×100%
细胞融合(cell fusion)
细胞融合基本过程
1. 去除细胞壁以获得大量的原生质体
2. 诱导细胞融合形成杂种细胞
细胞相互靠近
形成细胞桥 – 最关键的一步
胞质渗透 细胞核融合
3. 筛选,培养,促进细胞分裂,分化,
4. 从细胞团,愈伤组织到最后成株
细胞融合(cell fusion)
动物细胞融合基本过程
硫由酸淋铵 巴沉器淀官法、组织–、细中胞共枢同构免成疫。 器官:骨髓、胸腺、(鸟、禽)法氏囊
电融合诱导法原理示意图
细胞融合(cell fusion)
电融合优点: 融合效率高,可达50~80% 产生杂交细胞的频率高,是PEG法的100倍。
操作简便、稳定,但需设备。 对细胞无毒害作用。
可在显微镜下观察操作。
细胞融合(cell fusion)
融合率
融合率=
融合细胞的细胞核总数
视野内全部细胞的细胞核总数
细胞融合(cell fusion)
融合过程:
1. 病毒颗粒附着细胞膜上起搭桥作用,使细胞粘着成堆,在4℃冰
浴中细胞紧密靠近,但不发生融合。 2. 37 ℃温浴后,粘结部位的细胞膜破坏,形成通道,细胞质流通、融汇。
3. 病毒颗粒进入细胞质,此时两个细胞合并、变圆,完成融合,全过程 约15~30分钟。
膜融合过程大体概括为两大阶段:首先是两膜脂相互聚合和 接触,其次是接触部位的局部脱水,形成不稳定中间结构,使 膜脂发生混合而最终导致膜的融合。
显微镜下细胞融合 过程
细胞融合(cell fusion)
细胞融合(cell fusion)
初步分析 可能是由于带有大量负电荷的PEG分子和原生质体表面的负电荷