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蛋白裂解液配方
蛋白裂解液是一种在生物学和生物化学实验中常用的试剂，用于裂解或溶解细胞，释放细胞内的蛋白质。
以下是一个基本的蛋白裂解液的常见配方，但请注意，具体的配方可能因实验目的和样品类型而有所不同。
常见的蛋白裂解液配方：
1.RIPA缓冲液：
•50 mM Tris-HCl pH 7.4
•150 mM NaCl
•1% Triton X-100
•0.5% 钠脱氧胆酸
•0.1% SDS
• 1 mM EDTA
• 1 mM PMSF（苯甲磺酰氟）
注：可以根据实验需求加入蛋白酶抑制剂、磷酸酯酶抑制剂等。
emmli裂解缓冲液：
•2% SDS
•10% 甘油
•60 mM Tris-HCl pH 6.8
•100 mM DTT（二硫代硫酸钠）
注：此为常用于SDS-PAGE的裂解液，可用于蛋白质的电泳分析。
3.蛋白裂解酶消化液：
•50 mM Tris-HCl pH 8.0
•150 mM NaCl
• 1 mM EDTA
•1% Triton X-100
•0.5% NP-40
•蛋白酶（如胰蛋白酶）或其他特定的蛋白酶
注：此液体适用于进行蛋白酶的部分或完全消化。
请注意，这些配方中的成分可以根据具体的实验需求进行调整。
在制备蛋白裂解液时，应该遵循严格的实验室规范，并根据样品的特性和实验目的选择合适的裂解液。
此外，对于某些特定的实验，可能需要添加蛋白酶抑制剂、磷酸酯酶抑制剂等以保护蛋白质不被降解。
edta标准液EDTA标准液。
EDTA（乙二胺四乙酸）是一种常用的螯合剂，广泛应用于化学分析、生物化学和医学领域。
EDTA标准液是一种含有已知浓度EDTA溶液，通常用于配制标准曲线、校准仪器和进行螯合滴定等实验。
本文将介绍EDTA标准液的配制方法、使用注意事项以及相关实验技巧。
一、EDTA标准液的配制方法。
1. 配制所需试剂和设备，精密天平、蒸馏水、EDTA固体、酸和碱调节剂。
2. 按照所需浓度计算出所需的EDTA质量，并用精密天平称取。
3. 将称取好的EDTA固体加入容量瓶中。
4. 加入适量的蒸馏水并轻轻摇匀，直至EDTA完全溶解。
5. 根据实验需要，可以加入酸或碱调节剂调节pH值至所需范围。
6. 最后用蒸馏水定容至刻度线，摇匀即可得到EDTA标准液。
二、使用注意事项。
1. 配制EDTA标准液时要使用精密天平和量筒等精密设备，保证配制出的标准液浓度准确。
2. 在配制过程中要注意EDTA的溶解性，可以适量加热或加入酸碱调节剂来帮助溶解。
3. 配制好的EDTA标准液应密封保存，避免受到空气、光线和污染物的影响。
4. 在使用过程中，要根据实验需要选择合适的浓度和体积的EDTA标准液，避免浪费和误差。
5. 注意标准液的稳定性，定期检查并根据需要重新校准。
三、相关实验技巧。
1. 在进行螯合滴定时，要注意选择合适的指示剂和pH范围，以确保实验结果的准确性。
2. 在配制标准曲线时，要根据实验需要选择合适的EDTA标准液浓度，并进行多点标定以提高准确度。
3. 在校准仪器时，要根据仪器的特点和要求选择合适的EDTA标准液进行校准，保证测量结果的准确性。
综上所述，EDTA标准液是化学分析和实验室常用的重要试剂，正确的配制和使用对实验结果的准确性至关重要。
通过本文的介绍，相信读者对EDTA标准液的配制方法、使用注意事项以及相关实验技巧有了更清晰的认识，希望能对实验工作有所帮助。
生物化学实验常用缓冲液的配制方法
一、TRIS-HCl缓冲液的配制
1、TRIS-HCl缓冲液的配制原理
TRIS-HCl缓冲液，也称为三胍盐缓冲液，是一种有机盐缓冲液。
其配制原理是将三胍钠(三胍氢氯化钠)和氢氯化钠混合在一起，以获得所需的pH值，使其达到缓冲效果。
缓冲效果可以使溶液保持稳定的pH值。
2、TRIS-HCl缓冲液的配制
（1）准备实验室试剂
三胍钠（TRIS），氢氯化钠（NaCl）和蒸馏水
（2）计算配制配方
根据欲得到的pH值和需要的量，计算配制配方。
（3）放置容器
将三胍钠和氢氯化钠分别放入容器中。
（4）添加蒸馏水
用蒸馏水将两种盐分别稀释至相等比例。
