异硫氰酸荧光素发光纳米微球标记双抗夹心固体基质室温燐光免疫分析法测定人IgG
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荧光免疫技术将抗原抗体反应与荧光技术相结合而建立的一种免疫标记技术,具有高度特异性、敏感性和直观性。
概述荧光抗体技术荧光免疫分析的类型荧光免疫技术在医学检验中的应用荧光物质在吸收激发光的能量后,使原来处于基态的电子跃迁到激发态,当其回复至基态时,激发态的电子以发射光的形式释放出能量,这种发射光称为荧光。
荧光荧光物质在吸收激发光的能量后,使原来处于基态的电子跃迁到激发态,当其回复至基态时,激发态的电子以发射光的形式释放出能量,这种发射光称为荧光。
荧光物质其他荧光物质铕(Eu3+)为三价稀土镧系元素,其螯合物经激发后也可发射特征性的荧光,激发光波长范围宽,发射光波长范围窄,荧光衰变时间长,最适合用于时间分辨荧光免疫测定。
荧光抗体技术荧光抗体技术是以荧光素标记抗体,与切片中组织或细胞抗原反应,经洗涤分离后,在荧光显微镜下观察呈现特异性荧光的抗原抗体复合物及其部位。
荧光抗体技术包括荧光抗体制备、标本制作、荧光抗体染色和荧光显微镜检查等内容。
荧光抗体的制备1.抗体要求:用于标记的抗体应该具有高特异性和高亲和力。
2.荧光素要求:①与蛋白质结合后不易解离,而未结合者易于清除;②荧光效率高;③荧光色泽与背景组织对比鲜明;④不影响蛋白质原有的生化与免疫性质;⑤标记方法简单、安全无毒;⑥与蛋白质的结合物稳定,易于保存。
3.抗体的荧光素标记:搅拌法和透析法。
4.荧光素标记抗体的纯化:去除未结合的游离的荧光素。
可采用透析法或层析分离法。
5.荧光抗体的鉴定:荧光素与蛋白质的结合比率(组织切片的荧光抗体染色以F/P=1.5为宜,用于活细胞染色以F/P=2.4为宜)、抗体效价、抗体特异性。
6.荧光抗体的保存:小量分装,-20℃冻存可保存1~2年。
真空干燥后可长期保存。
稀释后的抗体不宜长时间保存,在4℃可保存1~3天。
标本的制作临床标本主要有组织、细胞和细菌三大类。
制作标本要力求保持抗原的完整性、切片要求尽量薄、干扰物质要充分洗去、安全。
异硫氰酸荧光纳米复合粒子的研制与应用
张念椿;高燕红;万垂铭;刘应亮
【期刊名称】《分析化学》
【年(卷),期】2010(038)002
【摘要】采用改进的St(o)ber法制备了二氧化硅外壳的纳米复合荧光粒子.利用异硫氰酸荧光素(FITC)与3-氨基丙基三乙氧基硅烷(APTEOS)反应制备前驱体),再用正硅酸乙酯(TEOS)在一定的条件下水解与缩合,制备有机-无机纳米复合荧光颗粒,利用透射电子显微镜(TEM)测试表明,此纳米复合颗粒呈球形、大小均一,直径约为70 nm.制备的纳米复合荧光粒子经过多次水洗后,仍有较强的荧光特性,有效地防止FITC泄露.用激光共聚焦显微镜观测纳米复合荧光粒子标记的牛血清白蛋白(BSA),可以明显看出BSA上的绿色荧光.
【总页数】5页(P202-206)
【作者】张念椿;高燕红;万垂铭;刘应亮
【作者单位】暨南大学纳米化学研究所,广州,510632;暨南大学纳米化学研究所,广州,510632;暨南大学纳米化学研究所,广州,510632;暨南大学纳米化学研究所,广州,510632
【正文语种】中文
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微流控技术制备ZnO纳米棒及生物荧光检测性能研究郭灵霞;施雨辰;赵振杰;李欣【摘要】本研究设计并制备了一种微流控芯片并在其中水热合成了氧化锌(ZnO)纳米棒.利用扫描电子显微镜(SEM)和X射线衍射(XRD)研究了合成条件对ZnO纳米棒的形貌和晶体结构的影响.结果表明,在微流控芯片中可制备得到致密的ZnO 纳米棒,其直径和长度随加热方式和制备时间的变化而改变.对比研究不同加热方式制备的ZnO纳米棒阵列检测异硫氰酸荧光素标记的羊抗牛IgG的性能,发现局部加热方式制备的ZnO纳米棒检测荧光素标记蛋白的性能更佳,在10 pg/mL~1μg/mL范围内线性良好,相关系数为0.99209.在此基础上,用局部加热制备的ZnO纳米棒检测人甲胎蛋白(AFP),其最低检测限可达1 pg/mL.这些结果表明,微通道中合成的ZnO纳米棒适用于多通道荧光检测.【期刊名称】《无机材料学报》【年(卷),期】2018(033)010【总页数】7页(P1103-1109)【关键词】ZnO;微流控芯片;荧光检测;生物传感器【作者】郭灵霞;施雨辰;赵振杰;李欣【作者单位】华东师范大学物理与材料科学学院纳光电与先进装备教育部工程研究中心,上海 200062;华东师范大学物理与材料科学学院纳光电与先进装备教育部工程研究中心,上海 200062;华东师范大学物理与材料科学学院纳光电与先进装备教育部工程研究中心,上海 200062;华东师范大学物理与材料科学学院纳光电与先进装备教育部工程研究中心,上海 200062【正文语种】中文【中图分类】O611目前, 常用的医学诊断设备昂贵、检测过程繁琐、耗时长, 在快速现场诊断中难以发挥作用。
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免抗生物素、地高辛及异硫氰酸荧光素免疫血清的研制及应用李成文;袁庆霞
【期刊名称】《生物技术通讯》
【年(卷),期】1996(000)003
【摘要】随着分子生物学、分子免疫学与免疫化学等学科的飞速发展,要求建立和提供高度灵敏的方法与试剂,以各种非放射测定技术取代敏感的放射标记测定技术。
八十年代末以来,国外许多大公司象美国的Sigma等都制成了抗生物素(Biotin)、
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为此,我们先后制成了活化Biotin和防化Dig标
【总页数】1页(P117-117)
【作者】李成文;袁庆霞
【作者单位】军事医学科学院微生物流行病研究所;军事医学科学院微生物流行病
研究所北京 100071;北京 100071
【正文语种】中文
【中图分类】R392.1
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