化学检测实验室的方法验证与确认

一、目的：规范药品检验方法确认与验证的管理，证明采用的方法适合相应的检测要求及在实验室条件下的适用性，保证检验结果准确、可靠。

二、适用范围：适用于中药和化学药品（包括物料和产品）的理化分析方法和仪器分析方法的确认与验证。

不适用于中药和化学药品（包括物料和产品）微生物分析方法的确认与验证。

三、相关职责：QC班组长：QC班组长根据检验方法的来源确定开展方法确认或验证。

由其本人或者其他有经验的检验人员起草方案；负责确认或验证方案的培训；安排有经验的人员参与方法确认或验证过程实施；对确认或验证过程中出现的偏差要严格按照相关管理规程的程序执行，如需要提出变更申请；对确认或验证工作中出现的问题及时纠正并记录；总结确认或验证报告。

QC主管：负责审核检验方法确认或验证方案，并对方案的执行过程进行追踪；负责组织偏差的调查，变更的审核；负责总结报告的审核。

化验室QA：监督各项目按照已制定的方案进行；参与确认或验证过程中的偏差调查；对提出的变更进行评估，确认变更的是否成立，跟踪变更实施。

QA主管：负责审核检验方法确认或验证方案，确保其法规符合性；参与偏差的调查，变更的审核；负责总结报告的审核。

验证专员：审核检验方法确认或验证方案；审核总结报告；负责验证证书的发放；负责方法确认或验证方案、记录和报告的整理、存档。

质量管理负责人：批准检验方法确认或验证方案；批准方案实施过程中出现的偏差和变更；批准总结报告。

四、制定依据：《药品GMP指南》（质量控制实验室与物料系统）、《药品生产质量管理规范》（2010年修订）、《中国药典》（2020年版）、《化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则》、ICH分析方法验证：正文和方法学Q2（R1 ）、中国药品检验标准操作规范（2010年版）（原子吸收分光光度法）。

五、内容：1、术语1.1方法验证方法验证系指根据检验项目的要求，预先设置一定的验证内容和验证标准要求，并通过设计合理的实验来验证所采用的分析方法是否符合检验项目的要求。

