HCV核心抗原检测(ELISA法)

丙型肝炎病毒核心抗原检测的临床价值目的探讨血清中丙型肝炎病毒核心抗原（HCV-cAg）检测的临床价值。

方法采用酶联免疫吸附试验检测HCV-cAg；采用化学发光方法检测HCV-Ab；采用实时荧光定量PCR方法检测HCV-RNA。

结果137例HCV-Ab阳性标本中HCV-RNA与HCV-cAg检测两种方法通过Kappa检验得出的结论一致性较好（P ＜0.001，Kappa=0.893）；HCV-RNA和HCV-cAg阳性检出率分别为40.15%和37.96%，采用配对卡方检验，差异无统计学意义（χ2=0.571，P>0.05）。

55例HCV-RNA阳性标本中HCV-RNA拷贝数对数值与HCV-cAgOD均值之间有良好的正相关性（r=0.882，P＜0.05）。

结论HCV-cAg检测操作简便，能够缩短诊断丙肝病毒感染的时间，其水平一定程度上能反应丙型肝炎患者体内HCV复制程度，具有较好的临床实用价值。

标签：丙型肝炎病毒抗体；丙型肝炎病毒-RNA；丙型肝炎病毒核心抗原丙型肝炎病毒（HCV）是丙型病毒性肝炎的病原体，主要经血液传播，是目前引起输血后肝炎最常见和最严重的病原体。

丙型肝炎能引起急性和慢性肝炎，其感染慢性化占75%～85%，且慢性丙型肝炎与肝硬化和原发性肝癌关系密切[1]。

我国丙型病毒性肝炎的报告病例数呈现出逐年上升的趋势，严重威胁人民的生命健康。

由于目前尚无针对HCV的有效疫苗可供临床使用，因此对于丙肝感染的及早检出并通过一系列有效措施阻断其在易感人群间的传播就显得尤为重要。

近年来，陆续出现了一些关于HCV核心抗原（HCV-cAg）可以缩短丙肝感染检测窗口期，提高感染检出率的报道[2-3]。

本文通过检测丙型肝炎病毒抗体（HCV-Ab）阳性患者血清中HCV-cAg、HCV-RNA来探讨HCV-cAg检测在临床的应用价值。

1 资料与方法1.1一般资料137例HCV-Ab阳性血清标本来自我院2014年1月～2015年5月门诊和住院患者，其中男性76例，女性61例，年龄16～68岁，平均39.7岁。

细胞成分治疗，或器官移植。 3.1.2 有血液透析史、不洁注射史，或其他消毒不
严格的有创检查、治疗史，有静脉注射毒品史。 3.1.3 职业供血者，特别是接受过成分血单采回输
者。 3.1.4 与HCV感染者有性接触史，或HCV感染者
（母亲）所生的婴儿。
3.2.1急性丙型病毒性肝炎 ◦ 3.2.1.1 病程在6个月以内，全身乏力、食欲减退、恶心和右季 肋部疼痛或不适等。 ◦ 3.2.1.2 可有轻度肝肿大、部分患者可出现脾肿大；少数患者 可伴有低热或出现黄疸。 ◦ 3.2.1.3 部分患者可有关节疼痛等肝外表现。 ◦ 3.2.1.4 部分患者可无明显症状和体征。
区分急性、慢性丙型病毒性肝炎及丙型病毒性肝炎 肝硬化须根据明确的暴露时间、影像学及组织病理学 检查结果。
疑似丙肝病例：符合下列任 何一项可诊断： 符合3.1和3.2。 符合3.1和3.3.1。
临床诊断丙肝病例：符合下 列任何一项可诊断： 符合3.3.2和3.1。 符合3.3.2和3.2。 符合3.3.2和3.3.1。
防保科医生审核、查重并录入直报系统 反馈
县区疾控中心审核、查重、订正并确认
谢 谢！
3.2.2慢性丙型病毒性肝炎 ◦ 3.2.2.1 病程超过6个月，全身乏力、食欲减退、恶心和右季肋 部疼痛或不适等。 ◦ 3.2.2.2 部分患者可有肝病面容、肝掌、蜘蛛痣及轻度肝、脾 肿大。 ◦ 3.2.2.3 部分患者可无明显症状和体征。
3.2.3丙型病毒性肝炎肝硬化 ◦ 3.2.3.1 可有全身乏力、食欲减退、恶心和右季肋部疼痛或不 适等。 ◦ 3.2.3.2 可有肝病面容、肝掌、蜘蛛痣及腹壁或食管、胃底静 脉曲张及脾脏肿大和脾功能亢进。 ◦ 3.2.3.3 失代偿期患者可有腹水、肝性脑病及消化道出血史。

图1 抗 HCV阴性样本Cov值频数由表4结果，分别对各样本不同稀释倍数的检测结果绘制抗 HCV阳性样本稀释Cov曲线图，并对相同稀释倍数的不同样本计算平均值绘制抗 HCV阳性样本稀释Cov平均值曲线图，结果见图3。

