尿酸测定SOP_UA临床意义_检验科生化项目SOP
- 格式:doc
- 大小:54.50 KB
- 文档页数:3
尿酸测定试剂盒(尿酸酶法)标准化操作规程1 目的规范实验室操作,保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。
2 授权操作人经培训且考核通过的实验室检验人员。
3 适用范围本试剂适用于体外定量检测人血清或尿液中尿酸的含量。
4 检验方法本试剂盒采用酶法测定尿酸的含量。
5 检验原理样品中的尿酸在试剂中尿酸氧化酶(GOD)的催化作用下氧化生成尿酸酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶(POD)的催化下与苯胺类色原物质和4-氨基安替比林作用产生水和醌亚胺色素,醌亚胺色素的生成量与样品中尿酸的含量成正比,通过测定特定波长处反应最终生成的色素量,可以计算出样品中尿酸的浓度。
尿酸+ H2O + O2−−−→−GOD尿酸酸+ H2O2H 2O2+ 4-氨基安替比林 + 苯胺类色原物质−−−→−POD醌亚胺色素 + 水6 标本要求6.1 血清样本应及时离心分离,不得使用溶血或被污染的样本。
6.2 建议尿液样本作pH测定,若pH<8.0,可用NaOH调至pH=8.0。
尿液样本测定前需用水稀释10倍。
6.3 血清、尿液样本无微生物污染在2℃~8℃可稳定3天,冷冻保存可稳定6个月。
7 试剂及配套品7.1试剂来源长春迪瑞医疗科技股份有限公司尿酸试剂盒(酶法)7.27.3试剂的稳定性与贮存7.3.1试剂在2℃~8℃条件下,干燥、避光、密封贮存,有效期为18个月。
7.3.2试剂开封后在2℃~8℃可稳定30天。
7.4试剂的变质指示若试剂混浊,或以水为空白在520 nm处吸光度值大于0.100A时,则不能使用。
8 实验仪器及性能指标8.1 实验仪器迪瑞CS系列全自动生化分析仪8.2试剂性能指标8.2.1 试剂空白吸光度:A≤0.100。
8.2.1 分析灵敏度:测试1mmol/L被测物时,吸光度变化△A>0.10。
8.2.3 线性范围:0.01mmol/L~1.5mmol/L;线性相关系数r≥0.9900;[0.01,0.3] mmol/L区间内,线性绝对偏差应不超过±0.06mmol/L;(0.3,1.5] mmol/L 区间内,相对偏差不超过±15%。
SOP标准操作程序UA 尿酸(货号:OSR6198,OSR6298)一、目的:规范尿酸测定的操作程序,确保尿酸测定的结果准确二、适用范围:在Beckman Coulter AU分析仪上定量测定人血清中的尿酸(UA)三、临床意义尿酸是人体内嘌呤分解代谢的主要产物。
绝大多数尿酸在肝脏中形成,通过肾脏排泄,体内尿酸库由合成和排泄之间的平衡决定。
高尿酸血症可以分为原发性高尿酸血症和继发性高尿酸血症,包括生成过量或排泄减少。
原发性高尿酸血症也称作特发性或者家族性高尿酸血症。
在大多数病例中,肾小管分泌尿酸减少引起尿酸水平升高。
大约 1% 的原发性高尿酸血症患者在嘌呤代谢中存在酶缺陷,因而导致尿酸生成过多。
原发性高尿酸血症与痛风、Lesch-Nyhan 综合征,Kelley Seegmiller 综合征和磷酸核糖基焦磷酸盐合酶活性升高有关。
继发性高尿酸血症可能由营养型嘌呤摄取增加引起,伴有尿液中尿酸排泄增多。
继发性高尿酸血症与许多情况有关,这些情况包括肾功能不全,骨髓增生性疾病,溶血性疾病,牛皮癣、真性红细胞增多症、I 型糖原贮积病,酒精摄入过多,铅中毒,高嘌呤饮食,禁食,饥饿和化疗。