ISO170252024检测方法及方法的确认程序验证和确认是确保检测方法的准确性和可靠性的重要步骤。

验证是指通过比较检测方法在特定条件下的结果与已知结果进行比较，以确定方法的准确性、精确性和可重复性。

确认是指通过实验室内或实验室间比对来评估检测方法的准确性和可靠性。

为了有效地进行方法的确认程序，实验室应当采取适当的程序和文件记录。

这些文件记录应包括确认的目的和范围、实验室人员的职责和授权、实验室设备和仪器的校准和验证记录、样品的准备和处理方法、数据分析和解释方法等。

在进行方法的确认程序时，实验室应首先确保实验人员具备适当的培训和经验，才能执行确认实验。

确认实验的过程中，实验室应使用适当的仪器和设备，并针对不同的检测项目制定相应的确认方案。

确认方案应包括实验的目的、范围、实验的步骤和条件、验证结果的判定准则等内容。

实验室在确认实验过程中需要注意以下几点。

首先，实验室应尽可能模拟实际样品的条件，保证实验结果的可靠性和准确性。

其次，实验室应对已确认的方法进行监控，确保实验过程和结果的稳定性。

最后，实验室还应建立适当的纠正和预防措施，以确保任何在确认实验过程中发现的问题得到及时处理和解决。

在完成确认实验后，实验室应对实验结果进行分析和解释。

实验室应确定实验结果是否符合预期值，并将结果与其他确认实验的结果进行比较。

如果确认实验结果与已知结果一致，则可认为该方法的准确性和可靠性得到了确认。

如果确认实验结果与已知结果存在差异，则实验室应进行进一步的分析和调查，以确定原因并采取相应的纠正措施。

实验室方法确认实验室方法确认，是对实验室所采用的方法进行科学认定的过程。

它包括对方法的准确性、可靠性、稳定性、可重复性、可维护性等方面的评估。

实验室方法确认是实验室质量管理体系的重要组成部分，也是保证实验室检测结果准确可靠的重要环节。

确定需要确认的方法：实验室根据自身的业务范围和检测需求，确定需要确认的检测方法。

这些方法可能包括国家标准、行业标准、客户指定方法等。

制定确认计划：实验室根据方法的特性，制定详细的确认计划。

计划应包括方法的研究设计、实验操作步骤、数据处理和分析方法、不确定度评估等内容。

实施确认实验：实验室按照确认计划进行实验操作，并对实验数据进行详细记录。

在实验过程中，要对实验的重复性、稳定性、可靠性等方面进行评估。

分析确认结果：实验室对实验数据进行处理和分析，评估方法的准确性、可靠性、稳定性等性能指标，并形成确认报告。

审批确认报告：实验室将确认报告提交给相关领导或客户进行审批，以确保报告的有效性和可靠性。

更新确认记录：实验室应定期对确认记录进行更新和维护，以确保方法的持续性和有效性。

提高实验室检测结果的准确性和可靠性：通过实验室方法确认，可以保证实验室所采用的检测方法具有准确性、可靠性、稳定性等性能指标，从而提高实验室检测结果的准确性和可靠性。