由结果可知，阳性样本，经过稀释，最终使筛查实验无法检出。

但是，阳性样本稀释到一定程度，虽然Cov值持续下降，结果呈阴性反应，在阳性和阴性结果转换期间，曲线总体趋势逐渐由陡峭到平坦，进入1个相对稳定的平台期。

统计表4中Cov均值＜2 0的数据，Cov平均值=0 731、s=0 410、平均值+2s=1 552。

图3 抗 HCV阳性样本稀释Cov平均值图3 讨论综合阴性、阳性样本和阳性稀释样本统计数据，两者灰区范围结果吻合，均在0 70左右，该值远高于多数阴性样本Co v值（表2结果中94 48%的阴性样本Cov值＜0 70），足以区识阴阳性，可以作为分界线，弥补ELISA试剂盒单纯以cut off值判断阴阳性的缺陷，因此把筛查结果Cov值下浮30%范围视为“灰区”较为合适。

对该区样本需要增补试验联合检测，以防漏检。

把“灰区范围”设置为30%，处于该区域内的样本占本项研究全部样本的0 49%，“灰区范围”内的这些样本经文中方法鉴定后的真阳性率为10 0%。

由此表明确实存在灰区样本漏检情况发生，故而有必要对这些样本进行确认。

而处于“灰区范围”内的样本仅占全部样本的0 49%，即便增加试验联合检测，也不会过多增加工作量，在实际工作中是现实可行的。

另外，结果不一致的样本，Cov平均值、s和Cov平均值+2s分别为2 13、0 77、3 67，从而表明结果不一致的样本多为弱阳性样本，一般情况下Cov值＜4 0。

在常规检测过程中，可能会有一些阳性样本，由于抗体浓度较低而出现假阴性结果的现象。

所以，设置1个适当的“灰区范围”，对处于该范围的样本做进一步的检测，采用多种试剂联合检测，只有当结果均为阴性时方可发出检验报告，必要时需再次取样随访调查，以避免漏检现象的发生。

NARL组织的HCV-EIA与HCV-RIBA检测符合率比较
s/co值
EIA+
-
RIBA
+/14 5 36 + 7 95 102
1～3.8 ≥3.8 合计
21 100 121
0 0 3
S/CO>=3.8时，进口EIA与RIBA确证的符合率为95.0% S/CO1- 3.8时，进口EIA与RIBA确证的符合率为33.3%
筛查实验的灰区设定方面，目前丙肝抗体酶免 检测试剂皆没有灰区的设定，S/CO比值较低(但应 大于1)的结果也报告阳性，造成许多假阳性。 临检中心对国内几家血液中心送来的HCV抗体筛 查(两家国产试剂结果不一致)阳性的3000份样本检 验，得到确认HCV抗体阳性的仅25份。
参考文献： 1、邢文革，郑怀竞.全国医院、血站病毒性肝炎标志物检验的流行病学调查.中 华肝脏病杂志，1998;6(1):47. 2、邢文革等，国产丙型肝炎病毒抗体酶免检测试剂盒的质量评价. 中华肝脏病 杂志，2001;9(5):314. 3、邢文革，郑怀竞，血站丙肝病毒抗体酶免检测试剂盒的使用调查.中国输血 杂志,2002;15(1):60.
HCV genotype distribution in the HIV/HCV co-infected patients
14.3% 2a 1b+2a 16.8% 68.9% 1b
HIV/HCV共感染
美国HIV感染者共感染HCV的比例平均为33%， 根据感染途径不同有所区别，IDU人群60-90%， MSM人群10%以下（最近有所增加）。 另一报告：HCV感染者中HIV感染率10%， HIV感染者中，约25%HCV阳性。
HIV
1百万 四千五百万 性 不可 109-10 10-3-10-4