低尿酸血症可能由于尿酸产生减少引起,例如在遗传性黄嘌呤尿症,遗传性嘌呤核苷磷酸化酶缺乏和别嘌呤醇法治疗中。
低尿酸血症可能由于肾脏尿酸排泄增多引起,这种情况可能出现于恶性疾病,AIDS,Fanconi 综合征,糖尿病,严重烧伤和嗜酸性白细胞增多综合征。
此外,使用促尿酸排泄药物治疗和食入 X 光造影剂也会引发低尿酸血症。
定量测定尿酸的排泄有助于确定高尿酸血症的治疗方案,确认患者是应当使用促尿酸排泄药治疗以增加肾脏排泄,还是应当使用别嘌呤醇治疗以抑制嘌呤合成。
四、方法原理尿酸被尿酸酶转化为尿囊素和过氧化氢。
通过 Trinder 反应测定 H2O2。
在过氧化物酶 (POD) 的作用下,所形成的 H2O2 与 4-氨基比林和 N,N-二(4-磺丁基)- 3,5-二甲苯胺二钠盐 (MADB) 以及 4-氨基比林发生反应,生成发色团,该物质可通过双色分析仪在 660/800nm 处测定。
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------生化检验项目及临床意义一、肝功能检查 1 丙氨酸氨基转移酶(ALT)正常参考值:040IU/L 临床意义:对肝实质病变的诊断及病程变化的观察有重要意义。
注意事项:空腹采血,标本应避免溶血,严重黄疸及浑浊血清也可使结果升高,血清不宜冰冻保存。
2 天门冬氨酸氨基转移酶(AST)正常参考值:040 IU/L 临床意义:急性心肌梗死时升高。
肝病及其它脏器炎症时也常升高。
注意事项:标本应避免溶血,血清不宜冰冻保存。
3 总蛋白(TP)正常参考值:6085 g/L 临床意义:了解体内蛋白质代谢的一般情况。
对肝、肾损害,多发性骨髓瘤等有一定的诊断、鉴别意义。
总蛋白升高常见于高度脱水、休克、慢性肾上腺皮质机能减退等造成的血液浓缩而致;总蛋白降低常见于营养不良和消耗增加(如严重结核病、甲亢、恶性肿瘤及慢性肠道疾病等),合成障碍(如1 / 25肝硬化)蛋白丢失(如肾病综合症、溃疡性结肠炎、烧伤及失血等)。
注意事项:空腹采血,标本应避免溶血。
4 白蛋白(ALB)正常参考值:3555 g/L 临床意义:白蛋白的生理功能广泛,包括营养价值;有效胶体渗透压的保持;血清钙、未结合胆红素、游离脂肪酸、药物、以及甲状腺激素的运输。
白蛋白的多种生理功能使其成为检测肝脏疾病的重要指标。
白蛋白增高常见于严重失水而导致血浆浓缩,使其白蛋白浓度上升。
白蛋白降低基本与总蛋白相同,特别是肝脏、肾脏疾病更为明显。
注意事项:空腹采血,标本应避免溶血。
5 球蛋白(GLB)正常参考值:20-30 g/L 临床意义:球蛋白升高常见于肝硬化、红斑狼疮、硬皮病、风湿及类风湿性关节炎、结核、疟疾、黑热病、血吸虫病、麻风、骨髓瘤、淋巴瘤等。
生化实验室尿酸UA氧化酶法作业指导书1、前言试验名称:尿酸测定,英文名称:UA,方法:氧化酶法。
本文件适用于安阳鼎城糖尿病医院检验科生化实验室,目的是指导工作人员正确的在科华KHB-450全自动生化分析仪上测定血清、血浆、样本中的尿酸浓度,以保证测定结果的准确可靠。
尿酸是卩票吟、核酸的代谢产物,因此,尿酸水平异常可作为上述物质代谢异常的指征,高尿酸血症可见于:肾功能障碍、痛风、白血病、红细胞增多症、动肪粥样硬化、糖尿病、甲状腺机能减退、或其他遗传疾病,尿酸水平低可见于威乐逊氏病。
