植物氨基酸提取液
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植物中脯氨酸含量的测定实验报告及结果本实验的目的是测定植物中脯氨酸的含量。
脯氨酸是一种非常重要的氨基酸,它在植物中起着调节渗透压、抗逆性、保护细胞膜完整性等多种生理功能。
因此,测定植物中脯氨酸含量对于研究植物生理学和生物化学具有重要意义。
实验所需材料和仪器设备有:植物组织样品、乙醇、脯氨酸标准物质、离心机、溶液混合器、超声波清洗器、显微管、比色皿、分光光度计等。
实验步骤如下:1.准备样品:收集植物样品后,在洁净条件下取样品约10克,稍微清洗并切碎成小片,以利于提取脯氨酸。
2.浸提脯氨酸:将植物样品放入超声波清洗器中,加入适量的乙醇,使乙醇能充分接触到样品。
使用超声波清洗仪提取样品中的脯氨酸,提取时间为30分钟。
3.离心处理:将乙醇提取液离心10分钟,将上清液转移至显微管中。
4.标准曲线的制备:取不同浓度的脯氨酸标准物质,分别加入适量的乙醇,制备不同浓度(如0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mg/mL)的标准品溶液。
5.比色测定:取0.2~1.0 mL标准品溶液,分别加入10%冰醋酸溶液(2.3 mL),然后加入15%草酸溶液(2.5 mL),混合均匀。
再加入0.2%法拉第试剂(0.2 mL),充分混合,并静置15分钟。
测量样品的最大吸收波长为535 nm。
6.吸光度测定:使用分光光度计进行吸光度测定,按照比色皿中的液体,即可得到对应吸光度值。
7.测量样品中脯氨酸的含量:根据标准曲线上的吸光度值,可以通过光谱仪测得样品溶液的吸光度值,然后将其代入标准曲线中计算脯氨酸的含量。
通过以上步骤,我们可以测定植物中脯氨酸的含量。
实验的结果按照以下格式进行记录:表1植物样品中脯氨酸含量的测定结果样品编号吸光度值脯氨酸含量(mg/mL)--------------------------------10.320.120.450.230.520.340.570.450.620.5通过实验测定的结果,我们可以发现不同植物样品中脯氨酸含量的差异,并进一步探究其对于植物生长和生理功能的影响。
茚三酮比色测定氨基酸含量一、实验原理氨基酸在碱性溶液中能与茚三酮作用,生成蓝紫色或黄色化合物(除脯氨酸外均有此反应),可用吸光光度法测定。
生成的蓝紫色或黄色化合物颜色深浅与氨基酸含量成正比,其最大吸收波长分别为570nm或350nm,故据此可以测定样品中氨基酸含量。
二、实验试剂(1)1.2%茚三酮溶液:称取茚三酮1g于盛有35mL热水的烧杯中使其溶解,加入40mg氯化亚锡(SnCl2▪H2O),搅拌过滤(作防腐剂)。
滤液置冷暗处过夜,加水至50mL,摇匀备用。
(2)pH 8.04磷酸缓冲液:Ⅰ、准确称取磷酸二氢钾(KH2PO4)4.5350g于烧杯中,用少量蒸馏水溶解后,定量转入500mL容量瓶中,用水稀释至标线,摇匀备用。
Ⅱ、准确称取磷酸氢二钠(Na2HPO4)11.9380g于烧杯中,用少量蒸馏水溶解后,定量转入500mL容量瓶中,用水稀释到标线,摇匀备用。
Ⅲ、取上述配好的磷酸二氢钾溶液10.0mL与190mL磷酸氢二钠溶液混合均匀即为pH8.04的磷酸缓冲溶液。