满足法规和客户要求：实验室方法确认是实验室质量管理体系的要求之一，也是满足相关法规和客户要求的重要手段。

通过实验室方法确认，可以保证实验室的检测结果符合相关法规和客户的要求。

提高实验室的竞争力：通过实验室方法确认，可以提升实验室的技术实力和管理水平，提高实验室的竞争力，有利于实验室在激烈的市场竞争中脱颖而出。

促进实验室持续改进：通过对方法的确认过程进行总结和分析，可以发现实验室存在的问题和不足之处，为实验室的持续改进提供依据和方向。

实验室方法确认是保证实验室检测结果准确可靠的重要环节，对于提高实验室的质量管理水平和技术实力具有重要意义。

高效液相色谱仪（HPLC）是一种广泛应用于化学、生物和医药等领域的分析仪器，对于实验室中的科研人员来说具有至关重要的地位。

方法验证和方法确认的区别与联系任何分析的目的都是为了获得稳定、可靠和准确的数据;方法验证在其中起着极为重要的作用..方法验证的结果可以用于判断分析结果的质量、可靠性和一致性;这是所有质量管理体系不可分割的一部分..一般在下列情况下;要求对分析方法进行验证、确认或称证实或重新验证：1首次用于常规检测前；2转到另一个时；3对于验证过的方法;其条件或方法参数发生变化时例如;仪器性能参数发生改变或样品基质不同时;并且这种变化超出了方法的原适用范围..对实验室有影响的法规和质量管理一般都要求进行方法验证..有的法规中直接使用“验证或确认”一词;并列出特定参数;也有的法规用这样的陈述暗示验证要求——“检测方法应适合于预期用途..”1. 国内主要法规标准国内第三方检测机构一般均非标准制修订机构;方法验证或确认的来源基本来自资质认定或实验室认可的要求;主要依据如下：2.1 CNAS-CL01:20062.2 实验室资质认定评审准则l 5.3.2 实验室应确认能否正确使用所选用的新方法..如果方法发生了变化;应重新进行确认..实验室应确保使用标准的最新有效版本..l 5.3.5 实验室自行制订的非标方法;经确认后;可以作为资质认定项目;但仅限特定委托方的检测..2.3 司法鉴定机构资质认定评审准则2.4 CNAS-CL02:20132.5 CNAS-CL08:20132.6 其他CNAS-CL10:2012检测和校准实验室能力认可准则在化学检测领域的应用说明：5.4.2 方法的选择：b 实验室应对首次采用的检测方法进行技术能力的验证;如检出限、回收率、正确度和精密度等..如果在验证过程中发现标准方法中未能详述但影响检测结果的环节;应将详细操作步骤编制成作业指导书;作为标准方法的补充..当检测标准发生变更涉及到检测方法原理、仪器设施、操作方法时;需要通过技术验证重新证明正确运用新标准的能力.. 5.4.5 方法确认： a 任何对标准方法的偏离;都必须进行实验室确认;即使所采用的替代技术可能具有更好的分析性能.. b 实验室应通过试验方法的检出限、精密度、回收率、适用的浓度范围和样品基体等特性来对检测方法进行确认..CNAS-CL09:2013要求：标准方法引入检测之前;实验室应证实能够正确地运用这些方法;并未清晰说明如何证实;而对非标方法的确认提供的参考资料;比如SN/T 3266-2012食品微生物检验方法确认技术规范；CNAS-CL18:2013规定标准方法必要时才进行技术验证；CNAS-CL44:2013和CNAS-CL56:2014仅规定非标准方法包括实验室自制定方法才需要确认；CNAS-CL55:2014仅规定：以软件方式、物理方式或采样方式等标准未明确的方法进行低辐照度试验时;实验室应对该方法进行确认..除化学领域明确规定应对标准方法进行确认或验证外;其他领域仅要求对非标方法进行确认或验证;或者未做规定;而且对确认和验证是否有区别也未作说明..但是CNAS-CL52:2014是与CNAS-CL01:2006同步应用的;具有等同效力;因此其他领域如未对标准方法确认或验证进行规定的;应参考CNAS-CL52执行..2. 国外主要法规标准2.1 美国FDAcGMP药品动态生产质量管理规范和GLP临床前研究实验室质量管理规范等法规要求必须进分析方法的验证..美国cGMPs 在211.165e和211.194 两小节中提出了验证要求：l 165e：应用检测方法时;应建立并记录准确度、灵敏度、专属性以及重现性..这类验证及文件制作应按194a2完成；l 194a2：实验室的记录应包含用于样品检测的每个方法的声明..声明中应指明建立方法的数据位置;这些数据应能证明该检测方法在应用于产品检测时符合特定的准确度和可靠性标准要求..所有检测方法的适用性应在实际应用条件下得到证实；l 194b：如对应用于检测的已确认方法有任何变更;应保存完整的变更记录..该记录中应包含变更原因以及相关数据;以证实方法变更后的样品检测结果至少能达到原方法相同的准确度和可靠性；l FDA GLP 法规21 CFR 第58 部分并未用到“验证”一词;但是依据58.113 中的要求;检查员需要检查验证研究记录：“应采用合适的分析方法进行检测”;其中“合适的”即意味着验证..并且FDA 的生物分析方法验证指南中规定临床前毒理研究也属于验证范围；l FDA 关于生物利用度和生物等效性要求的法规21 CFR 320第29节中规定：a 用于体内生物利用度研究以检测体液或排泄物中活性药物成分或治疗成分检测的分析方法;或用于急性药理作用检测的方法;应证明其具有准确性和足够的灵敏度以及恰当的精密度;能满足体内的活性药物成分/治疗成分或其代谢产物的实际浓度的检测要求..2.2 药品检查协定和药品监察检查合作计划PIC/SPIC/S 的使命是“领导制定、实施和维护国际性的、统一的药品生产质量管理规范GMP标准以及药品领域检查工作质量体系”..这一使命通过以下手段得以实施：制定和推广统一的GMP 标准和指导文件；培训主管部门、尤其是检查员；评审检查活动；以及促进主管部门和国际组织的合作和网络化..目前;约有50个政府组织参加了PIC/S;包话所有的欧盟成员国..许多新的成员国还没有按照PIC/S GMPs建立自己的GMP 法规..PIC/S 的GMP 与欧盟的GMP 指令非常相似..两个文件都在第6.1.5 部分以相同的文字规定了分析方法验证的要求：分析方法应经过验证..申请上市许可的所有检测均应按照批准的方法进行..在PIC/S 的实验室现场检查指南中包含检查员检查质量控制实验室时的一些提问..这些问题包括：l 方法验证是不是验证总体计划的一部分l 有没有通用的方法验证SOP 方法验证报告是否经过正式批准l 是否明确验证目的l 是否按ICH规定的参数对每一种方法进行完整的验证并记录l 是否规定了每种方法的接受限度并能符合该限度规定2.3 国际协调会议ICH国际协调会议ICH发起于1990 年;汇集了欧盟、日本和美国的监管机构和这三个地区的制药行业专家;一起讨论产品注册方面的科学和技术问题..ICH 出版的指导原则;有些被成员国如欧盟写入法律;有些被国家权力机构如美国FDA推荐为指南..