荷叶中总黄酮类化合物提取工艺的研究

超声辅助萃取荷叶总黄酮工艺的研究周桃英1，罗登宏1，曹志军2(1．黄冈职业技术学院生物系，黄冈市438002；2．内蒙古农业大学职业技术学院食品科学与工程系，呼和浩特市010018)摘要：为获取荷叶总黄酮的最佳提取工艺，采用超声波提取法对荷叶总黄酮进行提取，以芦丁标准品，在波长510n m处测定吸光度，得回归方程C=0．0925A+0．0063(R=0．9996)。

通过单因素试验确定出荷叶总黄酮超声提取时较佳的提取工艺为：乙醇浓度60％～80％、料液比1：25～1：35、提取时间20～30m i n、提取温度30—40℃。

在此基础上，采用二次通用旋转组合设计优化确定出荷叶总黄酮最佳提取工艺为：按1：35的料液比加入70％乙醇溶液，浸泡4h；而后在超声波清洗器中超声提取30r ai n，超声温度40。

C，荷叶总黄酮提取率为7．47％。

利用超声波技术提取荷叶总黄酮具有提取率较高，节省时间和溶剂、能耗低等优点。

关键词：总黄酮；荷叶；超声波辅助萃取中图分类号：T S202．1文献标识码：A文章编号：1006—2513(2009)05—0074—06A s t udy about ext r act i on t ot al f l avonoi ds f r O m l ot us(N el um bo nuf i ce r a G aer t n)l eaf by ul t r as oni c as si s t ed m et hodZ H O U T ao-yi ng，L U O D eng-hong，C A O Z hi-j un(D e par t m e nt of B i ol ogy，H uangG ang V oc at i on al&T e chni c al C o l l eg e，H uan gG an g438002)A bst r a ct：Tot al f l avonoi ds f r om l ot us(N el um bo nuf i cer a G aert n)l eaf by ul t r as oni c as s is t ed ext r act i on W as s tud i e d．R u t i n be i ng us ed鹊a st and ar d t o de t er m i ne t he cont ent of f l avonoi ds by m e asur i ng t he ab sor bane e at510nm．T he r e．gr es s i on equ at i on W a s C=0．0925A+O．0063(R=0．9996)．T he bett er ext r act i on pr o cess W a s def i ned by s i n gl e f act or t es t．鹊f ol l ow i ng：60％～80％et ha nol，r aw m at er i al a nd s ol uti on r at i o W a s l：25～l：35，e xt r a ct i on t i m e20～30r ai n，e xt r act i on t e m pe r at ur e30～40℃．B ased on t he a bove condi t i o ns，t he opt i m um ext r act i on pr o cess W as obt a i ned by s i n gl e f act or t est a nd r esul t s w er e：70％e t ha nol as a sol ven t．t h e r at i o n of r a w m at er i al a nd s ol uti on l：35，soak 4b．山t r aso ni c ext r act i on30m i n a t40℃．A t l as t。

超声波协同法提取荷叶中总黄酮的研究作者：李海梅胡佳佳来源：《中国科技博览》2014年第03期摘要：采用超声波协同提取法对荷叶总黄酮进行提取，通过单因素试验确定最佳的荷叶总黄酮提取工艺：提取时间20min，料液比1：30，乙醇浓度60%，温度50℃，验证试验证明实际提取率为4.85%。

关键词：超声波法；荷叶总黄酮；协同提取中图分类号：P631.5荷叶为睡莲科莲属植物莲的叶。

荷叶中的黄酮类化合物主要是荷叶苷，其次是槲皮素、异槲皮素等常见的黄酮类物质。

本课题以荷叶为研究对象，利用超声波协同法提取总黄酮，从而增加荷叶的附加值，将为荷叶在食品、药品中的应用提供科学依据。

1材料与方法1.1试验材料原料：荷叶（湖北武汉）：新鲜、无污染荷叶，采摘后洗净，用烘箱60℃烘干。

主要试剂：芦丁（生化试剂，国药集团化学试剂有限公司）、无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、盐酸、锌粉等均为分析纯。