(3)氨基酸标准溶液:准确称取干燥的氨基酸(如异亮氨酸)0.2000g于烧杯中,先用少量水溶解后,定量转入100mL容量瓶中,用水稀释到标线,摇匀,准确吸取此液10.0mL于100mL容量瓶中,加水到标线,摇匀,此为200μg/mL 氨基酸标准溶液。
三、实验方法及步骤(1)标准曲线绘制准确吸取200μg/mL的氨基酸标准溶液0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL (相当于0、100、200、300、400、500、600μg 氨基酸),分别置于25mL 容量瓶或比色管中,各加水补充至容积为 4.0mL,然后加入茚三酮溶液(20g/L)和磷酸盐缓冲溶液(pH为8.04)各1mL,混合均匀,于90℃水浴上加热至显色恒定为止(该加热过程至少需要25分钟),取出迅速冷至室温,加水至标线,摇匀。
静置15min后,若生成蓝紫色化合物,在570nm波长下,以试剂空白为参比液测定其余各溶液的吸光度A ;若生成的化合物呈黄色,则在350nm 波长下,以试剂空白为参比液测定其余各溶液的吸光度A 。
高效液相色谱法测定大豆中游离氨基酸含量一、本文概述本文旨在探讨高效液相色谱法(HPLC)在大豆中游离氨基酸含量测定中的应用。
作为一种重要的植物蛋白来源,大豆中的氨基酸组成对于其营养价值及食品工业应用具有重要意义。
游离氨基酸作为大豆蛋白质水解的产物,其含量直接反映了大豆的蛋白质质量和营养价值。
因此,准确测定大豆中游离氨基酸的含量对于评估大豆品质及开发高附加值产品至关重要。
高效液相色谱法作为一种高效、准确的分离分析技术,在氨基酸分析领域具有广泛应用。
本文将详细介绍高效液相色谱法的基本原理、样品处理方法、色谱条件优化以及结果计算与分析等方面的内容,并通过实验验证该方法的可行性和准确性。
本文还将讨论高效液相色谱法在大豆游离氨基酸含量测定中的优势及局限性,以期为相关领域的研究和实践提供有益的参考。
二、实验材料与方法(1)大豆样品:选择新鲜、无病虫害、无杂质的大豆作为实验材料,经过清洗、烘干、破碎后备用。
(2)试剂:实验所需试剂包括高效液相色谱仪用流动相(如乙腈、甲醇等)、衍生化试剂(如OPA、FMOC等)、标准品氨基酸等,均为分析纯或更高纯度。
(3)仪器:高效液相色谱仪(配备紫外检测器或荧光检测器)、离心机、涡旋混合器、水浴锅、移液枪等。
(1)样品处理:称取适量大豆样品,加入适量的水或缓冲液,进行匀浆处理。
然后,将匀浆液进行离心,取上清液作为游离氨基酸提取液。
(2)衍生化处理:取一定体积的游离氨基酸提取液,加入适量的衍生化试剂,进行衍生化反应。
衍生化反应的目的是将氨基酸转化为易于检测的衍生物,提高检测灵敏度和准确性。
(3)高效液相色谱分析:将衍生化后的样品进行高效液相色谱分析。
选择合适的流动相和色谱柱,设置合适的检测波长或激发/发射波长,记录色谱图和峰面积。
(4)数据处理:根据标准品氨基酸的色谱图和峰面积,绘制标准曲线。
然后,根据样品的色谱图和峰面积,结合标准曲线,计算样品中游离氨基酸的含量。
本实验采用高效液相色谱法测定大豆中游离氨基酸的含量,通过样品处理、衍生化处理、高效液相色谱分析和数据处理等步骤,实现对大豆中游离氨基酸的快速、准确测定。
芦荟纯露的功效与作用芦荟纯露是从芦荟的叶肉中提取出来的一种纯天然植物提取液,具有丰富的营养成分和多种功效,被广泛用于护肤、美容、保健等领域。