2、测定原理本试验采用改良的Trinder氏方法,其反应原理:尿酸+O2+H2O尿跡・尿囊素+CO2+H2O2H26+AAP+TRHRA过隼化物酶醜亚胺色素+出0上式中AAP为4■氨基安替比林TBHBA为3■疑基・2,4,6三漠甲酸在上述反应中,红色醞亚胺色素的生成量与样本中尿酸的浓度成正比,通过在520nm波长处测定吸光度的变化值,从而计算出尿酸的浓度,试剂中亚铁氧化钾可抑制样本中胆红素的干扰。
3、试剂试剂生产商:长海科华生物工程股份有限公司。
剂型:液体双试剂。
包装量:Rl : 4*40ml R2: 4*20ml注册号:沪食药监械(准)字2010第2400028号。
生产许可证号:沪药管械生产许20030916号。
基本成份: 试剂1: 过氧化物酶3-疑基-2,4,6三澳甲酸亚铁氧化钾磷酸盐缓冲液4 ■氨基安替比林含非反应性填充物及稳定剂试剂2:磷酸盐缓冲液尿酸酶 储存条件和有效期「试剂避光储存于2-8°C 可稳定12个月。
启用后2-10°C 可稳定14天,若试剂混浊,或空白在520nm 下吸光度值高于0.4A 时,则不能使用。
4、标准品:使用试剂盒附带标准品300u/l2.5mmol/l0.05mmol/l150mmol/l0.7mmol/l150mmol/l 500u/l5、质控品:生产商:英国Randox公司。
一、简介生化全套检查就是指用生物或化学的方法来对人进行身体检查。
生化全套检查内容包括:肝功能(总蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比,总胆红素、直接、间接胆红素,转氨酶);血脂(总胆固醇,甘油三酯,高、低密度脂蛋白,载脂蛋白);空腹血糖;肾功能(肌酐、尿素氮);尿酸;乳酸脱氢酶;肌酸肌酶等。
二、常规生化检验项目缩写三、临床意义:1.血清丙氨酸氨基转移酶(ALT或GPT)测定的临床意义:升高:常见于急慢性肝炎、药物性肝损害、脂肪肝、肝硬化、心肌梗塞、心肌炎及胆道疾病等。
2.血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST或GOT)测定的临床意义:升高:常见于心肌梗塞发病期、急慢性肝炎、中毒性肝炎、心功能不全、皮肌炎等。
3.血清总蛋白测定的临床意义:增高:常见于高度脱水症(如腹泻,呕吐,休克,高热)及多发性骨髓瘤。
降低:常见于恶性肿瘤,重症结核,营养及吸收障碍,肝硬化、肾病综合征,溃疡性结肠炎,烧伤,失血等。
4.血清白蛋白测定的临床意义:增高:常见于严重失水导致血浆浓缩,使白蛋白浓度上升。
降低:基本与总蛋白相同,特别是肝脏病,肾脏疾病更为明显。
5.血清碱性磷酸酶(ALP)测定的临床意义:升高:常见于肝癌、肝硬化、阻塞性黄疸、急慢性黄疸型肝炎、骨细胞瘤、骨转移癌、骨折恢复期。
另外,少年儿童在生长发育期骨胳系统活跃,可使ALP增高。
注意:使用不同缓冲液,结果可出现明显差异。
6.血清r-谷氨酰基转移酶(GGT或r-GT)测定的临床意义:升高:常见于原发性或转移性肝癌、急性肝炎、慢性肝炎活动期肝硬化、急性胰腺炎及心力衰竭等。
7.血清总胆红质测定的临床意义:增高:肝脏疾病,肝外疾病,原发性胆汁性肝硬化溶血性黄疸急性黄疸性肝炎新生儿黄疸慢性活动期肝炎闭塞性黄疸病毒性肝炎胆石症阻塞性黄疸胰头癌肝硬化输血错误8.血清直接胆红素测定临床意义:增高:常见于阻塞性黄疸,肝癌,胰头癌,胆石症等。
9.血清甘油三酯测定的临床意义:增高:可以由遗传、饮食因素或继发于某些疾病,如糖尿病、肾病等。
