铁皮石斛组织培养与栽培技术研究进展

铁皮石斛组培快繁技术研究进展作者：王朝雯来源：《现代农业科技》2020年第11期摘要; ; 铁皮石斛是濒危药材之一，本文通过查阅铁皮石斛相关文献，对其组织培养繁殖技术研究现状进行了综述，以期为铁皮石斛组培快繁技术研究提供参考。

关键词; ; 铁皮石斛;组织培养;快繁技术中图分类号; ; S567.239; ; ; ; 文献标识码; ; A文章编号; ;1007-5739（2020）11-0068-01; ; ;开放科学（资源服务）标识码（OSID）铁皮石斛为多年生草本植物，可有效提升人体免疫力，具有延缓衰老、增强血管扩张的效果。

由于铁皮石斛种子小且没有胚乳，只有在真菌环境下才有萌发的可能，因而栽培难度较大[1]。

组织培养是快速繁殖铁皮石斛的主要方式，目前国内外专家进行了大量研究，并取得了较为显著的成果。

1; ; 外植体的选取外植体除种子外，还有无菌幼苗茎段。

饶宝蓉等[2]通过分析发现，以种子作为外植体较茎段外植体其无菌系的建立效率较高，种子诱导感染率更低。

同时，种子外植体的长势更加整齐。

总体来说，选取种子作为外植体较为理想。

2; ; 初代培养基选择培养基选择是组培的关键，不同的物种、品种以及外植体材料所采用的培养基也应有所区别。

同时，处于不同培养阶段、基于不同目的而进行的培养，应从培养基上进行区分。

2.1; ; 基本培养基诱导培养基是常见的初代培养基，也可采用分化培養基作为初代培养基。

铁皮石斛有多种培养基，可根据外植体的不同而选择适合的培养基。

林江波等[3]采用SRR检验方法对各处理因子进行检验后发现，从原球茎诱导率方面分析，MS培养基与1/2MS培养基并没有明显差异，而二者与VW培养基的诱导率差异较为明显。

杨立昌等[4]对铁皮石斛的愈伤组织情况进行了分析，结果发现，与MS培养基相比，1/2MS培养基的出芽率更高，表明在激素浓度适合的情况下，培养基的盐含量较低对不定芽的分化更加适合。

2.2; ; 激素及添加物有利于铁皮石斛愈伤组织的培养基种类较多，NAA与IBA等激素的应用较为常见;此外，还有6-BA等激素。

铁皮石斛组织培养研究进展1、1 种子萌发1.2 基本培养基铁皮石斛种子在N6，改良N6，MS , 1 / 2 MS , SH 、KS 、VW 、KundsonC , 1 / 2N6，White等培养基上均可萌发。

赵天榜等比较风、MS 等14 种培养基对铁皮石斛种胚成苗率的影响，除残外，所有的基本培养基均优于其减半培养基，其中以N6最好，SH 、Kn 、MS 次之，l /2MS 、1 / 2 Vw 最差。

曾宋君等田将铁皮石斛种子在SH 、改良N6、MS 、KS 、VW 、KundsonC 培养基中培养，得出最适培养基为改良N6或自制PT 培养基。

罗吉凤等比较了*** / 2MS 、1 / 2 N6和White 培养基对铁皮石斛种子萌发的影响，30d 种子发芽率均达到95 % ，但1 / 2MS 培养基上所萌发的原球茎较大。

1.3 激素在培养基中添加一定浓度的NAA 可促进种子的萌发，浓度以0.2 一0.5mg/L最适合胚的萌发和生长，过高起抑制作用。

2 , 4-D对胚的萌发起抑制作用。

6 一BA 对胚萌发后的生长起抑制作用。

KT 、IAA对胚萌发和成苗的影响不大，当浓度超过1mg/L 时，对胚萌发和成苗起抑制作用。

ABA 有抑制种子萌发和抑制植物生长的作用，但张铭等发现ABA 能显著提高铁皮石斛原球茎的质量，浓度以0.5mg/L为最佳。

1.4 天然添加物在培养基中添加适量的马铃薯汁、香蕉汁、椰乳可促进铁皮石斛种胚的萌发，但张玲等认为香蕉提取物和椰乳对种子萌发和正常发育有不利影响，干扰其正常发育过程。

