分子技术在食品乳酸菌分类和鉴定中的应用
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食品中乳酸菌的分离鉴定及功能研究近年来,随着人们健康意识的提高,对于食品中乳酸菌的分离鉴定及功能的研究逐渐受到关注。
乳酸菌是一类广泛存在于食品中的有益菌群,具有许多对人体有益的功效,其鉴定与功能研究对于食品质量的提升和人类健康至关重要。
首先,乳酸菌的分离鉴定是研究乳酸菌功能的基础。
在食品中分离鉴定乳酸菌,可以帮助我们了解不同种类、不同来源食品中乳酸菌的种类和数量。
常见的分离鉴定方法包括传统的培养分离方法、分子生物学方法和基因测序技术等。
其中,传统的培养分离方法是最常用的一种方法。
通过在不同的培养基上进行培养,分析菌落形态、生理和生化特性,可以初步鉴定出乳酸菌的种类。
而分子生物学方法则可通过引物对乳酸菌特异基因进行扩增和检测,进一步确定其种类。
基因测序技术则可以更加准确地鉴定不同乳酸菌的种类和亲缘关系,为进一步深入研究乳酸菌功能奠定基础。
其次,乳酸菌的功能研究主要包括保健、抗菌和抗氧化等方面。
乳酸菌具有胃肠道保健功能,可以维护肠道的健康平衡,促进食物的消化吸收,降低胃肠道疾病的风险。
此外,乳酸菌还具有抗菌作用,特别是对肠道中的有害菌起到抑制作用,有利于维持肠道菌群的稳定。
同时,乳酸菌还具有一定的抗氧化功能,可以清除自由基、减少氧化应激,保护人体细胞免受氧化损伤。
乳酸菌的功能主要通过其代谢产物来实现。
乳酸菌代谢产物包括乳酸、抗菌物质、挥发性化合物和细胞外多糖等。
其中,乳酸是乳酸菌最主要的代谢产物之一,可以维持肠道的酸碱平衡,抑制有害菌的生长。
抗菌物质则可以直接杀灭或抑制有害菌的生长。
挥发性化合物则赋予乳酸菌独特的风味和香气,为食品增色不少。
细胞外多糖则具有一定的黏附能力,有助于乳酸菌在肠道中生存和繁殖。
针对乳酸菌的功能研究还包括乳酸菌的应用。
乳酸菌可以被广泛应用于食品工业,通过发酵食品,不仅可以制造出更多种类的美味食品,还可以增加食品的营养价值和保质期。
此外,乳酸菌在医学领域也有着广泛的应用前景。
研究表明,乳酸菌在预防和治疗肠道疾病、免疫调节、降低胆固醇、抑制肿瘤等方面具有潜在疗效。
食品中乳酸细菌的筛选和鉴定食品是人类生活中不可或缺的一部分,而乳酸细菌则是食品产业中的重要组成部分。
乳酸细菌在食品加工过程中起着关键的作用,例如发酵乳制品、面包、啤酒等。
因此,筛选和鉴定食品中的乳酸细菌对于食品安全和质量的保障具有重要意义。
首先,筛选食品中的乳酸细菌应该从源头开始。
当我们选择原料时,应注意选择新鲜且有机的食材。
乳酸细菌通常存在于新鲜的奶制品、蔬菜和水果中。
因此,在生产过程中应该选择高质量的原料,以确保食品中含有丰富的乳酸细菌。
其次,对食品中的乳酸细菌进行鉴定也是非常重要的。
目前常用的方法有传统培养方法和分子生物学方法。
传统培养方法是通过将食品样品接种到乳酸菌富集培养基中,然后根据菌落形态和生理特性进行鉴定。
虽然该方法简单易行,但对于少数难以培养的乳酸细菌则无法准确鉴定。
分子生物学方法是近年来迅速发展的一种鉴定乳酸细菌的新方法。
这种方法基于对乳酸细菌基因组的分析,通过PCR、蛋白质电泳等技术手段来确定乳酸菌的种类和数量。
分子生物学方法具有快速、准确和高通量的特点,可以帮助我们更好地了解食品中乳酸细菌的情况。
此外,筛选合适的乳酸菌应具备以下特点。
首先,应具备较强的耐受性,能够在食品加工过程中存活和繁殖。
其次,应具备较好的产酸能力,确保食品发酵的质量和风味。
最后,应能够对食品中的有害细菌起到一定的抑制作用,从而保证食品的安全性。
乳酸细菌在食品发酵过程中起到的作用不仅仅是改善风味,还具有多种益处。
首先,乳酸细菌能够制造出多种有益物质,例如乳酸、对乳酸菌独有的多种抗菌物质等。
这些物质具有抗菌、抗氧化和免疫调节等作用,对人体健康有益。
其次,乳酸细菌可以帮助消化,改善肠道菌群的平衡,增加人体对营养的吸收。
此外,乳酸细菌还可以帮助降低肠道内有害菌的数量,提高人体的免疫力。
然而,在乳酸细菌的选择过程中也存在一些问题和挑战。
首先,不同种类的食品需要不同的菌株,因此我们需要根据具体产品的特点来选择适合的乳酸菌。
分子生物学技术在食品微生物检验中的应用探析近年来,食品安全问题成为社会关注的热点,食品微生物检验成为保障食品安全质量的重要手段之一。
传统的微生物检验方法存在一些缺点,如操作繁琐、时间长、灵敏度低等。
而分子生物学技术的应用使得食品微生物检验更加快速、准确、灵敏,成为食品安全监测的重要手段之一。
PCR技术是一种重要的分子生物学技术,可以对食品中的微生物进行快速鉴定。
PCR技术利用核酸特异性引物,通过酶切扩增的原理,能够将微生物的特定DNA序列放大,从而快速鉴定食品样品中是否存在某种微生物。
利用PCR技术,可以快速鉴定出食品中的致病菌,如大肠杆菌、沙门氏菌等。
PCR技术还可以快速鉴定出食品中的转基因成分和病毒等。
测序技术是分子生物学技术中的重要手段之一,可以对食品中微生物的基因组进行全面解析。
传统的微生物鉴定方法往往只能鉴定出微生物的种类,而无法了解其详细的基因信息。
而测序技术可以对微生物的基因组进行全面测序,从而了解微生物的遗传特性和潜在致病基因。
利用测序技术,可以对食品样品中的微生物进行全面的基因分析,从而更好地了解食品中微生物的种类和数量,为食品安全监测提供了更全面的信息。
免疫学技术也是食品微生物检验中的重要手段之一。
传统的微生物鉴定方法中,往往利用抗原抗体反应来鉴定微生物的种类和数量。
而免疫学技术可以利用抗体特异性识别微生物的抗原,从而实现对微生物的快速鉴定。