硕世生物hcv说明书硕世生物HCV说明书一、产品概述硕世生物HCV（乙型肝炎病毒）试剂是一种用于检测乙型肝炎病毒感染的检测试剂。

本试剂采用酶联免疫吸附法（ELISA）原理，能快速、准确地检测出乙型肝炎病毒感染。

二、产品特点1.高灵敏度：本试剂具有高灵敏度，能够有效检测出HCV感染。

2.快速检测：本试剂使用方便，操作简单，检测快速，减少了检测时间和工作负担。

3.准确可靠：本试剂具有良好的准确性和可靠性，能够准确判定阳性和阴性结果，降低了误判的风险。

4.经济实惠：本试剂的价格合理，经济实惠，适合各类医疗机构和实验室使用。

三、适用范围本试剂适用于医疗机构、实验室等单位，用于乙型肝炎病毒感染的筛查、诊断和监测。

四、试剂组成本试剂包含以下部分：1.HCV抗原：作为标记物，用于检测乙型肝炎病毒抗原。

2.溶液：用于稀释和洗涤。

3.酶标板：用于固相吸附抗原。

4.显色液：用于显示结果。

五、试剂保存本试剂应存放在2-8摄氏度的阴凉干燥处，避免阳光直射。

开封后需密封保存并迅速使用，避免长时间暴露在空气中。

六、试剂使用方法1.取出所需试剂并将其温度恢复至室温。

2.打开试剂包装并将试剂倒入空白标准孔板中。

3.将待检样本加入孔板的样本孔中。

4.将盖片盖在孔板上，轻轻摇晃孔板，使样本充分与试剂混合。

5.静置孔板15-30分钟，使抗原与抗体发生特异性反应。

6.倒出孔板内的液体，并用洗涤溶液进行洗涤操作。

7.加入酶标记物，静置孔板15-30分钟。

8.倒出孔板内的液体，并用洗涤溶液进行洗涤操作。

9.加入显色液，静置孔板15-30分钟。

10.倒出孔板内的液体，洗涤2-3次。

11.加入底物，静置孔板10-20分钟。

12.用显微镜观察结果，根据显色程度判定结果。

七、结果解读根据试剂说明书上的阳性对照样本和阴性对照样本的反应程度进行比较，阴性对照样本的吸光度低于阳性对照样本。

通过对照样本反应的结果，判断所测样本的阴性或阳性。

八、注意事项1.试剂包装在使用前应先检查是否完好，过期试剂禁止使用。

【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】 Ａｎｔｉ－ＨＣＶ；ＥＬＩＳＡ；Ｒｅａｇｅｎｔ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ
丙型肝炎是一种主要经过血液和性传播的传染 病。１９８９年美国学者 Ｃｈｏｏ等 首 ［１］ 次从 受 感 染 的 黑 猩猩血液 标 本 中 分 离 出 丙 型 肝 炎 病 毒 （ＨＣＶ）。 据 报道［２］，全 球 现 有 １．３ 亿 ～１．７ 亿 人 口 感 染 了 ＨＣＶ。我 国 丙 型 肝 炎 感 染 高 发 时 间 在 ２０ 世 纪 ８０ 年代末至９０年代初。流行病学调查 显 ［３］ 示，我 国 人
抗－ＨＣＶ 双抗原夹心 法 试 剂 １ 家，用 Ａ１ 表 示； 抗－ＨＣＶ 间接法试 剂 ４ 家，分 别 用 Ａ２（进 口 试 剂 ）、 Ａ３、Ａ４、Ａ５表示；ＲＩＢＡ 确认法用 Ａ６表示。试剂均 经中国药品生物制 品 检 定 所 批 检 合 格，并 在 有 效 期 内使用。 １．２ 标 本
北京康彻思坦生物技术有限公司参考血清盘 ４０ 支 ，批 号 ２０１３０４００４；北 京 康 彻 思 坦 生 物 技 术 有 限 公司室内 质 控 品 （含 量 ４ ＮＣＵ／ｍＬ、２ ＮＣＵ／ｍＬ、１ ＮＣＵ／ｍＬ、０．５ ＮＣＵ／ｍＬ 和 ０．０５ ＮＣＵ／ｍＬ）各 １０ 支；留取２０１３年１～１２月抗－ＨＣＶ 单试剂阳性标本 １０ 份 。 １．３ 仪 器 设 备
２１．４５
１８．５４
９．３１
２．９５
１．２３
０．５２
１０．５６
６．２１
３．１２
９．５６
５．６５
２．５７
９．１４
５．７５
３．０１
０．０５ ＮＣＵ／ｍＬ ３．２１ ＼ ０．５２ ０．４７ ０．６７
· １５５ ·
表３ １０份抗－ＨＣＶ 单试剂阳性标本检测结果

丙型肝炎病毒抗体的两种检测方法结果比较黄乙清【摘要】目的比较双抗原夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法与间接ELISA法检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)灵敏度和特异性,为无偿献血的血液筛查提供参考依据.方法采用双抗原夹心ELISA法和间接ELISA法分别对1500份无偿献血者标本(经血液筛查抗-HCV阴性标本1416份,抗-HCV阳性标本84份)进行检测,记录标本结果与丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)的符合性,评价两种检测方法的差异.结果双抗原夹心ELISA法检测84份抗-HCV阳性标本的灵敏度为97.6%(82/84),间接ELISA法的阳性检出率为85.7%(72/84),双抗原夹心ELISA法灵敏度高于间接ELISA法,差异有统计学意义(P<0.05);双抗原夹心ELISA法的特异性为100.0%(1416/1416),高于间接ELISA法的85.9%,差异有统计学意义(P<0.05).结论双抗原夹心法的灵敏度和特异性优于间接法,可降低间接ELISA法引起的假阳性,减少血液不必要浪费,同时也避免了献血者淘汰.【期刊名称】《海南医学》【年(卷),期】2016(027)023【总页数】2页(P3935-3936)【关键词】丙肝病毒抗体;双抗原夹心法;间接ELISA法;灵敏度;特异性【作者】黄乙清【作者单位】海南省血液中心检验科,海南海口 570311【正文语种】中文【中图分类】R512.6+3丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(HC)感染引起的一种世界性传染病，主要通过输血和血液制品等途径传播。

为控制HCV经血液传播，要求对献血者进行抗-HCV的检测。

常用的第三代抗-HCV检测试剂，包被用抗原一般包括HCV-core、NS3、NS4和NS5抗原，特异性和灵敏度达99%[1]。

目前国内对献血者HCV感染的筛查,主要依赖间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测其血清中的抗-HCV。