其中;最为重要的ICH 文件是活性药物成分的GMP 指南..在第12章中规定了方法验证的要求：应对分析方法进行验证;所用方法收载于相关的药典或其他认可的标准参考文件中的除外..所有检测方法均应在实际使用条件下证实其适用性；实施分析验证的程度应能反映分析的目的以及活性药物成分的生产工艺状况；开始验证分析方法前;应考虑对分析设备进行适当的确认..2.4 美国药典USP美国药典USP为具体的应用制定方法;并针对FDA 监管的行业内不同的分析特点制定通则..根据联邦食品药品和化妆品法案501 部分的规定;USP 方法构成法定标准P 制定了两个与方法验证有关的通则..通则<1225>是“法定方法的验证”..该通则中给出了用于新方法验证的各种参数..通则中的建议可以被药品实验室用作自行制定方法的验证..通则<1226>是“法定方法的确认”..该通则用于实施药典和标准方法的实验室..这些内容也适用于实验室应用其他实验室验证过的方法..2.5 ISO/IEC 17025同CNAS-CL01:2006检测和校准实验室能力认可准则以上国内外法规标准中多次出现验证、确认和证实三个术语;由于国内翻译问题;经常在标准中将确认和验证混用或等同..正确的翻译：Verification译成确认或证实;Validation译成验证;建议参考美国USP..3. 验证和确认的定义3.1 方法验证Validation of methodUSP：方法验证是一个通过实验室研究来证明程序的性能参数符合期望的分析应用要求的过程..ICH：分析方法验证的目的是显示分析方法适用于它所期望的应用目的..FDA：方法验证是一个阐述分析方法适合于其使用目的的过程..3.2方法确认Verification of methodUSP<1225>：USP-NF所收载方法的使用者不需要验证这些方法的准确性和可靠性;但需要确认这些方法在实际使用条件下的适应性..USP<1226>：确认包括所涉及方法的性能参数;如那些在<1225>中描述的;以建立恰当的、相应的数据;而不是重复验证的过程..FDA：出现在USP中的方法被认为已验证;对于法定方法;厂家必须阐明该方法在实际使用情况下的状态..总体来讲;方法验证是阐明方法适合于它使用目的的一个过程;方法确认是通过已验证的方法进行检测的条件确实适合于该已验证方法的过程..、4. 参数和试验4.1 方法验证的参数USP<1225>规定实验室应采用试验方式进行方法验证：“应通过实验室的研究制定成一定的分析方法验证程序;证明方法的性能参数符合预期的分析应用要求..”不同国家和国际委员会的工作组都对方法验证所要求的试验作出了规定;这些在中都有阐述..不幸的是;一些定义在不同的组织间差异很大..为了达到化的目的;ICH 来自美国、欧洲和日本的行业和监管机构代表定义了分析方法验证的参数、要求和方法..表1 典型化学分析方法验证参数的选择注：1依据GB/T 3358.2-2009统计学词汇及符号第2部分：应用统计 IDT ISO3534-2:2006和GB/T6379.1-2004测量方法与结果的准确度正确度与精密度第1部分:总则与定义 IDT ISO5725-1:1994中规定“准确度”的定义为正确度和精密度的组合;而国内目前部分标准中包括上表的“准确度”仅等同GB/T 3358.2-2009中的“正确度”;所以上表的准确度与正确度同义;此差异主要是由于国内标准制订引用术语不严谨造成..2回收率是表示准确度/正确度的一项指标；3再现性亦称复现性、重现性；4由于重复性和再现性条件均为精密度的两种极端条件;因此引出中间精密度这一术语;具体定义见GB/T 3358.2-2009..CNAS-CL01:2006和CNAS-CL10:2012对方法确认的具体参数描述已经与表1类似;但确认终究不是验证;因此一般要求对非标准方法参照表1进行验证;而标准方法的确认则适当采用简化程序..至于每项参数的验证试具体如何操作;可参考本文后的相关参考文献;这里不做过多阐述..4.2 方法验证的步骤某个具体方法的有效性应通过实验加以证明;一般使用与常规分析的未知样品接近的样品或标准品进行验证试验..其准备和执行应按照验证计划进行;最好写成作业指导书..图1为方法验证的参考步骤..图1 方法验证常规步骤5. 方法确认证实ISO/IEC 17025 要求：“应优先使用以国际、区域或国家标准发布的方法..”;这些标准方法被认为已经得到验证..因此;许多技术人员错误地认为标准方法不需要在实验室中做任何进一步的验证、证实或试验即可投入使用 FDA CGMP 法规在21 CFR 211.194 a2中规定：“如果应用的方法收载于现行的美国药典或其他认可的标准方法中;或在批准的新药应用中有详细方法且未改变这一参考方法时;有指明方法和参考文献的声明即满足要求..所有检测方法的适用性应在实际应用条件下得到证实..”ISO/IEC 17025 在5.4.2 中有类似的要求：“在引入检测或校准之前;实验室应证实能够正确地运用这些标准方法..如果标准方法发生了变化;应重新进行证实..”这里明确了标准方法只要不发生变更;不需要进行验证;但实验室应确认其有能力成功运行该方法..当决定选择什么样的证实方式最好时;问题又来了..是否需要重做部分验证试验还是全部的验证试验都要重做;或者仅仅系统适用性试验或质控样品结果满意是否足够;这些都不清楚..USP 在通则<1226>法定方法的确认中回答了这些问题;给出的建议适用于法定方法和标准方法的实施;关键的建议有：1.通过系统适用性试验证明实验室和系统的性能2.评价方法的临界性和复杂性3.选择最重要的方法性能参数4.根据方法的临界性和复杂性;重复1～3 个最为重要的验证试验1.使用参考标准或标准物质参考物质进行校准；2.与其他方法所得的结果进行比较；3.实验室间比对；4.对影响结果的因素作系统性评审；根据对方法的理论原理和实践经验的科学理解;对所得结果不确定度进行的评定..与内部制定方法的验证相同;标准方法的确认和评价也应该遵循文件化的程序;如确认计划或作业指导书..法定/标准方法的确认过程见图2..图2 方法确认的参考过程那么;确认参数和试验该如何选择呢参数和试验的选择与应用类型相关;图3为USP <1226>为特定应用推荐的确认试验..图3 USP <1226>为药物分析推荐的确认试验图4为AOAC 发布按ISO/IEC 17025 实施标准方法时建议采取的确认试验..图4 AOAC 为特定的应用推荐的确认试验相对于方法验证来说;方法确认类似于方法验证的简化版;且方式更灵活..但是实验室最终该如何做好方法验证或确认;还需要各实验室对相关法规标准及参考文献进行深入的研究;制定适合自身的作业指导书并严格执行;才能在应对认证认可和技术发展两个层面实现双提高..最后;将方法验证、确认和转移简单总结如下：表3 方法验证、确认和转移总结。

