对结核分枝杆菌几种检测方法的比较

结核分枝杆菌耐药性不同检测方法的比较与评价目的：探讨两种方法在结核分枝杆菌耐药性快速检测的应用可行性。

方法：应用直接法与传统法进行耐药试验，比较两者的耐药结果。

结果：与传统法耐药管培养结果比较，涂片≤2+的痰标本的低浓度耐药试验直接法的结果RFP、INH、EMB耐药性符合率分别为28.6%、50.0%、12.5%，耐药性总符合率为30.4%，两者差异有统计学意义。

结论：直接法应用于结核分枝杆菌耐药试验是可行的，对临床上肺结核病人耐药性的快速检测具有一定价值。

标签：结核分枝杆菌；肺结核；直接耐药试验；耐药性检测结核分枝杆菌高耐药是结核病病情恶化的重要原因，已成为当前结核病临床和防治工作的难题。

常规药敏试验方法，如用罗氏培养基等做直接或间接药敏试验，由于受MTB生长缓慢的影响而费力、费时(需6～8周或更长时间)，不能满足临床需要，目前已较少使用。

故目前急需一种简单、快速、价廉、灵敏、特异的检查方法。

为了指导临床用药，本文实际比较了结核分枝杆菌耐药性不同检测方法的效果，现报道如下：1材料与方法1.1材料结核分枝杆菌共35株(份)，均自我院住院和门诊患者的痰、胸腔积液、腹腔积液等标本中分离，经对硝基苯甲酸(PNB)噻吩，2-羧酸肼(TCH)鉴别培养基培养鉴定为结核分枝杆菌。

痰标本处理按规定要求进行痰标本处理[1]。

1.2检测方法直接法：取经前处理的标本液0.1 ml，均匀接种于各培养基斜面上，每份标本按每个药物浓度管2支，不含药物的对照管2支、分离培养管2支进行接种。

接种后放37℃孵箱培养，2周内每天观察1次，2周后每周观察1次，药敏试验管至4周报告药敏结果。

传统法：取上述直接法分离培养基上生长的菌落，采用传统法进行药敏试验。

按传统规定药敏试验结果观察报告结果。

1.3耐药判定标准以含药培养基无菌落生长者报告敏感(S)，有菌落生长≥20个者报告耐药(R)。

2结果2.1痰涂片结果直接法培养的对照管有菌落生长的共34例，占97.1%，其中结果报告3+以上的有25例，2+及以下的有8例，阴性的1例。

不同检测方法对结核病的诊断效果分析摘要】目的将诊断结核病的蛋白芯片法与金标法及抗酸染色法三种检测方法进行比较，以评价三种方法在临床中的应用价值。

方法用蛋白芯片法、金标法及抗酸染色法检测125例确诊结核病人、50例肺部其它疾病患者的血清标本，并进行相关统计分析。

结果蛋白芯片法、金标法及抗酸染色法检出结核分枝杆菌的灵敏度为64%，72%及22.7%，前两者比较无显著性差异(P>0.05)，但均高于抗酸染色法(P<0.05)。

三者的特异性分别为90%，76%及96%。

结论蛋白芯片法检测结核分枝杆菌，与金标法及抗酸染色法比较，具有简便、快速、敏感性较高和特异性强等优点，是临床辅助诊断结核病的有效方法。

【关键词】蛋白芯片结核分枝杆菌比较诊断1 材料与方法1.1 材料① 标本来源：125例确诊结核病人血清由我院内科肺结核确诊病人提供，50例肺部其它疾病患者的血清来源于我院胸外科、内科。

② 主要仪器和试剂：蛋白芯片阅读仪、结核分枝杆菌蛋白芯片试剂盒均为南京大渊生物技术公司提供；结核分枝杆菌免疫胶体金诊断试剂盒为上海奥普生物医药有限公司提供；抗酸染色相关试剂，根据《全国临床检验操作规程》（第3版）由实验室自行配置。

