在体生物光学成像技术的研究进展
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光学显微成像技术在生物学研究中的应用前景随着科技的不断进步,光学显微成像技术在生物学研究中发挥着越来越重要的作用。
这种技术利用光学系统对生物样本进行观察和分析,可以提供高分辨率、非侵入性的成像结果,为生物学家研究细胞结构、功能和生物过程提供了强有力的工具。
本文将探讨光学显微成像技术在生物学研究中的应用前景。
首先,光学显微成像技术在细胞结构研究中具有重要意义。
通过显微镜观察细胞的形态和结构,可以揭示细胞内部的组织和器官的分布情况。
例如,荧光显微镜技术可以标记细胞器和蛋白质,使其在显微镜下呈现出不同的荧光信号,从而帮助研究人员观察和分析细胞的结构和功能。
此外,光学显微成像技术还可以通过三维成像和高分辨率成像来提供更详细的细胞结构信息,为细胞生物学的研究提供了更多的可能性。
其次,光学显微成像技术在生物过程研究中具有广泛的应用。
生物过程是生物学研究的核心内容之一,而光学显微成像技术可以帮助研究人员观察和记录生物过程的实时动态。
例如,通过荧光显微镜观察细胞内的钙离子浓度变化,可以揭示细胞信号传导和细胞活动的机制。
此外,光学显微成像技术还可以用于观察细胞增殖、细胞迁移和细胞分化等生物过程,为生物学家研究生物发育和疾病发生机制提供了重要的工具和方法。
此外,光学显微成像技术还在生物学研究中具有潜在的应用前景。
随着技术的不断发展,新型的光学显微成像技术不断涌现,为生物学研究提供了更多的可能性。
例如,近年来兴起的超分辨率显微镜技术可以突破传统光学显微镜的分辨率限制,提供更高的空间分辨率,使研究人员能够观察到更小的细胞结构和更细微的生物过程。
此外,光学显微成像技术还可以与其他技术相结合,如光学操控、光谱分析等,进一步拓展其应用范围。
然而,光学显微成像技术在生物学研究中仍然面临一些挑战和限制。
首先,成像深度限制是光学显微成像技术的一个重要问题。
由于光的散射和吸收,光学显微成像技术在成像深度上存在一定的限制,难以观察到深层组织的细胞结构和生物过程。
生物医学光学成像技术的研究与发展生物医学光学成像技术是一种在生物医学领域中应用光学原理和技术的成像方法。
经过多年的发展,该技术在医学诊断、疾病治疗和基础科学研究等方面取得了重要突破。
本文将从成像原理、应用领域和发展趋势等方面介绍生物医学光学成像技术的研究与发展。
一、成像原理生物医学光学成像技术利用光与组织的相互作用,通过测量光在组织中的传播、散射和吸收等过程,实现对生物组织结构和功能的成像。
常用的生物医学光学成像技术包括光学相干层析成像(OCT)、多光谱成像、荧光成像和光声成像等。
OCT是一种通过测量光波在组织中的反射和散射来进行高分辨率断层成像的技术。
它可以实时地获取组织镜像,并对组织结构进行定量分析,被广泛应用于角膜病变、血管病变和神经退行性病变等方面的研究。
多光谱成像则是利用不同波长的光来照射生物组织,并采集其反射光谱,通过对光谱数据的分析可以获得组织的特征信息。
这种成像技术常用于组织的病理分类和肿瘤的早期诊断。
荧光成像是利用特定的荧光探针将组织或细胞标记成荧光信号,通过对荧光信号的检测和分析来获得相关的生物信息。
该技术在生物分子探测、细胞追踪以及药物递送方面有着广泛的应用。
光声成像则是通过组织对激光脉冲的吸收和声波的产生来实现对组织结构和功能的成像。
光声成像技术具有超声成像和光学成像的优点,可以同时获得组织的结构和血液流动等信息。
二、应用领域生物医学光学成像技术在医学诊断、疾病治疗和科学研究等领域有着广泛的应用。
在医学诊断方面,生物医学光学成像技术可以提供非侵入性、高分辨率的成像信息,既可以观察到组织的微观结构,又可以获取组织的功能和代谢信息。
例如,OCT在眼科领域的应用可以实现对青光眼和黄斑变性等疾病的早期诊断和监测。
光声成像则可以用于乳腺癌和肝癌等恶性肿瘤的检测。
在疾病治疗方面,生物医学光学成像技术可以提供实时的成像引导,帮助医生准确定位和评估治疗效果。
例如,光学相干断层扫描(OCT)可以帮助激光治疗的定位和监测,提高疾病的治疗效果。
光学传感技术在生物医学领域的应用研究随着科技的不断进步,光学传感技术在生物医学领域得到了广泛的应用。
光学传感技术是一种非侵入式的物理检测技术,它可以通过光学原理来获取被测物体的信息,具有快速、高灵敏度、无损和无辐射等优点。
本文将重点探讨光学传感技术在生物医学领域的应用研究进展。
一、光学生物成像技术光学生物成像技术是光学传感技术在生物医学领域的一大应用。
它可以帮助医学研究人员可视化身体内部组织、器官和细胞结构的生理和病理状态,是生物医学研究不可或缺的手段。
1. 吸收成像技术吸收成像技术是利用被检测物体对光的吸收程度来进行成像的技术。
在成像过程中,红外线或可见光等特定波长的光线通过被检测物体,被吸收和散射。
通过测量吸收和散射的光,可以获得被检测物体的影像。
2. 透射成像技术透射成像技术是利用物体对光的透过性进行成像的技术。
在成像过程中,透射成像仪通过物体并转换成数字信号,使医生可以看到物体内部结构的三维图像。
透射成像技术不仅可以用于疾病的早期诊断,还可以用于治疗过程的监督。
3. 荧光成像技术荧光成像技术是利用引发标记物发出荧光的特性进行成像的技术。
在成像过程中,医学研究人员利用许多生物分子和细胞能够获得的荧光标记物,使其发光来确定其存在和定位。
荧光成像技术在生物药学领域、医学化学等领域有着广泛的应用。
二、光学传感技术在生物医学领域的其他应用除了光学生物成像技术以外,光学传感技术在生物医学领域的其他应用还包括以下几个方面。
1. 光黏度计光黏度计是一种通过光学传感技术来测量液体粘度的仪器。
它基于斯托克斯定律,通过分析液体中透过的散射光的强度来测量液体的粘度。
光黏度计在长期医疗中,能够基于高精度测量结果来制订药物配方。
2. 光学免疫分析光学免疫分析是利用光学原理检测生物分子的浓度、活性和种类的技术。
它主要用于医学检测和药物筛选。
近年来,随着人们对新型病毒诊断的要求日益增加,光学免疫分析得到了广泛的应用。
3. 光学热成像光学热成像是一种通过红外成像技术来测量物体表面温度的技术。
第43 卷第 1 期2024 年1 月Vol.43 No.119~31分析测试学报FENXI CESHI XUEBAO(Journal of Instrumental Analysis)生物光学成像技术在组织穿透性方面的研究进展张玉敏,王富,林俐*,叶坚*(上海交通大学生物医学工程学院,上海200030)摘要:光学成像因灵敏度高、特异性强、无电离辐射、低成本、丰富的候选探针、可获取细胞/分子水平信息和可实时检测等优势,在临床前的基础研究和临床诊断与治疗领域具有巨大的应用价值。
但由于生物组织对光子的高散射与高吸收特性,光学成像的组织穿透深度通常非常有限,很大程度上限制了其在深部病变活体生物医学检测方面的应用,研究者们对此做了大量的努力。
随着科学技术的发展,光学技术的组织检测深度已覆盖微米到厘米甚至分米以上的范围,在生物检测、成像、诊断、术中导航等领域展现出了广阔的应用前景。
该文从常见的光学成像技术入手,对荧光成像、生物/化学发光成像、光声成像以及拉曼成像在组织穿透性方面的研究进展进行了总结与讨论,并对这些光学成像技术未来在组织穿透方面的主要研究方向进行了展望。