1.2黄酮测定方法用NaN02-Al（N03）3-NaOH体系络合化学吸光法测定黄酮。

得到回归曲线方程：y=0.5095x+0.0019，R2=0.9997。

式中：y，提取液吸光度；x，提取液黄酮类物质浓度，mg/ml。

1.3荷叶总黄酮单因素试验与分析称取一定量的荷叶，在不同反应条件下，即处理时间、料液比、乙醇浓度、提取温度，测定总黄酮的提取率，从而比较选取最佳反应条件。

1.4荷叶总黄酮响应面分析2结果与分析2.1不同超声波处理时间对荷叶总黄酮提取率的影响称取荷叶0.2g，在料液比为1：30、乙醇浓度为60%、温度为50℃的条件下，分别对不同超声波处理时间的荷叶测定总黄酮的提取率。

从图1看出，在处理时间为20min条件下，荷叶总黄酮的提取率最高。

2.2不同料液比对荷叶总黄酮提取率的影响称取荷叶0.2g，在乙醇浓度为60%、处理时间为20min、温度50℃的条件下，分别对不同料液比的荷叶测定总黄酮的提取率，比较选取最佳料液比。

由图2可知，料液比为1：30时，荷叶总黄酮提取率最高。

醇法提取荷叶中总黄酮的工艺研究采用乙醇提取法对荷叶总黄酮进行提取，通过单因素试验分析，确定最佳的荷叶总黄酮提取工艺。

荷叶黄酮醇法提取的最佳工艺是：料液比1：25，提取时间1h，提取温度80℃，乙醇浓度60%，验证试验证明实际提取率为3.82%。

标签：总黄酮；荷叶；乙醇提取法荷叶为睡莲科植物莲的叶。

荷叶中所含的黄酮类化合物，其主要成分是荷叶苷，其次是槲皮素、异槲皮素等常见的黄酮类物质。

实验研究表明，黄酮类物质具有很高的生物活性，如抗氧化作用、抑菌作用、降血脂、减肥作用等[1]。

本课题以荷叶为研究对象，利用乙醇提取法提取总黄酮，从而增加荷叶的附加值，将为荷叶在食品、药品中的应用提供科学依据。

1 材料与方法1.1 实验设备电热恒温水浴锅、722型分光光度计、鼓风干燥箱、电子天平、粉碎机、旋转蒸发器等。

1.2 试验材料原料：荷叶（湖北武汉）：新鲜、无污染荷叶，采摘后洗净，用烘箱60℃烘干。

主要试剂：芦丁（生化试剂，国药集团化学试剂有限公司）；无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等均为分析纯。

1.3 黄酮测定方法[2]用NaN02-Al（N03）3-NaOH体系络合化学吸光法测定黄酮。

用NaN02-Al （N03）3-NaOH体系络合化学吸光法测定黄酮。

准确称取芦丁标准品0.625mg，用体积分数30%乙醇定容于100mL容量瓶中，得质量浓度为0.625mg/mL的标准储备液。

分别吸取芦丁标准储备液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL分别置于0、1、2、3、4、5、6号共7支10mL具塞试管中，用体积分数30%乙醇补充至5mL，分别加入0.3mL质量分数10%硝酸铝溶液，混匀，用体积分数30%乙醇标定至刻度线，放置10min后于510nm处，以0号试剂作为空白参比，测定其吸光度值。

