油菜花粉中黄酮类物质提取工艺的优化研究

油菜花粉（rape pollen）是油菜精华的浓缩、油菜有性繁殖的雄性配子体，内含多种人体所需的营养成分，被人们称为微型营养库。

油菜花粉的气味吸引蜜蜂传粉，经过蜜蜂采食运回蜂巢内进行自然发酵所得到的花粉内含有多种自然酵素、酶( 蛋白酶、淀粉酶、转化酶、脂肪酶等) 和激素（性激素、生长素）、酚类、黄酮类、脂肪酸、维生素和无机元素等物质，是一种公认的天然健康食品。

因其有抗衰老、抗氧化、提高人体免疫力等功效，可被用于医疗领域[1]。

油菜是我国大面积种植的粉源较广的农业经济作物，因此，有必要对油菜花粉的化学成分、功效及其在食品产业中的应用进行概述，为油菜花粉的开发利用提供依据。

1 油菜花粉的结构形态和化学成分1.1 油菜花粉的结构形态油菜花粉外形大多呈长球形，由花粉壁及其内容物组成。

花粉壁具有抵抗酸、碱及微生物降解的作用，在自然界中可以长久保存。

花粉壁包含内壁和外壁，外壁十分坚固。

1.2 油菜花粉的化学成分油菜花粉富含8 种人体必需氨基酸和其它氨基酸、维生素、矿物质元素、脂肪酸、黄酮类化合物及多糖类物质等[2]。

油菜花粉中的色氨酸是5- 羟色胺（血清素）的原料，血清素由脑细胞分泌，它能抑制大脑活动，使大脑进入睡眠状态[3]。

花粉中不饱和脂肪酸在脂肪酸中所占的比例较大，其中的多不饱和脂肪酸(PUFA) 是婴儿视觉功能发育所必需的脂肪酸，是维持正常视力的重要功能成分，能促进智力发育，增强记忆力，PUFA 摄取不足会导致脑功能障碍[4]。

生物活性物质黄酮类化合物也存在油菜花粉中，产地不同的油菜花粉中黄酮类化合物含量有所不同。

从油菜花粉中提取的多糖类物质是一种水溶性糖蛋白，也是生物体内一类重要的生物大分子，对生物体有着非常重要的作用[5]。

油菜花粉中，钙含量较高，钾、钠含量较低，且含有镁、硫、硅等常量元素及锰、锌、铁、铜等微量元素，其中有害元素铅、铬、镍含量极低，符合国家规定的食品标准，可以放心食用[2]。

油菜花粉的功效2.1 油菜花粉抗癌、抗肿瘤的作用谢锦波等[6] 探讨油菜花粉脂溶性提取物（BPE）对体外培养的人肺腺癌细胞A549 的杀伤效应，表明BPE 可抑制人肺腺癌细胞A549 的增殖，浓度为1.00 mg/mL 的BPE 对A549 细胞增殖的抑制率达到最高。

油菜花粉蛋白提取工艺研究学生：XXX（学号）导师：XXX（导师级别）摘要：本试验主要进行油菜花粉蛋白提取工艺的研究。

以破壁花粉为试材，探讨提取温度、提取时间、pH值和料液比对花粉蛋白提取率的影响，在单因素试验的基础上，通过正交试验确定最佳提取工艺条件。

结果表明：提取温度对花粉蛋白提取率的影响最大，其次为提取时间、pH值，料液比的影响最小。

油菜花粉蛋白提取的最优条件为1:25的料液比，70℃的水浴条件下，pH值为11，提取时间75min，此条件下油菜花粉蛋白的提取率为60.11％。

关键词：油菜花粉蛋白；破壁花粉；提取率The study of the Rape pollen protein extraction process Chun ying Tang (2008113387) , Directed by: Hai yan Yan (Senior Experimental Division)Abstract：This experiment mainly working on rape pollen protein extraction technology research. We take was test materials , study the influence temperature, time, pH value and the ratio of solid-liquid on pollen protein, extraction rate, on the single factor experiment,we determine the optimal extraction condition.The results show that : the effect of temperature on pollen protein extraction rate is mostly affected, followed by the pH value, solid-liquid ratio , extraction time minimally affected. the optimal conditions of the ratio of solid-liquid is 1:20, the water bath temperature is 70 centigrade, the pH value is 11, the extraction time is 75 min, this condition of rape pollen protein, extraction rate is 60.11percent. Keywords: Rape pollen proteins; cracked - cell pollen; extraction rate1前言油菜是我国五个种植面积上亿亩的农作物之一，是世界最大的油菜生产国，也是我国的主要油料作物。