免疫学技术可以将微生物的抗原与特定抗体结合,通过检测抗原抗体结合反应来确定微生物的种类和数量,从而快速、准确地鉴定食品中的微生物。
分子生物学技术在食品微生物检验中的应用已经取得了很多成果。
从快速鉴定食品中的致病菌到全面解析微生物的基因组,从利用抗原抗体反应快速鉴定微生物的种类和数量,分子生物学技术为食品安全监测提供了更快速、准确、灵敏的方法。
还需要进一步完善和优化这些技术的操作流程和准确性,以提高食品安全检测的效率和准确性。
乳酸菌的分子鉴定及其发酵生产研究乳酸菌是一类重要的微生物,它们可以对人体健康和食品质量有着积极的影响。
因此,乳酸菌的分子鉴定和发酵生产已成为当前生物技术领域的热点研究方向。
一、乳酸菌的分子鉴定1. 基于16S rRNA序列的分子鉴定16S rRNA序列是一种分子生物学技术,可用于确定细菌的分类位置。
通过对乳酸菌的16S rRNA序列进行分析,可以对其进行分子鉴定。
例如,可以通过利用PCR技术来扩增16S rRNA序列,并进行DNA测序,然后使用一些专门的软件来比对数据库中已有的乳酸菌序列,以此确定乳酸菌所属的种属和亚种属。
2. 基于质谱谱图的分子鉴定质谱谱图技术可以分析乳酸菌代谢产物的质谱图谱,并根据代谢物的组成、分子量和分子结构来鉴定乳酸菌的种属和亚种属。
例如,可以通过利用质谱仪来对乳酸菌发酵代谢产物的质谱谱图进行解析,然后将谱图与数据库进行比对,以此确定乳酸菌所属的种属和亚种属。
二、乳酸菌的发酵生产乳酸菌的发酵生产是一种很常见的生产方式。
下面我们将从乳酸菌的筛选及培养、选择发酵介质以及乳酸菌株种类等方面来阐述乳酸菌的发酵生产。
1. 乳酸菌的筛选及培养乳酸菌的筛选通常要经过多个步骤。
首先,需要从环境中分离出乳酸菌,然后进行预筛选,以去除不适宜生产的菌株。
接着,根据具体需求来确定乳酸菌的最终筛选条件,并进行强筛。
例如,可以通过对菌株进行分子鉴定,并对其菌株活力、乳酸生产能力以及耐受性等方面进行细致研究,以此筛选出适合生产的菌株。
2. 选择发酵介质乳酸菌的发酵过程需要选择适当的发酵介质。
通常使用的发酵介质包括糖类、蛋白质、乳类及酵母提取物等。
具体来说,糖类可以提供乳酸菌的生长和代谢所需的碳源,乳类则可以作为乳酸菌的营养来源。
对于蛋白质,可以促进乳酸菌生长并提高其产乳酸的能力。
3. 乳酸菌株种类乳酸菌株种类的选择对乳酸发酵生产有着至关重要的影响。
目前,市场上常见的乳酸菌株有Lactobacillus、Bifidobacterium和Streptococcus等。
一、概述食品安全一直是人们关注的重点问题,而微生物污染是导致食品安全问题的重要原因之一。
食品微生物检测技术的发展对于保障食品安全具有重要意义。
分子生物学方法由于其高度特异性和灵敏度,在食品微生物检测中得到了广泛的应用。
本文将就分子生物学方法在食品微生物检测中的应用进行探讨,旨在为食品安全领域的研究和实践提供参考。
二、分子生物学方法在食品微生物检测中的应用1. PCR技术2. 实时荧光PCR技术3. 微阵列芯片技术4. 基因测序技术5. 其他新兴分子生物学方法三、分子生物学方法在食品微生物检测中的优势与挑战1. 优势1.1 高度特异性1.2 高度灵敏度1.3 快速性1.4 可定量性2. 挑战2.1 样品前处理的标准化2.2 数据分析的标准化2.3 成本控制四、分子生物学方法在特定食品微生物检测中的应用案例1. 肉制品中致病菌的检测2. 奶制品中乳酸菌的检测3. 水产品中霉菌的检测4. 蔬果制品中寄生虫的检测5. 其他食品中常见微生物污染的检测五、分子生物学方法在食品微生物检测中的未来发展1. 新技术的不断涌现2. 多重技术的融合应用3. 检测标准的国际统一4. 自动化、智能化的检测设备的发展六、结论分子生物学方法在食品微生物检测中的应用已经取得了显著的成果,为食品安全领域的进步作出了重要贡献。
随着技术的不断进步和发展,相信分子生物学方法在食品微生物检测中将会发挥越来越重要的作用,为保障人们的饮食安全提供更为可靠的技术支持。
希望该领域的科研人员和实践者能够不断探索创新,共同致力于食品安全事业的发展。
七、分子生物学方法在食品微生物检测中的优势与挑战分子生物学方法在食品微生物检测中具有诸多优势,首先是高度的特异性。
传统的微生物检测方法可能对多种微生物都具有一定的反应,而分子生物学方法可以设计特异性的引物或探针,只对目标微生物进行检测,避免了其他微生物的干扰,提高了检测的准确性。
其次是高度的灵敏度,分子生物学方法可以检测到微生物的极低浓度,可以在微生物含量较低的食品样品中提高检测的准确性和可靠性。
PCR技术在乳酸菌分类鉴定中的应用王庭柱,高学军,杨振宇东北农业大学教育部乳品科学重点实验室(150030)E-mail:wangtingzhu1980@摘要:近年来,随着分子生物学和生物信息学的迅速发展,特别是作为生物技术里程碑的PCR技术以及核酸测序和电泳技术的不断改进与完善,产生了许多新的分类学方法,如RAPD、PCR-RFLP、T-RFLP、ARDRA、PCR-SSCP、PCR-DGGE、PCR-TGGE、AFLP、REP-PCR、S-PCR、LCR、LH-PCR、SBCS以及小卫星序列多态性和序列同源性分析等。
本文即论述了这些技术在乳酸菌分类鉴定中的应用及其优势和局限性。
关键词:乳酸菌,PCR,分类,鉴定,分子生物学1. 引言乳酸菌(lactic acid bacteria, LAB)是一大类缺乏细胞色素、糖代谢主要以乳酸为终产物的革兰氏阳性非芽孢细菌,其过氧化氢酶反应为阴性、耐氧耐酸、营养要求复杂并且严格发酵。
