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中药色谱指纹图谱相似度评价系统国家药典委员会翟为民背景国家食品药品监督管理局于2000年先后下达“关于加强中药注册管理有关事宜的通知”（国药管注［2000］157号）和关于印发《中药注射剂色谱指纹图谱研究的技术要号）和“关于印发《中药注射剂色谱指纹图谱研究的技术要求》的通知”（国药管注［2000］348号）文件。
国家药典委员会负责组织实施“已批准生产的中药注射剂质量标准的提高完善及指纹图谱工作”及牵头组织“已批准多家生产的中药注射剂，其指纹图谱联合起草工作”。
国家药典委员会从2000年12月起开始组织实施，进行了可行性调研、规范性技术文件起草与研究、同布进行了科技部立项。
从中药注射剂的指纹图谱研究质量标准提高逐步从中药注射剂的指纹图谱研究、质量标准提高，逐步成熟、扩展，到2010版药典，部分提取物和中成药标准中都收载了指纹图谱项目，为发挥着积极的作用。
1、论证1论证首先进行调研，多次召开研讨会，代表涉及科研院所、中央和省级药品检验所及企业科技人员。
形成共识：央和省级药品检验所及企业科技人员形成共识：①重点-色谱指纹图谱；②理论上可行。
②理论上可行③通过实践，检验可行性，不断完善。
2、修订《中药注射剂指纹图谱研究技术要求》（国药谱管注［2000］348号）①优化、方法验证，细化参数、明确要求。
②解决手工计算“共有峰”、“非共有峰”面积工作中大量的人为因素，改变“只见树木不见森林”的局面，力求量的人为因素改变“只见树木不见森林”的局面力求反映整体质量特性。
二规范性技术文件起草与研究工作二、规范性技术文件起草与研究工作1、修订修订稿就原料药材、半成品、成品的样品收集、制备、参照物的选择，指纹图谱试验条件，对实验室的要求，对仪器的要求，试验方法和试验条件的建立及验证，色谱条件的优选，指纹图谱的建立和验证、识别、计算和复核，标准书写格式指纹图谱的建立和验证识别计算和复核标准书写格式等进行了详尽的细化规定，起草稿经广泛征求意见，先后进行了多次修改得以完成。
1．目的规范岛津LC-10AT型高效液相色谱系统的使用和维护。
2．范围本规程适用于岛津LC-10AT型高效液相色谱系统的使用和维护。
3．职责质检室仪器分析员负责岛津LC-10AT型高效液相色谱系统的日常使用和维护。
4．规程4.1 系统组成：本系统由1个LC-10ATvp溶剂输送泵、Rheodyne 7725i手动进样阀、SPD-10Avp 紫外-可见检测器、N2000色谱工作站和台式电脑等组成。
4.2 准备4.2.1使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。
4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）和定量环。
4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。
4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
4.3 开机4.3.1接通电源，依次开启稳压电源、泵、检测器，待泵和检测器自检结束后，打开电脑显示器、主机。
4.3.2启动N2000工作站4.3.2.1确认仪器启动后，打开计算机电源，并启动N000色谱工作站在线（ONline）程序。
（可以通过桌面上的快捷方式，迅速打开N2000online在线工作站）4.3.2.2 在Main Menu 窗口中双击Instrument图标。
4.3.2.3 输入用户名和口令，以登录CLASS-VP。
缺省情况下，已经用户名和口令分别为“system”和“2001”。
4.3.2.4 当SCL-10Avp发出蜂鸣声后，说明已建立与计算机之间的连接，Instrument窗口打开。
4.3.2.5 启动色谱图监视器4.3.2.5.1 从Windows任务栏中选择Program> Chromatography > Chromatogram Monitor 以打开Chromatogram Monitor 窗口。