以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，见图1所示。

得到回归曲线方程：y=0.5011x+0.0022，R2=0.9997。

荷叶提取物最佳工艺的研究摘要：荷叶提取物有较好的调节血脂功效，有药理[1]研究表明其主要活性组分为荷叶生物碱、黄酮类化合物。

并且目前荷叶生物碱[2]、黄酮的需求量不断增加，但是缺少方便有效的分离分析荷叶生物碱和黄酮的方法[3]，限制了对荷叶资源进一步的开发和利用。

本实验通过对荷叶生物碱、黄酮的提取、分离纯化，寻找荷叶提取物的最佳工艺，以期为荷叶提取物的深入研究和合理开发利用提供参考。

关键词：荷叶提取物;黄酮;生物碱;分离纯化Abstract: Better regulation of blood lipid effect of the extract from Lotus leaf, pharmacological research has shown that group into the alkaloid from Lotus leaf, its main activity of flavonoid compounds. And Lotus Leaf alkaloids, flavonoids in demand now increasing, but the lack of convenient and effective method of separation and analysis of alkaloids and flavonoids in Lotus leaf, limited the further development and utilization of resources in Lotus leaf. This experiment by alkaloids from Lotus leaves, extraction, isolation and purification of the flavonoids, finding best technology of Lotus leaf extract, for in-depth research and rational development and utilization of Lotus leaf extract of reference.Key words: Lotus leaf extract; flavonoids; alkaloids; isolation and purification1.前言荷叶属睡莲科植物(Nelumbo nuxifera Gaerth)的叶片，作为一种天然、安全有效的保健食品和药物[4]，越来越受到人们的青睐。

荷叶黄酮富集纯化研究摘要：荷叶为睡莲科植物莲的千燥叶，为我国民间常用中药材，它是一种既是食品又是药品的天然植物。

本文对黄酮类化合物的结构与性质进行归纳，并对大孔树脂法分离纯化荷叶黄酮进行研究，采用最大耐受量实验，检验了荷叶的使用安全性，实验完成后所有实验动物全部健康存活，表明荷叶黄酮安全无毒。

关键词：荷叶黄酮类化合物大孔树脂分离纯化一、黄酮类化合物的结构与性质1.黄酮类化合物的结构黄酮类化合物系色原烷或色原酮的2或3苯基衍生物，泛指两个苯环通过中央三碳链相互连接而成的一系列化合物，一般具有c6一c3一c6的基本骨架结构。

黄酮类化合物是植物光合作用产生的一大类化合物，黄酮母核上有羟基、甲氧基、烃氧基等取代基，分别形成各种黄酮类化合物。

植物界中存在各种各样的黄酮类化合物，目前发现的已达上万余种。

已从多种植物提取出了黄酮类化合物，并且已从中分离出了部分单一成分。

2．黄酮类化合物的性质(1)物理性质黄酮类化合物多为结晶性固体，少数(如黄酮苷类)为无定形粉末。

一般情况下，黄酮、黄酮醇及其苷类多显灰黄～黄色，查耳酮为黄～橙黄色，而二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮类，因不具有交叉共轭体系或共轭链短，故不显色(二氢黄酮及二氢黄酮醇)或显微黄色(异黄酮)。

(2)溶解性黄酮类化合物的溶解度因结构及存在状态(苷和苷元、单糖苷、双糖苷或三糖苷)不同而有很大差异。

一般游离苷元难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、醋酸乙酯、乙醇等有机溶剂及稀碱水溶液中。

(3)酸碱性黄酮类化合物因分子中多具有酚羟基，故显酸性，可溶于碱性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。

由于酚羟基数目及位置不同，酸性强弱也不同，以黄酮为例，其酚羟基酸性强弱顺序依次为：7，4’一二羟基>7或4t-羟基>一般酚羟基>5一羟基。

二、大孔树脂法分离纯化荷叶黄酮荷叶粗提液中所含组分较多，不仅含有黄酮类化合物，还含有其它组分，因此必须进一步鉴定、分离纯化，大孔吸附树脂具有机械强度好、选择性好、吸附量高、解析容易、可反复使用、耐污染强等特点。

1、黄酮类化合物理化性质黄酮类化合物的溶解性因其结构不同而有很大差别，据此可进行提取精制。

荷叶中的黄酮类化合物主要有荷叶苷、槲皮素等，主要以苷类的形式存在。

黄酮类化合物的苷类一般难溶于乙醚、氯仿和苯等非极性溶剂，而易溶于甲醇，乙醇、乙酸乙酯、水（热水）等极性溶剂。

所以对于荷叶中黄酮类化合物的提取采用极性溶剂提取。

2、单因素实验2.1料液比对有机溶剂提取法提取荷叶黄酮的影响实验步骤：①取3g 干荷叶,浸没于一定料液比的60％乙醇一水溶液 ②水浴加热，水浴温度75℃，浸渍40min③真空抽滤。