（5）搅拌混合
用搅拌器或磁力搅拌器将两种盐混合均匀。
（6）温度调节
将混合物加热至37℃，保持温度，节省时间。
（7）校准pH
用pH计校正混合物的pH值，确保其在正确的pH范围内，调节pH值。
（8）放入瓶中
将缓冲液放入容器中，容器密封后存放，防止受污染。
二、枸橼酸缓冲液的配制
1、枸橼酸缓冲液的配制原理
枸橼酸液是一种有机碱性液，其原理是将枸橼酸(Citric acid)和碳
酸钙(CaCO3)混合在一起，以获得所需的pH值，使其达到效果。
如何配制edta标准溶液EDTA标准溶液是实验室常用的一种配制溶液，它主要用于配制金属离子的标准溶液，常用于分析化学和生物化学实验中。
下面将介绍如何配制EDTA标准溶液。
首先，准备所需试剂和设备，二硝基乙二胺四乙酸（EDTA）、蒸馏水、天平、烧杯、磁力搅拌器、PH计等。
其次，按照所需浓度计算所需的EDTA和蒸馏水的质量或体积。
一般来说，可以根据所需的最终浓度和体积来计算所需的EDTA和蒸馏水的量。
例如，如果需要配制0.01M的EDTA标准溶液，可以根据摩尔浓度计算所需的EDTA的质量，然后加入适量的蒸馏水。
然后，将计算好的EDTA加入到烧杯中，并加入适量的蒸馏水。
在搅拌的同时缓慢加入EDTA，以确保其充分溶解。
在溶解过程中可以使用PH计检测溶液的PH值，根据需要可以适当调整PH值。
接下来，将溶解好的EDTA标准溶液转移到干净的烧瓶或其他储存容器中，并用盖子密封。
注意，密封的容器应该标有所配制溶液的浓度和日期，以便日后使用和识别。
最后，将配制好的EDTA标准溶液进行标定，以确保其浓度的准确性。
标定的方法可以根据实际需要选择，一般可以使用金属离子标准溶液进行滴定，然后根据滴定所需的EDTA标准溶液的体积计算其浓度。
在配制EDTA标准溶液的过程中，需要注意以下几点，首先，实验操作要注意安全，避免接触到化学试剂和溶液；其次，要严格按照所需浓度和体积计算试剂的用量，避免浪费和误差；最后，要注意溶解过程中的PH值和溶解度，确保溶液的稳定性和准确性。
总之，配制EDTA标准溶液是实验室中常见的操作，掌握好配制方法和注意事项，可以确保所配制溶液的准确性和稳定性，为实验结果的准确性提供保障。
希望以上介绍的方法对大家有所帮助，祝实验顺利！。
一种中浓度iaa凝胶的配制方法一种中浓度IAA凝胶的配制方法IAA凝胶是一种常用的生物化学试剂，常用于蛋白质电泳、DNA/RNA电泳等实验中。
在实验中，我们常常需要制备不同浓度的IAA凝胶，以满足不同实验的需要。
本文将介绍一种中浓度IAA凝胶的配制方法。
材料：- 30%丙烯酰胺溶液- 10%SDS溶液- 1.5M Tris-HCl缓冲液（pH 8.8）- 10%过氧化物溶液- IAA粉末- 蒸馏水步骤：1. 准备凝胶模板：将凝胶模板放在平整的工作台上，用胶带将四周封住，以防止凝胶液外漏。
2. 准备凝胶液：将30%丙烯酰胺溶液、10%SDS溶液和1.5M Tris-HCl缓冲液按照体积比例为29:10:61混合，加入适量的蒸馏水调节总体积至所需体积。
例如，如果需要制备100ml的凝胶液，则将29ml的30%丙烯酰胺溶液、10ml的10%SDS溶液和61ml的1.5M Tris-HCl缓冲液混合，加入适量的蒸馏水调节总体积至100ml。
3. 加入IAA：将所需的IAA粉末加入凝胶液中，搅拌均匀。
4. 加入过氧化物：将10%过氧化物溶液加入凝胶液中，搅拌均匀。
5. 倒入凝胶模板：将凝胶液倒入准备好的凝胶模板中，注意不要产生气泡。
6. 固化凝胶：将凝胶模板放置在室温下静置约30分钟，直至凝胶固化。
至此，中浓度IAA凝胶的制备完成。
需要注意的是，IAA粉末在制备过程中应该避免暴露在光线下，以免影响其活性。
此外，凝胶模板的尺寸和厚度应根据实验需要进行调整。
本文介绍的中浓度IAA凝胶的配制方法简单易行，适用于常规的生物化学实验。
希望能对需要制备IAA凝胶的实验人员提供一定的参考。
生物化学实验常用试剂的配制方法1、0.5mol/L 氢氧化钠溶液 *组份浓度 0.5mol/L*配制量 2L*配置方法 1.准确称取氢氧化钠 40g。
2.用去离子水溶解并稀释至 2L。
