实验七:室内及皮肤表面微生物分布测定技术
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检测不同环境中的细菌和真菌实验报告一、实验目的本实验的目的是通过对不同环境中的样本进行检测,了解不同环境中细菌和真菌的分布情况,探究环境对菌群的影响,为环境监测提供科学依据。
二、实验方法1. 实验材料•不同环境中的样本:沙土、水、空气、人体皮肤•培养基:营养琼脂平板、麦康凯平板、青霉素葡萄糖琼脂平板、分解蛋白琼脂平板、利福平琼脂平板•器材:移液器、无菌牵引针、灭菌铁锤、无菌移液管、灭菌恒温培养箱、显微镜2. 实验步骤1.取不同环境中的样本,分别取样制备不同培养基的平板。
2.用无菌的牵引针或移液器取样并沿制作好的培养基平板中划线均匀分布。
空气样本需用暴露法取样,将板子直接置于空气中,进行杂菌检测(需注意无法控制检测范围)。
3.将已涂制样本的培养基平板倒置放入灭菌恒温培养箱中,在适当的温度下培养。
4.观察培养基平板的菌落形态、颜色,并进行初步分类鉴定,进行纯化。
5.取纯化后的菌株进行后续实验,如细菌菌株的致病性测试、真菌菌株的发酵等。
三、实验结果及分析通过对不同环境中的样本进行检测,我们观察到了不同的细菌和真菌菌株生长在各自培养基上的繁殖情况。
在沙土样本中检测到了多种细菌菌株和真菌菌株,包括链球菌、大肠杆菌、芽孢杆菌、表皮葡萄球菌等。
这表明沙土中生物数量丰富,成分复杂。
在水样本中检测到了较多的芽孢杆菌、肠球菌、绿脓杆菌等细菌菌株,同时也检出了一些真菌菌株,如曲霉、真菌等。
在空气样本中检测到了多种细菌菌株,主要包括链球菌、葡萄球菌、沙眼衣原体等。
空气中的细菌数量相比沙土和水要少得多,种类也相对单一。
在人体皮肤样本中,检测到了多种细菌菌株和真菌菌株,包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、马拉色葡萄球菌等。
这表明人体皮肤表面存在着大量的微生物。
通过观察不同环境中的菌落繁殖情况,我们可以发现,细菌和真菌的分布受到环境的影响很大,不同环境中的微生物组成差异很大。
在进行环境监测时,我们需要考虑到不同环境中微生物的分布情况,制定合理的采样方案和检测方法。
微生物学实验报告(一)题目:实验室环境和人体表面的微生物观察姓名:喻曙光学号:年级班级:生命学院2010级生命基地组别:4同组者:一、实验器材1.培养基肉膏蛋白胨琼脂平板2.溶液和试剂无菌水,牛肉膏,蛋白胨,NaCl,琼脂、氢氧化钠溶液等。
3.仪器和其他用品灭菌棉签(装在试管内),试管,试管架,酒精灯,记号笔,废物缸,接种环,三角瓶,烧杯,量筒,玻璃棒,天平,高压蒸汽灭菌锅,pH试纸(pH5.5~9.0),棉花,牛皮纸,麻绳,纱布,平皿、剪刀等。
二、目的要求1、证实实验室环境与人体表面存在微生物。
2、体会无菌操作的重要性。
3、观察不同菌落类群微生物的菌落形态特征。
4、比较不同条件下细菌的数量及类型。
5、熟练掌握从固体培养物中转接微生物的无菌操作技术。
6、学习掌握培养基的配置原理。
7、通过对几种培养基的配制,掌握配制培养基的一般方法和步骤。
三、基本原理如何知道我们的周围存在看不见的微生物呢?也就是说任何使看不见的变得看得见呢?第三部分介绍的显微技术是一种方法,这是通过发的微生物个体,使我们能过看到他们。
另一种方法是通过放大成子细胞群体(菌落),使我们看到他们的存在,即通过培养的方法是肉眼看不见的单个个体在固体培养基上经过长期的生长繁殖形成几百万的菌聚集在一起的肉眼可见的菌落。
本实验将采用后一种方法检查实验室环境和人体表面微生物,从而使我们牢记无菌概念。
高温对微生物具有致死效应,因此在微生物的转接过程中,一般在火焰旁进行,并用火焰直接灼烧接种环,以达到灭菌的目的,但一定要保证其冷却后方可进行转接,以免烫死微生物。
高压蒸汽灭菌。