而间接ELISA法也存在一定的假阳性[2]，主要是由于抗-HCV ELISA试剂均采用二抗作酶结合物，由于血清中IgG含量高，故少量的非特异性吸附可造成假阳性结果，血清中类风湿因子等也可能干扰检测结果。

ｒ ｅ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｌ ｙ ｍｅ ａ ｓ ｕ ｒ ｅ ｄ ｎｄ ａ ａ ｎａ ｌ ｙ ｚ ｅ ｄ ｂ ｙ ＥＬ Ｉ Ｓ Ａ ａ ｎ ｄ ＣＭＩ Ａ． Ｔ ｈ ｅ ｐ ｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ａ ｎ ｔ ｉ － ＨＣ ￣ ｗａ ｓ ｃ ｏ ｍｐ ａ ｒ ｅ ｄ ｂ ｅ —
Ｈ Ｃ Ｖ） 的优 越性 。 方法 首 先选 择 ２ ０ ０份质 控 品对 两种 方法 检测 的 准 确性 及一 致 性进 行 分 析 ， 然 后 选择 本院 门
诊及 住 院患 者 抗一 ＨＣ Ｖ样本 ２ ０ ０ ０例 ， 分别 采 用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法 与 Ｃ ＭＩ Ａ法 对 患者 血 清 中抗 一 ＨＣ Ｖ进 行 测 定 、 分析 ， 并 对 比两 种 方 法 对 抗 一 ＨＣ Ｖ 的 阳 性 检 测 率 。 结 果 质 控 品试 验 结 果 ： Ｃ Ｉ ＭＡ法 与 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法 检 测 准 确 率 分 别 为 ９ ８ ． ５ Ｏ ％与 ９ ３ ． ０ ０ ％ ，两 种 方 法 检 测 的一 致 率 为 ９ ３ ． ０ ０ ％；对 两种 检 测 方 法下 反 馈 结果 不 一 致 的 样 本进 行 分 析 ，
２ ． １ ０ ％， 两种 方法 抗 一 ＨＣ Ｖ 阳性 检测 率 比较 ， 差 异有 统计 学 意 义 （ Ｐ ＜ ０ － ０ ５ ） 。 结论 Ｃ ＭＩ Ａ检 测抗 一 Ｉ － Ｉ Ｃ Ｙ 的准 确率 、
特异 性 以及灵 敏 度均 明显 优 于 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法 ， 更适 合用 于丙 型肝 炎 的 Ｉ 临床筛 查 。
［ Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ］Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｃ ｏ ｍｐ ａ ｒ ｅ ｔ ｈ ｅ ｓ ｕ ｐ ｅ ｉ ｒ ｏ ｉ ｒ ｔ ｙ ｏ ｆ ｅ ｎ ｚ ｙ ｍ ｅ － ｌ ｉ ｎ ｋ ｅ ｄ ｉ ｍｍｕ ｎ ｏ ｓ ｏ ｒ ｂ ｅ ｎ ｔ ａ ｓ ｓ ａ ｙ （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ ）ａ ｎ ｄ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｌ ｕ ｍｉ ｎ ｅ ｓ —

显著差异（ Ｐ＜０ 【 ） Ｊ １
３３ 将 Ｅ Ａ板置于 ３ ℃水 浴箱 中， １３或 １２接触 水 ｕｓ ７ 其 ／ ／
面 ， 用水温传导 效应 ， Ｊ 使反 应孔 内溶 液 的温度 逐渐平衡 至 ３℃ ， ７ 而置于鼓 风式 厘温系统 ． 由于热 风传 导效应 ， 四周均 板
匀地置 于热风 中 ． 反应孔 内溶被 的温度更快达 到 ３ ℃ ． 使 ７ 存 相 同的时间内 ． 应更加 充分： 反 ３４ 加底物显色 时温育环 境 不 同对 结 果影响 并不 明 显， 如 Ａ与 ｃ， 对加 检样 、 但 加酶标 抗体这两 步 的反应有 重要影 响。 因此为提 高灵敏度 ． 止弱 阳性 标 本 的漏 检 ． 防 实验 必须 在干 式温育环境中进行 。但如果没有雅培鼓 风式恒 温系统 ． 可考 虑将 Ｅ Ａ徽板 置于 电热恒 温培养箱 。并 将其 置于 发热源 附 Ｉ
表 １ 不 同温育条件下 的检 测结果
式 ；、 Ｆ ①干式② 、 ③水浴 ； ①水 浴②干式＠水 浴 ； ①干式 Ｇ、 Ｈ、
＠ 水浴③ 干式 。 以上各实 验 Ｎ、 、 Ｕ／ ｄ各平行 测定 ２ Ｐ ２ＮＣ ｗ ０孔 ， 果取 结 Ａ均 值 ， 并用 检验进行比较。 ３ 结果与讨 论 ３ １ 各种模 式下检测结 果见 表ｌ 。
中国分类号 ： ４ ６ ６ Ｒ ６
文献标 识码 ： Ｂ
不 同温 育 环境 ＥＬ Ｓ ＩＡ检 测 抗一 Ｖ 的 比较 ＨＣ
许萍 ， 黄锦缸 ， 王扬替（ 福州市中心血站 ． 州 ３ ５０ ） 福 １００ 关键词 ： 酶免疫 法； 温育 ； 丙型肝 炎病毒抗 体 抗 用 Ｅ Ｉ Ａ检则丙型肝炎病毒抗体 （ ＨＣ 影响因素较 ＬＺ 抗 Ｖ） 多 本 文 选 择 在 相 同 温 度 两 种 不 同 温 育 环 境 下 检 测 抗一 Ｖ， 果报道如下。 ＨＣ 结 １ 材料与 方法 １ 试 剂 Ｍｕｅ 抗一 ｖ 试 剂 ． 号 ： ５ ２ ０ １ ｒｘ Ｈｒ 批 Ｍ０ １ １。２ 异（ 尸＞０ ０ ）Ｃ与 Ｆ、 比较 ， 、 Ｊｕ／ 、 — 的 Ａ 值有 ．５ ； Ｈ ｌ ２） ｃ ｍｌＰ