关键词:生物光学成像;组织穿透性;深穿透拉曼光谱中图分类号:O657.3;R318文献标识码:A 文章编号:1004-4957(2024)01-0019-13Advances in Tissue Penetration by Optical Imaging TechniquesZHANG Yu-min,WANG Fu,LIN Li*,YE Jian*(School of Biomedical Engineering,Shanghai Jiao Tong University,Shanghai 200030,China)Abstract:Optical imaging has great potential for application in the field of preclinical basic research and clinical diagnostics and therapeutics,due to its advantages of high sensitivity and specificity,non-ionizing radiation,simplicity of equipment,low cost,rich nanoprobe candidates,ability to ob⁃tain cellular/molecular level information and real-time acquisition capability.However,due to the nature of high scattering and absorption of photons in biological tissues,optical imaging is usually limited by the shallow tissue penetration depth,which largely limits its usage for in vivo biomedical detection of deep-seated lesions. A lot of efforts have been done by researchers to overcome this is⁃sue.This paper summarizes and discusses the progress of various common optical imaging tech⁃niques,such as fluorescence imaging,bioluminescence/chemiluminescence imaging,photoacous⁃tic imaging,and Raman imaging,in terms of their research progress in tissue penetration. With the development of science and technology,the tissue detection depths of optical modalities have cov⁃ered a range from microns to centimeters or even to decimeters,and have shown broad application prospects in the fields of biological detection,imaging,diagnosis,intraoperative navigation,and so on. Finally,the main directions of future research of these optical imaging techniques in tissue penetration are prospected.Key words:optical imaging;tissue penetration;deep Raman spectroscopy近一个世纪以来,光在生物组织中的传播与分布,以及光与生物组织的相互作用引起了科学家们的广泛关注,引发了光学方法在生物医学检测与成像领域的研究热潮。
光学成像技术在生物医学中的进展近年来,光学成像技术在生物医学领域得到了迅猛发展,成为了研究生物医学领域的重要手段。
基于光学成像技术的生物医学研究,可以从微观、纳米级别上观察到生命现象的发生和发展,为生物医学研究提供了前所未有的便利条件。
一、荧光显微镜荧光显微镜是通过荧光分子的激发和荧光发射来产生图像的光学成像技术。
荧光显微镜具有高度灵敏度、高分辨率和无需损伤生物样本等优点,因此被广泛用于生物医学研究领域。
通过荧光显微镜,可以在单细胞水平上观察细胞的形态、功能、代谢和信号通路等生命现象,还可以研究发生在细胞之间和细胞内的互作,进而揭示诸如肿瘤、心血管疾病及感染等病理生理现象在细胞水平上的发生和发展机制。
二、多光子显微镜多光子显微镜是一种新型的光学成像技术,其与传统单光子显微镜最大的不同在于,多光子显微镜需要用两个或多个光子激发质点进行成像。
多光子显微镜具有高度的分辨率和深层成像的能力,可以观察到未被损伤的细胞或组织样本内部的结构和功能。
多光子显微镜的应用领域非常广泛,涵盖了生物医学、生命科学和材料科学等领域。
其主要应用于肿瘤组织学、神经科学、心血管学和免疫学等领域。
三、光学相干断层扫描成像技术(OCT)光学相干断层扫描成像技术(OCT)是一种近年来兴起的,非接触式的光学成像技术。
该技术可以通过扫描生物组织来分析光的反射和散射,以获取生物组织的三维图像。
OCT成像过程中不需要使用辐射,因此OCT是一种非侵入性诊断手段,不会对生物组织造成任何损伤。
OCT在临床应用及基础研究方面有广泛的应用前景,可以用于研究局部光学特性,以及在各种疾病的早期诊断和检测中的有效性。
四、光学显微成像技术(OMI)光学显微成像技术(OMI)是一种新型的光学成像技术,其主要作用在于研究体内纳米级别的荧光标记物。
OMI结合了激光显微镜的高光学分辨率和多种荧光标记的优势,通过识别和追踪细胞功能、受体和代谢物等活性成分,能够量化细胞活性及其变化程度,并在非侵入性的同时,提供高度的时间和空间分辨率。
光学成像在生物医学研究中的应用是什么在当今生物医学研究的广袤领域中,光学成像技术宛如一颗璀璨的明星,凭借其独特的优势和强大的功能,为科学家们揭示生命的奥秘提供了前所未有的视角和工具。
那么,光学成像在生物医学研究中的应用究竟是什么呢?光学成像技术在细胞和分子水平的研究中发挥着关键作用。
通过荧光标记技术,科学家们能够特异性地标记细胞内的特定分子或结构,然后利用荧光显微镜进行观察。
例如,标记特定的蛋白质可以帮助我们了解其在细胞内的分布、运动和相互作用。
这种方法让我们能够实时追踪细胞内的动态过程,如细胞分裂、蛋白质转运等。
在神经科学领域,光学成像技术更是带来了革命性的突破。
钙离子成像技术使得研究人员能够监测神经元内钙离子浓度的变化,从而间接反映神经元的活动。
通过这种方法,我们可以了解大脑中神经元网络是如何工作的,以及在不同的生理和病理条件下,神经活动的模式会发生怎样的改变。
此外,光学相干断层扫描(OCT)技术在眼科疾病的诊断和研究中具有重要地位。
OCT 能够非侵入性地获取眼睛视网膜、角膜等结构的高分辨率图像,帮助医生早期发现青光眼、黄斑变性等疾病的细微变化,为及时治疗提供依据。
在癌症研究方面,光学成像也大显身手。
近红外荧光成像技术可以用于肿瘤的检测和定位。
通过给肿瘤细胞特异性的标记物连接上荧光分子,然后利用近红外光的穿透能力,能够在活体动物体内清晰地看到肿瘤的位置和大小。
同时,多光子显微镜能够深入肿瘤组织内部,观察肿瘤细胞的微环境和细胞间的相互作用,为癌症的发生、发展机制提供深入的见解。
除了疾病的诊断和研究,光学成像在药物研发中也扮演着重要角色。
利用高内涵筛选技术,能够同时对大量细胞进行成像分析,快速筛选出有效的药物化合物。
并且,通过追踪药物分子在细胞内的分布和代谢过程,可以评估药物的疗效和安全性。
在心血管疾病的研究中,光学成像同样不可或缺。
血管内光学相干断层扫描(IVOCT)可以清晰地显示血管内壁的结构和斑块的特征,有助于评估心血管疾病的风险和指导治疗方案的制定。
生物医学光学技术新进展生物医学光学技术是指将光学原理应用于医学领域的技术,它可以对人体进行非侵入性的、高精度的成像和诊断。
随着科技的不断进步,生物医学光学技术日新月异,无论是在基础研究方面还是在临床应用方面都取得了显著的进展。
一、生物医学光学技术在基础研究中的应用生物医学光学技术的应用不仅局限于医疗领域,近年来,越来越多的科学家将其应用于生命科学的基础研究中。
例如,利用生物医学光学技术可以对蛋白质、DNA、细胞等微观结构进行研究,这有助于我们更好地理解生物体系的运作原理。
此外,生物医学光学技术还可以用于疾病模型的构建和验证。
以肿瘤为例,科学家们可以利用光学技术观察肿瘤生长和转移的过程,研究肿瘤细胞的行为规律,从而为肿瘤治疗的开发提供重要的参考和支持。
二、生物医学光学技术在临床应用中的进展除了在基础研究中的应用,生物医学光学技术在临床医学中也有越来越广泛的应用。
下面将分别介绍生物医学光学技术在临床应用中的进展。
1、光学成像技术在临床医学中,最常见的生物医学光学技术是光学成像技术。
这种技术可以实现对人体的高分辨率成像,能够帮助医生诊断疾病。
例如,利用反射式光学成像技术,医生可以更准确地观察肿瘤的形态和大小,从而制定更科学的治疗方案。
此外,光学成像技术还可以用于心脏、脑部等器官的成像,帮助医生对疾病做出更准确的诊断。
2、光学纤维技术光学纤维技术是利用光纤传输光信号,对人体进行定位和成像的技术。
它不仅可以实现高分辨率成像,还可以实现穿透深度更大的成像。