下面将详细介绍芦荟纯露的功效与作用。
一、护肤功效1. 舒缓镇静:芦荟纯露含有丰富的芦荟多糖和氨基酸等成分,可以温和舒缓肌肤,减轻敏感和红肿,特别适合于敏感肌肤的人群使用。
2. 深层保湿:芦荟纯露具有优秀的保湿效果,可以迅速渗透到肌肤深层,补充肌肤所需的水分,增加皮肤的弹性和光泽。
3. 收敛毛孔:芦荟纯露富含天然的收敛剂,可以有效收敛毛孔,减少皮脂分泌,改善油性肌肤问题。
4. 淡化斑点:芦荟纯露中含有丰富的维生素C和多种氨基酸,具有抑制黑色素的生成和排泄的作用,可以帮助淡化色斑和雀斑。
5. 祛痘消炎:芦荟纯露具有良好的消炎杀菌作用,可以有效消除青春痘和痤疮炎症,减少皮肤因细菌感染而引起的问题。
二、美容功效1. 抗氧化:芦荟纯露中含有丰富的维生素E和多种抗氧化物质,可以帮助清除自由基,减轻肌肤老化现象,保持皮肤年轻有弹性。
2. 紧致提升:芦荟纯露中富含多糖和胶原蛋白等成分,可以促进皮肤的胶原蛋白合成,增加肌肤弹性,有助于紧致提升肌肤。
3. 去除眼袋:芦荟纯露中的多糖和多种维生素可以促进眼部血液循环,减少眼袋和黑眼圈的困扰,使眼部肌肤紧致有弹性。
4. 淡化细纹:芦荟纯露中的多糖和胶原蛋白可以增加皮肤的水分和弹性,淡化细纹和皱纹,使肌肤更加光滑细致。
5. 改善肤色:芦荟纯露有助于平衡肌肤的酸碱度,调整肤色,减少沉积在皮肤表层的色素,改善肤色不均问题。
三、保健功效1. 改善消化:芦荟纯露含有丰富的芦荟多糖和酶等成分,可以促进胃肠蠕动,增强消化功能,缓解胃痛和消化不良问题。
2. 排毒养颜:芦荟纯露中富含的芦荟素能有效排除体内的毒素和废物,帮助肠道净化,增强免疫力,并具有抗衰老和延缓衰老的作用。
3. 降压降血脂:芦荟纯露中含有丰富的多糖和植物活性成分,能够促进血液循环,降低血压和血脂,预防心脑血管疾病的发生。
实验四植物组织中可溶性糖、淀粉、氨基酸及蛋白质的系列测定一、目的从一份植物样品中系统分离和测定可溶性糖、淀粉、氨基酸及蛋白质等多种成分,不仅对研究植物体内碳、氮代谢,了解植物的生长发育状况有重要意义,亦可以作为鉴定其品质的重要指标,而且也有助于训练基本操作技能。
二、原理(一)分离提取原理在80-85%的乙醇中,植物组织中的还原糖、蔗糖以及游离氨基酸和叶绿素等溶解,而淀粉及蛋白质沉淀,再用9.2 mol/L高氯酸溶解淀粉(蛋白质沉淀),最后用0.1 mol/L氢氧化钠溶解蛋白质,然后选用适当的方法测定各个提取液中相应物质的含量。
(二)测定原理1.蒽酮比色法——可溶性糖含量测定碳水化合物及其衍生物经浓硫酸处理,生成糠醛,再与蒽酮脱水缩合而生成蓝绿色化合物,在一定范围内其颜色深浅与碳水化合物含量成线性关系。
蒽酮反应的颜色深浅,随温度条件和加热时间而变化,葡萄糖显色高峰在100℃时,加热10 min后出现,而核糖在相同温度下,加热3 min后出现。
此法灵敏度高,糖含量达30 μg即可测定。
2.茚三酮比色法——氨基酸含量测定氨基酸的游离氨基与水合茚三酮作用后,产生二酮茚胺的取代盐等蓝紫色化合物,在570 nm下有最大光吸收。
在一定范围内,其颜色深浅与氨基酸的含量呈正比。
3.考马斯亮蓝G-250结合法——蛋白质含量测定考马斯亮蓝在游离状态时呈红色,当与蛋白质结合后变为蓝色,后者最大光吸收在595 nm,在一定范围内(0-1000 μg /mL),其颜色深浅与蛋白质的含量呈正比。