黄蜀葵花总黄酮提取工艺优化及其对黄嘌呤氧化酶的抑制作用分析发布时间：2023-06-19T00:49:04.614Z 来源：《医师在线》2023年3月5期作者：白喜妹何忠剑余瑾[导读]黄蜀葵花总黄酮提取工艺优化及其对黄嘌呤氧化酶的抑制作用分析白喜妹何忠剑余瑾（杭州康恩贝制药有限公司；浙江杭州 310051）摘要：提取黄蜀葵花总黄酮成分主要应用超声波法、乙醇回流法等，但都存在提取效率低的问题，随着十二烷基硫酸钠的应用，提升增容效果，提高了黄酮成分提取效率。

因此，本文使用超声SDS提取黄蜀葵花总黄酮，通过对提取工艺的优化能够提高提取效率。

并析总黄酮对于黄嘌呤氧化酶的抑制作用。

关键词：黄蜀葵花；总黄酮；提取工艺；黄嘌呤氧化酶引言：黄蜀葵花总黄酮成分具有良好的利尿、抗癌以及抗疲劳作用，可作为黄嘌呤氧化酶（XOD）抑制剂应用。

XOD作为人体生成尿酸的主要催化酶，人体嘌呤含量过高可能会造成尿酸过高，引起高尿酸血症，更容易提高糖尿病、高血压等并发症。

黄酮成分更加安全有效，在药物和保健品中得到应用。

1.材料和设备准备黄蜀葵花（经过60℃烘干粉碎处理后使用40目过筛备用）、无水乙醇、氢氧化钠、十二烷基硫酸钠、亚硝酸钠、粉碎机、真空泵、超声波清洗器以及紫外可见分光光度计。

2.实验方法首先对黄蜀葵花进行粉碎处理，对粉碎粉末过筛（40目）处理，保证粉末均匀。

称取2.5g放置于锥形瓶内，添加70%乙醇和SDS后，充分搅拌后，使用超声提取。

抽滤过程中保证待过滤物质稳定于漏斗中央，避免没有经过过滤就从缝隙中流入[1]。

经过抽滤后提取浓缩液，使用60%乙醇定容（50ml）处理。

使用移液枪提取5ml样本，放置于容量瓶（25ml）中，测定总黄酮容量。

3.绘制标准曲线使用芦丁标准样本12mg，添加60%乙醇定容后，充分摇匀，使用移液枪吸取样本，放置于容量瓶内，添水至5ml，依次添加NaNO2溶液（5%，1ml，静置6min）、Al（NO3）3溶液（10%，1ml，静置6min）、NaOH溶液（10%，10ml）。

黄酮类化合物的含量测定方法该文综述了近年黄酮类化合物含量测定时常见的方法，分光光度法、薄层色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法，分析了各种方法的优缺点，并介绍了一些应用比较少的方法。

标签：黄酮类化合物；含量；测定；方法黄酮类化合物是广泛分布于自然界中的一类化合物，生活中常见的食品茶叶、豆类、蔬菜、蜂蜜等都含有大量的黄酮类化合物。

黄酮类化合物具有C6-C3-C6的基本骨架，是许多植物成分的活性化合物，具有抗菌、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤等药理作用。

该文综述了近年黄酮类化合物分析中主要应用的方法，为广大同行提供一些参考。

1 分光光度法分光光度法主要适用于总黄酮的测定，具有操作简便、快速、准确度及精密度较好的特点。

目前黄酮类化合物测定法有直接测定法和比色法。

直接测定法直接以黄酮类化合物为对照物测定样品中的此成分的含量，比色法是将化合物加入显色剂后测定吸光度再进行换算测定，其中常用的显色剂有Al（NO3）3和AlCl3。