目前,光学纤维技术已经被应用于胃肠道、气管、支气管和膀胱等器官的检查,极大地提高了检查的准确率和效率。
3、光学治疗技术光学治疗技术是利用光的特性对疾病进行治疗的技术。
例如,利用激光器产生的强光束对肿瘤进行照射,可以杀死癌细胞,从而达到治疗的效果。
此外,利用光学治疗技术还可以治疗其他一些疾病,例如近视、青光眼等眼部疾病。
4、光学传感技术光学传感技术是指利用光学原理对人体内部的化学物质进行检测和监测的技术。
光学技术在生物成像领域的应用随着科技的不断发展,光学技术在生物成像领域的应用越来越广泛。
光学技术通过对生物组织的研究,可以更加深入地了解生命系统的运作方式,例如神经网络、免疫系统、细胞生长等。
本文将介绍几种光学技术在生物成像领域的应用。
光学显微镜光学显微镜被认为是最基本、最重要的显微镜之一。
它可以通过将光线聚焦到非常小的区域,使我们能够观察到生物组织的微观结构。
生物组织是由细胞、细胞器和分子等构成的,这些结构难以通过肉眼观察。
光学显微镜通过光学放大来观察这些结构,因此被广泛应用于生物研究。
原子力显微镜原子力显微镜(AFM)是一种先进的显微镜,它可以高解析探测生物样品表面的形貌和生物分子内部的纳米结构。
使用AFM,我们可以在水平尺度上看到单个蛋白或细胞的高分辨率图像。
在生物医学研究中,AFM被广泛应用于癌症和感染性疾病等领域的分子级别研究。
激光扫描共聚焦显微镜激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)是一种高分辨率光学显微镜,它使用激光聚焦到样品上,同时通过荧光光谱来检测样品表面的物质分子。
与其他生物成像技术相比,LSCM具有高速、高分辨率、高对比度和非侵入性等优点。
LSCM被广泛应用于神经科学、微生物学和生物材料科学等领域。
全息显微镜全息显微镜是一种将三维信息记录到二维平面上的光学成像技术,它通过记录闪光瞬间的干涉条纹图案,来表征样品的相位和振幅。
它被广泛应用于生物医学、纳米材料和生物分子等领域。
全息显微镜的优点在于它可以在非常小的板凳上制造高分辨率、高频响的光学元件,以及成像纳米级别的生物材料和组织。
总之,光学技术在生物成像领域的应用本文只是概述。
现代生物科学领域的复杂性需要利用光学技术来深入了解生物系统的运作机制、从单个蛋白或细胞水平了解生命的起始和发展的细节。
为了更好的了解生命系统的运作方式,光学技术不仅需要在增加灵敏度、分辨率和深度方面投入更多的研究,还需要有效地将其与其他生物学技术集成在一起,从而推动生物学和医学的发展。
生物活体成像技术的研究和发展生物活体成像技术指的是利用各种成像方法直接观察活的生物体内部结构或分子级别的变化,是生命科学领域中非常重要的研究工具。
这种技术可以帮助我们更加深入地理解生物学的复杂问题,进而为疾病的治疗提供更好的解决方案。
本文将介绍几种主要的生物活体成像技术及其研究进展。
一、光学成像技术光学成像技术是生物活体成像技术中应用最为广泛的一种技术。
光学成像技术主要包括荧光显微镜、多光子显微镜、光学凝聚共振成像和全息显微术等。
其中,荧光显微镜是最常用的一种技术。
荧光显微镜通过激光或特定波长的光照射样本,使样本中荧光物质受激发,从而发出达到可见光谱范围内的光,进而观察荧光现象。
显微镜成像技术是非常有用的生物成像工具,但是其分辨率有限,在对样本进行深层成像时,会因为生物组织对于光的散射和吸收而受到限制。
多光子显微镜通过激光聚焦点扫描样本,使样本吸收到相对较高能量的激光,从而获得分辨率更高的显微镜图像。
光学凝聚共振成像则可以直接观测到生物分子的振动状态,提供了一种非常有用的药物开发平台。
二、磁共振成像技术磁共振成像技术是一种利用磁场和无线电波对样本进行磁共振信号的检测。
该技术可以获得较高的空间分辨率和灵敏度,不依赖于样本的透射性和荧光物质,具有较好的成像效果。
例如,磁共振成像技术可以用来观察脑内的神经元活动、肿瘤分布等。
但是,磁共振成像技术也存在一些限制。
例如,该技术所产生的磁场对样本的影响较大,可能会对样本造成损伤。
此外,该技术对样本内部结构需要较好的特殊预处理,否则将影响成像的效果。
三、声音成像技术声音成像技术是一种利用声音波特性对样本进行成像的方法。
该技术所使用的声波在穿过生物组织时会发生散射或反射,因此可以产生一系列声波模式,从而获得三维成像结果。
例如,乳腺和甲状腺体是生物体中常见的组织,超声成像技术可用于观察它们的结构和神经系统内部的结构。
总结通过对几种不同生物活体成像技术的介绍,我们可以看到它们在生命科学研究中的重要性。
光学成像技术在生物领域中的应用研究摘要:随着科学技术的不断发展,光学成像技术在生物领域中得到了广泛的应用。
本文将重点关注光学成像技术在生物领域中的应用,包括生物成像技术的原理、常见的光学成像技术以及它们在生物研究方面的具体应用。
随着这些技术的不断发展和改进,光学成像技术在生物研究领域中的应用将会越来越广泛,为生命科学领域的研究和发展带来新的突破。
1. 引言:光学成像技术是一种通过利用光学原理来获取和处理图像的技术,已成为生物研究中不可或缺的工具。
光学成像技术的优势在于其非侵入性、高分辨率以及实时成像的能力,使其成为研究生物学、生物医学和药物研究等领域的重要手段。
2. 光学成像技术的原理:光学成像技术主要基于光学信号与生物样本的相互作用,通过收集、处理和分析光学信号来获得有关生物样本的信息。
常见的光学成像技术包括荧光显微镜、共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)、多光子显微镜和光学相干断层扫描(OCT)等。
3. 光学成像技术在生物领域中的应用:3.1 生物体内研究光学成像技术在生物体内研究中发挥着重要作用。
例如,通过激活荧光探针,荧光显微镜可以实现对生物体内细胞和组织的高分辨率成像。
这种非侵入性的成像方式可以实时观察到生物过程,如细胞的分裂、细胞凋亡等。
而多光子显微镜利用其能量对样本产生非线性作用的特性,可以实现更深入组织的成像,对生物体内微观结构的研究提供了有力的工具。
3.2 药物研究光学成像技术在药物研究中具有重要的应用价值。
荧光成像技术可以用来研究药物的靶向给药与生物分布,通过将荧光标记的药物与生物靶点结合,可以观察药物在生物体内的作用和转运过程。
这种定量分析的方法可以为药物治疗方案设计和疾病治疗效果评估提供重要的信息。
3.3 组织学研究光学成像技术在组织学研究中也有着广泛的应用。
例如,在共聚焦激光扫描显微镜的帮助下,研究人员可以观察和记录细胞组织中的微纳结构以及其关联的病理变化。
光学相干断层扫描技术则可以提供组织结构的非侵入性、高分辨率的三维图像,为组织学研究提供了一种新的途径。
生物医学光学成像技术的发展和应用前景随着科技的不断发展,生物医学光学成像技术正在逐渐成为研究和诊断生物医学领域的重要手段。
光学成像技术是使用光学技术进行高清晰度的影像获取,可不侵入性地观察生物体内部构造和各种生理功能。
其作为一种无创技术,光学成像技术在医学、生物化学、生物物理等学科领域均能得到广泛应用。
一、生物医学光学成像技术的发展历程1. 近代光学近代光学技术的发展奠定了生物医学光学成像技术的技术基础。
在光学仪器发展的过程中,光学透镜技术为数不多地在医学领域发挥了积极的作用。
其中,扫描电子显微镜(SEM)和透射电子显微镜(TEM)等成像技术为生物学体系的抽象理论奠定了坚实的理论基础。
2. 生物医学光学成像技术的应用随着计算机、光学、电子设备和生物实验技术的发展,生物医学光学成像技术得到了进一步的发展和应用。
这种技术逐渐成为了生物医学领域的一种研究手段,并被广泛用于各种生命体系,如细胞、组织和生物体。
同样在医学领域,光学成像技术作为一种侵入技术,为人们提供了一种诊断和治疗手段,如眼科的视网膜相关疾病的诊断、手术过程中的镜头成像等。
3. 现代生物医学光学成像技术的发展趋势生物医学光学成像技术在近年来迅猛发展,进一步加速了其在医学领域的应用。
其发展趋势主要包括以下几个方面:1)源和探测器的改进源和探测器的不断进步是现代生物医学光学成像技术不断发展的关键因素。
通过对不同源的研究和改进,人们可以提高成像质量和分辨率,从而实现更为深入和准确的结构、形态和生理功能的分析。
2)成像算法的优化和完善成像算法的发展也是促进生物医学光学成像技术进步的关键之一。
随着计算机技术的发展,新算法的出现和优化有助于提高成像的处理速度和质量。
同时,算法也有助于消除成像中的噪声和提高分辨率等。
3)新型材料和新型结构的研发随着生物医学领域的发展,新型材料和新型结构的研究也引起了人们的热切关注。
这些新型材料和结构可以为生物体内外部分子、细胞和组织等领域的分析提供更高的分辨率和精度。