LAB这个名称就细菌分类学而言实属一个非正式、非规范的名称。
目前从自然界中已发现的这类细菌在分类学上至少可划分为23个属,涉及到的有关菌种则更多,其代表性的菌属有乳杆菌属、乳球菌属、链球菌属、双歧杆菌属、肠球菌属、明串珠菌属、气球菌属、肉杆菌属、酒球菌属、足球菌属、四体球菌属和漫游球菌属等[1,2]。
传统的LAB鉴定方法主要依赖于表型分析,包括形态学观察、生长需要及特性、发酵图谱、细胞壁蛋白分析、血清学以及脂肪酸甲基酯分析等,其中有些技术已被证明适用于某些LAB的鉴定,但是也普遍意识到表型分析的一些缺点,如重现率及辨识能力低、相似的表型特性并不等同于相似的或者关系密切的基因型[3]。
表型试验可能的固有问题是,不是每一给定种内的所有菌株都有一个共同的性状,而且即使是同一菌株也可能呈现出一定的生化变异性。
此外,实验操作的一点改变也可能产生错误的结果。
因此基于表型试验的常规技术并不能对菌株做出明确的鉴定[4]。
乳酸细菌分类鉴定及实验方法乳酸细菌是一类可以发酵果糖或蔗糖产生乳酸的革兰氏阳性细菌。
它们广泛存在于自然界中的土壤、水体、动物肠道、植物表面等环境中,并且在食品加工、乳制品、膳食补充剂等领域具有重要的应用价值。
分类鉴定乳酸细菌的方法主要包括传统分离鉴定和分子生物学方法,而实验方法主要包括培养、生理生化鉴定和分子鉴定等。
1.传统分离鉴定传统分离鉴定是通过培养、生理生化特性的观察和细菌形态学特征的分析来进行分类鉴定的方法。
一般的步骤包括:1.2分离:采用适当的培养基,如MRS培养基等,在适当条件下进行分离培养。
可以采用不同的稀释度和培养温度来增加分离率和适应性。
1.3纯化:从培养出的菌落中选择纯净的菌落进行纯化。
1.4形态学观察:观察细菌的形态学特征,如菌落形态、细胞形态、孢子形态等。
1.5生理生化特性鉴定:通过生理生化实验,如氧需氧性、产气、产酸、碱性产蛋白酶等特性的鉴定来进一步确定细菌的分类。
1.6比较分析:将鉴定结果与已知的乳酸菌进行比较分析,以确定菌株的分类。
2.分子生物学方法分子生物学方法是一种快速、准确的分类鉴定方法,可以通过检测细菌的DNA序列来进行鉴定。
常用的分子生物学方法包括PCR、16SrRNA测序和随机扩增多态性DNA(RAPD)等。
2.1PCR:PCR是通过扩增细菌DNA的特定区域来进行鉴定的方法。
首先,从培养的细菌中提取DNA。
然后,使用特定引物扩增目标区域的DNA,并通过凝胶电泳分析PCR产物的大小。
比较PCR产物的片段大小和带型模式,可以确定乳酸菌的分类。
2.216SrRNA测序:细菌的16SrRNA序列是一个高度保守的基因序列,可以用来进行细菌分类鉴定。
通过提取DNA,扩增16SrRNA基因片段,并进行测序,然后将测序结果与已知的乳酸菌序列比对,可以确定细菌的分类。
2.3RAPD:RAPD是一种无须事先了解目标序列的技术,它利用随机引物扩增细菌DNA的多态位点,通过凝胶电泳分析不同样品间的DNA带型模式,来进行菌株分类。
现代分子生物学技术在食品和药品微生物检测中的应用随着社会的发展和人们对食品和药品质量安全的要求越来越高,微生物检测成为了食品和药品生产过程中非常重要的一环。
微生物污染不仅会影响产品的质量和口感,还可能对人体健康造成危害。
如何有效快速地检测和控制微生物污染成为了食品和药品生产过程中的重要问题。
而现代分子生物学技术的应用,为食品和药品微生物检测提供了更加准确和快速的解决方案。
一、PCR技术在微生物检测中的应用聚合酶链式反应(PCR)是一种重要的分子生物学技术,通过PCR技术可以快速复制DNA 分子,并进行定量分析。
在微生物检测中,PCR技术能够识别和检测微生物的DNA或RNA,从而进行微生物的鉴定和定量分析。
通过对样本进行提取DNA或RNA,并选择特定的引物进行PCR,可以快速准确地确定样本中是否存在目标细菌、真菌或病毒。
PCR技术还可以进行多重PCR,同时检测多种微生物的存在,提高检测的灵敏度和准确度。
二、实时荧光定量PCR技术在微生物检测中的应用实时荧光定量PCR技术(qPCR)是PCR技术的一种改进,通过引入荧光探针实现对PCR 反应过程的实时监测。
qPCR技术具有高灵敏度、高特异性和快速反应的特点,可以快速准确地检测样品中微生物的存在和数量。
在食品和药品微生物检测中,qPCR技术可以用于快速检测样品中的致病菌、变质菌和其他微生物污染,为食品和药品安全提供保障。
三、NGS技术在微生物检测中的应用新一代测序技术(NGS)是近年来发展起来的一种高通量测序技术,具有高通量、高速度和高灵敏度的特点。
在微生物检测中,NGS技术可以快速高效地对样品中的微生物进行全面测序分析,识别和鉴定样品中所有微生物的种类和数量。
通过NGS技术的应用,可以更加全面地了解样品中的微生物组成,为食品和药品生产提供更加全面的微生物安全控制。
食品中乳酸菌的种类鉴定与筛选导语:乳酸菌作为一类益生菌,对人体健康有着重要作用。
在食品行业中,乳酸菌也被广泛应用于酸奶、乳酸发酵食品等产品的制作中。
但是,不同种类的乳酸菌对人体的功效和食品质量的影响也存在差异。
因此,食品中乳酸菌的种类鉴定与筛选成为了食品工业中一项重要的研究内容。
一、乳酸菌的基本特征乳酸菌是一类革兰氏阳性、非芽孢形成的厌氧杆菌。
它具有利用碳源的多样性,能够在较宽的温度和pH范围内生长,敏感于多种抗生素,但对酸和胆盐具有很高的耐受性。
乳酸菌的独特特征在于其产酸能力和产酶能力,这对于发酵乳制品中的酸度调节、食品品质和保质期具有重要影响。
二、食品中乳酸菌的种类食品中常见的乳酸菌主要包括嗜酸乳杆菌、屎肠球菌、乳酸杆菌等。