1 目的为确保客户的需要，保证本中心使用的检测方法准确、现行和有效。

2 适用范围适用于本中心所有检测方法(包括抽样方法)。

3 职责3.1技术主管负责检测方法的确认和审批，负责新方法的制定。

3.2质量主管协助技术主管做好检测方法的确认和审批工作。

3.3技术主管负责确保所有检测方法正确、有效。

3.4检测人员负责新检测方法及非标方法的建立以及方法确认和验证工作。

3.5质量监督员负责对方法的选定、确认和审批进行监督。

4 程序4.1检测方法的选择4.1.1中心应采取满足需要并适用于所进行检测的方法，包括抽样方法。

中心应对使用的检测或校准方法实施有效的控制与管理，明确每种方法的投入使用时间，并及时跟进检测或校准技术的发展，定期评审方法的有效性。

4.1.2优先使用国家标准、行业标准、区域或国际标准，并确保使用标准的最新有效版本，除非该版本不适宜或不可能使用，对标准方法的补充都制定成附加细则加以补充，编制成文件列入作业指导书中，以确保使用的一致性。

中心对能力范围内的标准每半年进行一次查新，查新后及时发布通知，保证标准方法为现行有效版本。

4.1.3对接受国家或地方政府的市场抽查检测时，按国家或地方政府指定的方法进行。

如果国家或地方政府没有指定方法，中心应优先选择国家标准、行业标准、地方标准，按照相关技术规范或者标准，使用适合的方法和程序实施检测活动。

4.1.4 综合办公室在进行合同评审时，应确定使用的检测方法。

当客户未指定方法时，中心应选择国际标准、区域或国家标准，或由知名的技术组织或有关科学书籍和期刊公布的，或由设备制造商指定的方法。

如果中心制定的方法或中心选用的其他方法经验证能满足预期用途，也可以使用。

4.1.5 中心所用的方法应通知客户，并在合同评审时，征得客户书面同意，在开始检测工作前，中心应确认能够正确地运用标准方法，如果标准方法发生变化，应重新进行确认。