光学成像在生物医学研究中的应用价值如何在当今生物医学研究领域,光学成像技术正发挥着日益重要的作用。
它为科学家们深入探究生命的奥秘、诊断和治疗疾病提供了强大的工具。
那么,光学成像在生物医学研究中的应用价值究竟如何呢?光学成像技术能够以非侵入性的方式获取生物体内的信息,这是其最为显著的优势之一。
传统的研究方法,如组织切片和生化分析,往往需要对生物体进行破坏性的操作,而光学成像则可以在不损伤生物体的前提下,实时、动态地观察细胞和组织的生理和病理过程。
例如,利用荧光显微镜,科学家可以标记特定的细胞或分子,然后通过观察荧光信号的分布和强度,了解这些细胞或分子在生物体内的行为和功能。
这种非侵入性的特点使得光学成像能够对同一个生物体进行长期的跟踪和监测,从而更好地了解疾病的发展和治疗效果。
在细胞生物学研究中,光学成像技术的应用价值不可小觑。
通过共聚焦显微镜和超高分辨率显微镜,科学家能够清晰地观察到细胞内的细胞器结构和分子分布。
这有助于深入了解细胞的代谢、信号转导等基本生命过程,以及细胞在疾病状态下的变化。
例如,在癌症研究中,通过观察癌细胞内的线粒体形态和功能变化,可以揭示癌细胞的能量代谢异常,为开发新的抗癌药物提供重要的靶点。
在神经科学领域,光学成像技术为研究大脑的功能和结构提供了有力的手段。
双光子显微镜可以穿透大脑组织,对神经元的活动进行实时监测。
结合基因编辑技术,科学家可以标记特定类型的神经元,并观察它们在学习、记忆等过程中的活动模式。
这对于理解大脑的工作机制、揭示神经系统疾病的发病机制具有重要意义。
例如,在帕金森病的研究中,通过光学成像观察多巴胺能神经元的死亡过程,可以为疾病的早期诊断和治疗提供依据。
光学成像技术在心血管疾病的研究中也发挥着重要作用。
血管内光学相干断层成像(OCT)可以高分辨率地显示血管壁的结构和斑块的形态,帮助医生评估心血管疾病的风险和制定治疗方案。
此外,通过荧光标记的方法,可以观察血液中细胞的流动和黏附情况,深入了解心血管疾病的发病机制。
生物医学光学成像技术的进展随着科技的不断进步,人们对医学领域的需求和期望也在不断提高。
在医学诊断等方面,一项重要的技术便是光学成像技术。
光学成像技术包括了多个领域,如计算机视觉和医学影像学。
近年来,生物医学光学成像技术取得了突破性进展,在生物医学应用中得到了广泛应用。
1. 光学一线成像技术生物医学光学成像技术中的一线成像技术是指利用光学显微镜来观察活体组织、细胞等微小对象的技术。
近年来,该技术已经取得了重大进展。
光学一线成像技术的发展,对于诊断和治疗疾病,特别是在癌症的早期诊断和治疗上,具有重大意义。
2. 光纤光学成像技术纤维光学成像技术已经成为医疗和可视化领域的主要技术之一。
该技术能够通过一根纤维光束进入人体内部进行探查,并且在进入人体的同时记录下进入的位置和位置周围的细节。
这种无创探测可以充分利用海量的信息,并且操作简单。
目前,该技术已经应用于胃肠道和肺、十二指肠等器官的检查和诊断。
3. 包装光投影技术光投影技术是一种将光投影到物体表面的技术,其应用广泛。
在生物医学领域,包装光投影技术则可以利用光的散射、吸收和反射来探索人体的内部结构,并形成高质量的影像。
通过该技术,医生可以直接观察到病变部位和周围组织的情况,进而制定更有效的治疗方案。
4. 光谱成像技术光谱成像是利用光对样品进行扫描,然后根据不同颜色的光波进行测量并计算出样品的成分和物理状态的成像技术。
在生物医学中,光谱成像技术可以对生物分子和细胞的结构、状态进行成像。
对于肿瘤和疾病的早期检测和诊断,该技术有着广泛的应用前景。
5. 纳米光学成像技术纳米光学成像技术是指通过光学方法观察纳米尺度物体的技术。
在生物医学中,纳米光学成像技术的应用对于癌细胞和病变细胞等的精细观察具有非常重要的意义。
针对不同的应用场景,纳米光学成像技术还可以进行表面增强拉曼散射和多普勒成像等技术的综合应用,将生物医学研究和诊断提升到更高的水平。
总而言之,随着光学成像技术的逐步完善和不断革新,现代医学研究取得了重大进展,特别是在疾病的诊断和治疗方面。
基于光电探测器件的生物光学成像技术研究生物光学成像技术是一种非侵入性的成像技术,通过利用光的物理特性对生物体进行成像。
在近年来,随着光电探测器件的发展,生物光学成像技术取得了巨大的突破和进展。
本文将回顾和分析基于光电探测器件的生物光学成像技术的研究进展。
光电探测器件是将光信号转换为电信号的器件,例如光电二极管(photodiode)、光敏二极管(phototransistor)、增强型光电倍增管(photomultiplier tube)、光电子倍增管(electron multiplier phototube)等。
这些光电探测器件在生物光学成像中起到了关键作用,能够高效地转换光信号,实现生物样品的成像和定量测量。
首先,基于光电探测器件的生物光学成像技术在医学领域具有广泛的应用。
例如,X射线光电探测器件可以用于乳腺癌的早期诊断和治疗监测。
这些探测器件通过测量X射线的能量来区分不同组织和病理性改变,为医生提供有效的诊断依据。
此外,X射线光电探测器件还可以用于放射治疗计划的制定和剂量监测。
光电探测器件的高灵敏度和快速响应特性,使其成为医学成像中不可或缺的工具。
其次,生物光学成像技术中的光电探测器件也广泛应用于光学显微成像。
光学显微成像技术基于荧光分子或荧光标记物的发射光信号,通过光电探测器件的接收和转换,实现对生物样品的高分辨率成像。
例如,荧光显微镜结合光电探测器件可以用于细胞和组织的活体成像,从而观察生物样品的动态过程。
此外,基于光电探测器件的双光子显微镜技术可以实现更深层次的组织成像,具有较高的像素分辨能力和更强的穿透深度。
除了医学和生物科学领域,基于光电探测器件的生物光学成像技术还在生物医药研究、环境监测等领域具有广泛应用。
例如,在新药研发过程中,药物的代谢动力学和分布情况可以通过生物光学成像技术进行研究。
通过标记药物分子的荧光探针和光电探测器件的接收和转换,可以实时监测药物在体内的分布和代谢过程,为药物研发提供重要参考。
生物光学成像技术的研究进展及应用前景随着现代生物学和医学的发展,生物光学成像技术在生物医学领域中得到了广泛的应用。
生物光学成像技术是一项以光学成像为基础的技术,其应用主要涉及光学显微成像、光学断层扫描成像(OCT)、光学脑成像等方面,这些技术具有高分辨率、免疫性和无创性的特点,在医学诊断和研究方面具有广泛的应用前景。
1. 光学显微成像技术光学显微成像技术是应用非常广泛的一种生物光学成像技术,其基本原理是使用可见光和荧光成像技术捕捉细胞或组织的显微图像,可以实现对许多生物医学研究问题的研究。
例如,显微成像技术可以帮助科学家在组织和细胞水平上研究生物体内的分子机制,提高早期癌症的诊断准确性,监测药物的疗效和协助手术操作等。
近年来,一些新的显微成像技术的研究和发展已经开始引起学术界的注意。
例如,分子显微成像技术可以通过与光纳米材料的结合,通过显微镜直接监测细胞中的生物分子,研究细胞间的代谢网络等。
这些技术都在更加精细和直观的图像处理和分析方面做出了巨大的贡献,将使生物显微成像技术的应用更加广泛。
2. 光学断层扫描成像(OCT)技术光学断层扫描成像(OCT)技术是利用相干光的相干成像技术来进行三维成像的技术。
OCT技术主要应用于人体眼球和视网膜成像,可以获得高分辨率的三维影像,而且没有任何痛苦和副作用,已成为眼科医学中不可或缺的成像技术。
OCT 技术的发展还将有助于其他医学领域,如皮肤成像、牙齿成像、血管和心脏成像等。
另一方面,OCT技术还在生物基因信号分析和检验方面显示出巨大的潜力。
OCT可以将生物信号的光谱和不同的成像时间关联起来,从而对生物活动进行分析和评估,并发现潜在的医学问题和疾病。
3. 光学脑成像技术光学脑成像技术是基于生物光学成像的一种重要应用,其目的是通过光学成像技术直接获取脑神经活动的信息,以研究脑神经网络的功能和设定新的脑神经信号监测技术。
该技术在神经科学领域的研究、脑活动的过程、脑部疾病、脑干预治疗等方面具有巨大的应用前景。
光子学技术在生物医学中的前沿研究进展引言:光子学技术作为物理学中的一个重要分支,在生物医学领域中具有广泛的应用前景。
它利用光的性质和现代光学技术,研究光的产生、检测、操控和应用,为生物医学研究提供了独特的工具和方法。
本文将着重介绍光子学技术在生物医学中的一些前沿研究进展以及它们在疾病诊断和治疗上的应用。
一、光学成像技术在生物医学中的应用光学成像技术是利用光的散射、吸收、传播等特性来观察和研究生物体结构和功能的一种非侵入性手段。