这些乳酸菌在食品发酵过程中发挥着重要作用。
例如,嗜酸乳杆菌能够将乳糖转化为乳酸,起到酸度调节和抑制有害菌生长的作用;屎肠球菌则具有较强的抗菌活性,能够抑制肠道有害菌的生长;乳酸杆菌则被广泛应用于酸奶等乳制品的制作中,具有促进消化、增强免疫力等功效。
三、食品中乳酸菌的种类鉴定方法1.传统方法传统上,食品中乳酸菌的种类鉴定主要依靠生理和生化特性,包括菌株的外形特征、生长条件、产酸能力、抗菌活性等。
然而,这种方法存在着一定的主观性和局限性,无法准确鉴定不同种类的乳酸菌。
2.分子生物学方法近年来,随着分子生物学技术的发展,食品中乳酸菌的种类鉴定方法得到了极大的改进。
例如,通过PCR扩增和序列分析特定的基因片段(如16S rRNA)可以确定乳酸菌的亲缘关系和种类。
这种方法准确度高、重现性好,成为当前乳酸菌鉴定的主要手段之一。
四、食品中乳酸菌的筛选与应用1.筛选方法食品中乳酸菌的筛选一般基于其酸度产生和抗菌活性。
通过培养基和条件的优化,可以获得具有较高产酸能力和抗菌活性的乳酸菌菌株。
同时,利用基因工程技术也可以对乳酸菌进行基因编辑,增强其产酸能力和抗菌活性。
2.应用领域食品中乳酸菌的筛选和应用广泛存在于乳制品、调味品、肉制品等食品行业中。
《乳酸细菌分类鉴定及实验方法》一、引言乳酸细菌(Lactobacillus)是一类常见的益生菌,它们能帮助消化系统聪明,同时也可以通过促进有益的肠道微生物的生长来改善肠道健康。
因此,乳酸细菌的分类和鉴定对于研究乳酸细菌的功能和应用具有重要意义。
本文将首先介绍乳酸细菌的分类和鉴定,然后介绍乳酸细菌的实验方法。
二、乳酸细菌的分类和鉴定1. 乳酸细菌的分类乳酸细菌是属于细菌科(Bacteroidetes)的一类细菌。
它们可以分为三大类:乳酸菌(Lactobacillus)、乳酸乳球菌(Streptococcus)和乳酸变形杆菌(Bifidobacterium)。
每一类乳酸菌都有不同的特征,如形态、生长习性和生理功能。
2. 乳酸细菌的鉴定乳酸细菌的鉴定可以分成宏观鉴定和微观鉴定两种。
宏观鉴定可以从外观上分辨不同种类的乳酸细菌,其中包括形态、大小、色泽和膜结构等。
微观鉴定则是从细节上来识别乳酸细菌的特征,包括菌体的形态、菌落的形状、菌落的大小和染色等。
三、乳酸细菌的实验方法1. 样品采集乳酸细菌的实验方法首先要从样品的采集开始。
乳酸细菌的样品可以从食品、生物体表面、自然环境或肠道等环境中获取。
采集的样品应当及时保存,以防乳酸细菌的生长和繁殖。
2. 培养基制备乳酸细菌的培养基是乳酸细菌实验的基础,它可以保证乳酸细菌的生长和繁殖。
常用的乳酸细菌培养基有MRS培养基、MRS-glucose培养基和MRS-sucrose培养基等。
这些培养基中的成分可以满足乳酸细菌的需求,从而促进乳酸细菌的繁殖和活力。
3. 培养和筛选采集到的样品和制备好的培养基可以混合在一起,然后置于培养室中,根据规定的条件进行培养。
一旦乳酸细菌在培养基中获得了生长和繁殖的机会,就可以开始筛选。
筛选的过程可以通过诸如生长观察、生理鉴定和生化鉴定等方法来进行。
4. 分子鉴定最后,分子鉴定是乳酸细菌分类鉴定的最关键步骤。
分子鉴定可以通过PCR技术、限制性片段长度多态性分析(RFLP)和16S rRNA基因测序等方法准确地识别乳酸细菌的种类。
食品中乳酸菌的分离鉴定与应用研究随着人们对健康的关注程度不断提升,食品安全成为人们日常生活中不可忽视的问题之一。
乳酸菌作为一类有益微生物,被广泛应用于食品工业中。
然而,食品中乳酸菌的准确鉴定与合理应用仍然是当前科学研究关注的热点。
本文探讨了食品中乳酸菌的分离鉴定方法以及其在食品工业中的应用前景,旨在为食品科学领域的研究提供参考。
在食品加工过程中,乳酸菌是一类常见的菌群,可以发酵产生乳酸,给食品赋予了特殊的风味和营养价值。
为了准确鉴定食品中的乳酸菌,科学家们普遍采用了分离纯化的方法。
首先,从食品样品中分离出潜在的乳酸菌,然后通过多重培养基和生理生化特性进行初步筛选。
接下来,通过形态学观察和生理生化试验进一步确定乳酸菌的种属分类。
最后,通过分子生物学技术如PCR和DNA测序来确定乳酸菌的亲缘关系。
这些方法的综合应用可以有效地分离鉴定食品中的乳酸菌种类。
乳酸菌的应用广泛,尤其在食品工业中展现出了巨大的潜力。
首先,乳酸菌可以用于酸奶、酸乳等乳制品的生产。
其产生的乳酸不仅可以增加产品的保存期限,还能提高食品的口感,增加食品的营养价值。
其次,乳酸菌还可以应用于面包、豆腐等发酵类食品的生产。
乳酸菌发酵能够使得食品在产生特殊风味的同时,还能使食品中的抗营养因子降低,增加人体对营养物质的吸收。
此外,乳酸菌还可以应用于腌制食品的生产,通过发酵降低盐分含量,并使食品更具咸鲜味。
乳酸菌的种类繁多,其应用潜力远未被完全挖掘。
尽管食品中乳酸菌的应用前景广阔,但是乳酸菌菌株的选择和培养条件仍然是当前研究中的难题。
一方面,不同种类的乳酸菌育种有其特殊性,如何从大量的微生物中筛选出理想的乳酸菌成为了困扰科学家的问题。
另一方面,乳酸菌的培养条件也是研究的难点之一。
乳酸菌对酸碱度、温度、营养物质等环境因素都有一定要求,因此科学家们需要不断努力来寻找适宜的培养条件。
综上所述,食品中乳酸菌的分离鉴定与应用研究是当前食品科学研究的重要方向之一。
ScienceandTechnologyofFoodIndustry废鞠疑硪竞迸晨段宇珩。
谈重芳,王雁萍,秦广雍,霍裕平(郑州大学物理工程学院离子束生物工程省重点实验室,河南郑州450052)摘要:乳酸茵是食品发酵工业中一类重要的茵种,准确快速的乳酸茵分类鉴定是十分必要的。