1.5 炭源在组培过程中适当添加活性炭，可以吸附代谢过程中产生的废弃物，防止组织褐变，并刺激胚胎的发生与生根，可加人2 ％蔗糖。

曾宋君等在改良N6＋NAA 0.2mg/L 的最适培养基上，发现以白糖、片糖为炭源时，胚萌发和成苗的效果比蔗糖好，这可能是白糖、片糖中含有适合胚萌发和成苗的矿质元素2 原球茎增殖2.1 基本培养基铁皮石斛原球茎增殖可以1/2 MS，MS等作为基本培养基。

铁皮石斛组培快繁技术的研究分析摘要：铁皮石斛的种子极为细小、无胚乳，自然条件下需要与某些真菌共生才能萌发，因此自然繁殖率很低，不易获得实生苗；而传统的分株、杆插等方式的繁殖率极低，加上人为的过度采挖和破坏生境，其资源已濒临灭绝，被国家列为重点保护的药用植物之一。

文章基于此，对铁皮石斛组培快繁技术进行综述性分析。

关键词：铁皮石斛；组培快繁；技术研究植物组织培养技术是20世纪初，以植物生理学为基础发展起来的一门新兴技术。

植物组织培养是指在离体条件下利用人工培养基对植物器官、组织、细胞、原生质体等进行培养，使之生长、繁殖或长出完整植株的技术和方法。

目前，植物组织培养技术己经在科学研究以及实际生产上得到非常广泛的应用。

该技术不仅具有缩短育种年限、加快繁殖过程，改良品质，节省空间，减少劳力，并可全年进行生产，不受季节、气候等自然条件限制等特点，而且组培苗的体积不大，方便运输和资源交流。

在促进农林业现代化方面展现出了巨大的经济、社会和生态效益，被认为是一项很有潜力的高新技术。

铁皮石斛种子细如粉尘，一个果实内所含种子达100万粒之多，由于缺乏胚乳，种子需与真菌共生才能正常萌发，自然条件下萌发率非常低。

因此，虽然分布广，但生活环境狭窄，产量还不能满足目前药用需求，利用组织培养技术繁殖试管苗是解决铁皮石斛种苗的有效途径。

铁皮石斛的组织培养中有几个关键的时期：原球茎的诱导、原球茎的继代增殖、壮苗的培育。

根据这几个重要的时期及其组织培养的外界条件，我国研究人员在铁皮石斛组培快繁技术方面的研究取得了一定的进展。

在20世纪70年代谭文澄等就进行铁皮石斛组织培养研究并获得完整植株；何静波等尝试通过种胚培养繁殖铁皮石斛；左春芳等于1985年开始研究铁皮石斛的组织培养，并取得进展。

1外植体的选择在植物组织培养中，外植体的选择是十分关键的因素，不同的取材部位和时期，培养的结果也不一样。

目前，诱导铁皮石斛原球茎采用的外植体主要有种子种子、无菌苗幼苗茎段、根尖、不定芽、幼叶，及人工种子等。

铁皮石斛组织培养与栽培技术分析作者：杨洪兰来源：《农民致富之友》2018年第07期一、铁皮石斛组织培养技术铁皮石斛种子在萌发的过程中会受到多种因素的影响，如果不能对这些因素进行有效控制变化铁皮石斛种子的发芽率，进而影响铁皮石斛的产量和质量。

有部分学者对种龄与萌芽的关系进行研究之后可以发现，在采用组织培养技术进行萌芽操作时，选用了2-6月种龄的种子进行分别培养，其中种龄较大的种子在培养操作中表现出明显的优势，无论是萌芽时间还是萌芽率都表现为种龄越大萌芽所用时间越短，萌芽率越高。

