则形(图2)。
2.2 EGF的表达:EGF的阳性定位主要位于顶泌汗腺细胞的胞浆中,表现为细胞胞浆中有棕黄色颗粒沉积。
试验组胞浆中可见大量的棕黄色颗粒沉淀,EGF表达较强。
健康对照组胞浆中棕黄色颗粒沉淀较少,EGF表达弱或不表达。
2组之间的EGF平均光密度差异具有统计学意义P2.3 EGFR的表达:EGFR的阳性定位主要位于顶泌汗腺细胞的细胞表面,表现为细胞表面棕黄色颗粒分布。
试验组细胞表面可见大量的棕黄色颗粒沉淀,EGFR表达较强。
对照组细胞表面棕黄色颗粒沉淀较少,EGFR表达弱或不表达。
两组之间EGFR的平均光密度差异具有统计学意义P3讨论腋臭的确切病因尚不明确,研究发现刚排出皮肤表面的大汗液呈乳白色,没有臭味,排出后不久受到腋窝潮湿部位细菌(表皮葡萄球菌、格兰氏阴性杆菌等) 的分解,才发出典型的令人厌恶的臭味。
Zeng等[1]通过气相色谱/质普法检测发现,腋臭的气味系由C6-C11的不饱和支链脂肪酸所致,主要是(E)-3-甲基-2-己烯酸(E-3-methyl-2-hexenoic acid,E-3M2H)分子。
James等[2]研究发现类白喉杆菌在腋臭的形成中有调控作用,较其它常见皮肤菌群作用大。
随着研究工作的深入,顶泌汗腺细胞的生理及病理功能方面的研究得到越来越多的重视。
顶泌汗腺虽然在出生时就存在,但是直到青春期才表现其分泌功能。
顶泌汗腺细胞的分化、增值和结构形成受多种基因和因子的调控,推测顶泌汗腺细胞的功能异常可能与这些调控因子的变化有密切关系。
Pesonen等[3]首次报道EGF在腋窝顶泌汗腺液中的存在,证实了顶泌汗腺比外分泌汗腺含有的EGF的量更多(可达50倍) 。
EGF存在于人体的许多组织中,特别是腺体细胞中。
EGF因其具有多种生物学活性和丰富的临床应用前景,成为近年来生物化学研究的热点之一。
Saga等[4]通过比较人类外分泌和顶泌汗腺中EGF的表达方式,证实了EGF分布在汗腺的分泌部,并且顶泌汗腺分泌细胞比外分泌汗腺分泌细胞具有更强的反应性。
免疫电镜下显示顶泌汗腺分泌细胞内线粒体样小颗粒中抗EGF抗体呈阳性反应,推测EGF的作用机制是由汗腺中的分泌细胞产生的EGF控制分泌细胞自己的增殖和功能[5];由于导管细胞抗EGF阴性反应,说明导管细胞不能产生EGF,但其EGF受体可以通过接受汗液中EGF的活化,并影响着导管细胞的增殖和功能。
EGF在肌上皮细胞中的生理作用知之甚少,Schon M等[6]认为肌上皮细胞在外分泌和顶浆汗腺中不表达EGF受体, 但有报道认为在加入EGF的培养基中肌上皮细胞具有向上皮和间质选择性分化的潜能。
EGF能够发挥作用是于其受体密不可分的。
EGFR存在于人体除造血系统外的几乎所有组织中。
EGF是与靶细胞膜上EGFR结合后发挥生物学效应的。
二者的结合具有高亲和力、时间与温度的依赖性、饱和性和可逆性。
研究发现,EGFR与核内染色体相连,可通过直接诱导特殊核蛋白的磷酸化而发挥其生理功能。
EGF首先与EGFR的胞外结合部位结合,导致受体分子发生二聚化,促使EGFR羧基末端的三个酪氨酸残基(Tyr)自身磷酸化位点发生磷酸化,使受体酪氨酸激酶活化,从而磷酸化受体本身及下游的信号分子,磷酸化的受体通过其磷酸化酪氨酸残基可与蛋白质的SH2结构域相互作用,结合胞内的信号转导分子。
已知EGFR的活化可以使细胞内三磷酸肌醇和二酰基甘油增多,结果引起细胞内游离钙离子增多,激活磷酸蛋白激酶C和磷酸蛋白激酶A,从而介导各种信号转导途径,使细胞增殖和功能发生改变。
英国[7]有研究利用离体人类皮肤附属器对胆固醇和脂肪酸生物合成过程中的两种重要催化酶,即3-羟基-3-甲酸戊二酰基辅酶A(HMG-CoA)还原酶和乙酰CoA羧化酶分别进行测定,发现HMG-CoA还原酶和乙酰CoA羧化酶均可以通过磷酸化失活。
说明磷酸化和外源性胆固醇可调节人类顶泌汗腺、皮脂腺和毛囊内的HMG-CoA还原酶和乙酰CoA 羧化酶的活性。
在复杂的物质代谢过程中,推测EGF和EGFR介导的磷酸化过程可能在胆固醇合成过程中,起到调节作用。
Spielman等[8]研究发现:3M2H是伴随分子量分别为45和26kDa的两种分泌物载体蛋白而分泌到皮肤表面。
而这两种蛋白质,也就是所谓的顶浆汗腺分泌物偶联蛋白(ASOB1和ASOB2)。
Natsch等[9]研究发现:3M2H在胞浆中同ASOB2分子的N-末端的谷氨酰胺残基,首先以共价键结合在一起的,到达皮肤表面被特异性的棒状杆菌的酶,即Nα-酰基谷氨酰胺氨基酰化酶分解后,以非共价键的形式同ASOB2结合,最终导致了臭味气体缓慢地产生。