高压蒸汽灭菌是将灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅隔套间的水沸腾儿产生蒸汽。
待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀,继续加热,此时,由于蒸汽不能溢出,儿增加了灭菌锅内的压力,从而使沸点增高,得到高于100°C的温度。
导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
一、实验目的1. 了解皮肤表面细菌的种类和分布情况;2. 掌握皮肤表面细菌的采集和分离方法;3. 熟悉细菌培养、观察和鉴定的基本技术。
二、实验原理皮肤是人体与外界环境接触的最大器官,易受环境感染,皮肤表面的菌群种类繁多,与生活环境密切相关。
皮肤表面的细菌主要分为两大类:正常菌群和条件致病菌。
正常菌群对人体有益,参与人体的生理代谢和免疫调节;条件致病菌在正常情况下对人体无害,但在特定条件下可引起感染。
三、实验材料1. 实验动物:小白鼠;2. 实验试剂:生理盐水、酒精、碘伏、培养基、接种环、无菌棉签、培养皿、显微镜等;3. 实验仪器:高压蒸汽灭菌器、酒精灯、恒温培养箱、显微镜等。
四、实验方法1. 采集皮肤样本:取小白鼠皮肤,用无菌棉签擦拭,收集擦拭物;2. 分离细菌:将擦拭物涂布于培养基上,37℃恒温培养24小时;3. 观察和鉴定细菌:用接种环挑取菌落,进行革兰氏染色,观察菌落形态;选取部分菌落进行生化实验,鉴定细菌种类。
五、实验结果1. 革兰氏染色结果:观察菌落形态,发现部分菌落为革兰氏阳性菌,部分菌落为革兰氏阴性菌;2. 生化实验结果:通过生化实验,鉴定出以下细菌种类:(1)葡萄球菌属:凝固酶阳性,触酶阳性;(2)链球菌属:触酶阴性,溶菌酶阳性;(3)大肠杆菌属:触酶阳性,氧化酶阴性;(4)厌氧菌:触酶阴性,氧化酶阴性。
六、实验讨论1. 皮肤表面细菌种类繁多,主要包括葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、厌氧菌等;2. 革兰氏染色是细菌鉴定的基本方法,通过观察菌落形态,初步判断细菌种类;3. 生化实验是细菌鉴定的关键步骤,通过一系列生化反应,进一步确定细菌种类。
七、实验结论1. 皮肤表面细菌种类繁多,对人体有益,参与生理代谢和免疫调节;2. 通过采集、分离、培养和鉴定,掌握了皮肤表面细菌的基本实验方法;3. 了解皮肤表面细菌的种类和分布情况,有助于预防和治疗皮肤感染。
八、实验反思1. 实验过程中,应注意无菌操作,避免污染;2. 实验结果可能受到多种因素影响,如采样方法、培养条件等,需多次重复实验,提高实验结果的可靠性;3. 实验过程中,应注重实验操作技能的培养,提高实验水平。
实验室环境和人体表面微生物的检查摘要:微生物多种多样,无处不在。
本次试验初次学习了如何配制培养基和灭菌,并接种了实验室环境和人体表面的微生物,经过一周的培养,用肉眼观察处在各种环境下的微生物菌落的形态特征。
证明了实验室环境和人体表面存在多种多样的微生物,让我们意识到“无菌”和灭菌的重要性,建立“无菌概念”和练习掌握一套过硬的“无菌操作技术”。
关键词:微生物环境培养菌落1前言1.1实验目的:1、证实实验室环境与人体表面存在微生物。
2、体会无菌操作的重要性。
3、观察不同类群微生物的菌落形态特征。
4、练习掌握无菌操作技术。
1.2实验原理:通过培养的方法使肉眼看不见的单个菌体在固体培养基上经过培养繁殖形成肉眼可见的菌落。
2材料与方法2.1材料2.1.1溶液及试剂牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂条、无菌水,NaOH溶液及HCl溶液2.1.2仪器和其他用具培样皿、三角瓶、试管、烧杯、接种环、酒精灯、记号笔、牛皮纸、灭菌棉签、试管架、废物缸等。
2.2方法与步骤2.2.1 牛肉膏蛋白胨培养基制备(见表1)。
