食品中玉米赤霉烯酮的快速检测 胶体金免疫层析法(KJ201913)

挪I分析与检测胶体金免疫层析技术快速检测谷物中的黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素□贺丽丽拜发分析系统销售（北京）有限公司1971 年，Faulk 和 Taylor 首次将胶体金引入免疫化学领域，建立了 以胶体金标记抗原（或抗体）检测相 应抗体（或抗原）的免疫学新方法。

自此，胶体金标记技术成为继荧光标 记、酶标记和放射性免疫标记之后的 又一新型免疫标记技术〇经过近50年的 发展，免疫胶体金标记技术已较为成 熟，并被广泛应用于电镜水平研究、光显微细胞化学、免疫沉淀及蛋白质 染色技术中。

此外，这一技术还被引 进免疫诊断/检测领域，并在医学检验、植物学诊断、刑侦、食品安全检测方面应用广泛。

德国拜发生产的 RIDA®QUICK系列就是利用胶体金免疫层析原理制备成胶体金免疫层析横流检测卡，结合德拜发集团独有的RIDA®SM ARTAPP读数仪，能对食品中存在的霉菌毒素进行准确定量检测。

本文通过实验对德国拜发集团生产的RIDA®QUICK霉菌毒素系列在谷物、花生及花生粗榨油中的检测应用进行客观评价。

1材料与方法1.1材料RIDA®QUICK Aflatoxin RQSvRIDA®QUICK Zearalenon RQS、RIDA®QUICK DON 及 RIDA®SMART APP读数仪，均由德国拜发集团提供；用于添加回收实验的标准品为Trilogy®标准品，用于验证实验过程的参考物质为Tri丨ogy®参考物质；用于配合HPLC高效液相色谱使用并进行比对试验的霉菌毒素免疫亲和柱为EASI-EXTRACT®A F L A T O X IN、E A S I-E X T R A C T®ZEARALENONE、D0NPREP®。

以上所有材料均由德国拜发集团生产，购买自拜发分析系统销售（北京）有限公司。

《饲料及饲料原料中玉米赤霉烯酮的快速筛查胶体金快速定量法》江西省地方标准编制说明一、标准制定意义（一）介绍玉米赤霉烯酮(Zearalenone，ZEN)为一种白色结晶，又称F-2毒素，是由禾谷镰刀菌等菌种产生的有毒代谢产物。

1962年Stob等首先从发霉的玉米中分离得到了该毒素，命名为玉米赤霉烯酮；1966年Urry首次阐明了该毒素的结构，并将此结构命名为F-2毒素，后又被改称为ZEN。

ZEN为白色晶体，分子式C18H22O5，化学名为6-(10-羟基-6氧基-1-碳烯基)β-雷琐酸-μ-内酯[6-(10-hydroxy-6-OXO-trans-1-undeceny)β-resorcylicacid lactone]，熔点164~165℃，紫外线光谱最大吸收为236nm、274nm和316nm。

红外线光谱最大吸收为970nm，其甲醇溶液在254nm短紫外光照射下呈明亮的绿-蓝色荧光。

ZEN不溶于水，溶于碱性水溶液、乙醚、苯、氯仿、乙酸乙酯、甲醇及乙醇等。

在植物体内，ZEN主要代谢产生α-玉米赤霉烯醇(α-Zearalenol，a-ZOL)。

在动物及人体内，除了可以代谢产生α-ZOL外，ZEN还可代谢产生β-玉米赤霉烯醇(β-zearalenol，β-ZOL)，α-ZOL和β-ZOL又可以相互转化并进一步代谢产生α-玉米赤霉醇(zeranol，α-zearalanol，ZAL)及β-玉米赤霉醇(Taleranol，β-Zearalanol，TAL)，而ZAL、TAL以及玉米赤霉醇(zearalanone，ZAN)又可相互转化。

ZEN主要污染玉米、高粱、小麦、大麦等粮谷类作物及其制品。

Toshitsugu对19个国家和地区的谷物、食品及饲料中所含的ZEN进行了调查发现，包括中国、阿根廷、加拿大、波兰及也门等众多国家和地区的样品均有不同程度的污染。

借助被污染的乳制品、肉制品等动物源性食品，ZEN及其代谢产物可以进入人体，给人类的健康造成威胁。

专利名称：用胶体金免疫层析试检测玉米赤霉烯酮毒素的方法专利类型：发明专利
发明人：严亚贤,王元凯,王君,孙建和
申请号：CN200910307803.0
申请日：20090927
公开号：CN101650368A
公开日：
20100217
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：一种检测技术领域的用胶体金免疫层析试检测玉米赤霉烯酮毒素的方法，包括如下步骤：将ZEN半抗原通过活泼酯法分别与BSA和OVA偶联，得到ZEN的偶联物ZEN－BSA和ZEN－OVA；利用ZEN－BSA作为免疫原，采用常规方法制备抗ZEN的单克隆抗体；用柠檬酸三钠还原法制备
40nm的胶体金，用该胶体金标记经过透析除盐处理的抗ZEN的单克隆抗体；将步骤三所得的已标记的单克隆抗体喷涂到金标垫上，将ZEN－OVA喷涂到T线，兔抗鼠的单克隆抗体喷涂到C线，组装成试纸条，干燥；将待测样品用甲醇提取，离心，取上清，将上清滴入试纸条的样本槽中，获取T线和C 线的显色，鉴定，得到结果。