4.3.2.5.2 根据需要设置受监视项的类型和格式。
制备液相色谱仪操作规程1.样品准备：溶剂应使用“HPLC”级试剂、应对试样有适宜的溶解度。
进样前，配制的溶液须用0.45µm或更小孔径的过滤头过滤。
2.依次打开A泵、B泵电源、控制器电源、PDA检测器电源。
3.打开电脑电源，至WINDOWS界面出现。
双击图标，打开软件进入操作界面。
此时会出现一个Shimadzu CLASS-VP 窗口，双击Instrument1图标，仪器会发出“嘟”的响声，以表示建立了与计算机的连接。
随即出现主操作界面。
4.建立分析方法参数：点击图标，或用“Method/Instrument Setup”进入分析方法参数设定画面（Instrument Setup），设置各项参数。
Pumps页面: 设定流动相的流速和组成百分比。
A相的百分比由B相算出。
参数设置结束后，点击“Download”。
5.点击PDA检测器图标或（PDA setup），进入PDA检测器参数设定对话框，设置检测波长等参数。
6.在主菜单上选择File > Method > Save as或Save保存方法文件。
7.点击Rinse autosampler图标，清洗自动进样器2～3次，然后点击Purge Autosampler图标，进行约25分钟的清洗。
每天第一次进样之前或每次更换流动相，都应清洗autosampler并进行Auto purge。
8．点击图标“Instrument On/Off”、“Turn pumps On/Off”和“Turn SPD-M10Avp Lamp On/Off”，启动仪器、泵和PDA检测器的灯源。
9．点击图标（Preview）预览基线。
待基线平稳，点击图标（Autozero SPD－M10Avp）和（zeros detectors）调零。
10．进样：将样品放进样品架。
○1单个进样：点击Single Run键，此时出现一对话框，在Vial中输入样品所在位置编号，自动进样架上有。
HPLC操作规程开机之前，准备好所用的流动相和样品（流动相和样品必须通过0.45um过滤器过滤）1、依次打开各组件电源（DGU-14A,LC-10ADvp，SIL-10ADvp,CTO-10Avp,SPD-M10vp（或其他检测器）），待各单元自检通过。
2、打开SCL-10Avp电源，检查开机屏应显示各单元，如果某单元没有显示，则不能控制该单元，按F2取消屏幕右上角Fixde显示，即可显示并控制该单元。
（SPD检测器与计算机直接相连，不受SCL 控制）。
3、排气：打开LC－10ADvp泵排空阀（逆时针旋转90度以上），按purge键，开始排空，检查流动相入口管路中没有气泡后，再按purge键停止排空。
4、压力调零：按LC-10ADvp泵func键数次，直至屏幕显示“ENTER TO ZEROADJ”项，按enter 键，再按ce键，完成调零，关进排空阀（顺时针旋紧）。
5、打开计算机，双击“CLASS-VP”图标。
6、选择双击所用的检测器组件，听到“嘟”声，自动进入软件界面工作站。
7、点击method－instrument setup ，分别设定pump、CTO-10avp、SPD-M10Avp、SIL-10ADvp等参数，保存方法（File－method－save as）。
8、运行方法：点击图标（instrument on/off），系统开始运行，可以通过预览基线（Control/preview run），观察基线变化，待基线平稳，可以停止预览，准备进样。
9、进样：点击Contral/singer run，设置相关参数，点击start后检查信息提示栏出现waiting for trigger，进样器开始进样。
10、待分析结束后，进行积分处理（analysis/analyze）编辑报告并保存结束。
11、退出：停止系统运行，退出class－vp。
关闭计算机，再依次按开机相反的顺序关闭SIL-10ADvp、CTO-10Avp、SPD-M10vp、SCL-10Avp工作系统。
排阻色谱SEQ分析排阻色谱SEQ分为GPC(凝胶渗透色谱)和GFC（凝胶过滤色谱）GPC主要用于聚合物领域，GFC主要用于生物科学领域。