SOP标准操作程序尿酸(货号:OSR6136,OSR6236)实验原理:尿酸测量用于诊断和治疗许多肾脏疾病和代谢紊乱,包括肾衰竭,痛风,白血病,牛皮癣,饥饿或各种应急条件以及接受药物治疗的病人。
方法尿酸可直接进行测定,通过测量耗氧量测定或通过测量尿酸酶反应产生的过氧化氢来进行测定。
一些方法利用反应来检测尿酸酶反应产生的过氧化氢。
Fossati等人1提出了一种方法,这种方法利用Trinder氏反应测量产生的过氧化氢,一种替代的苯酚增加反应的灵敏度。
奥林巴斯AU640尿酸的测定是Fossati方法的改良法。
尿酸通过尿酸酶转化为尿囊素和过氧化氢。
过氧化氢在3,5二氧羟基苯磺酸(DCB)存在的情况下与4-氨基安替比林(4-AAP)反应产生一个色基,在520/660nm读取吸光度,与标本中尿酸的浓度成正比。
尿酸酶尿酸+O2+H2O -------------﹥尿囊素+CO2+H2O2过氧化物酶2 H2O2 +4-AAP+DCB -------------﹥4 H2O+醌亚胺(红)标本:病人准备:无特殊要求。
类型:标本最好是无溶血的血清或无凝块的肝素化的血浆。
留取24小时尿样。
标本稳定性:血清尿酸在0~4℃下稳定3~5天,在冰冻条件下稳定6个月。
不建议尿素酶法使用氟化物,草酸盐或EDTA血浆。
仪器与材料:仪器:奥林巴斯AU640生化分析仪材料:奥林巴斯AU640尿酸参与反应成份的最终浓度:HEPES缓冲液(pH 7.5)32.7 mmol/L过氧化物酶≥2.0 kU/L3,5二氧羟基苯磺酸 3.25 mmol/L4-氨基安替比林 1.50 mmol/LEDTA 0.72 mmol/L尿素酶≥400 kU/L其中含有保护剂。
注意:1. 此试剂为体外诊断用。
2.不要入口,吞服有害。
试验用试管的直径在12~16mm。
定标液:奥林巴斯定标液(Cat. No. DR0040)。
试剂准备:奥林巴斯AU640的尿酸是即开即用的。
尿酸检测作业指导书1 检验目的规范尿酸(UA)检测试验,确保检测结果准确性和重复性。
2 测定方法尿酸酶-过氧化物酶法。
3 检测原理尿酸(UA)在尿酸酶的作用下,生成过氧化氢。
在过氧化物酶(POD)的作用下,过氧化氢使ESBmT和4-氨基安替比林氧化缩合产生紫红色色素,通过测定色素的吸光度,求出尿酸的含量。
尿酸酶尿酸+ 2H2O+2O2 尿囊素+CO2+2H2过氧化物酶2H2O2+4-氨基安替比林+ESBmT 紫红色色素+4H2O4 样本血清、肝素、EDTA、草酸盐及氟化物抗凝血浆,处理方法见生化标本采集程序。
稳定性:2~8℃稳定7天;室温可稳定3天。
5 仪器和试剂5.1 仪器:美国贝克曼-库尔特DXC800、AU5811全自动生化仪、迈瑞BS800M生化分析仪。
5.2 试剂:由武汉元景商贸公司提供原装贝克曼-库尔特试剂及迈瑞公司提供的生化试剂(详见试剂说明书),超过失效期的试剂不能使用。
5.3 校准物:Rodan混合校准品,符合WHO标准,贮存、准备严格遵照其说明书。
5.4 质控物:Rodan正常值及病理值质控品,符合WHO 标准,贮存、准备严格遵照说明书。
6 校准6.1 仪器校准:每年由该仪器维修工程师参照厂方的技术规范对仪器进行一次校准。
6.2 项目校准:试剂盒在仪器上放置稳定期后;试剂批号更换后;由质控结果随时决定。
7 操作步骤上机操作,操作程序、质量控制程序见相应生化仪操作程序。
8 参考范围150~430µmol/L。