本发明可特异性检测ZEN毒素，准确率高，检测速度快，所需时间仅为5～10分钟。

申请人：上海交通大学
地址：200240 上海市闵行区东川路800号
国籍：CN
代理机构：上海交达专利事务所
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食品科技玉米赤霉烯酮及其类似物残留检测技术研究进展王博文，王 博（河南科技学院，河南新乡 453003）摘 要：玉米赤霉烯酮及其类似物是一种有害物质，它们会对动物的生殖功能和免疫机能产生抑制作用，从而直接或间接地影响动物的健康，对畜牧业造成极大的危害。

因此，开展玉米赤霉烯酮及其类似物的检测研究非常必要。

本文对目前玉米赤霉烯酮及其类似物的检测方法进行了详细介绍，为未来研究玉米赤霉烯酮及其类似物多残留检测方法提供了重要的参考。

关键词：玉米赤霉烯酮；毒性作用；检测方法Research Progress on Residue Detection Techniques for Zearalenone and Its Analogues in CornWANG Bowen, WANG Bo(Henan Institute of Science and Technology, Xinxiang 453003, China)Abstract: Zearalenone and its analogues are harmful substances that can inhibit the reproductive function and immune system of animals, directly or indirectly affecting their health and causing great damage to the livestock industry. Therefore, it is essential to conduct research on the detection of zearalenone and its analogues. This chapter provides a detailed introduction to the current detection methods for zearalenone and its analogues, providing important references for future research on multi-residue detection methods of zearalenone and its analogues.Keywords: zearalenone; toxic effects; test methods玉米赤霉烯酮是一种由镰刀菌产生的生物毒素，目前已知的类似物至少有15种，其中常见的有5种，包括α-玉米赤霉烯醇（α-Zearalenol，α-ZOL）、β-玉米赤霉烯醇（β-Zearalenol，β-ZOL）、α-玉米赤霉醇（α-Zeranol，α-ZAL）、β-玉米赤霉醇（β-Zearalenol，β-ZAL）和玉米赤霉酮（Zearalanone，ZAN），这些毒素主要污染农产品及其副产品，导致农产品的可用性下降。

玉米赤霉烯酮（ZEN），又称F-2毒素，是由镰刀菌属真菌产生的一种次级代谢产物，具有雌激素样活性的非甾体类真菌毒素，起初发现于玉米赤霉病之中，后经突变衍生出多种毒素种类。

玉米赤霉烯酮主要通过被污染的谷物、肉及奶制品等进入人体，危害人体生殖系统的发育，会对动植物造成生殖毒害与致畸突变。

为了人们的健康，对粮食中玉米赤霉烯酮的含量必须严格控制。

玉米赤霉烯酮广泛存在于玉米、大米、小麦、豆类等粮油作物中，其污染范围广、程度深、危害大。

为了控制玉米赤霉烯酮的危害，各国制定了其在粮油产品中的限量标准，以利于保障食品安全[1]。

我国对玉米赤霉烯酮的最高限量为60μg/kg。

为了控制玉米赤霉烯酮在粮食产品中的含量，近年来兴起了一些快速、灵敏、准确的玉米赤霉烯酮检测方法。

1化学检测方法1.1薄层色谱法薄层色谱法主要的优点是成本低、过程简便，因此是应用较多的检测方式。

但该方法的检测灵敏度却是所有方法中最低的。

薄层色谱法对玉米赤霉烯酮含量检测的灵敏度极限为300ng/g。

在检测过程中主要采用CHCl3、色谱硅胶、甲醇-三氯甲烷等方式，并在此过程中依次对样品进行提取、层析净化与洗脱。

1.2气相色谱—质谱联用法气相色谱—质谱联用法检测灵敏度较高，不仅能对玉米赤霉烯酮、DES等进行检测，二期还能够同时对其他多种毒素进行检测，该检测法主要是采用比对法对结果进行评价，其结果具有很高的准确度。

该方法中主要是对样品代谢物进行标准谱图库的比对，所用设备较为特别，因此在应用中只能作为大型或官方检测方法。

气相色谱—质谱联用法也是美国AOAC官方指定检测方法。

粮油作物中玉米赤霉烯酮盛开（吉林省吉林市粮油监测站，吉林市132000）摘要：文章就玉米赤酶烯酮的常用检测方法进行了概述和比较，同时对相关方法的检测原理及最新研究进展进行了重点阐述，并对玉米赤酶烯酮检测技术的研究方向提出建议。

关键词：玉米赤霉烯酮；真菌毒素；检测方法中图分类号：S816.17文献标识码：A文章编号：2096-8515（2022）01-0033-03--331.3高效液相色谱法玉米赤霉烯酮具有荧光特性，因此可运用HPLC检测其在样品中的含量，该方法灵敏度较高，玉米赤霉烯酮检测极限为0.31μg/kg。