由此可见，在进行组织培养时需要优先选择种龄较大的种子进行培养。

另外，在培养基中添加适当的NAA、IAA、IBA激素对试管苗培养的根系生长具有促进作用，为此，在组织培养的过程中为了提升幼苗的根系生长率，可以根据实际培养情况在培养基中适当添加激素，进而达到增收增产的目的。

二、铁皮石斛的栽培管理技术1、炼苗与出瓶炼苗指的是将培育之后的试管苗移植到炼苗房，让其在炼苗房内栽植3周左右的时间，在此期间内，实现试管苗对自然环境的适应的整个过程。

经过一段时间的培育，幼苗的叶子呈现浓绿色且根系生长到一定长度之后便可出瓶栽植。

试管苗在炼苗房内培育2-3三周时间之后，观察幼苗的生长状况，当增值代数为10代以内，幼苗长至3cm，长出3节以上肉质茎，且叶片数量达到5片左右，颜色正常的情况下方可出瓶。

除此之外，对根系的生长状态也具有一定的要求，具体表现为根系表皮应呈现白中带绿的颜色，根系长度在3cm以上，且数量在5根以上，不存在黑色根须和畸形根系。

出瓶的具体操作方式如下：为了减少出瓶操作不当为幼苗带来损伤，需要将培养基和幼苗同时取出，之后将发育良好的幼苗与被污染幼苗、根系较少的幼苗分开处理。

正常发育的幼苗在取出之后需要先使用自来水清洗掉表面的琼脂，避免因琼脂残留导致的根系腐烂现象，待表层的琼脂清洗干净之后，使用清水进行再次冲洗。

而对于根系发育不良的幼苗来说，则需要采用生根粉进行浸泡，待根系发育完全之后，方可进行下阶段的栽植操作。

铁皮石斛栽培、组培技术研究进展方妙听;张青华;王军;李枝林【摘要】The topic of this paper summarized the in bionomics of Dendrobium candidum, the artificial cultivation and tissue cultivation and Medicinal value. Summarizes the research achievements in recent years, a number of research units and indi- viduals in Dendrobium candidum breeding techniques, Including seed germination, protocorm differentiation, seedling and rooting culture, In order to provide a reference for future breeding, look into the future the development of Dendrobium candidum.%综述了铁皮石斛的植物学特性、栽培技术、组培技术、药用价值。

总结了近年来多个科研单位及个人在铁皮石斛育种技术上所取得的研究成果，包括种子萌发、原球茎分化、壮苗以及生根培养，以期为今后的育种工作提供借鉴。

并对未来我国铁皮石斛的研究发展进行了展望。

【期刊名称】《安徽农学通报》【年(卷),期】2012(018)019【总页数】4页(P40-43)【关键词】铁皮石斛;栽培;组培;药用价值【作者】方妙听;张青华;王军;李枝林【作者单位】云南农业大学园林园艺学院,云南昆明650201;云南农业大学园林园艺学院,云南昆明650201;云南农业大学园林园艺学院,云南昆明650201;云南农业大学园林园艺学院,云南昆明650201【正文语种】中文【中图分类】Q949.718.43铁皮石斛(Dendrobium candidum)是兰科石斛属多年生附生草本植物，被誉为“中华九大仙草(铁皮石斛、天山雪莲、千年人参、百二十年首乌、花甲之茯苓、苁蓉、深山灵芝、海底珍珠、冬虫夏草)”之首，具有较高的药用价值。

铁皮石斛茎段组织培养与栽培摘要: 为试验铁皮石斛茎段组织培养与栽培，以铁皮石斛茎段为外植体，结合铁皮石斛的生物学特性，综述铁皮石斛组织培养与栽培的过程技术。

观察研究基本培养基、天然附加物和植物生长调节剂对铁皮石斛生长的影响。

验证和探究铁皮石斛茎段组织培养技术并对铁皮石斛的组织培养与栽培管理技术进行了思考与展望。

关键词: 铁皮石斛; 组织培养; 茎段; 移栽; 驯化0.引言铁皮石斛( Dendrobium officinale Kimura et Migo) 是兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium Sw．)多年生草本植物，又名黑节草，俗称铁皮枫斗，分布于云南、安徽、贵州、浙江、江西、广东和广西等地，是我国传统名贵珍稀中药材，其有效成分主要为石斛多糖、石斛碱、氨基酸等，其中石斛多糖的含量高达21.7%，能显著提高机体免疫功能，具有养胃出津、补肾益力、滋阴清热、耐缺氧、抗疲劳、抗肿瘤等功效。