此法快速灵敏,反应在2 min内即达到平衡,室温1h内颜色稳定,而且干扰物也少。
三、实验用品(一)实验材料:植物样品。
(二)器皿:1. 25 mL刻度试管⨯8 ,15 mL试管⨯20;2. 10 mL离心管⨯2;3. 容量瓶:50 mL⨯1 ,25 mL⨯1;4. 移液管:5 mL⨯2,2 mL⨯4,1 mL⨯2,0.1 mL⨯2;5. 恒温水浴锅;6. 离心机;7. 电子天平;8. 分光光度计。
植物组织中游离氨基酸的鉴定(吕培银)一、实验原理层析技术是一种物理的分离方法,可以用来分离各类性质极为近似、用一般化学方法难以分离的化合物,如氨基酸、核苷酸、糖、脂肪酸、蛋白质和核酸等。
层析技术一般不需要很复杂的设备,操作简便,样品量可大可小,既可用于实验室的分析分离,又可用于工业生产中的制备分离,因此是近代生物化学领域中最常用的技术之一。
薄层层析是在薄层板上进行的层析,其分离物质的原理因薄层材料而异,可分为分配层析、吸附层析等。
如以纤维素粉制作薄层,则属分配层析;而以硅胶G制作薄层,则主要是吸附层析。
本实验以硅胶G制成薄层,用于分离鉴定植物组织中的游离氨基酸组分。
硅胶G中含有10%~15%的煅石膏粉作为黏合剂。
该混合物是微酸性的吸附剂。
由于各种氨基酸的极性不同,因而被固定相吸附的程度和在流动相中的溶解度各不相同。
层析时,随着流动相在固定相上流动,点在薄板上的混合氨基酸组分被不同程度地吸附、溶解(或解吸)、再吸附、再溶解(或解吸),从而以不同速度随流动相向前移动。
经过一段时间,即可将混合物各组分分离开。
一般来说,酸性氨基酸和中性氨基酸所受吸附力较弱,移动距离较长;碱性氨基酸所受吸附力较强,移动距离较短。
展层后用茚三酮溶液显色,将样品各显色斑点的R值与同时展层的标准氨基酸的R1值比较,即可判断样品中含有何种氨基酸。
二、操作步骤1.马铃薯提取液的制备30g去皮新鲜马铃薯加100mL80%乙醇,用组织捣碎机捣碎过滤,滤液用蒸发皿水浴蒸干,所得残渣加水溶解成30mg/mL的溶液。
2.制板称取1.8g硅胶G置于研钵中,加入6mL0.5%CMC溶液(可制6cm*10cm 薄板一块),研磨2~3min,然后倒在玻璃板上铺平,水平放置8~12h,在空气中干燥后备用。
用前需在110℃烘箱中活化30min。
3.点样取活化过的硅胶G薄板,用铅笔在距底边2cm水平线上轻轻地画一条线(画线时轻轻用力,以免划伤薄层表面),在线上确定相距约1cm的4个点,点距两边约1.5cm。
保健品超市中的植物提取物类产品种类与功效植物提取物类保健品是指通过植物提取物制作而成的保健品,其源自天然植物原料,以提取其中的有效成分,经科学加工制作而成。
植物提取物类产品在保健品市场中越来越受到消费者的关注和喜爱,因为它们被认为是天然、安全且有效的补充品。
本文将介绍保健品超市中常见的植物提取物类产品种类与功效。
1. 葡萄籽提取物葡萄籽提取物是从葡萄种子中提取得到的保健品原料,含有丰富的原花青素、多酚类化合物等抗氧化成分。
它具有抗氧化、增强免疫力、保护心脑血管等功效,可减缓衰老、改善皮肤质量以及预防心脑血管疾病等。
2. 金盏花提取物金盏花提取物是以金盏花为原料提炼而成的保健品成分,其主要功效为消炎、杀菌和促进伤口愈合。