9 警告/危急值未规定。
10 性能指标10.1 线形上限:1487µmol/L。
10.2 精密度:≤8%。
10.3 准确度:不准确度≤10%。
11 干扰因素及变异的潜在来源11.1脂血对本法有干扰作用。
11.2抗坏血酸(0.3mmol/L),血红蛋白(1g/L)及胆红素(15mg/L)均不干扰。
12 临床意义尿酸测定主要用于各种原因引起的高尿酸血症,以及由此导致的痛风症。
常用化验值及意义氨基酸及其代谢产物血清(血浆)尿酸(UA)『标本采集』采空腹血2毫升,抗凝或不抗凝。
『正常值范围』119―417.umol/L或2―7mg/dl,换算成SI单位因素:59.5。
『临床意义』1、增高:痛风,肾脏疾患,子癫,肝脏病患,慢性白血病,红细胞增多症和摄入富含核蛋白的食物后。
2、降低:恶性贫血,复发乳糜泻。
血清苯丙氨酸『标本采集』采空腹血2毫升,不抗凝。
『正常值范围』成人:104―233umol/L或0.8―1.8mg/dl;新生儿:156―441umol/L或1.2―3.4mg/dl。
『临床意义』增高:苯丙酮尿症,早产儿略高,几周后恢复正常。
血清酪氨酸(Tyr)『标本采集』采空腹血2毫升,抗凝。
『正常值范围』9―29mg/L或0.6―1.5mg/dl。
『临床意义』1、增高:遗传性高酪氨酸血症。
2、降低:苯丙酮尿症。
血液非蛋白氮(NPN)『标本采集』采空腹2毫升,抗凝。
『正常值范围』全血14.3―25mmol/L或20.0―35.0mg/dl。
血浆:14.3―21.4mmol/L或20.0―35.0mg/dl。
换算成SI单位的因素:0.714。
『临床意义』1、增高:肾产前性(脱水,心功能不全,腹水,休克),肾性(各种肾病),肾后性(尿阻塞等疾病),蛋白分解过多(消化道出血,严重烧伤)。
2、降低:重症肝病。
血液还原型谷胱甘肽(GSH)『标本采集』采空腹血2ml,抗凝。
『正常值范围』280―380mg/L(全血),307mg/L(平均红细胞)。
『临床意义』1、增高:甘氨酸中毒。
2、降低:有机磷中毒。
血液肌酸(Cre)『标本采集』采血2毫升,抗凝或不抗凝,勿溶血。
『正常值范围』血清或血浆:男13―38umol/L或0.17―0.5mg/dl,女26.7―71umol/L或0.35―0.95mg/dl。
『临床意义』增高:严重肌肉损伤,挤压综合症,皮肌炎。
进行性肌营养不良,肾脏重度损伤。
血清尿酸(UA)
一、检测原理
血清中的尿酸在尿酸酶的催化下和H2O与O2反应生成尿囊素、H2O2和CO2,其中H2O2与4-氨基安替比林和ESPAS 在过氧化物酶的催化下生成红色化合物醌亚胺。
由于醌亚胺在波长545nm处有吸收峰,所以在一定底物浓度范围内,545nm处吸光度变化值与样品中尿酸的含量成正比。
二、参考区间
155—428umol/L
三、临床意义
1、血尿酸增高:
①急慢性肾炎血尿酸明显增高,且较BUN、Cr更显著,出现更早。
其他肾病晚期,如肾结核、肾盂肾炎、肾积水等血尿酸亦增高。
因肾外因素影响较大,故其升高程度并不与肾功能受损程度成正比。
②痛风,由核蛋白及嘌呤代谢紊乱所致。
③白血病,多发性骨髓瘤,真性红细胞增多症等因核酸代谢分解增加使血尿酸增加。
④其他:氯仿、四氯化碳、铅中毒、子痫、妊娠反应、剧烈运动等。
2、血尿酸减少:
较少见,见于恶性贫血、乳糜泻等。
血清尿酸UA测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。