以下介绍岛津GPC分析系统特点：★以分子量大小分离：分子量大的先洗出，小的后洗出。
按保留时间计算分子量分布.★专用色谱柱分类：●以分子量大小分类（表明分离线性范围）。
●以流动相分类使用四氢呋喃作流动相.使用DMF作流动相。
（二甲基甲酰胺）使用氯仿作流动相。
使用水性溶液作流动相。
根据色谱柱线性分布,色谱柱可以串连使用,先连接分子量大的，再接分子量小的。
岛津GPC Vol。
1.02软件操作首先,在CLASS-VP中对标准品进行色谱分析，优化积分后,得到理想的色谱图和数据，即去掉杂质峰和负峰（Method∈ Integration Events中Min Area最小峰面积，Intergate off禁止积分，WIDTH半峰宽等等）。
然后进入GPC分析软件：1．点击开始∈程序∈GPC∈GPC for CLASS—VP出现下面对话框:在Data filename下为从CLASS—VP中由色谱文件(*＊*。
dat）转换成的对应GPC文件起名和排序号*＊＊＊*＊.D＊＊（如DLSICA.D01）。
然后点击OK 进入下面菜单：在窗口中有以下七个处理功能图标：GPC GPC Mol GPC Super Single File configuration Method Weight Batch Impose Chrmatogram ManagerGPC配置GPC方法分子量批处理叠加单色谱文件管理上述图标中选择GPC GPC方法即可以满足日常分析应用。
Method2．下面再返回到CLASS-VP工作站中操作,先将其它界面最小化，如图：如图:选择File∈Data∈Open打开标准品色谱数据选择数据文件后，打开选择File∈Method∈Open打开分析该标准品的方法(已优化积分完毕）选择Analysis∈Analyze 分析计算该标准品一次。
岛津ClASS-VP工作站系统配置流程一、打开Class-vp，双击instrument进入以下画面，点击file/configure
二、选择仪器名称。
弹出instrument Configuration画面，选择仪器名称，点击Configure按钮，并OK。
三、自动配置。
弹出岛津HPLC System Configuration画面（下图）中点击左下角auto Configuration按钮。
Communication下RS232C port 处选择com口。
点击右下角auto- configure
附1：如果是PDA检器Relays项下的Relay 1和Relay 2选择Start（默认是event）
附2：系统压力显示单位、电磁阀选择等可以在此画面指定。
四、系统控制器所控部件自动识别到右面的已配置模块。
（其它部件可以手动加入）
五、确认各个识别模块。
双击右面框中显示的各模块进行确认（系统控制器可以不再确认）。
以检测器的确认为例：
1、双击Detector出现：
2、点击右侧“地雷”图标，双波长模式选择可以在此处选择。
系统检查标准可在System Check下输入，可以查看Device Information中仪器序列号等信息，确认后点击确定、Ok。
六、配置完成。
确认右侧配置模块无误后，点击OK。
点击OK
点击“确定”并退出Class-vp（退出时有正常的蜂鸣声），完成配置。
重新进入即可联机使用。
凝胶渗透色谱仪操作规程（1）仪器与电脑开机顺序并无先后，但是只有等仪器初始化好后，才能启动装在电脑上的CLASS-VP软件。
（2）双击图标，进入操作界面。
此时会出现一个Shimadzu CLASS-VP 窗口，双击Instrument1图标，仪器会发出蜂鸣声，以表示建立了与计算机的连接。
随即出现如下主操作界面：（3）点击图标、和，打开instrument 、pump 和oven 。
工具栏： ②RID R. FlowOn/Off ⑥Rinse ⑧Turn pumps On/off ⑩LC SetupAssistant④Zero RIDAutosample⑨LCD①Oven On/Off ③Balance RID ⑤Purge ⑦Instrument On/off Autosample 按下①⑦⑧⑨按钮，完成仪器初始化，此时这些按钮呈高亮状态，如上图所示。