本文对目前使用的乳酸茵表型特征鉴定和基因型特征鉴定乳酸茵方法及各种方法的优缺点进行了综述。
关t词:乳酸茵,食品,鉴定Abstract:Lacticacidbacteria(LAB)iSoneofthemostimportantgroupsofbacteriatothefoodfermentativeindustry.ThecorrectspeciesidentificationofLABiSveryimportant.ThispaperprovidesanoverviewofphenotypicandgenotypictechniquesthatarecurrentlyusedforidentificationOfLAB.andthemeritandshortcomingofalIkindsofmethodsaredescribed.Keywords:lacticacidbacteria(LAB);food;identification中图分类号:TS252.1文献标识码:A文章编号:1002—0306(2007)02—0242—03乳酸菌是一类革兰氏阳性、利用可发酵糖产生大量乳酸的细菌的通称。
乳酸菌是广义范畴的概念,是非正式、非规范的细菌分类学名称【1】。
乳酸菌广泛地存在于自然界、动植物体、乳制品和发酵食品中,且大多数为非致病菌,属于有益微生物,是人体正常菌群。
人们在生产和应用中要利用乳酸菌,需要了解它们的生物学特性,因此对乳酸菌进行快速、可靠的分类和鉴定在微生物学和食品科学的研究中是必需的。
在乳酸菌分类鉴定方面,如以形态学、生理生化和化学特征等表型特征为主要指标,则可能由于乳酸菌形态多样,且易受培养条件的影响,加之生理生化特征极其相似,很难对乳酸菌相近种属做出正确鉴定,在相同种属不同菌株的鉴定方面更是非常困难。
现代分子生物学技术在食品和药品微生物检测中的应用食品和药品微生物检测是确保食品和药品的安全和质量的重要工作。
传统的微生物检测方法包括培养和生化鉴定,但这些方法通常需要长时间才能获得结果,并且可能会漏检一些微生物。
现代分子生物学技术的出现,为食品和药品微生物检测提供了新的解决方案。
下面将介绍几种常用的分子生物学技术在食品和药品微生物检测中的应用。
一种常用的分子生物学技术是聚合酶链反应(PCR)。
PCR是一种可以从一段DNA序列中扩增出大量DNA片段的技术。
在食品和药品微生物检测中,PCR可以用于检测特定微生物的DNA序列。
当食品或药品受到霉菌的污染时,可以使用PCR来检测霉菌的DNA序列,从而确定产品的安全性。
PCR具有高灵敏度和特异性,可以在短时间内获得结果,因此被广泛应用于食品和药品微生物检测中。
另一种常用的分子生物学技术是DNA测序。
DNA测序是一种确定DNA序列的技术,可以用于分析微生物的基因组信息。
在食品和药品微生物检测中,DNA测序可以用于确定微生物的种属和菌株信息。
在食品中发现了一种未知的微生物污染,可以使用DNA测序技术对其进行分析,从而了解其分类和特征。
DNA测序技术的出现,使得对微生物的鉴定更加准确和快速。
除了PCR和DNA测序之外,还有一些其他的分子生物学技术在食品和药品微生物检测中得到了应用。
引物探针技术可以用于检测特定微生物的DNA序列,并且可以与荧光标记结合,从而实现实时监测。
基于基因组的方法,如整个基因组测序和比较基因组学分析,也可以用于分析微生物在食品和药品中的分布和演化。
这些分子生物学技术的应用,不仅提高了食品和药品微生物检测的准确性和效率,也为食品和药品安全提供了更为可靠的保障。
食品中乳酸菌的分离与鉴定乳酸菌是一类重要的微生物,在食品加工和保质过程中起着关键作用。
乳酸菌具有产生乳酸的能力,能够抑制有害菌的生长,提高食品的质量和安全性。
因此,乳酸菌的分离与鉴定对于食品工业具有重要意义。
乳酸菌的分离方法多种多样,常用的有直接涂布法、稀释涂布法和差减分离法等。
其中,直接涂布法是最常用的方法之一。
直接涂布法是将食品样品均匀涂布于含有特定培养基的琼脂平板上,利用乳酸菌对特定培养基的选择性生长来分离乳酸菌。
稀释涂布法则是将食品样品稀释到一定程度后,涂布于琼脂平板上进行分离。
差减分离法是相对于稀释涂布法的一种改进方法,通过两个不同培养基的对比,进一步筛选出乳酸菌。
乳酸菌的鉴定方法主要包括形态学观察、生理生化特性鉴定和分子生物学鉴定等。
形态学观察是最基本的鉴定手段之一,通过显微镜观察菌落和细胞形态特征,可以初步判断出乳酸菌的种类。
生理生化特性鉴定是将分离出的菌株在不同条件下进行相关实验,如气体产生、温度耐受性、胞外酶产生等,通过对比不同特性的表现,进一步鉴定乳酸菌的种类。
而分子生物学鉴定则能够更准确地确定乳酸菌的种属和亚属,如通过PCR扩增特定基因序列,利用DNA测序技术进行序列比对,从而鉴定乳酸菌的种类。
乳酸菌的分离与鉴定在实际食品加工中具有重要意义。
首先,通过分离和鉴定乳酸菌,可以确定食品中乳酸菌的种类和数量,进而判断食品是否存在质量和安全性问题。
其次,乳酸菌的鉴定有助于选择合适的培养条件,促进乳酸菌的生长和产酸过程,从而提高食品品质。
此外,乳酸菌的鉴定也有利于乳品行业中的产品研发和工艺改进,为创新和提高乳制品的营养和口感贡献力量。
然而,乳酸菌的分离与鉴定也面临一些挑战。
首先,食品中的乳酸菌种类繁多,分离出纯种菌株的难度较大。
其次,乳酸菌的生理生化特性相似,需要较为精确的实验手段和技术设备来进行鉴定。
此外,乳酸菌与其他微生物的相互作用也需要考虑,有时候必须结合其他鉴定方法才能得出准确结论。
食品工程在食品中乳酸菌的应用研究引言:食品安全和健康已经成为当今社会的热点话题。