直接测定法和比色法的选择要综合考虑，样品中成分是否会与显色剂发生沉淀反应、样品成分的复杂性等都会影响结果的准确性，在NaNO2-Al（NO3）3-NaOH 体系中，碱性条件经常会影响结果的准确性和稳定性，只有物质中含有邻二酚羟基，并且邻二酚羟基的邻位没有取代时，Al（NO3）3比色法才在510 nm 左右有最大吸收[1]。

王东升等[2]、李春红等[3]采用紫外分光光度法分别测定了淫羊藿、黄芪中总黄酮的含量。

吕凛等[4]比较了直接测定法和NaNO2-Al（NO3）3-NaOH显色法测定桔皮中总黄酮含量，结果表明显色法检测，会出现浑浊现象；直接法检测，操作简便，结果准确，重现性好。

时维静等[5]研究直接测定法和NaNO2-Al（NO3）3-NaOH法测定中药复方总黄酮含量，结果表明NaNO2-Al（NO3）3-NaOH法测定中药复方总黄酮含量稳定可靠，快速准确。

徐灵源等[6]采用AlCl3-HAc-NaAc （pH 5.5）为显色剂，建立一种青天葵药材中总黄酮检测的方法，并考察14批青天葵药材中总黄酮的含量。

植物中黄酮类化合物提取方法的研究进展摘要：黄酮类化合物是自然界普遍存在的一类天然有机化合物，具有抗氧化、抗肿瘤、降血脂、降血糖等多种药理作用。

本文就黄酮类化合物提取方法的研究进展做了综述，以便对其研究做一参考。

关键词：黄酮类化合物提取方法研究进展1前言：黄酮类化合物广泛存在于自然界中，属植物次级代谢产物，是一类重要的天然有机化合物，大多数存在于高等植物及蕨类植物中，少数存在于苔藓植物中。

黄酮类化合物的基本母核是2-苯基色原酮，即含有C6-C3-C6的基本骨架。

根据其结构特点，可将黄酮类化合物分类为黄酮、黄酮醇、黄烷醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、花色素、查尔酮、双黄酮等。