注：样本翠的比较采用ｒ检验。 阳性率（Ｐ＜０．０５）。
在所有结果中．使用三种试剂盒检测均为假阳 性结果的有９例。假阳性率为８．６％。低于单独使用 任何一种国产试剂盒（Ｐ＜０．０５）。
２．２不同试剂盒检测婴幼儿标本假阳性结果的分 布
号标本）用生理盐水１：３０和１：１００稀释，然后用试剂 盒Ａ检测，部分标本ｆ标本ｌ至标本６）检测结果如图 ２。在１：３０稀释的４５例标本中检测出假阳性标本２ 例，假阳性率为４．４４％，低于原倍检测标本（Ｐ＜０．０５）。
１．４结果的判断和分析 根据试剂盒说明书计算ｃｕｔ—ｏｆｆ值和每个标本
检测的Ｓ／ＣＯ值：根据每个标本ＥＩＡ检测结果、试剂 盒检测结果、肝功能检测结果、婴幼儿流行病学特点 和临床资料筛选出假阳性结果。
１．５统计学处理本实验结果统计使用ＳＰｓＳ １５．Ｏ
统计软件分析数据，样本率的比较采用ｒ检验（理论 值小于５时使用校正公式），均值比较采用ｔ检验。
其中标本ｌ、２为真阳性标本；标本３、４在１：３０稀释后检测仍为假阳 性；标本５在原倍时检测为假阳性；标本６为阴性标本。
注：样本率的比较采用，检验，均值比较采用ｆ检验。
性意义。我们同时检测了该６２例婴幼儿标本Ｉ酊含 量并进行了比较分析。假阳性标本中Ｉ舡含量的平 均值为７．８８９／Ｌ．真阴性标本中ＩｇＧ含量的平均值为
２．４ ６２例婴幼儿标本ＲＦ和免疫球蛋白含量检测 结果的分析
为了研究婴幼儿标本较高假阳性的原因，我们 以试剂盒Ａ检测结果为基础．随机抽取了３０例真 阴性标本和３２例假阳性标本．检测这些标本的ＲＦ 值．比较了真阴性标本和假阳性标本中ＲＦ的阳性 率（如表２），两阳性率的比较Ｐ＞０．０５，差别没有显著
表２要幼儿标本中真阴性和假阳性标本ＲＦ．ＩｇＧ检测结果比较

HCV—cAg与HCV—Ab联合检测的互补作用及HCV阳性者与ALT的关系目的探讨丙肝病毒核心抗原（HCV-cAg）与丙肝病毒抗体（HCV-Ab）联合检测对诊断丙肝病毒（HCV）感染的互补作用及HCV感染阳性者与丙氨酸氨基转移酶（ALT）的关系。

方法检测手术前检查组2061例患者和ALT>80 U/L 组242例患者的HCV-cAg、HCV-Ab和ALT等指标，然后将检测结果作出统计分析。

结果手术前检查组联合检测有 2.7%的阳性率，显著高于单独HCV-cAg 和单独HCV-Ab的1.6%（P＜0.05）；ALT>80 U/L组联合检测有14.5%的阳性率，显著高于单独HCV-cAg的7.0%（P＜0.01）；手术前检查组ALT均值和ALT>80U/L 例数是2项均阳性高于HCV-Ab阳性、HCV-Ab阳性高于HCV-cAg。

结论HCV-cAg和HCV-Ab 2项联合检测明显优于单项检测，这对HCV感染的诊断能起到很好的互补作用，加上ALT等肝功能指标的检测，有利于HCV感染的正确诊断。

标签：丙肝病毒核心抗原；丙肝病毒抗体；丙氨酸氨基转移酶；联合检测；互补作用丙型肝炎（丙肝）是一种主要经血液传播的传染病，而丙肝病毒（HCV）是其主要的致病因素，HCV感染的实验室检查是丙肝诊断的重要依据。