金盏花提取物常被用于制作外用药膏、口服液等产品,可用于治疗皮肤炎症、促进创口愈合等。
3. 绿茶提取物绿茶提取物源自茶叶中的有效成分,主要包括茶多酚、咖啡因等。
绿茶提取物具有降脂、抗氧化、清热解毒、提神醒脑等功效,长期适量饮用对于改善皮肤质量、减肥以及心血管健康都有一定益处。
4. 大蒜提取物大蒜提取物是通过大蒜的加工和提取而得到的保健原料,其主要活性成分为大蒜素,具有抗菌、抗炎、降脂、抗血栓等功效。
大蒜提取物常被用于改善免疫力、预防心血管疾病、降低血脂等。
5. 西洋参提取物西洋参提取物是以正宗西洋参为原料提取得到的保健品成分,其中主要含有人参皂苷等活性成分。
西洋参提取物被认为具有改善免疫力、增强体力、提高抗疲劳能力等功效,常被用于保健品中以改善人体机能。
6. 甘草提取物甘草提取物是以甘草为原材料提取得到的保健品成分,其主要活性成分为甘草苷。
甘草提取物具有抗炎、镇咳、降低血脂等功效,可用于改善咽喉疼痛、缓解咳嗽等症状。
7. 枸杞提取物枸杞提取物是从枸杞中提取得到的保健品原料,含有丰富的多种维生素和氨基酸。
枸杞提取物具有滋补肝肾、明目养颜、提高免疫力等功效,长期食用有助于提高体质、改善肌肤状况以及增强抵抗力。
氨基酸是这样做成的!很多农业资源经过⼀定⼯艺可以提取氨基酸,并可制备成肥料,具有提⾼作物品质、抗逆性、增产等作⽤,经济效益和社会效益显著。
蛋⽩经过分解后形成氨基酸,蛋⽩分为植物性蛋⽩和动物性蛋⽩,也就是我们说的植物源氨基酸和动物源氨基酸。
植物源氨基酸常见的来源有⼤⾖、⼩麦、燕麦、⽟⽶等,动物源蛋⽩来源相对⽐较⼴泛,动物⽑发(⽻⽑、猪鬃等)、蚕蛹、动物⾎液、内脏、⽪⾻、低值鱼等都可被⽔解成可利⽤的氨基酸,⽽同样是植物源所含的氨基酸⽐例也⼤不相同,动物源的亦是如此。
⽐如,⽔解动物⽑发中含胱氨酸、丝氨酸较⾼,⽔解动物⽪⾻中含⽢氨酸、脯氨酸较⾼,动物⾎液⾥含亮氨酸、苯丙氨酸较⾼,⽟⽶、⼩麦中则含⾕氨酸较⾼。
01植物源氨基酸来源制备氨基酸肥料,⾸先要解决的问题是找到合适的制备氨基酸的原料来源。
肥料对蛋⽩品质的要求远低于饲料及⾷品,国内许多研究机构都以废弃蛋⽩(主要为动物⽑发、⽻⽑等)作为原料。
但⽬前国内专门针对动物⽑发进⾏收集的企业较少,产量不⾼,难以提供充⾜的现货资源。
⽬前国内⼤宗的⾼蛋⽩质原料⼀般是油料作物榨油后的饼粕。
⽬前我国市场销售的氨基酸肥多为⾖粕、棉粕或其他含氨农副产品。
⾖粕⾖粕是⼤⾖榨油后的加⼯副产物,含有丰富的蛋⽩质,饲料⽤⾖粕蛋⽩含量⾼达46%。
曾有研究专门以⾖粕为原料制备了⼀种黄⽠专⽤的氨基酸叶⾯肥,在选⽤合适的原料,科学的配⽐情况下,可以使黄⽠均衡⽣长,增产明显,黄⽠⼝感佳。
棉粕我国每年产棉籽1000万吨以上,提取棉油后的棉籽达600万吨,资源量全球第⼀。
棉粕是棉籽经过压榨、浸出等⼯艺提取油脂后得到的⼀种微红或黄⾊颗粒状物质,含粗蛋⽩质35%,粗纤维15%,且富含矿物质和维⽣素。
⽬前主要被⽤作动物饲料,因棉粕中的棉酚有⼀定的毒性,限制了其产品的应⽤。
曾有研究证明棉粕型氨基酸肥料对⼩麦⽣长发育有显著促进作⽤,能有效提⾼⼩麦株⾼、叶⾯积、叶绿素含量、⼲物质等指标。
02动物源氨基酸来源当下,研究⽐较热门的动物源氨基酸来源主要有⽑发、⾎液、鱼蛋⽩等。
植物体内脯氨酸含量测定植物体内脯氨酸含量测定是评估植物生理状态的重要方法,也是研究植物逆境适应性的关键指标。