乳酸菌作为一种有益于健康的微生物,在食品工程中的应用研究日益受到重视。
本文将探讨食品工程领域乳酸菌的应用研究,并分析其未来发展趋势。
一、乳酸菌的作用与特点乳酸菌是一类能够产生乳酸的革兰氏阳性菌,广泛存在于自然界。
它具有多种有益作用,如促进食品保鲜、提高食品品质、增强免疫力、改善肠道健康等。
乳酸菌对人体健康的积极影响已经被广泛研究和证实。
二、食品工程中乳酸菌的应用1. 食品发酵乳酸菌是食品发酵的重要微生物。
在乳品、面包等食品的制作过程中,乳酸菌能够分解食材中的糖类,产生乳酸并降低酸碱度,从而改善口感、延长食品保质期并增加食品营养价值。
2. 功能性食品随着人们对健康需求的提高,功能性食品的市场需求逐渐增加。
乳酸菌在功能性食品中的应用研究已经取得了一定的成果,如乳酸菌饮料、乳酸菌酸奶等。
通过将乳酸菌引入功能性食品中,能够改善人体免疫力、调节肠道菌群平衡等,达到保健效果。
3. 抗生素替代品近年来,抗生素滥用和耐药性问题引起了广泛关注。
乳酸菌作为一种天然的抗生素替代品,具有抗菌作用且不易产生耐药性。
食品工程领域可以研究乳酸菌制备抗菌食品添加剂,用于食品保鲜和安全方面。
3. 基因工程研究乳酸菌的基因工程研究在食品工程中也有一定的应用前景。
通过对乳酸菌基因的改造,可以提高其酸耐受能力、抗菌能力等。
这对提高食品工程中乳酸菌的应用效果具有重要意义。
未来发展趋势:1. 乳酸菌的精准培养为了更好地应用乳酸菌,食品工程领域需要加强乳酸菌的精准培养技术研究。
精准培养可以提高乳酸菌的活性和功能性,并更好地实现其应用效果。
2. 乳酸菌的复合应用乳酸菌与其他微生物的复合应用研究也是未来的发展方向。
通过将乳酸菌与益生菌、酵母菌等结合应用,可以产生更多种类的食品,并提供更多元的保健效果。
3. 基因工程在乳酸菌中的应用基因工程技术对于乳酸菌在食品工程中的应用也具有重要意义。
乳酸菌鉴定法在食品领域中的应用发表时间:2017-01-05T15:41:27.373Z 来源:《科技中国》2016年10期作者:罗家祥[导读] 本文主要针对乳酸菌鉴定方法在食品工业中的应用进行分析。
(湖南师大附中梅溪湖中学湖南长沙 410006)摘要:乳酸菌在动植物体、自然界、发酵食品、乳制品中有着广泛的存在,是有益微生物,在人们的生活与生产等领域,都需要应用乳酸菌。
对乳酸菌分类鉴别进行深入的研究有着一定的理论意义和现实意义。
本文主要针对乳酸菌鉴定方法在食品工业中的应用进行分析。
关键词:乳酸菌鉴定法;食品领域;应用0 引言乳酸菌是指一类能利用糖类发酵产生大量乳酸的革兰氏阳性细菌。
乳酸菌的种群相当庞大和繁杂,它广泛的存在于自然界当中。
在细菌中,乳酸菌属于有益而无害的一类,因此,在人们所食用的乳制品和发酵食品中随处可见。
为了能更好的利用乳酸菌,我们就必须进行有效的分类和鉴定去了解它们的在生物学上的特点。
然而,如果单从形态、生理生化和化学特性去判断的话,则很难对相近物种的乳酸菌做出正确的判断。
1 乳酸菌表型特征鉴定表型性状的鉴定主要依据的是细菌菌体和菌落的形态特征、生理生化反应和代谢产物等,是一种传统的鉴定方式。
由于表型特征鉴定是属于一种相对花费小的鉴定方式,因此,在当今它依然作为在食品工业和应用中的主要重要依据。
表型特征鉴定虽然是很有用的一种鉴别方法,但是一般只能鉴定的属的水平,因此具有一些局限性。
相比之下,利用SDS-PAGE分析乳酸菌的整个细胞的蛋白质提高了分类的可靠性和重复性,但是工作量较大。
除了以上的分类方法,如薄层层析法分析有机酸及脂肪酸甲酯等,它们成功的概率都比较低。
因此,用多种表型方法一起去鉴定乳酸菌,可以得到更加理想的分类结果。
表型法鉴定的优点是操作简单且不需要特殊的仪器,在不要求精确的情况下是有一定实用性的;它的缺点则是只能大范围的鉴定,得到的结果不准确,而且重复性差。
因此,必须利用基因型特征来做更精确的鉴定。
乳酸菌菌落特征与鉴定乳酸菌是一类广泛存在于自然界中的微生物,可以在发酵食品、发酵饲料等的制作过程中产生乳酸,具有重要的应用价值。
乳酸菌菌落的特征与鉴定有助于确定其种类、品质以及发酵能力等方面的信息。
以下将从乳酸菌的菌落形态特征、生理生化特征以及分子生物学特征等方面进行介绍。
乳酸菌的菌落形态特征对于鉴定其种类至关重要。
乳酸菌的菌落通常呈白色或乳白色,与一些其他菌落形态相比较容易区分。
乳酸菌的菌落一般较小,直径在1-2毫米左右,起初呈球形,逐渐变平展,并具有典型的菌落边缘光滑或呈不规则的边缘。
此外,乳酸菌的菌落表面光滑或凹凸不平,质地柔软,并且菌落会发生一定的变色现象,例如有的乳酸菌会在菌落周围形成红色环带。
乳酸菌的生理生化特征也是鉴定其种类的重要依据之一、乳酸菌具有好气性和厌氧性两种类型,好气性乳酸菌需要氧气才能生长,而厌氧性乳酸菌则可以在无氧条件下生长。
乳酸菌在形成乳酸的过程中不产生气体,与产气菌相比较容易区分。
此外,乳酸菌一般为革兰氏阳性菌,不产生芽孢。
乳酸菌的生理生化特征还包括是否产生过氧化氢酶、蛋白酶、氧化酶等酶类,以及对不同的碳源和氮源的利用情况等。
分子生物学技术的应用使得乳酸菌的鉴定更为准确和方便。
通过PCR技术可以扩增乳酸菌的16SrRNA基因序列,然后通过测序和序列分析来鉴定乳酸菌的种类。
16SrRNA序列是乳酸菌的系统分类研究中最常用的序列标记,其具有高度保守性和足够的区分度,有助于确定乳酸菌的种属和进一步的亚种分类。
此外,对于一些重要的产酸乳酸菌种类,还可以通过多重引物聚合酶链式反应技术来进行鉴定。
例如,通过对乳酸菌的ldh基因进行扩增和分析,可以鉴定产酸乳酸菌中嗜酸性的乳酸菌种类。