近些年来的HCV检测技术主要是丙肝病毒抗体（HCV-Ab）和丙肝病毒核酸（HCV-RNA）检测，二者均存在一定的局限性。

该院于2013年3月起正式开展了丙肝病毒核心抗原（HCV-cAg）检测，这与HCV-Ab联合检测能起到一定的互补作用，可望提高HCV感染的阳性检出率。

但2项联合检测到底能起到多少互补作用以及HCV阳性者与丙氨酸氨基转移酶（ALT）的关系如何还值得探讨，现报道如下。

1 对象与方法1.1 研究对象该研究的研究对象为2013年3月1日—5月31日这一时段来我院作疾病诊治的并来源于2个方面的患者，一是手术前（含输血前）作例行检查的患者，共2 061例；二是ALT>80 U/L的肝炎和疑似肝炎患者，共242例。

- 107 -①黑龙江省佳木斯市妇幼保健院　黑龙江　佳木斯　154004通信作者：孙健HCV-cAg在丙型肝炎中的诊断价值孙健①【摘要】　目的：探讨HCV-cAg 在丙型肝炎中的诊断价值。

方法：选取2017年2月-2019年2月于本院就诊的72例疑似丙型肝炎患者为研究对象。

采用实时荧光定量PCR 法检测HCV-RNA 水平，分析HCV-RNA 与HCV-cAg 的检测结果，HCV-RNA 不同载血量血清的HCV-cAg 阳性率。

结果：HCV-cAg 检测的准确度88.9%（64/72），特异度92.7%（38/41），灵敏度83.9%（26/31）。

HCV-RNA 载血量血清数值<103 IU/mL、≥103 IU/mL 且<104 IU/mL、≥104 IU/mL 且<105 IU/mL、≥105 IU/mL 且<106 IU/mL、>106 IU/mL 患者的HCV-cAg 阳性率分别为4.9%、75.0%、83.3%、91.7%、100%。

结论：HCV-cAg 诊断丙型肝炎的准确度、特异度及灵敏度均较高，HCV-RNA 载血量血清数值越大，HCV-cAg 阳性率越高，因此HCV-cAg 的检测可作为HCV-RNA 的补充检测，临床应用价值较高。

【关键词】　丙型肝炎　丙肝病毒核心抗原　丙型肝炎病毒 Diagnostic Value of HCV-cAg in Hepatitis C/SUN Jian. //Medical Innovation of China, 2021, 18(05): 107-110 [Abstract]　Objective: To explore the diagnostic value of HCV-cAg in hepatitis C. Method: A total of 72 suspected hepatitis C patients admitted to our hospital from February 2017 to February 2019 were selected as the research subjects. The level of HCV-RNA was detected by real-time fluorescence quantitative PCR, and the detection results of HCV-RNA and HCV-CAG were analyzed， the positive rate of HCV-CAG in serum with different blood loads of HCV-RNA was analyzed. Result: The accuracy, specificity, and sensitivity of HCV-cAg detection were 88.9% (64/72), 92.7% (38/41), 83.9% (26/31). The positive rates of HCV-cAg were 4.9%, 75.0%, 83.3%, 91.7%, 100% in patients with HCV-RNA blood load and serum value <103 IU/mL, ≥103 IU/mL and <104 IU/mL, ≥104 IU/mL and <105 IU/mL, ≥105 IU/mL and <106 IU/mL, >106 IU/mL, respectively, the higher the serum value of HCV-RNA blood load. Conclusion: The accuracy, specificity and sensitivity of HCV-cAg in the diagnosis of hepatitis C are high, the higher the serum value of HCV-cAg blood carrying volume, the higher the positive rate of HCV-cAg, therefore, the detection of HCV-cAg can be used as a supplementary detection of HCV-RNA, its clinical application value is high. [Key words]　Hepatitis C　HCV-cAg　HCV-RNA First-author ’s address: Jiamusi Maternal and Child Health Hospital, Jiamusi 154004, China doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.05.027 丙型肝炎为全球范围内传染性疾病，临床数据显示丙型肝炎发病率出现逐年上升趋势，该病感染率较高，约为3%[1]。

丙肝病毒抗体双抗原夹心法的临床价值-医学技术论文-基础医学论文-医学论文——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印——HCV 是在输血后导致肝炎发生的一个重要因素, 往往经血液或血液制品进行传播, 经调查发现, HCV 感染具有世界性分布特点, 为了能够避免HCV 通过血液进行扩散, 需对每个献血者实施抗-HCV 指标检测[1].通常选取间接酶联免疫法进行检测, 此方法操作时包被抗原的组成及质量具有关键作用[2].目前对抗-HCV 间接酶联免疫法试剂进行单独检测时显现阳性, 且处于临界值相邻样本, 以双抗原夹心酶联免疫法试剂进行检测时则呈现阴性, 伴随临床医学发展,双抗原夹心酶联免疫吸附实验（ELISA）对于HCV 血清学诊断具有较为显着的改善作用, 效果明显[3].本文选取190 份血液筛查阴性标本, 分析双抗原夹心法作用, 现报告如下。