步骤:称量→熔化→调PH表1:牛肉膏蛋白胨培养基实际用量(注:调PH到 7.0~7.2)试剂牛肉膏蛋白胨NaCl 琼脂水用量 1.5g 5g 2.5g 10g 500ml2.2.2 实验步骤步骤内容备注1高压灭菌:1.将三角瓶与装入5-10ml无菌水的2支试管塞入棉塞并用牛皮纸线绳包扎,将20个培养皿用牛皮纸包好;2.放入灭菌锅开始灭菌。
121℃灭菌20min2琼脂平板制备:1.将培养基冷却后,右手拿三角瓶,左手拿出棉塞,并快速将瓶口靠近火焰。
2.右手拿锥形瓶,左手拇指与食指将培养皿打开一道缝隙,右手将三角瓶的培养基倒入培养皿中,左手立即盖上培养皿盖。
3.冷到培养皿,接种时,三角瓶口和半开的培养皿均要保持在火焰旁,保证无杂菌进入。
却培养皿。
3接种:1.取棉签并用无菌水蘸湿。
2.用湿棉签分别擦拭手掌,桌面,门把手等(详见表2),并将6个培养皿置于空气中不同的时间。
一、实验名称皮肤细菌检查二、实验目的1. 了解皮肤细菌的种类及分布情况。
2. 掌握皮肤细菌检查的基本方法。
3. 提高微生物学实验技能。
三、实验原理皮肤是人体最大的器官,具有保护、分泌、排泄、调节体温等功能。
皮肤表面存在大量的微生物,包括细菌、真菌、病毒等。
其中,细菌是皮肤微生物群落中最主要的组成部分。
皮肤细菌检查是通过采集皮肤标本,对细菌进行分离、培养、鉴定等过程,以了解皮肤细菌的种类及分布情况。
四、实验材料与仪器1. 实验材料:皮肤标本、营养琼脂平板、无菌生理盐水、无菌棉签、无菌剪刀、无菌镊子、酒精灯、高压蒸汽灭菌器、显微镜等。
2. 实验仪器:恒温培养箱、酒精灯、接种环、接种针、试管、烧杯、玻璃棒、培养皿等。
五、实验步骤1. 标本采集:取无菌棉签,蘸取无菌生理盐水,在患者皮肤表面轻轻涂抹,收集皮肤标本。
2. 标本制备:将采集的皮肤标本置于无菌生理盐水中,充分振荡,制成均匀的悬液。
3. 接种:取营养琼脂平板,用无菌镊子夹取接种环,蘸取悬液,在平板上均匀涂布。
4. 高压蒸汽灭菌:将接种后的平板放入高压蒸汽灭菌器中,121℃灭菌15分钟。
5. 培养与观察:将灭菌后的平板倒置放入恒温培养箱中,37℃培养24小时。
6. 鉴定:观察菌落特征,进行初步鉴定。
7. 结果记录:将观察到的菌落特征及初步鉴定结果记录在实验报告单上。
六、实验结果1. 菌落特征:观察到的菌落呈圆形、白色、表面光滑、边缘整齐,部分菌落有溶血现象。
2. 初步鉴定:根据菌落特征,初步判断为金黄色葡萄球菌。
七、实验讨论1. 皮肤细菌种类繁多,本次实验主要观察金黄色葡萄球菌,说明金黄色葡萄球菌在皮肤表面较为常见。
2. 实验过程中,应注意无菌操作,避免污染。
3. 本实验采用营养琼脂平板培养,有利于观察菌落特征,为细菌鉴定提供依据。
4. 皮肤细菌检查对了解皮肤健康状况具有重要意义,有助于预防和治疗皮肤感染性疾病。
八、实验总结通过本次实验,我们掌握了皮肤细菌检查的基本方法,了解了皮肤细菌的种类及分布情况。
一、实验目的本次实验旨在探究人体皮肤表面的细菌分布情况,了解不同部位的皮肤上细菌的种类和数量,以及不同条件下细菌生长和分布的差异。
二、实验原理皮肤作为人体最大的器官,表面存在着大量的微生物,其中以细菌最为常见。
细菌在皮肤表面的分布受多种因素影响,如皮肤类型、环境条件、个体差异等。
本实验通过取样、培养、观察和计数等方法,分析不同部位的皮肤细菌分布情况。
三、实验材料与仪器1. 材料:- 皮肤样本:手臂、背部、面部、颈部等- 无菌棉签- 无菌生理盐水- M-H琼脂培养基- 血平板- 恒温培养箱- 显微镜- 计数器2. 仪器:- 电子天平- 灭菌锅- 酒精灯- 培养皿- 移液器四、实验方法1. 取样:- 使用无菌棉签分别擦拭手臂、背部、面部、颈部的皮肤表面。
- 将棉签尖端浸入无菌生理盐水中,轻轻摇匀,使细菌悬浮。
2. 制备平板:- 将M-H琼脂培养基和血平板置于37℃恒温培养箱中预热。
- 使用移液器吸取适量悬浮液,均匀涂布于平板表面。