通过分子生物学的方法,乳酸菌的鉴定可以更加迅速和准确。
总之,乳酸菌的菌落特征、生理生化特征和分子生物学特征是鉴定乳酸菌的重要依据。
综合运用这些方法可以确定乳酸菌的种类、品质以及发酵能力等信息,对于乳酸菌的研究和应用具有重要意义。
分子技术在食品乳酸菌分类和鉴定中的应用近年来,乳酸菌的各种菌株用于多种食品和益生产品。
由于乳酸菌的益生功效为菌株依赖性,而单纯采用表型鉴定方法都无法准确鉴别到种属水平。
而基于DNA的基因型鉴定技术,因其检测的准确、稳定和灵敏可以实现乳酸菌种属甚至菌株水平的分类和鉴别。
本文对目前的主要分子技术在乳酸菌菌株分类和鉴定中的应用做一综述。
标签:乳酸菌;益生菌;鉴定;食品;分子技术随着人们生活品质的提高,人们广泛关注益生菌食品。
益生菌是指一类活的,摄入足够量就可以通过改善肠道微生态平衡而促进人体健康的微生物。
目前益生菌中应用较多的是乳杆菌和双歧杆菌。
益生菌功效主要集中在维持和调节机体的正常肠道菌群上并由此产生一系列的益生作用,但其益生功效为菌株依赖性。
由中国疾控中心营养与食品安全所牵头的研究结果证实,含有B益畅菌(即双歧杆菌DN173010)的酸奶能缩短肠道传输时间,对肠易激综合征人群、便秘人群的胃肠道有明显的改善效果。
由于不同菌株改善肠道的机制不同,所以对乳酸菌在菌株水平的鉴定就至关重要。
传统的表型法鉴定主要建立在形态学及生理生化特征基础上,但因其种间生化性状相似,单纯使用该法往往无法准确区分各个种。
随着分子标记技术的发展,基因型鉴定法以核酸为检测对象,因其更加灵敏和准确而被国内外学者用于乳酸菌的鉴定。
1 乳酸菌乳酸菌是存在于人体内的益身菌。
按照生化分类法,用于食品中乳酸菌分为5个属:乳秆菌属、双歧杆菌属、链球菌属、明串珠菌属(Leuconostoc)和汁球菌属,每个属包括多种菌种,某些菌种还包括数个亚种。
目前益生菌产品中应用较多的是乳杆菌属(Lactobacillaceae L)和双歧杆菌属(Bifidobacteria B)。
乳杆菌属中同型发酵乳秆菌包括:德氏乳杆菌(L.delbrueckii)、保加利亚乳杆菌(L.bulgaricus)、瑞士乳秆菌(L.helveticus)、嗜酸乳秆菌(L.acidophilus)和干酪乳杆菌(L.casei);异型发酵乳杆菌包括:短乳秆菌(L.brevis)和发酵乳杆菌(L.fermentum),主要用于发酵工业。
双歧杆菌属目前已知的双歧秆菌有24种,而应用于发酵乳制品生产的仅有5种包括:两歧双歧秆菌(B.bifidum)、长双歧杆菌(B.longum)、短双歧秆菌(B.breve)、婴儿双歧秆菌(B.infantis)和青春双歧杆菌(B.adolescentis),它们都存在于人的肠道内。
2001年我国卫生部公布的可用于保健食品的益生菌菌种包括:B.bifidum、B.infantis、B.longum、B.breve、B.adolescentis、L.bulgaricus、L.acidophilus、干酪乳杆菌干酪亚种(L.Casei subsp.casei)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)。
而国外用于酸奶及微生物制剂的主要乳酸菌种包括:L.acidophilus、鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)、罗氏乳杆菌(L.rogosae)、植物乳杆菌(L.plantarum)、L.casei、詹氏乳杆菌(L.jensenii)、B.breve、B.longum、B.bifidum等。
2 乳酸菌的鉴定方法2.1 表型鉴定法传统上对乳酸菌属的鉴定主要根据菌体成分或代谢产物在同种属间存在的差异,通过测定这些成分的含量进行菌种鉴定,如:乳酸旋光性的测定、乳酸菌含有的醌分析、细胞壁肽聚糖组分和结构分析。
这种基于表面受体的特异性和生化特性的检测方法为表型特征鉴定法。
由于该方法无法显示菌体基因组信息,不能体现鉴别菌株间的亲缘关系,且其方法自身检测的模糊性,分辨率不高,重复性差,且结果受微生物生长条件的影响等缺点,基于表型特征的培养鉴定方法无法对乳酸菌进行准确的属或者种甚至菌株水平的鉴定。
2.2 基因型鉴定法近年来,学者们采用新的分子生物学和分子标记技术迅速而准确的在亚种和菌株水平上对乳酸菌进行鉴别和分类。
这种根据菌株之间遗传距离而导致的DNA指纹差异;从分子和基因水平研究和鉴定乳酸菌遗传结构、组成和分类的方法为基因特征鉴定法。
这种以DNA为基础的主要检测技术有:随机扩增多态性DNA (randomly amplified polymorphic DNARAPD)指纹图谱、限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphismRFLP)、扩增片段长度多态性(Amplification fragment length polymorphismAFLP)、脉冲琼脂凝胶电泳(Pulse field gelelectrophoresisPFGE)、扩增性rDNA限制性酶切片段分析(amplified ribosomal DNA restriction analysis,ARDRA)。
2.2.1 16SrDNA/rRNA序列分析:从属到种的鉴定对生物大分子演变的研究是研究物种的近缘关系的很好工具。
16S rDNA或16S rRNA既具有保守性,又具有高变性,为细菌多态性研究最常用的靶基因。