1材料与方法1. 1试验材料选取本院2012 年 6 月~2014 年12 月190份血液筛查阴性标本, 同时采集190 份质控血液标本。

1. 2方法将所选取的380 份血液标本进行严格检测, 应用双抗原夹心法检测HCV 抗体。

在检测时所应用试剂有吉比爱、Ortho 丙肝病毒抗体酶联免疫诊断试剂, ChironRIBA确认试剂。

1. 2. 1抗原制备嵌合表位抗原经包涵体的形式表达, 采取离子交换层析措施进行纯化, 然后通过SephadexG-50 柱凝胶完成过滤采集, 应用SDS-PAGE 将抗原蛋白进行仔细鉴定。

1. 2. 2双抗原夹心法应用50 mmol/L 碳酸盐缓冲液对抗原予以稀释处理, 多肽抗原具体浓度为:结构处多肽151 g/ml,NS4 处多肽0.51 g/ml, NS5 处多肽0.251 g/ml, 所应用到的基因工程表达抗原具体浓度有c7 应用1 g/ml, C11 应用1 g/ml.每个孔内均加进100 l, 在37℃状态中持续保存1 h, 然后放置到4℃冰箱内过夜, 应用30% 小牛血清PBST 实施封闭处理, 在每个孔内加进200 l, 37℃状态中保存1 h, 然后去除封闭液, 应用50 l 样品稀释液, 每个孔内加进5 l, 37℃状态中保存30 min, 然后应用PBST 进行5 次冲洗。

ＲＮＡ ＲＴ— ＣＲ 荧 光 定 量 检测 结 果 相 类 似 ， 助 于 可 疑抗 ＨＣＶ 阳性 结 果 的 证 实 。 Ｐ 有
［ 关键 词 ］ 丙 型肝 炎 ； 心 抗 原 ； 联 免 疫 吸 附试 验 核 酶
中 图分 类 号 ： Ｒ５ ２ ６ １ ． ３ 文 献标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ： １ ７ — ７ Ｘ（ ０ ８ ０ — １ ８０ ６ ２２ １ ２ ０ ） ３０ ６ — ２
ｃ ｅ ｇ ｈｎ （ ．７ｈ ９ ｔ ｏ ｐｉａｌｃ ＰＬＡ ， ｕｚ ｏｕ ２ｌ ０４， ｉ ｎｇｓ Ｃｈｉ １ ＂Ｐ ７ ｈ Ｈ ｓ ｔ Ｘ ｈ ２ ０ ａ ］ ｕ， ｎａ； ． ｕ ａｎ Ｊｉ ２ Ｈ ｎ ｎｇｄａ Ｇｅ ｅ Ｃｏ ｎ
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［ 摘 要］ 目的 应 用 丙 型 病毒 性 肝 炎 核 心 抗 原 （ Ｃ ｃ ｇ Ｅ Ｓ 检 测 试 剂 ， 测 丙 型病 毒 性 肝 炎 Ｈ Ｖ—Ａ ） ＬＩＡ 检
（ Ｃ 病 毒 标 志 物 。方 法 对 单项 抗 一 Ｖ Ｅ Ｓ 试 剂 Ａ 阳性 ｌ Ｈ Ｖ） ＨＣ ｌ Ａ Ｉ 和单 项 试 剂 Ｂ阳 性 ｌ ５份 ７份 血 清标
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HCV-RNA与HCV-cAg检测的相关性分析苏明权;杨柳;王娟;常亮;肖凤静;马越云;郝晓柯【期刊名称】《临床和实验医学杂志》【年(卷),期】2013(012)017【摘要】目的探讨丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)与HCV-RNA检测的相关性及其在丙型肝炎病毒感染诊断中的价值.方法采用双抗体夹心酶联免疫分析法(ELISA)检测HCV-cAg;采用实时荧光定量PCR法检测HCV-RNA,以了解两者检测方法的相关性.结果在160例HCV-RNA阳性血清中,HCV-cAg阳性148例,阳性符合率92.5%;在60例HCV-cAg阳性血清中,HCV-RNA阳性59例,阳性符合率98.3%.结论通过对HCV-RNA与HCV-cAg检测,说明HCV核心抗原与HCV-RNA检测可作为反映HCV复制的间接指标,预防窗口期感染.由于HCV-cAg在方法学上与HCV-RNA相比,具有方法简便、快速、价廉,所需设备简单,易于普及应用等优点,特别是在不具备HCV-RNA检测条件的基层医疗单位作为HCV感染检测的直接证据具有重要的意义.【总页数】2页(P1362-1363)【作者】苏明权;杨柳;王娟;常亮;肖凤静;马越云;郝晓柯【作者单位】第四军医大学西京医院检验科,陕西,西安,710032;第四军医大学西京医院检验科,陕西,西安,710032;第四军医大学西京医院检验科,陕西,西安,710032;第四军医大学西京医院检验科,陕西,西安,710032;第四军医大学西京医院检验科,陕西,西安,710032;第四军医大学西京医院检验科,陕西,西安,710032;第四军医大学西京医院检验科,陕西,西安,710032【正文语种】中文【相关文献】1.HCV-Ab、HCV-cAg和HCV-RNA联合检测的临床价值 [J], 顾娟;孙明忠2.联合检测血清HCV-RNA、HCV-cAg与HCV-Ab对丙型肝炎的诊断价值分析[J], 卢庆文;董娅;刘红霞3.HCV-RNA与 HCV-Ab，HCV-cAg相关性分析研究 [J], 李娅;张赟;皇海;章迪;苏明权;郭旭昌4.丙肝患者血清HCV-Ab、HCV-cAg、HCV-RNA检测的比较及肝功能的相关性研究 [J], 王中东;黄麦华5.丙型肝炎病毒抗体阳性人群中抗-HCV、HCV-cAg与HCV-RNA结果的相关性及其联合检测在临床应用价值的评估 [J], 金晶;高智勇;关冲;孙静怡因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