大量的实验研究表明，黄酮类化合物具有抗氧化、抗过敏、抗菌、消炎、降血糖、抗病毒、抗肿瘤和护胃保肝等功效。

现代研究证明黄酮类化合物是重要的抗氧化剂，其生理作用是多种多样的[1]。

此外，黄酮类化合物还有降血脂、止血、抑制血小板聚集等多种药理作用[2]。

正因为黄酮类化合物具有上述多种多样的生物活性，所以引起了研究者的广泛关注，目前，该类化合物已成为国内外研究的热点。

而黄酮类化合物的提取是研究的关键步骤，本文就黄酮类化合物提取方法的研究进展做一综述，为该类化合物的研究做一参考。

1、传统提取方法黄酮类化合物的传统提取方法主要包括有机溶剂法、水提取法、碱提酸沉法等。

有机溶剂提取法是根据化合物的极性大小进行提取分离的，即利用相似相容的原理：极性分子一般易溶于极性分子组成的溶剂中，而非极性分子一般易溶于非极性分子组成的溶剂中。

甲醇、乙醇、丙酮是最常用的有机溶剂，高浓度的醇(如90% -95% )宜于提取苷元,60%左右浓度的乙醇或甲醇水溶液适宜于提取苷类物质[3]。

所谓水提取法主要是用热水提取，该方法主要用来提取黄酮苷类物质。

水提取法虽然操作简单，但是提取时会混有许多易溶于水的杂质如蛋白质、多糖类、淀粉等，所以所得产物收率低，含杂质较多，分离纯化比较困难。

油菜花粉中黄酮类物质提取工艺的优化研究阮征;胡筱波;赖富饶;朱新荣;吴谋成;吴晖;胡勇克;温红霞【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2007(028)007【摘要】以油菜花粉为原料,提取黄酮类化合物,探讨乙醇浓度、料液比、提取时间、温度等因素对总黄酮得率的影响.应用Box-Behnken中心组合实验和响应面分析法,确定了油菜花粉中黄酮类物质的最佳提取条件:温度74℃,乙醇浓度88%,料液比1∶10,提取时间48min.【总页数】5页(P133-137)【作者】阮征;胡筱波;赖富饶;朱新荣;吴谋成;吴晖;胡勇克;温红霞【作者单位】教育部食品科学重点实验室,南昌大学生命科学学院食品科学与工程系,江西,南昌,330031;华中农业大学食品科技学院,湖北,武汉,430070;华南理工大学轻工与食品学院,广东,广州,510641;华中农业大学食品科技学院,湖北,武汉,430070;华中农业大学食品科技学院,湖北,武汉,430070;华南理工大学轻工与食品学院,广东,广州,510641;南昌大学资产管理处,江西,南昌,330031;南昌大学资产管理处,江西,南昌,330031【正文语种】中文【中图分类】S896.4【相关文献】1.亚临界水提取油菜花粉中黄酮类物质的工艺研究 [J], 高如意;董兴叶;邓辰辰;许明君;徐振秋2.红麦麸皮中黄酮类物质不同提取工艺研究 [J], 吴敏;秦丹;张齐;陈文杰;华佳佳;桑宏庆3.柚皮中黄酮类化合物提取工艺优化研究 [J], 张世瑶; 袁浩麟; 刘超怡; 高鹏宁; 李方方; 刘祖翔4.山楂中黄酮类物质的水提取工艺及理化性质研究 [J], 郭艳华; 李娇; 黄刚; 吴旺喜; 白建勋; 张彩红; 熊加严5.茭白中黄酮类物质的提取工艺优化研究 [J], 何莉萍;王紫欣;张泽英;黄爱妮;李丽;高维因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

油菜蜂花粉中黄酮的分离纯化及结构鉴定陈莲君;徐德平【摘要】Bee-collected rape pollen extracted with 75% EtOH.and the mixture was suspended in Hz O and was extracted and degreased successively with petroleum ether . The compounds were isolated by polyamide column chromatography and Octadecyl silane chemically bonded to silica gel column chromatography . Three compounds were isolated from Bee-collected rape pollen and were determined by ! H-NMR,13C-NMR,MS. The structures of them were kaemferol-3-O-β-D-glucoside, kaemterol-3-0-β-D-glucosyl-( 2→1 )-β-D-glucoside and quercetin-3-O-β-D-glucoside.%研究油菜蜂花粉黄酮的组成,采用乙醇提取,石油醚萃取脱脂和柱层析分离方法对油菜蜂花粉黄酮进行研究,得3个黄酮类化合物,经1 H-NMR、13C-NMR,分别鉴定出3个黄酮类化合物化学结构为山奈酚-3-O-β-D -吡喃葡萄糖苷、山奈酚-3-O-β-D吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷和槲皮素-3-O-β-D -吡喃葡萄糖苷,与HPLC- MS检测结果一致.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2012(028)003【总页数】3页(P119-121)【关键词】油菜蜂花粉;黄酮;分离;结构鉴定;HPLC-MS;核磁共振;质谱分析【作者】陈莲君;徐德平【作者单位】江南大学食品学院,江苏无锡 214122;江南大学食品学院,江苏无锡214122【正文语种】中文油菜（ Brassica campestris L.）是十字花科植物油菜的嫩茎叶，原产中国，为中国大面积种植的农业经济作物。