Sul 等依据L.acidophilus、L.rhamnosus、B.longum、B.bifidum四种菌的16S rRNA、23S rRNA和16S-23S间区设计引物,快速准确的在属和种水平对四种乳酸菌进行鉴定。
2.2.2 脉冲琼脂凝胶电泳(PFGE)PFGE可用于乳酸菌的培养鉴定,乳酸菌包埋于琼脂块中,用适当的内切酶在原位对整个染色体进行酶切,酶切片段在特定的电泳系统中通过电场方向不断交替变换及合适的脉冲时间等条件下而得到良好的分离。
PFGE中内切酶的选用至关重要,所采用的内切酶常为寡切点酶(low frequency cleavagerestric-tionendoucleases),这种酶切后的片段少而大,适合于作PFGE电泳。
该方法是在全基因组水平的分析,能对菌株的突变进行检测(DNA缺失,插入或重组),分辨率高。
已有多位学者利用该技术进行中水平的鉴别:B longum和B.animalis;L casei 和L.rhamnosus;Lacidophilus 和L.helveticus;Lb.johnsonii。
2.2.3 随机扩增多态性DNA指纹图谱(RAPD)RAPD技术是1990年由Wiliam和Welsh等人利用PCR技术发展的检测DNA 多态性的方法。
利用随机引物(一般为8—10bp)通过PCR反应非定点扩增DNA 片段,然后用凝胶电泳分析扩增产物DNA片段的多态性。
扩增片段多态性便反映了基因组相应区域的DNA多态性。
RAPD可用于对整个基因组DNA进行多态性检测,也可用于构建基因组指纹图谱,具有种属甚至种间特异性。
与RFLP相比,RAPD技术简单,检测速度快;分析只需少量DNA样品且一套引物可用于不同生物基因组分析。
但是,由于该方法存在共迁移问题且该技术影响因素多,凝胶电泳只能分开不同长度DNA片段,而不能分开那些分子量相同但碱基序列组成不同的DNA片段,实验的稳定性和重复性差。
所以该技术通常与其他技术联用:Spano G等利用RAPD结合物种特异性PCR技术对红葡萄酒中L plantarum进行种水平的鉴定。
Schillinger U等采用L.casei 和L.acidophilus的种属特异性引物,结合RAPD-PCR分析,鉴别出益生菌酸奶中分离的20株乳酸菌,结果与标准菌株图谱对照,证明此法能实现乳酸菌的菌株水平的鉴别。
2.2.4 限制性片段长度多态性(RFLP)1974年Grodzicker等创立了限制性片段长度多态性(RFLP)技术,它是一种以DNA—DNA杂交为基础的第一代遗传标记。
采用特定的限制性内切酶识别并切割不同生物个体的基因组DNA,得到大小不等的DNA片段,所产生的DNA数目和各个片段的长度反映了DNA分子上不同酶切位点的分布情况。
通过凝胶电泳分析这些片段,就形成不同带,然后与克隆DNA探针进行Southern杂交和放射显影,即获得反映个体特异性的RFLP图谱。
它所代表的是基因组DNA在限制性内切酶消化后产生片段在长度上差异。
该技术用于乳酸菌菌株种内水平鉴定的DNA指纹法。
Randazzo CL等结合PCR和RFLP技术从自然发酵的橄榄油中分离的35个同型发酵乳杆菌菌株中,分离出24个L casei,11 L plantarum.。
该方法具有RFLP标记位点数量不受限制的特点,但是克隆可表现基因组DNA多态性的探针较为困难;另外,该方法操作繁锁,且检测周期长检测成本高。
2.2.5 扩增片段长度多态性(AFLP)AFLP是1993年荷兰科学家Zbaeau和V os发展起来的一种检测DN A多态性的新方法。
AFLP 是RFLP 与PCR相结合的产物,其基本原理是先利用限制性内切酶水解基因组DNA 产生不同大小的DNA 片段,再使双链人工接头的酶切片段相边接,作为扩增反应的模板DNA,然后以人工接头的互补链为引物进行预扩增,最后在接头互补链的基础上添加1~3个选择性核苷酸作引物对模板DNA 基因再进行选择性扩增,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离检测获得的DNA扩增片段,根据扩增片段长度的不同检测出多态性。
该技术的独特之处在于所用的专用引物可在知道DNA 信息的前提下就可对酶切片段进行PCR 扩增。
为使酶切浓度大小分布均匀,一般采用两个限制性内切酶,一个酶为多切点,另一个酶切点数较少,因而AFLP 分析产生的主要是由两个酶共同酶切的片段。
AFLP 结合了RFLP 和RAPD两种技术的优点,具有分辨率高、稳定性好、效率高的优点。
Giorgio G等采用该技术对种族遗传学上关系密切的菌种进行物种水平的鉴定。
利用该技术遗传多样性的结果可以对种质进行聚类分析,Giorgio G等应用该法了解L pentosus,、L.plantarum和L.pseudoplantarum乳酸菌菌属的系统发育与亲缘关系。
但其技术费用昂贵,对DNA 的纯度和内切酶的质量要求很高。
尽管AFLP 技术诞生时间较短,但可称之为分子标记技术的又一次重大突破,被认为是目前一种十分理想、有效的分子标记。
3 结论酸菌的各种菌株已广泛应用于各种益生菌产品和食品中,表型生化鉴定法耗时耗力,且培养和生化鉴定结果易受到培养条件等诸多因素的影响,且主要缺点在于无法反应菌株的核酸信息。
基因型鉴定法准确、快速、灵敏,且分辨率高。
但是由于每种方法基于的原理不同和各种检测方法的优势不同,各种方法都一定的选择性和局限性。
目前,还没有一种方法能单独完成各种物种各种水平的检测。
所以,只有联合各种鉴别方法,充分利用各种方法的优势,且联合表型特征鉴定法和基因特征鉴定法,才能得到更为便捷、准确和灵敏的乳酸菌的分类和鉴别。