②③④为走基线时调整基线所用，②为冲洗参比池，③平衡参比池与样品池，④基线归零。
⑥为排赶进样针气泡，⑤为清洗进样针外壁 ⑩为返回主操作界面 (4)点击图标，冲洗进样针25分钟。
点击图标，冲洗autosampler 3次。
（5）按主界面中的任何实物图标（溶剂瓶、进样架、泵、检测器）进入Instrument Setup 中，进行主要参数设置：Pumps ：mode 选择Low Pressure Gradient ，自定义流量T.Flow 及洗脱液的配比。
一般T.Flow 是0.8mL/min 。
CTO-10Avp ：一般柱温40℃，最高不超过85℃。
RID-10A (DetA)SCL-10Avp注意：参数设置完毕后，要按下Download 键，所有设置方可生效。
在主菜单上选择File >Method > Save 或Save as 保存方法文件。
（6）走基线与进样Preview Single RunSequence RunStop点击Preview预览基线，基线走平后，方可进样。
第1篇一、总则1. 目的：为确保装置安全、稳定、高效运行，规范操作人员的行为，特制定本规程。
2. 适用范围：本规程适用于本装置所有操作人员及其相关辅助人员。
3. 责任：操作人员应严格遵守本规程，确保装置安全运行。
二、操作前的准备1. 安全检查：- 检查装置各部件是否完好，设备运行状态是否正常。
- 检查安全防护装置是否齐全有效。
- 检查消防设施、应急器材是否处于备用状态。
2. 操作人员：- 操作人员必须经过专业培训，取得相应操作资格。
- 操作人员应熟悉装置的结构、性能、操作规程及应急预案。
3. 物料准备：- 根据生产需求，准备所需物料，并确保其质量符合标准。
- 检查物料存储设施是否完好，防止物料泄漏或污染。
三、操作步骤1. 启动装置：- 打开电源，启动装置。
- 检查各仪表、传感器是否正常工作。
- 检查装置各部件运行是否平稳。
2. 调整参数：- 根据生产需求，调整装置参数。
- 观察仪表数据，确保参数调整在安全范围内。
3. 监控运行：- 定期检查装置运行状态，观察仪表数据。
- 发现异常情况，立即采取措施进行处理。
4. 停机操作：- 在停机前，通知相关人员做好准备工作。
- 逐步降低装置运行速度，关闭相关设备。
- 关闭电源，确保装置处于安全状态。
四、应急处理1. 火灾：- 立即启动消防设施，扑灭火灾。
- 组织人员撤离现场，确保人员安全。
2. 泄漏：- 立即关闭泄漏点，防止泄漏扩大。
- 使用应急器材进行堵漏处理。
- 清理泄漏物质，防止环境污染。
3. 停电：- 立即启动应急电源，确保装置安全运行。
- 等待电力恢复，恢复正常生产。
五、维护保养1. 日常维护：- 定期检查装置各部件，及时更换磨损、损坏的部件。
- 清洁装置，保持其清洁、整洁。
2. 定期保养：- 按照设备保养计划，进行定期保养。
- 更换易损件，确保装置正常运行。
六、附则1. 本规程由（部门名称）负责解释。
2. 本规程自发布之日起实施。
---注：以上模板仅供参考，具体操作规程应根据实际装置特点和需求进行调整和完善。
仪器设备操作规程仪器设备操作规程为了保证仪器设备安全良好运行，充分发挥仪器设备在技术工作中的作用，提高使用效益，制定本规程。
一、仪器设备的管理制度1.公司建立仪器设备档案，同类仪器进行编号管理。
2.公司建立仪器设备使用登记簿、保养簿，制定专人负责管理，进行仪器设备的日常保养和维护，做好防寒、防热、防潮、防尘、防火“五防”工作，填写仪器维护保养登记簿。
3.各种仪器设备需制定详细的操作及维护保养规程，每台仪器设备应挂操作维护保养标示牌。
4.负责人每周检查仪器设备的性能，挂好标示牌，性能良好者挂“备用”标示，如出现故障，挂“待维修”标示，及时与维修人员联系维修，并记录维修情况。
5.仪器设备定期进行检测，贴上“检测合格”标示，包括检测日期及检测负责人，并做好检测登记，检测不合格的仪器设备要送检、维修，检测合格方可继续使用。
6.公司组织对仪器设备操作的培训及考核，需熟练掌握。
7.操作者必须严格遵守操作规程，并进行定期维护保养。