脯氨酸是一种氨基酸,能够调节植物的生长发育和逆境响应。
因此,准确测定植物体内脯氨酸含量对于探究植物生理机制和优化植物生长具有重要意义。
脯氨酸是一种含有羧基和氨基的氨基酸,通常以游离态的形式存在于植物体内。
衡量植物体内脯氨酸含量的方法有多种,其中较常用的是酸水解法和直接检测法。
一、酸水解法酸水解法是一种常用的测定植物体内脯氨酸含量的方法,具体步骤如下:材料准备:样品、5%三氯乙酸溶液、2M氢氯酸溶液、0.2M醋酸钠缓冲液、酚酞指示液。
1. 取适量样品,磨碎成粉末,并过筛筛掉颗粒均匀的样品。
2. 取约0.2g的样品加入10ml 5%三氯乙酸溶液中,放在80℃恒温水浴中加热1小时。
酸水解旨在将脯氨酸从蛋白质中释放出来。
3. 将样品冷却后,在离心管中以8000rpm的速度进行离心5分钟。
4. 从上层液体中取出约1ml的提取液,放在烧杯中加入1.2ml的2M氢氯酸溶液,并在水浴中加热沸腾10分钟,旨在保持脯氨酸的游离态。
5. 再将烧杯中的液体冷却后,在其中加入1ml醋酸钠缓冲液和2滴酚酞指示液,并加入1ml 1M氢氧化钠溶液,旨在使酸碱度中和。
6. 最后,以0.1M硼酸溶液进行稀释,将反应液稀释至适宜的浓度,使用分光光度计测量脯氨酸的吸光度值,然后按一定的公式计算出样品中的脯氨酸浓度。
二、直接检测法材料准备:样品、4%硫酸溶液、10%二氧化硫溶液、巴氏试剂。
1. 取适量样品,磨碎成粉末,并称取约0.1g的样品加入10ml的4%硫酸溶液中,放在温度为80℃的恒温水浴中加热5分钟。
3. 从上层液体中取出约2ml的提取液,放在试管中,并加入10%二氧化硫溶液和巴氏试剂。
在这个过程中,二氧化硫旨在使脯氨酸分子与巴氏试剂分子结合,使过氧化氢水平升高。
4. 然后,将试管振荡混合,并用分光光度计测量波长为550nm处的吸光度值。
北京雷根生物技术有限公司
植物氨基酸(AA)提取液
简介:
氨基酸(Amino acid ,AA)是组成蛋白质的基本单位,也是蛋白质的分解产物。
动物肝脏、肾脏是氨基酸代谢的主要器官,故尿中氨基酸的变化最能反应肝、肾的生理状态,植物体内氨基酸含量对研究植物在不同条件下及不同生长发育时期氮代谢变化、植物对氮素的吸收、运输、同化及营养状况等有重要意义。
另外,氨基酸还能反映灼伤、伤寒等方面情况。
Leagene 植物氨基酸(AA)提取液主要用于裂解植物组织,提取植物组织、食品、药品等中的总游离氨基酸含量。
该试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:
自备材料:
1、 去离子水或无氨蒸馏水
2、 离心管或试管
3、 匀浆器或研钵
操作步骤(仅供参考):
1、植物样品:取新鲜植物组织,清洗干净,擦干,切碎。
2、加植物氨基酸提取液,匀浆或研磨。
3、用去离子水稀释,混匀,用滤纸过滤,滤液即为氨基酸粗提液,保存备用。
4、如果样品中含有较高浓度的氨基酸,可以使用植物氨基酸提取液进行恰当的稀释。
注意事项:
1、 实验材料应尽量新鲜,如取材后不立即使用,应存于4℃。
2、 植物氨基酸提取液应密闭保存,避免挥发。
3、 所测样本的浓度过高,应用植物氨基酸提取液稀释样品。
有效期:12个月有效。
编号 名称 CS1011 Storage 植物氨基酸提取液 500ml RT 使用说明书 1份。