4.1.7对于化学检测，有必要防止实验室器皿对检测样品或标准溶液的污染。

附件2生态环境监测机构资质认定化学监测方法验证技术规定中国环境监测总站2023年12月1 适用范围 (4)2 规范性引用文件 (4)3 术语和定义 (4)4 化学监测方法的分类 (5)5 基本条件确认 (6)6 方法性能指标的验证 (8)7 实际监测 (12)附件A（资料性附录）化学监测方法验证典型案例 (14)本技术规定是《生态环境监测机构资质认定方法验证通用技术指南》（以下简称《通用技术指南》）的配套文件，是生态环境监测机构开展化学监测方法验证的指导性文件。

旨在规范生态环境监测机构化学监测方法的验证活动，确保方法验证过程科学合理，评价结论客观可靠。

本技术规定为首次发布，依据《通用技术指南》，综合考虑生态环境监测中水和废水、环境空气和废气、海水、土壤、沉积物、固体废物等要素的化学监测方法特性，并结合操作实践经验而制定。

主要参考《环境监测分析方法标准制订技术导则》（HJ 168-2020）、《合格评定化学分析方法确认和验证指南》（GB/T 27417-2017）和《化学分析方法验证确认和内部质量控制要求》（GB/T 32465-2015）等。

如有相关标准规范发布，则以其标准规范要求为准。

本技术规定从基本条件确认、方法性能指标的验证、实际监测3个方面，对生态环境监测机构开展的化学监测方法的验证活动，从操作层面给出了指导性的建议。

本技术规定的附录A为资料性附录。

本技术规定由中国环境监测总站组织编制。

本技术规定主要起草单位：中国环境监测总站、天津市生态环境监测中心、山西省环境监测保障中心、海南省生态环境监测中心本技术规定主要起草人员：王琳、米方卓、冯丹、陈表娟、杨炯、李静、关玉春、郭晶晶、林冬本技术规定自2024年5月1日实施，由中国环境监测总站解释。

生态环境监测机构资质认定化学监测方法验证技术规定1 适用范围本规定明确了生态环境监测机构（以下简称“机构”）开展化学监测方法验证活动的技术要求，包括基本条件确认、方法性能指标的验证和实际监测。

化学原料药的分析方法验证转移与确认摘要：分析方法的适用性取决于分析方法的验证、转移传递和确认，以确保最终结果的一致性，提高可靠性。

由于方法验证、转移和验证的概念和适用范围不同，任何分析和验证的目标是获得稳定性和可靠的准确数据的方法，方法验证起着非常重要的作用。

无论使用哪种方法，分析方法通常需要验证转移与确认。

在此基础上，有必要详细说明其联系方式和适用范围，化学原料药检验提供参考。

关键词：化学原料药；分析方法；验证；转移；确认分析前言：对于中国的化工原料来说，欧美国家是重要的出口目的地。

结合公司实际情况，审查化学原料药的分析方法，提供相关证明文件和材料。

分析方法的验证转移与确认的目的是证明所采用的分析方法适合于相应的测试要求和目的，获得准确的测试结果。

通过化学分析法的验证，转移，确认，可以有效地证明质量管理。

一、化学原料药的分析方法验证转移与确认概念分析（一）方法验证方法验证的核心是通过实验室设计和测试，验证方法对预期用途的适用性。

在医药品的研究开发中，有必要根据产品的变化调整品质管理方法。

在决定质量方法的时候，公司还必须对证明方法可以有效控制产品质量的方法进行全面检查。

1.方法转移方法转移的概念包括三个要素：方法设置实验室、方法验收实验室和比较测试。

方法转移在实验室获得的结果和使用标本化方法的实验结果的关联性。

测试样本的数量与方法的重要性和复杂性有关，并且接收实验室是否具有实施该方法的经验。

在转移方法之前，应注意确保接受该方法的实验室工作人员详细了解该方法涉及的关键参数。

制定详细的动员程序也很重要，以确保双方实验室人员之间的良好沟通。

（三）方法确认在应用分析方法时，药品检验实验室不需要验证方法，但必须确认方法，以证明实验室能够正确应用药典方法。

待确定的具体内容没有明确有效的规定，只能通过方法本身的特点和检查员的专业知识进行确认，并由实验室进行操作。

以下是决定需要做什么的有用参考：方法本身的复杂性、方法的关键步骤、操作和影响结果的关键方法，以及验证方法复杂性的最重要方法的选择参数。