用50ml 石油醚处理浸提液，回收石油醚,取下层液④高速旋转离心器进行离心，用旋转蒸发器减压浓缩，100mL 容量瓶定容 ⑤测定溶液吸光度 测定结果 料液比 1:15 1:20 1:25 1:30 1:35 吸光度（Abs ） 1.259 1.627 1.728 1.948 1.995料液比与吸光度之间的关系1.2591.6271.7281.9481.9950.511.522.51:151:201:251:301:35吸光度（Abs）实验结论：随着料液比逐渐增大，提取率逐渐增大。

增大到一定程度时，逐渐趋于缓慢，为保节能，高效，最佳工艺条件为1:30。

2.2乙醇浓度对有机溶剂提取法提取荷叶黄酮的影响实验步骤：①取3g 干荷叶,浸没于90ml 一定浓度的乙醇一水溶液（1:30） ②水浴加热，水浴温度75℃，浸渍40min③真空抽滤。

用50ml 石油醚处理浸提液，回收石油醚,取下层液④高速旋转离心器进行离心，用旋转蒸发器减压浓缩，100mL 容量瓶定容⑤测定溶液吸光度测定结果C （乙醇）/% 40 50 60 70 80 吸光度（Abs ）1.434 1.605 1.765 1.780 1.368乙醇浓度与吸光度之间的关系1.4341.6051.7651.781.3680.20.40.60.811.21.41.61.824050607080系列1实验结论：在较低浓度时，随着乙醇浓度的增加，提取率明显增加，到浓度为60%的时候，提取率增加速率趋于缓慢，浓度超过70％以后，提取率急剧下降， 所以最佳乙醇浓度应在60%左右。

荷叶中黄酮类化合物的浸提、分离及其抗氧化性研究荷叶是一种药食两用的天然植物原料。

植物黄酮类化合物具有抗氧化、抗衰老、治疗心血管疾病、降血脂等保健功能。

本文主要对荷叶中黄酮类化合物的提取、分离、纯化进行研究,同时对荷叶乙醇提取物的抗氧化性进行考察鉴定。

论文取得如下主要结果: 1.使用三种方法(自然凉干、烘干、低温冻干)对新鲜荷叶进行干燥,结果表明:低温冻干后的荷叶颜色浅绿、味清香、口感纯正、荷叶中黄酮类化合物含量最高,烘干的荷叶效果(色香味和荷叶黄酮含量)次之,自然凉干的荷叶效果最差。

2.通过单因素试验对影响荷叶中黄酮类化合物提取效率的主要因素进行考察,得到荷叶中黄酮类化合物的最佳浸提工艺是:浸提温度80℃,料液比1:30,乙醇溶液浓度70%,浸提时间2h。