近年来,光学成像技术在生物医学中的应用取得了长足的进展。
例如,多光子显微镜技术可以用来观察细胞内部结构和分子运动等细节,为细胞生物学研究提供了重要的工具。
另外,近红外光谱技术可以通过测量组织中的光的散射和吸收来判断组织的氧合程度,从而实时监测脑缺氧、心血管疾病等病理过程。
二、光激发发光技术在生物医学中的应用光激发发光(Photoluminescence)技术是利用光的激发作用使物质发出特定的荧光信号,从而实现对物质结构和性质的研究。
在生物医学中,光激发发光技术被广泛应用于细胞和生物分子的探测和定量分析。
例如,荧光标记技术可以通过荧光染料对细胞内特定分子进行标记,通过检测发出的荧光信号来研究细胞功能和疾病机制。
此外,近年来还发展了基于量子点和纳米材料的荧光成像技术,具有高亮度、长寿命等优点,被广泛用于细胞追踪、分子探针和药物递送等方面。
三、光传感技术在生物医学中的应用光传感技术是利用光的散射、吸收等特性来检测和测量物理量、化学物质等的一种敏感手段。
在生物医学中,光传感技术被广泛应用于生物体内的生理参数和药物监测等方面。
例如,光纤传感技术可以通过嵌入光纤探头测量组织中的温度、压力等参数,实现对病灶的定量诊断。
此外,光学腔体传感器技术可以通过光的干涉或共振效应来实现对细胞内或生物分子的微量检测,拥有高灵敏度和高选择性的特点。
四、光治疗技术在生物医学中的应用光治疗技术是利用光的能量来治疗肿瘤和其他疾病的一种疗法。
光学成像技术在生物学中的应用前景生物学是研究生命体结构、功能、发育、动态变化及其相互关系的科学,从最开始的人肉眼观察到现在的显微镜技术,生物学研究手段一直得到了持续的改善和提高。
而随着科技的不断进步,光学成像技术如今已经成为生物学研究的重要手段之一。
本文将探讨光学成像技术在生物学中的应用前景。
一、光学成像技术简介光学成像技术是指利用光线以及物体与光的相互作用,获取物体的信息、形状和内部结构等,并将其以成像形式呈现出来的技术。
其中,常用的光学成像技术包括:显微镜成像技术、光学投影成像技术、摄影成像技术等多种。
二、显微镜成像技术在生物学中的应用显微镜是最早被应用于生物学研究的成像设备之一,随着时代的发展,各种类型的显微镜也不断出现。
如今,显微镜已经成为不同领域生物学家的日常研究手段之一。
借助显微镜,科学家们可以观察到微生物、细胞、分子和组织结构等微观生物学现象。
近年来,显微镜成像技术也得到了持续的发展。
光学准直成像(OPM)是其中重要的一种成像技术,在显微镜成像中具有良好的深度和分辨率。
利用OPM技术,科学家们可以更加精准地获取细胞内部的图像,探究细胞活动的规律和机制。
例如,利用OPM技术可以观察到细胞内脂质体的形态和数量等信息,也可以用于研究细胞融合等现象。
因其分辨率高、光量低等优势被广泛应用于生命科学领域。
三、光学投影成像技术在生物学中的应用光学投影成像技术是指利用透明或半透明的物质对光线的散射、折射、反射和吸收等现象,再将成像物体的光学信息通过透镜或反射镜将其重构在另一平面的技术。
与显微镜相比,光学投影成像技术拓宽了研究领域,能够进行更加宏观的生物学研究。
例如,在神经科学领域,利用光学投影成像技术可以对脑部结构进行研究,如这一技术被应用于课题研究等方面。
光学投影成像技术在生物学研究中的应用极其广泛,可用于分析蛋白质结构,细胞膜形态,细胞分裂,基因表达,甚至整个生物体的解剖学模型等多个领域。
四、摄影成像技术在生物学中的应用摄影成像技术是指将光依靠相机或其他设备记录下来,生成可观看的电子或纸质格式的成像方式。
第34卷第12期自动化学报Vol.34,No.12 2008年12月ACTA AUTOMATICA SINICA December,2008在体生物光学成像技术的研究进展李慧1,2戴汝为2摘要在体生物发光成像和在体荧光成像是近年来新兴的在体生物光学成像技术,能够无损实时动态监测被标记细胞在活体小动物体内的活动及反应,在肿瘤检测、基因表达、蛋白质分子检测、药物受体定位、药物筛选和药物疗效评价等方面具有很大的应用潜力.本文详细介绍了在体生物发光成像和在体荧光成像的特点、系统及应用,比较了它们的异同,综述了在体生物光学成像技术的基本原理和应用领域,讨论了将其应用于临床的进一步发展方向.关键词在体生物光学成像,生物发光成像,荧光成像中图分类号R319Development of In Vivo Optical ImagingLI Hui1,2DAI Ru-Wei2Abstract With the emergence of in vivo optical imaging,bioluminescence imaging andfluorescence imaging can be used to non-invasively monitor the activities and responses of cells marked with optical signals in real time,which are considered to be promising tools for tumor detection,gene expression profiling,protein molecular detection,drug receptor localization,drug screening,and therapeutic evaluation.In this paper,the features,imaging systems,and applications of in vivo bioluminescence imaging and in vivofluorescence imaging have been introduced and compared in detail.The basic theories,applicationfields,and development of in vivo optical imaging in future are reviewed.Key words In vivo optical imaging,bioluminescence imaging(BLI),fluorescence imaging(FI)随着荧光标记技术和光学成像技术的发展,在体生物光学成像(In vivo optical imaging)已经发展为一项崭新的分子、基因表达的分析检测技术,在生命科学、医学研究及药物研发等领域得到广泛应用,主要分为在体生物发光成像(Biolumi-nescence imaging,BLI)和在体荧光成像(Fluores-cence imaging)两种成像方式[1−2].在体生物发光成像采用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或DNA,在体荧光成像则采用荧光报告基团,如绿色荧光蛋白(Greenfluorescent protein,GFP)、红色荧光蛋白(Redfluorescent protein,RFP)等进行标记[3].利用灵敏的光学检测仪器,如电荷耦合摄像机(Charge coupled device camera,CCD camera),观测活体动物体内疾病的发生发展、肿瘤的生长及收稿日期2007-08-08收修改稿日期2007-11-19Received August8,2007;in revised form November19,2007国家自然科学基金(30500131),北京市优秀人才资助项目(20061D0501600216),中国博士后科学基金(20070410146)和中国科学院王宽诚博士后工作奖励基金资助Supported by National Natural Science Foundation of China (30500131),Research Fund for Beijing Distinguished Specialists (20061D0501600216),Chinese Postdoctoral Science Foundation (20070410146),and Chinese Academy of Sciences K.C.Wong Postdoctoral Fellowships1.首都师范大学教育技术系北京1000482.