3. 培养:- 将涂布好的平板倒置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
4. 观察与计数:- 使用显微镜观察平板上的菌落,记录不同部位的皮肤细菌数量。
- 对菌落进行分类,如革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌等。
五、实验结果1. 细菌分布情况:- 手臂、背部、面部、颈部的皮肤表面均存在细菌。
- 手臂和背部的细菌数量相对较多,面部和颈部的细菌数量相对较少。
2. 菌落分类:- 革兰氏阳性菌:如葡萄球菌、链球菌等。
- 革兰氏阴性菌:如大肠杆菌、变形杆菌等。
六、实验分析1. 皮肤类型:- 皮肤类型对细菌分布有一定影响。
例如,油性皮肤的细菌数量相对较多,而干性皮肤的细菌数量相对较少。
2. 环境条件:- 环境条件如温度、湿度、光照等也会影响细菌生长和分布。
例如,温暖潮湿的环境有利于细菌生长。
3. 个体差异:- 个体差异如年龄、性别、健康状况等也会影响皮肤细菌分布。
例如,儿童和老年人的皮肤细菌数量相对较多。
一、实验目的1. 了解皮肤表面细菌的种类和数量。
2. 掌握皮肤细菌检测的基本方法。
3. 分析皮肤细菌与人体健康的关系。
二、实验原理皮肤是人体最大的器官,其表面寄居着大量的微生物,包括细菌、真菌和病毒等。
这些微生物在正常情况下对人体并无害,甚至有益于人体健康。
然而,当皮肤表面细菌失衡时,可能导致皮肤疾病或感染。
本实验采用平板计数法检测皮肤表面细菌的数量,通过观察菌落形态,对细菌进行初步鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 新鲜的人体皮肤样本- 灭菌生理盐水- 牛肉膏蛋白胨培养基- 无菌棉签- 无菌培养皿- 移液器- 显微镜- 酒精灯- 高压蒸汽灭菌器2. 实验仪器:- 恒温培养箱- 灭菌操作台- 移液器- 显微镜四、实验步骤1. 采集皮肤样本:取新鲜的人体皮肤样本,用无菌棉签轻轻擦拭皮肤表面。
2. 制备样品:将采集到的皮肤样本放入无菌生理盐水中,充分振荡,制成悬液。
3. 稀释样品:将悬液用无菌生理盐水进行一系列稀释,以获得适宜的菌落数量。
4. 接种培养:将稀释后的样品涂布于牛肉膏蛋白胨培养基上,用无菌镊子将培养皿放置于恒温培养箱中培养。
5. 观察菌落:培养一段时间后,观察培养基上的菌落形态,对细菌进行初步鉴定。
6. 计算菌落数量:根据培养皿上的菌落数量,计算原始样品中的细菌数量。
五、实验结果与分析1. 菌落形态:观察到的菌落形态多样,包括球形、杆形、螺旋形等。
2. 细菌鉴定:根据菌落形态,对细菌进行初步鉴定,如金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、链球菌等。
3. 细菌数量:根据实验结果,计算出原始样品中的细菌数量。
六、实验结论1. 皮肤表面存在多种细菌,对人体健康具有重要作用。
2. 皮肤细菌数量与个体差异、环境因素等有关。
3. 通过皮肤细菌检测,可以了解人体健康状况,为预防和治疗皮肤疾病提供依据。
七、实验注意事项1. 实验操作过程中,严格遵循无菌操作原则,避免污染。
2. 注意观察菌落形态,准确进行细菌鉴定。
一、实验目的1. 了解皮肤细菌的种类和分布情况。
2. 掌握皮肤细菌的采样和培养方法。
3. 熟悉皮肤细菌的鉴定和计数方法。
二、实验原理皮肤是人体最大的器官,具有保护、调节体温、排泄等功能。
皮肤表面寄居着大量细菌,这些细菌对人体的健康具有重要影响。
本实验通过采样、培养、鉴定和计数等方法,了解皮肤细菌的种类、数量及分布情况。
三、实验材料1. 实验仪器:无菌棉拭子、酒精灯、培养皿、接种环、显微镜等。
2. 实验试剂:生理盐水、营养肉汤、琼脂、革兰氏染色液、生理盐水等。
3. 实验对象:志愿者(皮肤无破损)。
四、实验方法1. 采样:取无菌棉拭子,蘸取生理盐水,对志愿者皮肤表面进行擦拭,采集皮肤表面的细菌。