2、0.5mol/L 盐酸溶液 *组份浓度 0.5mol/L*配制量 2L*配置方法 1.准确量取盐酸 83.4mL。
2.用去离子水稀释至 2L。
4、0.2％葡萄糖标准溶液 *组份浓度 0.2％*配制量 1L*配置方法 1.称取葡萄糖 2.5g 置于称量瓶中，在70℃干燥 2 小时。
2.干燥器中冷却至室温，重复干燥，冷却至恒重。
3.准确称取葡萄糖 2.000g。
4.用去离子水溶解并定容至 1L5.于4℃保存。
5、250μg/mL牛血清 *组份浓度 250μg/mL白蛋白标准液 *配制量 2L*配置方法 1.准确称取 250mg标准牛血清白蛋白。
2.用 0.03mol/LpH7.8 的磷酸缓冲液溶解并定容至 1L。
3.4℃保存。
6、Folin 试剂甲*配置方法 1.称取 10g氢氧化钠溶于 400mL去离子水中，加入 50g 无水碳酸钠，溶解，待用。
2.称取 0.5g酒石酸钾钠，溶于 80mL去离子水中，加入 0.25g 硫酸铜.5水，溶解。
3.将 1：2：去离子水按 20：4：1的比例混合即可。
4. 4℃保存，可用一周。
7、Folin 试剂乙*配置方法1.在 500mL的磨口回流装置内加入钨酸钠.2水 25.0359g，钼酸钠.2水6.2526g，去离子水 175mL，85％磷酸 12.5mL，浓盐酸 25mL，充分混合。
2.回流 10 小时，再加硫酸锂 37.5g，去离子水 12.5mL及数滴溴。
3.然后开口沸腾 15min，以驱除过量的溴，冷却后定容到 250mL。
4.于棕色瓶中保存，可使用多年注意：上述制备地 Folin 试剂乙地贮备液浓度一般在 2mol/L 左右，几种操作方案都是把 Folin 试剂乙稀释至 1mol/L 的浓度作为应用液，我们这时是把贮备液于使用前稀释 18 倍，使之浓度为 0.1mol/L 略高。
实验室常用试剂和缓冲液配方PBS（磷酸盐缓冲液）是一种常用的生物化学缓冲液，用于洗涤和稀释生物化学试样。
配方：-NaCl：8g-KCl：0.2g-Na2HPO4：1.42g-KH2PO4：0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.4、用1M（摩尔浓度）盐酸或1M氢氧化钠进行调节。
2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基，适用于大多数细菌和酵母菌的培养。
配方：- 水解酪蛋白（tryptone）：10 g- 酵母粉（yeast extract）：5 g-NaCl：10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。
可以选择添加洗涤剂Tween-20（0.1%）以提高溶解度。
SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。
配方：-NaCl：175.3g- Na3Citrate·2H2O：88.2 g-EDTA：37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC（二硫酰二甲酯）处理，增强其功能。
4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。
配方：-甲醛：37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中，制备所需浓度的甲醛溶液。
5. β-羟丁酸钠（β-Hydroxybutyrate）溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂，用于生物化学实验中。
配方：-β-羟丁酸钠：1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。
这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方，实验室试剂和缓冲液种类丰富多样，具体使用取决于研究目的和实验要求。