2 实验原理尿酸酶分解尿酸生成尿囊素和过氧化氢。
尿酸+2H2O+O2尿酸酶尿囊素+ CO2 + H2O2在过氧化物酶存在的情况下,4-氨基比林由过氧化氢氧化生成醌二亚胺。
2H2O2+H++TOOSa+4-氨基比林过氧化物酶醌二亚胺+4 H2O醌二亚胺的颜色深浅与尿酸浓度成正比,可通过测定吸光度的上升来获得。
3 标本:3.1 病人准备:使用新鲜血清,不使用血浆.在采集血液后2h 分离血清.3.2 类型:血清,肝素或EDTA血浆,尿液。
3.3 标本存放:血清、血浆的稳定性:20~25℃保存可稳定3天;4~8℃保存可稳定7天;-20℃保存可稳定6个月。
对尿液用蒸馏水作1:10稀释后检测,结果乘11后报告。
3.4 标本运输:常温条件下保存运输。
3.5 标本拒收标准:细菌污染的标本。
4 实验材料4.1 试剂:上海罗氏诊断产品有限公司UA试剂盒,国械注进20142405056YZB/GER 5724-2014)4.1.1 试剂组成R 1 磷酸盐缓冲液:0.05 mol/L,pH 7.8;TOOS:7 mmol/L;脂肪醇聚乙二醇醚:4.8%;抗坏血酸盐氧化酶(EC 1.10.3.3;胡瓜)≥83.5 μkat/L(25℃)R 2 磷酸盐缓冲液:0.1 mol/L,pH 7.8;亚铁氰化钾(Ⅱ):0.3 mmol/L;4-氨基比林≥3mmol/L;尿酸酶(EC1.7.3.3;原生节杆菌)≥83.4 μkat/L(25℃);过氧化物酶(POD)(EC 1.11.1.7;辣根)≥50μkat/L(25℃)4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存:2-8℃下的保存期限:见试剂标签上的有效期。
机上稳定期: 4周4.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。
序号-项目-中文名-临床意义
1,Urea 尿素
在肾损伤中后期升高,对肾功能衰竭,尤其是尿毒症诊断有特殊价值,并可判断病情预后
2,Crea 肌酐
血肌酐浓度的变化反映肾小球滤过能力
3,UA 尿酸
急性或慢性肾小球肾炎,血清尿酸可明显增高,较UREA、Crea出现早血液UA、尿液UA同时升高,提示高尿酸血症
4,Cys C 胱抑素C
血清Cys C测肾小球,尿Cys C肾小管重吸收分解功能受损
5,mAlb 尿微量白蛋白
尿mALB是肾小球损伤标志物,尿蛋白与尿肌酐比值的测定,能够可靠的反映24小时尿蛋白量
6,β2-MG β2-微球蛋白
血β2-MG反映肾小球受损情况,尿β2-MG反映肾小管受损情况
7,CSF/UTP 脑脊液/尿液总蛋白
尿总蛋白含量升高常见于肾小球渗透性过高;脑脊液蛋白升高常见于血脑屏障通透性增高或鞘内的免疫球蛋白分泌增加
8,NGAL 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白
急性肾损伤肾小管损伤早期标志物
9,α1-MG α1-微球蛋白
血α1-MG反映肾小球受损情况,尿β2-MG反映肾小管受损情况,在酸性环境中稳定
10,RBP 视黄醇结合蛋白
尿RBP评估肾小管损伤程度,评估CKD中肾间质纤维化的程度
11,NAG N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶
肾小管损伤,可见尿NAG升高,辅助鉴别上下尿路感染。