油菜蜂花粉黄酮的研究进展薛茗阁;温苗苗;祁梦雅;卜翠萍;赵祥祥;纪丽莲【摘要】蜂花粉素有"微型营养库"的称号,具有抗氧化、护肝、抑菌、抗炎等多种药理活性.在此对油菜蜂花粉中黄酮类物质的提取工艺、已分离或检测到的成分及其生物活性进行综述,为今后其研究和开发利用提供参考.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2015(000)033【总页数】3页(P165-167)【关键词】油菜蜂花粉;黄酮类;提取工艺;化学成分;生物活性【作者】薛茗阁;温苗苗;祁梦雅;卜翠萍;赵祥祥;纪丽莲【作者单位】扬州大学食品科学与工程学院,江苏扬州225127;淮阴师范学院生命科学学院,江苏省环洪泽湖生态农业生物技术重点实验室,江苏淮安223300;淮阴师范学院生命科学学院,江苏省环洪泽湖生态农业生物技术重点实验室,江苏淮安223300;淮阴师范学院生命科学学院,江苏省环洪泽湖生态农业生物技术重点实验室,江苏淮安223300;淮阴师范学院生命科学学院,江苏省环洪泽湖生态农业生物技术重点实验室,江苏淮安223300;淮阴师范学院,江苏省高校区域现代农业与环境保护协同创新中心,江苏淮安223300;淮阴师范学院生命科学学院,江苏省环洪泽湖生态农业生物技术重点实验室,江苏淮安223300;淮阴师范学院,江苏省高校区域现代农业与环境保护协同创新中心,江苏淮安223300;扬州大学食品科学与工程学院,江苏扬州225127;淮阴师范学院生命科学学院,江苏省环洪泽湖生态农业生物技术重点实验室,江苏淮安223300;淮阴师范学院,江苏省高校区域现代农业与环境保护协同创新中心,江苏淮安223300【正文语种】中文【中图分类】S609.9Abstract Rape bee pollen is called “micr o-nutrition library”, with a variety of pharmacological activity, antioxidant, a ntibacterial, anti-inflammatory and hepatoprotective. The extraction techniques, isolated and detected components and the physiological activities of citrus flavonoids were introduced, which will provide a reference on research and exploitati on in the future.Key wordsRape bee pollen; Flavonoids; Extraction technique; Chemical components; Biological activity蜂花粉是蜜蜂在采集的花粉中加入花蜜和唾液而形成的花粉团状物，种类多与蜜蜂采集花朵的种类相关，其中，油菜蜂花粉应用潜力大。

油菜蜂花粉中总黄酮的提取及对自由基清除作用油菜蜂花粉是一种常见的天然保健食品，其中含有丰富的总黄酮类化合物。

总黄酮是一类具有多种生物活性的天然化合物，具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种保健作用。

因此，提取油菜蜂花粉中的总黄酮并研究其对自由基的清除作用具有重要的意义。

一、油菜蜂花粉中总黄酮的提取方法1.超声波提取法超声波提取法是一种常用的总黄酮提取方法，其原理是利用超声波的机械振动作用使样品中的总黄酮分子从细胞壁中释放出来。

具体操作步骤如下：（1）将油菜蜂花粉粉末加入适量的乙醇中，使其浸泡30分钟。

（2）将浸泡后的样品放入超声波提取仪中，进行超声波提取。

（3）将提取液过滤，去除杂质。

（4）将过滤后的提取液进行浓缩，得到总黄酮提取物。

2.微波辅助提取法微波辅助提取法是一种快速、高效的总黄酮提取方法，其原理是利用微波的电磁波作用使样品中的总黄酮分子快速释放出来。

具体操作步骤如下：（1）将油菜蜂花粉粉末加入适量的乙醇中，使其浸泡30分钟。

（2）将浸泡后的样品放入微波辅助提取仪中，进行微波辅助提取。

（3）将提取液过滤，去除杂质。

（4）将过滤后的提取液进行浓缩，得到总黄酮提取物。

二、油菜蜂花粉中总黄酮的自由基清除作用自由基是一类具有高度活性的分子，它们会与细胞内的蛋白质、核酸、脂质等分子结合，导致细胞损伤和死亡。

而总黄酮具有良好的抗氧化作用，可以清除自由基，保护细胞免受损伤。

因此，研究油菜蜂花粉中总黄酮的自由基清除作用具有重要的意义。

研究表明，油菜蜂花粉中的总黄酮具有良好的自由基清除作用。

在体外实验中，将油菜蜂花粉提取物加入到自由基产生体系中，可以明显降低自由基的产生量。

此外，油菜蜂花粉中的总黄酮还可以促进细胞内抗氧化酶的活性，增强细胞的抗氧化能力。

三、总结油菜蜂花粉中的总黄酮是一种具有多种生物活性的天然化合物，具有良好的抗氧化、抗炎、抗癌等多种保健作用。

超声波提取法和微波辅助提取法是两种常用的总黄酮提取方法，可以有效地提取油菜蜂花粉中的总黄酮。