高压蒸汽灭菌
湿热灭菌常用的方法有常压蒸汽灭菌和高压蒸汽灭菌。高压蒸汽灭菌的原理是在密闭容器里蒸汽不能扩散到外面去，而聚集在容器中，随着蒸汽的增加，压力升高，温度也相应增加，易使蛋白质变性。多数细菌和真菌的营养细胞在60℃左右处理15min后即可杀死，酵母菌和真菌的胞子要耐热些，要用80℃以上的温度处理才能杀死，而细菌的芽胞更耐热，一般要在120℃下处理15min才能杀死。为达到良好的灭菌效果，一般要求温度应达到121℃(压力为0.1MPa)，时间维持15-30min。也可采用在较低的温度(115℃，即0.075MPa)下维持35min的方法。
高压蒸汽灭菌器的基本构造如下：
1) 内外锅外锅或称“套层”，供贮存蒸汽用，连有用电加热的蒸汽发生器，并有水位玻管以标志盛水量。内锅也叫灭菌室，是放置灭菌物的空间。可配制铁蓖架以分放灭菌物。目前大多数灭菌器内外锅是一体的。
3)压力表内外锅各装一只，老式的压力表上标明三种单位：公斤压力单位(kg/cm2)，英制压力单位(1b/in2)和温度单位(℃)，便于灭菌时参照。现在的压力表用MPa表示。
4)温度计可分为两种，一种是直接插入式的水银温度计，装在密闭的铜管内，焊插在内锅中．另一种是感应式仪表温度计，其感应部分安装在内锅的排气管内，仪表安装于锅外顶部．便于观察。
5)排气阀一般外锅、内锅各一个，用于排除空气。新型的灭菌器多在排气阀外装有汽液分离器(或称疏水阀)．内有由膨胀盒控制的活塞。利用空气、冷凝水与蒸汽之间的温差控制开关，在灭菌过程中，可不断地自动排出空气和冷凝水。
6)安全阀或称保险阀．利用可调弹簧控制活塞，超过额定压力即自动放气减压。通常调在额定压力之下，略高于使用压力。安全阀只供超压时安全报警之用，不可在保温时用作自动减压装置。
7)加热源除直接引入锅炉蒸汽灭菌外，都具有加热装置。近年来的产品以电热为主，即底部装有调控电热管，使用比较方便。有些产品无电热装置，则附有打气煤油炉等。手提式灭菌器也可用煤炭炉作为热源。
1：首先检测锅内水是否到位，加水不可过少，以防将灭菌锅烧干，引起炸裂事故，加水过多则有可能引起灭菌物积水。
2:放入带灭菌的物体，注意保留空隙，使蒸汽容易进入
3：拧紧锅盖，设定温度为121℃，时间为20min
注意事项：
1：堆放物品时，严禁堵塞安全阀和放气阀，必须留出空位保证空气畅通，否则易造成容器爆裂
2：灭液体时，装液量不超过容器的3/4
3:要定期检查安全阀的可靠性，安全阀或称保险阀。利用可调弹簧控制活塞，超过额定压力即自动放气减压。通常调在额定压力之下，略高于使用压力。安全阀只供超压时安全报警之用，不可在保温时用作自动减压装置。工作压力超过165KPa不起跳，需要更换安全阀
4：糖液、牛奶、明胶等只能在常压蒸汽灭菌，不宜用高压蒸汽灭菌
5：必须将灭菌器内的冷空气完全排除，才能达到完全灭菌的目的。
6：在灭菌时必须保证待灭菌的材料能通入蒸汽，如试管应拧松盖子，容器应采用带蒸汽出入口的。