中国科学院自动化研究所复杂系统与智能科学重点实验室北京1001901.Department of Education Technology,Capital Normal Uni-versity,Beijing1000482.Key Laboratory of Complex Sys-tems and Intelligence Science,Institute of Automation,Chinese Academy of Sciences,Beijing100190DOI:10.3724/SP.J.1004.2008.01449转移、基因的表达及反应等生物学过程,从而监测活体生物体内的细胞活动和基因行为[4−8].相对于其他成像技术,如核磁共振成像(Mag-netic resonance imaging,MRI)、计算机层析成像(Computed tomography,CT)、超声成像(Ultra-sonic imaging)、正电子发射断层成像(Positron emission tomography,PET)、单光子发射断层成像(Single photon emission computed tomography, SPECT)等,在体生物光学成像具有巨大的优越性,堪称是分子基因检测领域的革命性技术.它具有如下优点:较高的时间/空间分辨率;在肿瘤和良性/正常疾患之间有高的软组织对比度;成像对比度直接与生物分子相关,适于重要疾病的基因表达、生理过程的在体成像;获得信息丰富、适于多参数复合测量;价格适中等.尽管其测量范围与测量深度有限,但适用于小动物的整体在体成像和在体基因表达成像.表1和表2(见下页)分别给出了几种主要成像技术的应用场合及参数比较[5,9],可以看出,基于分子光学标记的在体生物光学成像技术已经在活体动物体内基因表达规律方面展示了较大优势.近年来,随着生物光学成像设备的研制以及转基因动物的研究,国外发达国家已经将在体生物光学成像技术广泛应用于肿瘤免疫及治疗、基因治疗、药物研发等领域并取得了许多成果[4−8].本文分别介绍了在体生物发光成像和在体荧光成像的特点、系统及主要应用,比较二者在分子探1450自动化学报34卷表1成像技术的主要应用Table1Primary uses of different imaging techniques成像方法主要应用核磁共振成像(MRI)表型、生理成像和细胞跟踪的最好的全方位成像系统等计算机层析成像(CT)肺、骨癌成像等超声成像血管和介入成像等正电子发射断层成像(PET)分子代谢,如葡萄糖、胸腺嘧啶核苷等的成像等单光子发射断层成像(SPECT)探针,如抗体、肽等的成像等荧光反射成像(FRI)表面肿瘤分子事件的快速成像等荧光介导分子层析成像(FMT)对深部肿瘤靶向标记或荧光染料标记进行定量成像等生物发光成像(BLI)基因表达、细胞追踪成像生物发光断层成像(BLT)细胞、分子、基因水平的表达成像表2常用成像技术的参数比较Table2Parameters of imaging techniques成像方法空间分辨率时间分辨率测量深度造影剂价格核磁共振成像(MRI)10∼100m min/h无限制钆,镝和氧化铁离子$$$计算机层析成像(CT)50m min无限制碘$$超声成像50m min mm微型气泡$$正电子发射断层成像(PET)1∼2mm min无限制18F,11C,15O$$$单光子发射断层成像(SPECT)1∼2mm min无限制99mTc,111In(铟)$$荧光反射成像(FRI)1∼2mm s/min<1cm荧光蛋白,近红外荧光染料$荧光介导分子层析成像(FMT)1∼2mm s/min<10cm近红外荧光染料$$生物发光成像(BLI)mm min cm荧光素$$生物发光断层成像(BLT)mm min cm荧光素$$表中:$表示价格<10万美元;$$表示价格在10∼30万美元之间;$$$表示价格>30万美元针、成像原理、光在生物组织中的传输模型和重建算法等方面的异同,综述了在体生物光学成像技术的基本原理和应用领域,讨论了将在体生物光学成像应用于临床的进一步发展方向.1在体生物发光成像1995年,Contag[3]首次在活体哺乳动物体内检测到含Lux操纵子(由荧光素酶基因和其底物合成酶基因组成)的病原菌,在不需要外源性底物的情况下,发出持续的可见光.1997年,他又观察到表达Fluc基因的转基因小鼠,注入底物荧光素(Luciferin)后,荧光素酶蛋白与荧光素在氧、Mg2+离子存在的条件下消耗ATP发生氧化反应,将部分化学能转变为可见光能释放.由于这种生物发光现象只有在活细胞内才会发生,而且发光强度与标记细胞的数目成正比,因此已被广泛应用于在体生物光学成像的研究中.荧光素酶的每个催化反应只产生一个光子,通常肉眼无法直接观察到,而且光子在强散射性的生物组织中传输时,将会发生吸收、散射、反射、透射等大量光学行为[10−11].因此,必须采用高灵敏度的光学检测仪器(如CCD camera)采集并定量检测生物体内所发射的光子数量,然后将其转换成图像.在体生物发光成像中的发光光谱范围通常为可见光到近红外光波段,哺乳动物体内血红蛋白主要吸收可见光,水和脂质主要吸收红外线,但对波长为590∼1500nm的红光至近红外线吸收能力则较差.因此,大部分波长超过600nm的红光,经过散射、吸收后能够穿透哺乳动物组织,被生物体外的高灵敏光学检测仪器探测到,这是在体生物发光成像的理论基础.根据成像方式的不同,在体生物发光成像主要有生物发光成像(Bioluminescent imaging,BLI)和生物发光断层成像(Bioluminescent tomography, BLT)两种.其中,BLI的输出是二维图像,即生物体外探测器上采集的光学信号.其原理简单、使用方便快捷,适用于定性分析及简单的定量计算,但无法获得生物体内发光光源的深度信息,难以实现光源的准确定位[11−12].目前,已有相应的产品问世,如精诺真(Xenogen)公司的IVIS成像系统等.而BLT 则利用多个生物体外探测器上采集的光学信号,根据断层成像的原理,采用特定的反演算法[13−15](如12期李慧等:在体生物光学成像技术的研究进展1451基于多层自适应有限元方法的BLT重建算法等),得到活体小动物体内发光光源的精确位置信息.目前,BLT的光源定位和生物组织光学特性参数的反演问题已经成为国内外在体生物光学成像研究的重点和难点之一,但还仅限于实验室研究阶段,没有达到临床实验的阶段,所以尚未有成熟的成像系统.典型的BLT原型系统是由美国University of Iowa 的Bioluminescence Tomography Laboratory开发的[16−18].2在体荧光成像从20世纪80年代后期开始,一些研究者尝试向生物体内注射外源性的荧光染料作为对比剂,通过非侵入性或内窥的光学测量手段,在肿瘤检测中区分病态和正常组织.1994年,Chalfie等[19]首次报道了绿色荧光蛋白基因在大肠杆菌中的成功表达.此后,作为一种理想的活体标记分子,绿色荧光蛋白被迅速应用于各种生物学研究,特别是肿瘤学的研究[20].在体荧光成像主要以荧光报告基团(如绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白等)作为标记物或对比剂,用特定波长的激发光激发荧光染料,使其吸收入射光产生能级跃迁,到达高能量状态,然后经过特定的时间衰减回基态,并发出波长长于入射光的发射光.与在体生物发光成像相似,红光在哺乳动物体内的穿透性比蓝绿光要强得多,因此在体荧光成像中通常选择红光为激发光,得到近红外波段的发射光.由于荧光蛋白本身对细胞无毒性,无种属、组织和位置特异性,不需要任何反应底物及其他辅助因子,且检测简单,因此在体荧光成像已广泛应用于肿瘤检测和脑功能成像的研究中.根据成像方式的不同,在体荧光成像主要有荧光成像(Fluorescence imaging,FI)和荧光介导分子层析成像(Fluorescence molecular tomography, FMT)两种.其中,FI通常为平面或反射成像,生物体外探测器上采集的二维图像是从活体动物体表射出的荧光信号的总和,它可以快速、便捷、远距离、无损伤地获得小动物的整体在体成像.代表性产品为Xenogen的IVIS成像系统,可检测波长400∼950nm的荧光.但成像深度往往受限(<5mm),难以获得来自深层组织的更加精细和定量的信号.随着对光和生物组织之间相互作用的研究,20世纪90年代后期出现了一种对生物组织光学特性参数(如吸收系数、散射系数等)进行成像的近红外光学散射断层成像技术,也称为荧光介导分子层析成像(FMT).