在最佳浸提条件下对荷叶浸提三次,荷叶中黄酮类化和物可以基本溶出,荷叶黄酮含量达到36.19mg/g。

3.分别用三种方法分离纯化荷叶乙醇提取物,高速逆流色谱(HSCCC)分离效果最好,Sephdex LH-20柱层析分离效果次之,硅胶柱层析分离效果最差。

结合TLC 分析、颜色反应鉴定可知,荷叶乙醇提取物经HSCCC分离纯化,可以得到纯度很高的黄酮类化合物。

4.通过对荷叶乙醇提取物的定性鉴定,得出荷叶乙醇提取物中主要含有黄酮类化合物,生物碱含量很少,说明荷叶乙醇提取物中的主要功能成分(抗氧化)是黄酮类化合物。

荷叶乙醇提取物具有较强的抗氧化生理活性,为荷叶的保健功效提供理论基础。

5.对荷叶乙醇提取物进行抗氧化研究,试验表明荷叶乙醇提取物表现较强的抗氧化性。

可以显著地消除体外过氧化氢自由基;可以明显地延缓油脂的自动氧化过程;而且随着荷叶提取物浓度的增加,提取物的抗氧化性会随之增强。

荷叶总黄酮的提取工艺研究
薛晓丽
【期刊名称】《安徽农业科学》
【年(卷),期】2009(037)012
【摘要】[目的]为荷叶的大规模开发利用提供技术保证.[方法]采用超声波辅助萃取法对荷叶总黄酮进行提取,并用分光光度法测定其含量,通过单因素及正交试验确定最佳提取工艺.[结果]当乙醇浓度达到60%时,总黄酮收率最大;液料比在10∶1～30∶1时,黄酮的收率随液料比的增大而增加较快,当液料比大于40∶1后,黄酮收率趋于恒定;当作用时间为35 min时,黄酮收率最大,但此时与30 min相比,仅略微增加;提取时适宜的温度应为40 ℃;影响荷叶总黄酮收率的主次因素顺序为乙醇浓度＞超声时间＞液料比＞超声温度.[结论]荷叶总黄酮最佳提取工艺:将荷叶干粉按35∶1的液料比加入浓度60%乙醇水溶液,浸泡24 h,在超声波清洗槽中超声提取35 min,超声温度35 ℃.在该条件下,荷叶总黄酮收率为13.68%.
【总页数】3页(P5500-5501,5503)
【作者】薛晓丽
【作者单位】吉林农业科技学院实验管理中心,吉林吉林,132101
【正文语种】中文
【中图分类】Q946.91
【相关文献】
1.荷叶总黄酮提取工艺研究 [J], 游林红;揭晶;杨明利;蔡由生
2.醇法提取荷叶中总黄酮的工艺研究 [J], 何莉萍;何瑜萍
3.机械化学法提取荷叶总黄酮的工艺研究 [J], 高梦祥;郭珊珊
4.荷叶总黄酮的酶法提取工艺研究 [J], 师艳秋;尹春光;王晓强;彭浩;姜洁
5.酶法辅助回流提取荷叶中荷叶碱的工艺研究 [J], 宁娜;韩建军;胡宇莉;邹宗尧;郁建生
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

2023-11-15CATALOGUE 目录•引言•荷叶总黄酮提取工艺概述•荷叶总黄酮提取工艺优化•荷叶总黄酮提取工艺验证•结论与展望01引言研究背景研究目的研究意义研究目的和意义02荷叶总黄酮提取工艺概述荷叶总黄酮的化学结构与性质荷叶总黄酮是一种复杂的天然化合物，主要成分为黄酮类化合物，如儿茶素、槲皮素等。

荷叶总黄酮具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。

荷叶总黄酮的化学结构决定其具有水溶性和吸光性等物理性质。

荷叶总黄酮的生物活性与药理作用030201原料处理溶剂提取分离纯化工艺优化荷叶总黄酮的提取工艺流程03荷叶总黄酮提取工艺优化提取溶剂的选择与优化提取温度高温可以加速黄酮的溶解和提取，但过高的温度可能会破坏黄酮的化学结构。

提取时间提取时间也是影响提取效果的因素，过长或过短的提取时间都可能影响黄酮的提取效果。

提取温度与时间的确定提取工艺参数的优化与控制工艺流程荷叶总黄酮的提取工艺流程包括预处理、浸泡、提取、过滤、浓缩等步骤，每个步骤都可能影响最终的提取效果。

工艺参数控制在提取过程中，需要严格控制工艺参数，如温度、时间、搅拌速度等，以确保提取效果的一致性和稳定性。

04荷叶总黄酮提取工艺验证重复性验证重复性验证实验设计重复性验证数据分析稳定性验证稳定性验证实验设计稳定性验证数据分析提取工艺的实际应用验证实际应用验证为了确保提取工艺在实际应用中的可行性，需要将该工艺应用到实际生产中，并对产品进行质量检测和评估。