现代药理学研究发现，石斛还具有抗衰老和扩张血管的作用。

铁皮石斛喜荫凉、湿润的环境，常附在高海拔悬崖峭壁或林内树干和岩石缝隙中。

由于其药用价值高、生长条件特殊和分布受局限，且经长期人为采挖，野生资源濒临灭绝。

铁皮石斛是2005版《中华人民共和国药典》收载的3种石斛属植物之一，为石斛之极品，它因表皮呈铁绿色而得名。

铁皮石斛蒴果成熟时易开裂，且种子粒径小，自然繁殖率低，是一种珍稀的药用植物和和名贵的室内观赏植物.。

铁皮石斛自然繁殖力极低, 常规繁殖又较困难, 且多年来对铁皮石斛的采集量远大于其生长量, 野生铁皮石斛自然繁殖已濒临绝迹。

由于药用价值高，人为的过度开采与生态破坏，野生铁皮石斛已濒临灭绝，1987年国务院将其列为国家重点保护植物。

1 材料与方法1. 1 试验材料野生云南铁皮石斛，取材于浙江农林大学组培实验室，取其茎段作为外植体进行组织培养。

1. 2 试验方法1. 2. 1 外植体消毒取铁皮石斛的茎，去除多余叶片后用解剖刀将茎切成含 3 ～ 4 个节点的茎段，保留节点。

一••琴••零••零••琴••琴■■琴丨••琴丨■■琴••琴丨■■琴••琴••零••琴••琴丨■■琴••琴丨■■琴••琴••零••琴••琴••琴••琴••零••零■•零■•零■•零■•琴■•琴■•琴f文章编号：1002-0659 (2018) 02-0036-05I|铁皮石斛原球茎组织培养研究进展i专题综述t张鑫!(天津创世生态景观建设股份有限公司，天津南开300000)摘要：铁皮石斛是我国传统的名贵中药材，具有很高的药用价值，其所含的主要成分为石斛多糖和生 物碱。

由于长期的采挖，自然资源日益枯竭，现阶段铁皮石斛的种苗主要通过组织培养方法获得，但 在培养过程中存在诸多问题如出苗的成本过高，幼苗移栽成活率低，工厂化生产效率低等。

鉴于以上 问题，对于铁皮石斛原球茎的研究日益广泛，原球茎中含有同石斛苗相同的药用成分，通过大规模培 养来提取，同样可以满足药材市场对石斛的需求。

本文通过对相关文献的查阅，阐述了有关铁皮石斛 原球茎的组织培养方面的研究概况。

关键词：铁皮石斛；原球组织培养；多糖中图分类号：S682.1+9 文献标识码：A铁皮石斛（■O e/zdraW M m q^dna/e Kimura et Migo)是兰科（Orchidaceae)石斜属（Dendrobium)多年生附生草本植物，因其老基外呈黑色，又名为黑节草，是名贵中药，居“中华九大仙草”之首，所含的主要成分为石斛多糖及生物碱，另外，还 有酚类、菲类、芪类、倍半萜类及香豆素等。

现 代药理研究证明石斛多糖具有抗肿瘤、增强免疫 力的功能。

但由于铁皮石斛生长环境特殊，以及 长期采挖，自然资源日趋枯竭，已被国家列为重 点保护的野生药材。

从20世纪中期开始就有关 于铁皮石斛的研究，主要涉及组织培养方法、有 效成分含量和药理作用方面的研究。

随着研究的 深人，发现铁皮石斛在组织快繁过程中存在一些 问题，例如通过组培生产出苗的成本过高，幼苗 移栽成活率低，工厂化生产效率低。