它能够对组织内的荧光报告基团进行量化从而获得高清晰度图像,采用高灵敏度的体外探测器对被测物体进行多点测量和采集;然后,根据光子在强散射性生物组织中的迁移规律和光传播的数学模型,采用特定的反演算法,重建出生物组织内部的荧光光学特性(组织的光学特性参数、荧光寿命、聚集度、量子产额等)的分布图像.FMT 已在小动物模型上得到了有效验证[21−22],2002年Ntziachristos等[23]用FMT开展了小鼠体内组织蛋白酶B活性的影像研究.随着生物学的发展,在体荧光成像尤其是近红外荧光成像能够实现分子水平的功能检测,在基因表达图谱、受体定位、蛋白质功能研究、细胞通路的解释和小分子蛋白之间相互作用的检测等生物技术方面发挥了重要作用.除此之外,与其他成像方式相比,近红外荧光成像还具有以下优点:探测系统简单,成本较低;无电离辐射,染料稳定,适合长期或频率高的监测;成像结果具有一定的定量性.在体荧光成像中,当荧光进入生物组织时,一部分被皮肤表面和生物体内各器官表面反射,另一部分则被生物组织吸收和散射.因此,荧光报告基团越深,到达荧光报告基团的激发光信号越少,产生的发射光也就越少.目前,克服组织内的吸收和散射是荧光报告基因的研究者所面临的最大挑战.3在体生物发光成像与在体荧光成像的比较3.1分子探针在体生物发光成像和在体荧光成像的分子探针均为报告基因(Reporter gene).在体生物发光成像的分子探针主要为荧光素酶,分为两类:一类为Firefly luciferase,底物为Luciferin,形成的产物为绿色;另一类为Renilla luciferase,底物为Coelen-terazine,形成的产物为蓝色.而在体荧光成像的分子探针主要为荧光蛋白,最常用的有绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白.其中,绿色荧光蛋白是一类存在于水母、水螅和珊瑚等腔肠动物体内的生物发光蛋白,当受到紫外或蓝光激发时可自发地发射绿色荧光.因此,适合作为报告基因来研究基因表达、基因调控、细胞分化及蛋白质在生物体内的定位和转运等.在体生物发光成像中,采用荧光素酶光学信号标记细胞,其显著特点为:1)体内检测的高灵敏度;2)极低的背景噪声,极高的信噪比;3)由于荧光素酶和底物的特异作用而发光,特异性极强;4)单位细胞的发光数量很稳定,分子标记物随目标细胞的繁衍而增多,因此外部信号与动物体内的目标细胞数成正比,不会随细胞群体数目的增多而降低信号,可用于精确定量.因此,在体生物发光成像已经成为研究活体动物体内成像的最为有效的工具[6,24−28].荧光素酶和绿色荧光蛋白的在体光学成像[29](见下页表3)表明:荧光素酶比绿色荧光蛋白更灵敏,但由于在体生物发光成像(BLI和BLT)前,需对小动1452自动化学报34卷表3荧光素酶和绿色荧光蛋白的在体光学成像比较Table3Comparison of in vivo optical imaging based on luciferase and GFP报告基因信噪比底物成像时间灵敏度特异性其他GFP低无Milliseconds(200∼300ms)低低无Luciferase高Luciferin Minute(10min)高高需要与氧进行氧化反应产生光能物注射荧光素酶底物,导致很难反复长时间成像,而且成像时间长,因此在不追求高灵敏度的情况下,可以选用在体荧光成像(FI和FMT).与荧光素酶等报告基因相比,绿色荧光蛋白作为活体组织中的报道基因具有明显优势:1)细胞内绿色荧光蛋白的检测仅仅需要激发光的激发,不需要加入底物进行酶–底物反应;2)绿色荧光蛋白的表达与种属无关,无论细胞的种类和位置如何,都能在细胞内自主表达,无需其他外源的辅助因子;3)绿色荧光蛋白对细胞和组织是无毒的,不会扰乱细胞的正常生长和功能;4)绿色荧光蛋白能够克服穿透、毒素、光漂白等不利因素.因此,它是在活体细胞中基因表达、蛋白质定位和发育生物学研究的极其有用的工具.但当受到激发光激发时,生物体的皮肤、毛发和各种组织等会产生非特异性荧光,因此在体荧光成像具有较强的背景噪声,其信噪比远远低于生物发光.而且,激发光需要穿过生物组织到达靶点,发射光再经过吸收、散射等大量光学行为从生物体内透射出来,被体外探测器接收,路径较长,因此CCD探测到的信号水平取决于激发光的强度、发光细胞的数量、靶点的深度、生物组织的光学特性参数(如吸收系数、散射系数)等多方面因素,使得荧光强度很难精确定量.3.2成像原理及成像系统在体生物发光成像(BLI和BLT)不需要外部光源激发,自发荧光少;而在体荧光成像(FI和FMT)需要特定波长的外部激发光源激发,自发荧光较多,故前者比后者灵敏度更高,两者的成像原理图如图1所示.University of Iowa的Bioluminescence To-mography Laboratory开发的在体生物发光断层成像原型系统,主要由CCD相机、固定小动物的支架、控制装置(使支架水平运动、垂直运动或旋转)、完全密闭的不透光的成像暗箱等组成.将小动物麻醉后固定在支架上,并置于成像暗箱中,由控制装置带动支架沿水平方向运动、垂直方向运动或旋转,利用CCD相机从多个不同角度和位置对活体小动物的生物发光现象进行投影成像.然后将采集到的数据信息传输到计算机中,并采用特定的图像重建算法定位小动物体内的发光光源,得到活体动物体内发光光源的精确位置信息.(a)在体荧光成像(b)在体生物光学成像(a)In vivofluorescence(b)In vivo bioluminescenceimaging imaging图1在体生物光学成像的原理图Fig.1Schematics of in vivo optical imagingXenogen公司生产的IVIS成像系统是典型的在体荧光成像系统,主要由CCD相机、成像暗箱、激光器、激发和发射滤光片、恒温台、气体麻醉系统、数据采集的计算机、数据处理软件(Living imaging)等组成.将小动物放置到成像暗箱中,利用高性能的制冷CCD对活体小动物某个特定位置的发光进行投影成像,探测从小动物体内器官发射出的低水平荧光信号,然后将得到的投影图像与小动物的普通图像进行叠加,从而实现对小动物某个特定位置的生物荧光进行量化,并且可以重复进行.由于在体荧光成像具有较强的背景噪声,因此如何采用不同的技术来尽量降低背景信号、获取准确的荧光信息、提高信噪比,就成为提高成像质量的关键.目前,常用的方法主要有多谱段成像(Multi-spectral imaging)技术和时域光学分子成像(Time domain optical imaging,TDOI)技术.多谱段成像技术通常用于信号出现叠加时分离微弱的靶信号,也用于多探针荧光标记;时域光学分子成像技术主要利用生物组织的强散射、低吸收特性,通过观测发射光子从生物组织中通过的时间,将靶点信号与背景信号区分开,一般只用于动物的局部成像.3.3近红外荧光在强散射性生物组织中的传播模型与重建算法实验证明大部分生物组织(如皮肤、脑组织等)12期李慧等:在体生物光学成像技术的研究进展1453相对于近红外荧光是高散射、低吸收的介质,生物组织对光子的作用包括散射、吸收等,光子在生物组织内主要是前向传播.因此,通常采用漫射方程(也称扩散方程)作为描述光子在强散射性生物组织中传输的数学模型,其时域的表达形式如下[30−31]:∇·[D(r)∇Φ(r,t)]−µa(r)Φ(r,t)=1 c ∂Φ(r,t)∂t−S(r,t)(1)其中,Φ(r,t)是在点r处时刻t的平均漫射强度;µa(r)是介质的吸收系数;c是光子在介质中的传输速度;S(r,t)是光源函数;D(r)是与位置相关的光子扩散系数:D(r)=13[µa(r)+µs(r)](2)µs(r)=(1−g)µs(r)是约化散射系数,g是散射角余弦的平均值,µa(r)是介质的散射系数.求解漫射方程的方法有解析法和数值法.由于漫射方程是一个偏微分方程,因此只有当生物组织模型和光源模型比较简单时,才能获得漫射方程的解析解.例如,当组织模型为均匀分布的无限大媒介、光源模型为规则的几何形状(如球形面光源、球形体光源)时,Cong等[32]获得了漫射方程的解析解.但在一般情况下,尤其当介质形状不规则时,漫射方程的解析解通常很难获得,因此一般采用数值解法或随机统计解法求解漫射方程.漫射方程的数值解法主要有:有限差分法和有限元法;随机统计解法主要有:Monte Carlo方法、随机走动法等.这几种方法各有优缺点[33],其中,有限差分法是较早应用的方法,具有算法简单、易于实现等优点,但在处理不规则几何形状及各向异性媒介时比较困难.