如果产品符合相关质量标准，说明该工艺具有实际应用价值。

要点一要点二实际应用验证实验设计为了确保实验结果的可靠性，需要采用随机化方法进行实验设计，如随机选取荷叶原料、随机选择实验操作者等。

同时，还需要对实验过程进行详细记录，包括原料称量、溶剂配制、提取时间等。

实际应用验证数据分析对实际应用过程中提取得到的荷叶总黄酮进行质量检测和评估，可以得出产品的各项质量指标，如纯度、产量等。

如果这些指标均符合要求，说明该提取工艺具有实际应用价值。

科技创新论文（设计）题目：关于荷叶黄酮提取工艺的研究目录摘要 (3)1.前言 (3)2.实验材料与方法 (4)2.1材料 (4)2.1.1实验材料 (4)2.1.2 实验试剂 (4)2.1.3 实验仪器 (4)2.2实验方法 (4)2.2.1 材料处理 (4)2.2.2 1%的硝酸铝溶液的配制 (4)2.2.3不同温度、时间下的荷叶提取物溶液的组合设计 (5)2.2.4荷叶提取物溶液与硝酸铝进行显色反应 (6)2.2.5测试荷叶提取物溶液的分光度值 (6)2.2.6大量提取荷叶中的黄酮成分 (6)2.2.7黄酮的保存 (6)2.2.8高压灭菌.............................................. 错误！未定义书签。

3、实验结果与分析 (6)3.1确定提取荷叶中黄酮的最佳温度及时间 (6)3.2分析提取荷叶中黄酮成分的方法 (6)4.讨论 (7)5.参考文献 (7)关于荷叶黄酮提取工艺的研究摘要：分析了荷叶中活性成分及其生理功能，并对荷叶中的黄酮进行提取。

本实验通过热水提取法来提取荷叶中的黄酮，设置了75。

C、80。

C、85。

C三个温度梯度及1h、1.5h、2h的时间梯度，用显色反应和测试荷叶提取物的吸光度值来确定提取黄酮的最佳温度及时间。

通过实际实验操作，得出提取荷叶黄酮的最佳温度为80。

C，最佳时间为2h。

关键词：荷叶黄酮；提取；最佳温度；最佳时间Abstract: T h i s a r t i c l e a n a l y z e d t h e a c t i v e c om p o n e n t s a n d p h y s i o l o g i c a l f u n c t i o n s o f L o t u s l e a and collect the Flavo of Lotus led . This experiment through the hotwater extraction method to extract the lotus leaf flavonoids, set up three temperature-75。

荷叶总黄酮提取工艺研究作者：游林红揭晶杨明利来源：《现代农业科技》2014年第06期摘要以荷叶为原料，采用乙醇水浴浸提对其中总黄酮的提取工艺进行了研究。

通过单因素试验和正交试验，确定出各因素对总黄酮得率的影响顺序为：B（料液比）>D（乙醇浓度）>A（提取温度）>C（提取时间），从而得到乙醇提取荷叶总黄酮的最佳工艺条件为：提取时间90 min、乙醇浓度80%、料液比1∶40（g∶mL）、提取温度40 ℃。

正交试验表明，重现性和稳定性试验与正交试验所得的结果一致。

该研究为荷叶总黄酮的开发利用提供了新的方法与依据，具有很重要的现实意义。

关键词荷叶；总黄酮；提取工艺中图分类号 R284.2 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2014）06-0097-02Study on the Extraction Technology of Flavonoids from Lotus LeavesYOU Lin-hong JIE Jing * YANG Ming-li CAI You-sheng（Department of Pharmaceutical Engineering，Wuhan Bioengineering Institute，Wuhan Hubei 430415）Abstract Taking lotus leaf as raw material，using ethanol water bath extraction on the extraction process of total flavonoids was studied. Through single factor test and orthogonal test，the various factors on the yield of total flavonoids of order：B（the ratio of material to liquid）>D（ethanol concentration）>A（extraction temperature）>C（extraction time）.In order to get the best technological conditions of extracting the total flavonoids from lotus leaf ethanol as：extraction time was 90 min，ethanol concentration was 80%，ratio of solid-liquid was 1∶40（g∶mL），extraction temperature was 40 ℃.Orthogonal test results showed that the reproducibility and stability test were the same as orthogonal test results.This study provided a new method and basis for the development and utilization of the total flavonoids from lotus leaf，and it′s had very important practical significance.Key words lotus leaves；total flavonoids；extraction process荷叶（Folium Nelumbinis）为睡莲科植物莲（Nelumbo nuciferea Gaertn）的干燥叶，为我国民间常用中药材。