在进行实验之前，建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书，并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。
酪蛋白溶液的配制方法酪蛋白溶液是一种常用的生化试剂，广泛应用于生物学和生物化学实验中。
下面将介绍酪蛋白溶液的配制方法。
一、材料准备配制酪蛋白溶液所需的材料包括酪蛋白粉末、缓冲液、去离子水和一定的溶液容器。
1. 酪蛋白粉末：可以在生化试剂供应商处购买，确保选择质量优良的产品。
2. 缓冲液：根据实验需要选择合适的缓冲液，如Tris缓冲液、PBS 缓冲液等。
3. 去离子水：用于配制溶液的稀释，确保使用纯净的去离子水。
4. 溶液容器：可以选择适合体积的容器，如试管、烧杯等。
二、配制步骤1. 酪蛋白溶液的浓度根据实验需求而定，一般建议先根据实验要求确定所需的最终浓度。
根据浓度计算所需的酪蛋白粉末的质量。
2. 取适量的缓冲液加入溶液容器中，根据实验要求决定缓冲液的体积。
3. 将缓冲液加热至适当的温度，通常为37摄氏度，以便更好地溶解酪蛋白粉末。
4. 将事先称好的酪蛋白粉末逐渐加入缓冲液中，同时搅拌溶解。
搅拌的速度和时间根据实验要求而定，一般建议在室温下搅拌30分钟至1小时。
5. 溶解酪蛋白粉末后，使用适当的工具（如离心机）将溶液离心，以去除其中的悬浮物和杂质。
6. 经离心后，将溶液转移到干净的容器中，可根据需要进行进一步的稀释。
7. 最后，使用去离子水将溶液稀释至所需的最终浓度，并充分混合。
三、注意事项在配制酪蛋白溶液的过程中，需要注意以下几点：1. 酪蛋白粉末在溶解过程中可能会产生气泡，因此在搅拌时要轻柔地操作，以避免产生过多的气泡。
2. 在缓冲液的选择上，要根据实验要求选择合适的缓冲液，并确保缓冲液的pH值适合酪蛋白的溶解和稳定。
3. 酪蛋白溶液的稳定性较差，一般不宜长时间保存。
在使用前最好现配现用，避免溶液降解导致实验结果的误差。
4. 配制过程中要注意实验室的卫生和操作规范，避免污染和交叉感染。
总结酪蛋白溶液是一种常用的生化试剂，在生物学和生物化学实验中有着广泛的应用。
配制酪蛋白溶液需要准备好酪蛋白粉末、缓冲液、去离子水和适当的溶液容器。
第1篇一、实验目的1. 掌握常用生化试剂的配制方法。
2. 熟悉实验操作规范，提高实验技能。
3. 了解不同生化试剂的用途和注意事项。
二、实验原理生化试剂在生物化学实验中起着至关重要的作用，它们可以用于检测、分析、分离和鉴定生物分子。
本实验旨在通过配制不同类型的生化试剂，加深对实验原理和操作步骤的理解。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：分析天平、移液器、容量瓶、烧杯、玻璃棒、滴定管、滴定台、试管等。
2. 试剂：氯化钠、氢氧化钠、硫酸铜、硼酸、葡萄糖、丙酮、苯酚等。
四、实验步骤1. 氯化钠溶液的配制a. 称取5.85g氯化钠，置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液，备用。
2. 氢氧化钠溶液的配制a. 称取4.0g氢氧化钠，置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液，备用。
3. 硫酸铜溶液的配制a. 称取0.5g硫酸铜，置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液，备用。
4. 硼酸溶液的配制a. 称取5.2g硼酸，置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液，备用。
5. 葡萄糖溶液的配制a. 称取5.0g葡萄糖，置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液，备用。
6. 丙酮溶液的配制a. 称取5.0g丙酮，置于烧杯中。
b. 加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其溶解。
c. 将溶液转移至100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。