新进人员在未掌握使用方法前，不得独立操作仪器设备，以免造成仪器设备损坏。
二、仪器设备的使用及维护制度1.根据仪器设备对环境条件的要求，操作人员在进入实验室时，应按要求穿着工作服，防护衣，戴防护手套等，以保证仪器设备安全运行和操作人员的人身安全。
2.实验室工作人员应经常对水电及环境温度、湿度等进行检查测试，如不符合要求，应及时采取措施，保证仪器设备的运行条件。
3.根据仪器设备使用要求，开机前要进行检查，做好开机准备工作。
（1）检查供电电压是否符合仪器设备的要求。
（2）需电源、水源、润滑等条件的仪器设备，要检查气源、水源、油路等是否符合要求，有无泄漏等问题。
（3）定期对仪器设备接地线路进行测试检查，以防发生电路故障。
4.使用仪器设备必须严格按照仪器设备的使用说明书规定的程序操作。
5.使用仪器设备时，操作人员要集中精力时刻观察仪器设备使用状态，防止意外事故发生。
6.要准确记录实验过程和数据。
LC2010A/C高效液相色谱（HPLC）操作规程仪器编号：200563341 仪器组成与开机1．1本仪器由Class-VP工作站、在线脱线机、输液泵、自动进样器、柱温箱和检测器等部件组成。
各部分的操作均可由工作站或液晶面板控制完成。
1．2分别打计算机、LC-2010A/C高效液相色谱仪的电源开关。
1．3仪器约需3min时间完成自检过程，此时双击【Class-VP】快捷方式图标后，双击【Instrument l】可进入联机状态；双击【Offline Processing】可进入脱机状态（联机状态下可实现计算机对仪器的操纵控制以及在线据的采集和分析；脱机状态下可实现已采集数据的处理和再分析）。
1．4在联机状态下，计算机屏幕显示Class-VP 6.12工作站画面,此时得用工具栏上的【Auto Purge】按钮对仪器管路进行彻底的冲洗并排除可能存在的气泡, 【Auto Purge】功能将按照操作者的设置自动进行和停止(本机为四元低压梯度系统,分为A、B、C、D、R五个流路并配有五路在线脱气机。
其中R流路为自动进样器的清洗流路。
在进行Purge时，可以只选择所需要的流路进行Purge，但第R路是必选项)。
2 分析方法的建立、存储和调用2．1分析方法的建立2 .1．1 单击菜单栏中的【File→Method→New】以便建立一种新方法。
2．1．2 此时【LC Setup Assistant-System】对话框吵将显示当前的分析方法名为Untitled.met,单击【Simple Setting】可进行常规分析条件的设定；单击【Method→Instrument Setup】可进行复杂分析条件的设定。
2．1. 3利用【Simple Setting】进行常规分析条件的设定在Mode中选择Low Prerrure Gradient;在Pump 框中设定流速、各流路(通道)的比例、最大最小大力限;在【Oven】框中设定柱温;确保【Detector A】复选项被选中后，在其中设定所需的检测波长；在【Time Program】中设定液相停止时间以及采集停止时间（一般情况下二者一致。
LC&CLASS-VP操作规程
在开机之前，根据所做样品方法要求，准备所用流动相和标样及样品。
1．打开LC-10ATvp，SPD-10Avp，CTO-10Avp电源，待各单元自检通过。
2．打开SCL-10Avp电源，检查开机屏幕应显示各单元，如果某单元没有显示，则不能控制该单元，需按f2键取消Fixed，即可显示并控制该单元。
3．排空操作：打开LC-10ATvp泵排空阀（逆时针90度以上），按Purge键，泵开始排空运行。
4．检查流动相入口Teflon管路没有气泡后，再按Purge键停止排空。
5．压力调零：按LC-10ATvp泵Func键数次，直至屏幕显示***ml ZERO ADJ项，按Enter键，再按CE键，即完成调零。
然后关紧排空阀（顺时针旋紧）。
6．在计算机中双击CLSS-VP图标，进入工作站，再双击Instrument 1进入实时分析窗口。
7．编辑分析方法：
●选择File ∈Method ∈New如图：
●点击Method，如图：在该下拉菜单中，以下四项常用；