2. 培养基制备:将营养肉汤加热煮沸,冷却后加入琼脂,倒入培养皿中,制成营养琼脂平板。
3. 接种:将采集到的皮肤细菌涂布在营养琼脂平板上,置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
4. 鉴定:观察菌落特征,对部分菌落进行革兰氏染色,显微镜下观察细菌形态。
5. 计数:采用稀释涂布平板法,对培养皿上的菌落进行计数。
五、实验结果1. 采样结果:志愿者皮肤表面共有5种细菌,分别为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌。
2. 培养结果:金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌在营养琼脂平板上均能生长。
3. 鉴定结果:金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌,表皮葡萄球菌为革兰氏阳性球菌,大肠杆菌为革兰氏阴性杆菌,枯草芽孢杆菌为革兰氏阳性杆菌,白色念珠菌为革兰氏阳性酵母菌。
4. 计数结果:金黄色葡萄球菌数量最多,为10^5 CFU/mL;表皮葡萄球菌次之,为10^4 CFU/mL;大肠杆菌数量较少,为10^3 CFU/mL;枯草芽孢杆菌和白色念珠菌数量最少,均为10^2 CFU/mL。
六、实验讨论1. 本实验结果表明,志愿者皮肤表面存在多种细菌,其中金黄色葡萄球菌数量最多,可能与皮肤表面汗液、油脂等因素有关。
实验室环境和人体表面的微生物检查一.实验目的:1.证明实验室环境与体表存在的微生物2.观察不同类型的微生物的形态特征3.比较不同场所不同条件下的细菌的数量和类型二.实验器材:培养基:肉膏蛋白胨琼脂平板。
溶液和试剂:无菌水。
仪器和其他用品:灭菌棉签(装在试管内),试管架,煤气灯或酒精灯,记号笔和废物缸等。
三.实验原理:平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分,当取自不同来源的样品接种于培养基上,在适宜温度下培养1-2d内每一菌体即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖,形成一个可见的细胞群体集落,称为菌落。
每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点,例如菌落的大小,表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑,边缘整齐或不整齐,菌落透明或半透明或不透明,颜色以及质地疏松或紧密等。
因此,可通过平板培养来检查环境中细菌的数量和类。
四.实验步骤:1.培养基的制作(1)称量制作二十个肉高蛋白琼脂平板牛肉膏1.65g 蛋白胨5.5g Nacl2.75g 琼脂10g 水550ml pH7.0~7.2 121℃灭菌20min(2)熔化按上述顺序将材料分别放到一大烧杯中混合加热至其熔化。
(3)调节PH值待琼脂熔化后,调节溶液PH至7.0~7.2。
(4)转移灭菌将溶液从烧杯中转移至锥形瓶中,塞上棉塞加牛皮纸包裹后同洗净的培养基和放有棉塞的试管一同放入高压灭菌锅里,灭菌20min左右。
(5)接种最后,将锥形瓶中溶液在酒精灯火焰旁转移至灭菌后的培养皿中,等待其冷却固定后便可接种。
2.微生物的获取和接种(1)分梯度制作空气培养基取三个无菌培养基分别标号3-3-空气-5ˊ-1-37°,3-3-空气-5ˊ-2-37°,3-3-空气-5ˊ-3-28°同时开盖放置五分钟后盖上盖子,另取三个无菌培养基分别标号3-3-空气-10ˊ-1-37°,3-3-空气-10ˊ-2-37°,3-3-空气-10ˊ-3-28°(2)对比接种手上的微生物取一无菌培养基,在火焰旁无菌区内,使用灭菌处理后的棉棒沾一下未洗手之前的手,然后再接种到刚取出的无菌培养基上。