有限元方法可以有效处理复杂几何形状及各向异性分布的媒介,而且计算速度快,因此广泛应用于光学成像的前向问题[34−37]和逆向问题[38−41]的求解中;但是它最大的缺点是只能得到平均漫射强度(即漫射方程的解),无法得到其他中间物理量信息(如生物组织吸收光能量的分布图等).Monte Carlo方法是一种基于“随机数”的计算机随机模拟方法,通过对大量光子包进行统计计算,得到求解区域内任意位置处有意义的物理量信息[11−12],其最大的优点在于能够处理复杂几何形状和非均匀分布的介质,其最大的缺点是计算量大,运行所需时间较长.根据重建目标的不同,在体生物光学成像的逆问题主要分为两大类:1)生物组织光学特性参数的重建,即已知光源参数、生物组织的几何参数和探测器上得到的投影数据,求解生物组织内部的光学特性参数(如吸收系数、散射系数等);2)生物体内荧光光源位置的反演;即已知生物组织的几何参数、光学特性参数和探测器上得到的投影数据,利用一定的先验知识,定位小动物体内荧光光源的精确位置.由于生物组织边界处或CCD探测器上测量到的荧光散射光强是各边界点的离散数值,数量有限,而待求解区域内部的点往往数量巨大,所以这两类逆问题均为非适定性问题,系统方程组是病态的,其解不唯一,对测量误差及噪声非常敏感.目前通常采用的重建算法大致分为基于扰动的算法(Perturbation-based method)[42−46]、基于梯度的算法(Gradient-based method)[41,47−48]和有限元方法等[13−15].其中,扰动法主要包括Born近似法、Rytov近似法和Newton法,已被广泛应用于生物组织光学特性参数的重建[42−45]和生物体内荧光光源的定位.例如:Cong等[46]根据BLT原型系统的CCD探测器测量得到的荧光信号,采用Born近似法,重建出小鼠体内生物发光光源的位置信息.梯度法则将求解的逆问题转变为非线性优化问题,通过构造一个目标函数并使其最小化来获取最优解.Arridge等[41]利用时域信号的拉普拉斯变换数据和共轭梯度法对圆形区域内的吸收系数和散射系数进行重构,并比较了共轭梯度法(Method of conjugate gradients,CGD)、最速下降法(Method of steepest descent,SD)和代数重构法(Algebraic reconstruction technique,ART)的重构效果,指出CGD法的效果最好.在此基础上,UCL的BORG (Biomedical Optical Research Group)小组开发了时域光学重构软件TOAST(Time-resolved optical absorption and scattering tomography),对吸收系数和散射系数的空间分布进行重构.Hielscher等详细比较了扰动法和梯度法的不同,采用时域数据和梯度法,获得了散射系数和吸收系数的重建结果.在University of Iowa的Bioluminescent Tomogra-phy Laboratory设计开发的BLT原型系统的基础上,Cong等[15]不仅采用有限元方法获得了漫射方程的数值解,而且采用有限元法实现了荧光光源的反演,取得了比较好的重建结果.Lv等[13]利用仿体实验数据和仿真数据,实现了基于多层自适应有限元方法的荧光光源位置的重建,实验证明了此重建算法具有良好的鲁棒性和较高的效率.虽然针对在体生物光学成像的两类逆问题都取得了一定的研究成果,但重建算法仍存在一定局限性:1)基于扰动的算法不仅对初始值的依赖性很大,而且需要不断对系统的雅可比矩阵求逆,但雅可比矩阵一般是病态的,因此很难得到理想结果;2)在实际仿真过程中,基于梯度的优化算法往往在最初几步下降速度较快,随后收敛速度变慢,而且对距离边界较近的位置变化敏感,因此对生物组织光学特性参数的重建精度不理想.如何减小初始值对重建结1454自动化学报34卷果的影响、提高算法的收敛速度和重建精度是需要进一步探讨的问题;3)基于有限元方法的重建算法,所采用的生物组织和荧光光源还仅限于由规则几何体组成的模型,应用于真实小动物体内生物发光的重建还未见报道,而且网格剖分的好坏直接影响反演结果的精度,导致生物体内荧光光源的定位误差较大,因此有待于更深入的探索和研究.4在体生物光学成像的应用作为一项新兴的分子、基因表达的分析检测技术,在体生物光学成像已成功应用于生命科学、生物医学、分子生物学和药物研发等领域,取得了大量研究成果,主要包括:在体监测肿瘤的生长和转移、基因治疗中的基因表达、机体的生理病理改变过程以及进行药物的筛选和评价等.4.1在体监测肿瘤的生长和转移利用在体生物光学成像技术,通过荧光素酶或绿色荧光蛋白标记肿瘤细胞,可以实时监测被标记肿瘤细胞在生物体内生长、转移、对药物的反应等生理和病理活动,揭示肿瘤发生发展的细胞和分子机制.Contag等[20]将荧光素酶和绿色荧光蛋白作为报告基因,对肿瘤细胞进行活体成像,探讨了使用报告基因在细胞分子水平研究肿瘤的前景,并指出在体生物光学成像技术具有较高的灵敏度,尤其在监测肿瘤细胞的生长方面具有较大优势.Yang 等[49−50]首先利用光学成像系统对表达绿色荧光蛋白的肿瘤实现了实时非侵入性成像,记录了肿瘤的转移过程,开辟了在整体水平上无创、在体、实时跟踪肿瘤发生、发展和转移等生物学行为的崭新领域. Jenkins等[51]将标记了荧光素酶基因的人类前列腺癌细胞注射到小鼠体内,利用在体生物光学成像系统,实时、在体监测了前列腺癌细胞化疗后的复发和转移情况.基于绿色荧光蛋白的在体生物光学成像也在肺癌、大肠癌、前列腺癌、胰腺癌、黑色素瘤、脑胶质瘤和乳腺癌等多种肿瘤的生长转移等研究中得到了越来越广泛的应用[49−50,52−53].4.2在体监测基因治疗中的基因表达随着后基因组时代的到来和人们对疾病发生发展机制的深入了解,在基因水平上治疗肿瘤、心血管疾病、AIDS和分子遗传病等恶性疾病已经得到国内外研究人员越来越广泛的关注.如何客观地检测基因治疗的临床疗效判断终点,有效监测转基因在生物体内的传送,并定量检测基因治疗的转基因表达,已经成为基因治疗应用的关键所在.通过荧光素酶或绿色荧光蛋白等报告基因,在体生物光学成像技术能够进行基因表达的准确定位和定量分析,在整体水平上无创、实时、定量地检测转基因的时空表达[54].McCaffrey等[55]将荧光素酶标记在靶基因上,应用siRNA及shRNA减弱了小鼠转染的荧光素酶的表达,在活体动物体内首次实时观察到siRNA对特异靶基因表达的阻断作用.以病毒[56−57](如腺病毒及腺相关病毒等)作载体,将荧光素酶基因或绿色荧光蛋白等作为报告基因加入载体,采用在体生物光学成像,能够实时观察病毒在动物体内的侵染活动,获取病毒侵染部位等相关信息.4.3揭示机体的生理病理改变过程目前,在体生物光学成像技术已成功应用于干细胞移植、肿瘤免疫、毒血症、风湿性关节炎、皮炎等发病机制的研究中,可以实时监测生物机体的生理病理改变过程,具有重要的临床意义.应用转基因鼠,Wang等[58]将荧光素酶基因转导于人类造血干细胞(Hematopoietic stem cells,HSC)中,并将其植入脾及骨髓,利用在体生物光学成像技术,揭示了HSC在小鼠骨髓腔中植活、增殖等动态信息,实时监测HSC的后代在小鼠体内的生长等.Kim 等[59]将荧光素酶基因转染于神经前体细胞(Neural progenitor cell,NPC),并注射入小鼠脑梗模型中,在体生物光学成像系统显示神经前体细胞迅速游走聚集至梗塞病灶处.风湿性关节炎和类风湿性关节炎的动物模型研究表明:荧光报告基因在患关节炎的关节局部产生荧光信号,在健康组织周围未见荧光信号,能够动态观测关节炎的发生和发展,对关节炎疾病的治疗具有重要意义.另外,在体生物光学成像技术在生物大分子间相互作用及细胞凋亡的研究中也取得了一定进展.Paulmurugan等[60]将胰岛素样生长因子与胰岛素样生长因子结合蛋白分别用绿色荧光蛋白及Renilla荧光素酶基因融合,研究它们之间在活体小动物体内的相互作用.4.4药物的筛选和评价目前,转基因动物模型已大量应用于病理研究、药物研发、药物筛选和药物评价等领域.通过体外基因转染或直接注射等手段,将荧光素酶或绿色荧光蛋白等报告基因标记在生物体内的任何细胞(如肿瘤细胞、造血细胞等)上,采用在体生物光学成像技术对其示踪,了解细胞在生物体内的转移规律,不仅能够检测转基因动物体内的基因表达或内源性基因的活性和功能,而且能够对药物筛选及疗效进行评价.Zhang等[61]利用转基因鼠,研究可诱导的NO合成酶在急慢性免疫反应中的作用,并以此对多种化合物进行抗免疫反应的测试和筛选.肺癌、前列腺癌、黑色素瘤、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌和脑癌的原位GFP肿瘤的整体荧光成像模型已经建立[7],利用转移鼠和血管鼠实现了抗。