d. 摇匀溶液，备用。
7. 苯酚溶液的配制a. 称取5.0g苯酚，置于烧杯中。
实验室常用试剂缓冲液的配制方法实验室中常常需要使用各种试剂和缓冲液，以下是一些常用试剂和缓冲液的配制方法及其用途。
1.NaCl溶液配制：NaCl作为实验室常用的盐类试剂，可用于生化、分子生物学等多个实验室操作中。
常用浓度为0.9%（w/v）的生理盐水。
配制方法如下：称取对应质量的NaCl加入蒸馏水中，搅拌溶解，用蒸馏水调整至最终体积。
2.血红蛋白溶液配制：血红蛋白溶液可用于实验室的一些生化、免疫学等实验。
常用方法如下：从新鲜血液中分离出血红蛋白，加入适量的生理盐水或缓冲液，控制pH值为7.4-7.6，并用密闭容器保存。
3. Tris-HCl缓冲液配制：Tris-HCl缓冲液在生物化学实验中广泛应用于DNA/RNA电泳、蛋白质电泳等实验。
常用方法如下：按需求称取Tris固体加入一定量的去离子水中，搅拌溶解，用强碱（比如氢氧化钠）或强酸（比如盐酸）调整pH值至所需范围。
1. Tris缓冲液配制：Tris缓冲液常用于酶反应、凝胶电泳等实验中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，并用去离子水稀释至最终体积。
2.PBS缓冲液配制：PBS缓冲液在生物学实验中用于细胞培养、免疫染色等操作中。
配制方法如下：称取适量的NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积，调整pH值至所需范围。
3. Tris-Borate-EDTA（TBE）缓冲液配制：TBE缓冲液常用于核酸凝胶电泳中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，然后加入Boric acid和EDTA固体，继续搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积。
以上仅是一些常见的试剂和缓冲液的配制方法，实验室中还会使用到很多其他试剂和缓冲液。
在配制试剂和缓冲液时，需要注意选择合适的纯度的试剂、使用无菌器具和操作台，并遵循相应的实验操作规范和安全要求。
惯例试剂配制和测定方法一、溶液的配制1.Mandels 营养盐溶液（ 1000 mL）名称重量（ g）硫酸铵（ (NH 4)24）14 SO磷酸二氢钾（ KH 2PO4）20尿素（H2NCONH2）3硫酸镁（ MgSO·）347H2O氯化钙（ CaCl2· 2 ）42H O注：用煮沸 10 min 后的蒸馏水配制。
2. Mandels 微量元素溶液（ 1000 mL）名称氯化钴（ CoCl2·6H2O）硫酸锌（ ZnSO4·7H2O）硫酸锰（ MnSO4·H2O）硫酸亚铁（ FeSO4·7H2O）注：用煮沸 10 min 后的蒸馏水配制。
重量（ g）3.71.41.65.03.DNS 试剂的配制（1000 mL）（1）取：3,5-二硝基水杨酸（C7H4N2O7）7.5 g氢氧化钠（NaOH ）14.0 g充足溶解于 1000 mL 水中（水早先煮沸10 min）（2）加入：酒石酸钾钠（C4 4 6· 2）216.0 gH O K Na 4H O苯酚（在 50 ℃水浴中消融） 5.5 mL着重亚硫酸钠（ Na2S2 O5） 6.0 g（3）充足溶解后盛于棕色瓶中，搁置 5 天后即可使用，平常盛一小瓶(250 mL) 使用，要放在冰箱中冷藏。
此溶液每个月配制一次。
注意：倒入瓶中时要尽量装满！！4.考马斯亮蓝 G-250 的配制（1000 mL）称考马斯亮蓝G-250 100 mg 即 0.1g 溶于50 mL95%乙醇中，加入100 mL 85 %磷酸，用蒸馏水稀释至1000 mL，滤纸过滤。
最后试剂中含0.01 %（w/v ）考马斯亮蓝G-250，4.7 %（w/v ）乙醇， 8.5 %（w/v ）磷酸。
5. 1.0 M 柠檬酸缓冲溶液的配制（1000 mL）名称分子量 Mn重量 (g)柠檬酸（ C6 87· 2O ）210210H O HNaOH4074.5正确称取柠檬酸210 g，溶于约750 mL 煮沸（10 min）蒸馏水中，待柠檬酸充足溶解后加入氢氧化钠 74.5 g，完整溶解后将上述溶液转移到 1000 mL 容量瓶中，冷却后将容量瓶定容到 1000 mL（原始 pH4.45）。