Integration Events积分参数Advanced ∈performance 柱参数Custom Report报告格式Instrument Setup仪器参数
●点击Instrument setup编辑仪器参数：
⊙分别设定Pump泵参数，CTO-10ASvp柱箱参数，SPD-10Avp（DetA）检测器参数，SCL-10Avp系统控制器参数，Status Log多图谱选择，Time Program时间程序参数。
⊙Pump泵参数
⊙CTO-10ASvp柱箱参数
⊙SPD-10Avp（DetA）检测器参数
⊙SCL-10Avp系统控制器参数
⊙Status Log多图谱选择
⊙Time Program时间程序参数
●点击Integration Events编辑积分参数：如图
Width峰宽，Threshold阀值，Min Area最小峰面积，等等。
●点击Custom Report编辑报告格式：如图
选择File ∈Report Templae ∈Open选中所用格式，Open打开报告模版,
●点击Advanced ∈Performance编辑柱参数，评价色谱柱。
如图
⊙Column Length柱长度（m）Particle Dimeter填料粒径（um）
上述参数设置后，该方法可以基本运行（面积归一化法）。
如果采用外标法，需分析完标样后，再进行标定，然后分析未知样品即可。
●保存方法：选择File∈Method ∈Save as起文件名*****.dat保存Save
8．运行方法：点击如图图标
9．系统开始运行，检查各单元参数应与方法设定一致。
等待系统平衡。
一般情况下，由于流动相交换平衡时间不定。
可以观察SPD—10Avp检测器吸收变化, 如果吸收值稳定不变，即认为接近平衡，可以调零等待，确认不变后，可以准备进样。
也可以通过予览基线观察基线变化，待基线平稳，可以准备进样。
8．基线予览：
点击Control ∈Preview Run，
基线予览时，纵坐标是自动变换量程的，可以高灵敏检查检测器信号变化，但是
用户可能会认为基线不稳（相对于固定量程）。
如果固定量程，可以进行以下操作，⊙在图谱窗口点击右键，选择Properties（属性），在对话框中点击Scale To右侧▼
箭头，选择User Defined，再设定Y Min（如-0.01V olt）和Y Max（如0.5V olt）
点击确定后，纵坐标就会固定不变，基线看起来就很直了。
⊙Y Min 和Y Max的大小，应根据样品的最大信号而定。
⊙如果需要改回到自动变换量程设置，只要将Scale To的User Defined改回到
Normalized，同时点击Reset Scaling，然后点击确定，即可恢复。
⊙CLASS-VP工作站的右键功能很强大，用户可以参考说明书灵活使用。
⊙等待基线稳定。
⊙如果基线稳定，点击Control ∈Stop Run停止基线予览。
9．进样分析：
⊙点击Control ∈Single Run如图：
⊙编辑样品参数：Sample ID样品信息Method Name方法文件名
Data Path数据存储路径Data Name数据文件名
⊙点击Start后检查信息提示栏出现waiting for trigger，再按进样步骤进样（附录）．
⊙待分析结束自动进行积分处理。
10．报告打印：
⊙点击Reports ∈ Print ∈ Method Custom Report即完成报告打印。
★重复进样，执行9—10步骤即可。
11．关机步骤：
●停止系统运行，再按运行方法键即可。
●退出CLASS-VP（两级退出）
●关SCL-10Avp电源。
●系统清洗：（可以关SPD—10Avp和CTO—10ASvp电源，只开LC—10ATvp泵清洗）
⊙如果使用缓冲液，先用水更换缓冲液，清洗1小时，然后更换甲醇清洗40分钟，
再关闭其他LC各单元电源。
⊙如果使用有机溶剂（水），直接更换甲醇清洗40分钟，再关闭其他LC各单元电源。
附录：
进样步骤：①在7725i阀INJECT位置，插入进样针。
②将7725i阀搬至LOAD位置。
③注入样品，然后将7725i阀迅速搬至INJECT位置，自动同步触发
CLASS-VP采集数据。