• 如果两个质控数据中有任意一个落在±3SD 范围以外，则表示该次检测不符合 Westgard规则
• 应拒绝该次检测 • 如果该检测没有破坏 13S规则，则应对其进
行22S 规则评价
13S 规则 = 如果任意一项质控数据超出+3SD 或-
3SD的控制范围，则应拒绝该次检测
+3SD +2SD +1SD
《丙型肝炎病毒实验室检测技术规范》
《规范》共分9章，首次依据不同检测目的 制定了不同的检测策略： 1．疫情监测相关的检测策略 2．临床诊断相关的检测策略 3．血液筛查相关的检测策略
5
《丙型肝炎病毒实验室检测技术规范》
• 《规范》首次在临床诊断中规定了HCV抗 体筛查阳性反应后必须进行补充实验（免 疫印迹或NAT）。
蛋白芯片技术
深圳益生堂
胶体金技术
重组免疫印迹法 （RIBA）
国产的7家；进口注册只有韩国一家。 凯荣、MP、厦大与万泰合作的。
HCV抗原检测
检测目的 检测方法 检测策略及 结果报告 检测的意义
HCV抗原检测
检测目的
a. HCV感染的早期诊断：窗口期，HCV（+）母亲所生的婴儿； b. 免疫受损或缺陷； c. 抗-HCV阳性患者的病毒血症分析； d. 以流行病监测为目的的检测是为了解不同人群HCV感染率及其
仅一条HCV条带呈1+以上反应度， 或抗原条带呈1+以上，但2+以下反应度
不确定
* 仅有GST带反应可判为阴性 GST 质控带反应度为1+或以上，加上1条或更多HCV条带呈1+反 应度可读成不确定。
3+质控带(血清加样)
核抗原带 NS3-1 NS3-2 NS4 NS5

HCV核心抗原联合抗-HCV检测在丙型肝炎诊断中的作用发表时间：2012-10-29T15:06:52.937Z 来源：《医药前沿》2012年第20期供稿作者：何志君[导读] 探讨HCV核心抗原联合抗-HCV检测在丙型肝炎诊断中的作用。

何志君 (安徽省蒙城县第一人民医院检验科安徽蒙城 233500)【摘要】目的探讨HCV核心抗原联合抗-HCV检测在丙型肝炎诊断中的作用。

方法收集156例HCV-RNA阳性的标本同时检测抗-HCV和或HCV核心抗原，了解其检验结果的符合率。

结果 156例HCV-RNA阳性的标本中，检出抗-HCV阳性126例，HCV核心抗原132例，抗-HCV 和或HCV核心抗原阳性151例。

结论 HCV核心抗原联合抗-HCV检测可以提高丙型肝炎的诊断率。

【关键词】 HCV核心抗原抗-HCV 丙型肝炎联合检测符合率丙型肝炎是一种严重威胁人类健康的传染病，主要通过血液传播。

自1989年发现以来，据统计全球已有117亿人受到感染，我国的丙肝感染率在3.2%左右，感染丙肝病毒后形成慢性感染的机率很高，且有相当比例患者会发展成肝硬化、肝癌，因此，较早检出丙肝病毒感染，较早的抗病毒治疗是非常关键的[1]。

但是丙肝病毒感染后发展隐匿，临床表现不典型，因此其临床诊断、疗效观察还是依赖于实验室检测结果。

尽管第三代抗-HCV检测试剂提高了检测的灵敏度，缩短了窗口期，然而抗-HCV从HCV感染后到出现仍需6-12周(窗口期)，因此抗-HCV阴性并不能排除携带HCV并具有传染性的可能[2]。

而HCV核心抗原在感染后14天即可检出，大大缩短了窗口期。

本文就HCV核心抗原联合抗-HCV检测在丙型肝炎诊断中的作用作以分析，报告如下。

1 材料与方法1.1 标本来源 2008年1月-2012年1月本院门诊及住院HCV-RNA检测阳性标本156。

1.2 方法与试剂抗-HCV试剂采用珠海丽珠试剂股份有限公司的抗-HCV酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒，阳性者二次复检；HCV 核心抗原试剂采用湖南景达生物公司生产的HCV核心抗原ELISA试剂盒，阳性者二次复检；HCV-RNA采用上海复星长征医学科学有限公司的HCV-RNA试剂盒；具体操作严格按照试剂盒说明书操作。