（查验方法：取 1.0 M 柠檬酸缓冲溶液稀释 20 倍，测定稀释液的 pH 值， pH 值应为 4.8）6.标准糖溶液的配制和标准方程的测定（1）标准糖溶液的配制正确称取 2.000 g 葡萄糖 /木糖（葡萄糖 /木糖需 105 ℃烘干 3 h），蒸馏水溶解，所有转移至 1 L 容量瓶内，摇匀，配制成 2 g/L 葡萄糖 /木糖溶液。
取 9 个 100 mL 容量瓶、 1 支 20 mL 刻度吸管，分别汲取 2 g/L 葡萄糖 /木糖溶液 10 mL、20mL、 30 mL、 40 mL 、50 mL 、60 mL 、70 mL 、80 mL、 90 mL 挨次加入容量瓶，蒸馏水定容，摇匀。
即为 0.2 g/L 、0.4 g/L 、0.6 g/L 、0.8 g/L、1.0 g/L 、 1.2 g/L、 1.4 g/L、 1.6 g/L 、1.8 g/L、2.0 g/L 葡萄糖 /木糖标准溶液。
取 6 个 30 mL 容量瓶、1 支 20 mL 刻度吸管，分别汲取 2 g/L 葡萄糖溶液 10 mL、12 mL、14 mL 、16 mL 、 18 mL 、 20 mL 挨次加入容量瓶，每瓶再加入 1.5 mL 柠檬酸缓冲液，蒸馏水定容，摇匀。
即为 1.0 g、1.2 g、1.4 g、1.6 g、 1.8 g、 2.0 g 酶解葡萄糖。
（2）标准方程的测定：①葡萄糖 /木糖标准方程的测定取 10 支 25mL 刻度管，10 支 1mL 刻度吸管，分别加入 0.2 g/L、0.4 g/L、0.6 g/L、0.8 g/L、1.0 g/L、1.2 g/L 、1.4 g/L、1.6 g/L 、 1.8 g/L、2.0 g/L 葡萄糖 /木糖标准溶液 1 mL，DNS 溶液3 mL。
100 ℃煮沸 5 min，水浴冷却后定容至 25 mL ，摇匀。
以蒸馏水作为空白比较， 550 nm测定吸光度 A 。
以 A 为纵坐标， C 为横坐标，拟订标准曲线。
（ 7230 型分光光度计输出方程为：A = MC + N ，723 型分光光度计输出方程为： C = KA + B ）②酶解木糖标准方程测定（测定木聚糖酶活力）取 6 支25 mL刻度管， 6 支2 mL 刻度吸管，分别加入 1.0 g、1.2 g、1.4 g、1.6 g、1.8 g、2.0 g 酶解木糖标准溶液1.5 mL，DNS 溶液 3 mL，100 ℃煮沸 5 min ，水浴冷却后定容至25 mL，摇匀。
以蒸馏水作为空白比较，550 nm 测定吸光度 A 。
以 A 为纵坐标， C 为横坐标，拟订标准曲线。
（ 7230 型分光光度计输出方程为： A = MC + N ， 723 型分光光度计输出方程为：C=KA+B）③酶解葡萄糖标准方程测定（测定滤纸酶活力、CMC酶活力）取 6 支小试管， 6 支 2 mL 刻度吸管，分别加入 1.0 g、 1.2 g、 1.4 g、1.6 g、1.8 g、2.0 g酶解葡萄糖标准溶液 1.5 mL，DNS 溶液 3 mL ，100 ℃煮沸 5 min ，水浴冷却后，量筒定容至50 mL（定容至 25 mL ，测定 CMC 酶活力），摇匀。
以蒸馏水作为空白比较， 550 nm 测定吸光度 A 。
以 A 为纵坐标， C 为横坐标，拟订标准曲线。
（ 7230 型分光光度计输出方程为： A = MC + N ，723 型分光光度计输出方程为： C = KA + B ）7.柠檬酸 -磷酸氢二钠缓冲液的配制pH0.1 mol/L0.2 mol/LpH0.1 mol/L0.2 mol/L柠檬酸 /mL磷酸氢二钠 /mL柠檬酸 /mL磷酸氢二钠 /mL2.219.600.40 5.29.2810.72 2.418.76 1.24 5.48.8511.15 2.617.82 2.18 5.68.4011.602.816.833.17 5.87.9112.093.015.894.11 6.07.3712.63 3.215.06 4.946.2 6.7813.22 3.414.30 5.70 6.4 6.1513.85 3.613.56 6.44 6.6 5.4514.553.812.907.10 6.84.5515.454.012.297.717.0 3.5316.47 4.211.728.287.2 2.6117.39 4.411.188.827.4 1.8318.17 4.610.659.357.6 1.2718.734.810.149.867.80.8519.155.09.7010.308.00.5519.45注： Na24，Mr =141.98；0.2 mol/L溶液为28.40 g/LHPONa2HPO4·2H2O，Mr =178.05；0.2 mol/L 溶液为 35.61 g/LC6H8O7·H2O， Mr =210.14；0.1 mol/L 溶液为 21.01 g/L二、酶活力的测定1.滤纸酶活力的测定—纤维素酶的整体酶活力采纳国际理论和应用化学协会（IUPAC ）介绍的标准方法测定 [Ghose,T.K., et al,Pure & Appl.Chem.,1987,59,257-268]，一个滤纸酶活力的国际单位（FPIU）等于在标准反响条件下每分钟生成 1 μmol葡萄糖量的酶量。
测定方法以下：取 7 支试管在此中 1#- 5#支小试管中加入 50 mg 卷成筒状的滤纸条（ 1 ×6cm），适合稀释酶液，取 7 支试管按下表操作。
（5#有底物无酶， 6#为有酶无底物空白比较）项目1#2#3#4#5#6#7#稀释酶液（mL）0.20.30.40.500.5酶解葡萄糖0.05 M柠檬酸缓冲液（mL） 1.3 1.2 1.1 1.0 1.51标样 1.5mL 将上述试管盖上塑料布，用橡皮筋扎紧后置于恒温水浴器中，保持在振幅 80 和温度 50 ℃下保温 60 min 后立刻拿出加入 3 mL DNS 试剂，在开水中反响 5 min，冷却后加水至 50 mL 并充足摇匀，待滤纸完整积淀后，取上层清液于550 nm 波长下测定吸光度 A 值。
反响生成的葡萄糖的量依据葡萄糖标准曲线求得。
以 0.2、0.3、0.4、0.5mL 酶量所生成葡萄糖的毫克数为横坐标，酶量的对数为纵坐标作图，从图中找出生成 2 mg 葡萄糖的酶量，按下式计算样品的滤纸酶活力（FPA）：2mg 葡萄糖滤纸酶活力=60min× 0.18(mg/ μ mol)生成× 2mg 葡萄糖的酶量（ mL ）一个滤纸酶活力单位定义为每分钟生成1μmol葡萄糖所需的酶量，单位：IU/mL 。
备注：当加入 0.5 mL 酶液（指酶液没有被稀释的时候！）仍没法生成 2 mg 葡萄糖时，按下式计算：滤纸酶活=0.185 ×（葡萄糖 mg 数）2.β-葡萄糖苷酶活力的测定方法一：葡萄糖氧化酶测定法按国际标准方法测定 [Ghose,T.K.,etal,Pure & Appl.Chem.,1987,59,257-268]。
一个β-葡萄糖苷酶活力国际单位 (IU/mL) 等于标准条件下每分钟转变 1 μmol底物即生成 2 μmol葡萄糖的酶量来表示。
早先用 0.05 M 的柠檬酸缓冲液配制15 mmol/L 的纤维二糖溶液（ 0.513 g 纤维二糖 /100 mL0.05 M 的柠檬酸缓冲液，现配现用）（1）每个样品应做三个不一样酶量预计β-葡萄糖苷酶活力< 0.10.10.20.3（I U/mL ）取酶液量（mL）0.5/0.8/1.00.3/0.5/0.8 0.2/0.3/0.50.1/0.2/0.3（2）加料：试管中加入酶液、缓冲液和纤维二糖溶液以下：酶液量0.05 M 柠檬酸缓冲液纤维二糖溶液（mL ）（mL）（ mL）样品适当1－酶液1酶液空白110纤维二糖空白011每个试管共 2mL ，用塑料纸包扎好。
注意：纤维二糖溶液一定用0.05M 柠檬酸配制。
（3）酶解反响：试管置于 50 ℃水浴中，保温 30 分钟，拿出，开水中搁置 5 分钟使酶失活，冷却至室温。
（4）加显色剂（葡萄糖氧化酶测定试剂）：取试管中冷却液30 μL，加入显色剂 3.0 mL，混匀；同时做一个葡萄糖标样：取 1 g/L 葡萄糖标样 30 μL，加显色剂 3.0 mL，混匀；置于 37 ℃水浴中，保温15 分钟，拿出。