1.2 方法1.2.1 蛋白芯片法（PC）：按试剂说明书操作。

1.2.2 金标法（DIGFA）：按试剂说明书操作。

1.2.3 抗酸染色法(AFS)：参照《全国临床检验操作规程》第3版。

1.3 统计学分析概率的比较采用X2检验。

2 结果2.1 175例标本三种检测结果与临床诊断的关系见表1。

表1 175例标本三种检测结果比较注： #P<0.05(与对照组比较)，*P<0.05(与AFS法比较)。

2.2 三种检测方法的灵敏度、特异性比较蛋白芯片法、金标法及抗酸染色法检出结核分枝杆菌的灵敏度为64%，72%及22.7%，特异性分别为90%，76%及96%。

2.3 蛋白芯片法结核病组三种结核茵抗原的抗体构成比三种结核菌抗原的抗体阳性率以抗LAM 抗体的阳性率最高，为57.6％（72/125），其次为抗38KDa抗体44％（55/125)，最低为抗16KDa抗体20%（25/125）。

2020年7月Comparison of four detection methods of Mycobacterium tuberculosisand analysis of rifampicin resistance geneby Xpert MTB/RIF methodXIONG Li-qiao,WU Kai-jin(Clinical Laboratory Departement,Red Cross Hospital of Yulin City,Yulin 537000,China)ABSTRACT:Objective To evaluate the detection efficacy of four different detection methods for Mycobacterium tuberculosis (MTB),and to understand the detection site of Xpert MTB/RIF method for rifampin resistance gene,so as to provide reference for clinical treatment.Methods From November 2017to October 2018,248patients with pulmonary tuberculosis (tuberculosis group)and 101patients without pulmonary tuberculosis (control group)were selected from Red cross hospital of yulin city.The sputum samples of the two groups were examined by AFB microscopy method,solid culture method,TB -DNA PCR method and Xpert MTB/RIF method respectively.The detection results were compared and the distribution of rifampicin resistance gene detected by Xpert MTB/RIF method was analyzed.Results Based on clinicaldiagnosis,the sensitivity of AFB microscopy method,solid culture method,TB-DNA PCR method and Xpert MTB/RIF method were 50.8%,48.8%,64.1%and 69.8%,respectively.There was no significant difference in sensitivity between AFB microscopy method and solid culture method (χ2=0.20,P >0.05).There was no significant difference in sensitivity between TB-DNA PCR method and Xpert MTB/RIF method (χ2=1.79,P >0.05),but there was significant difference in sensitivity between Xpert MTB/RIF method and AFB microscopy method (χ2=18.60,P <0.05).Among 173MTB cases detected by Xpert MTB/RIF method,25cases were resistant to rifampin gene,and most of the mutation sites were ProbeE.Conclusion Compared with AFB microscopy method,Xpert MTB/RIF method has the characteristics of high sensitivity,fast and quantitative.It can be used as a rapid and effective detection method to improve the auxiliary diagnosis of tuberculosis.The most common mutation site of rifampin resistant rpoB gene of MTB in this area is ProbeE (S531L,L533P).KEYWORDS:Mycobacterium tuberculosis ;rifampicin resistance gene;Xpert MTB/RIF临床医学DOI :10.19347/ki.2096-1413.202020044作者简介：熊利巧（1984-），女，汉族，广西都安人，主管技师，学士。

•240 •结核与肺部疾病杂志 2020 年12 月第1卷第3 期J Tuberc Lung Dis，December 2020, Vol. 1，No. 3•论著.三种检测技术鉴别结核分枝杆菌复合群与非结核分枝杆菌的效能评价易俊莉杨新宇张洁田丽丽丁北川武文清【摘要1目的评价对硝基苯甲酸/噻吩-2-竣酸肼（PNB/T C H)生长试验法、结核分枝杆菌抗原（MPB64)检 测法、PCR-荧光探针法在结核分枝杆菌复合群(MTBC)与非结核分枝杆菌(N TM)鉴别中的应用价值。

方法11株 标准菌株包括M T B标准株H37R v及10株N T M标准菌株均来源于国家结核病参比实验室。

238株临床分离株为北京结核病控制研究所2019年1一 12月门诊患者培养阳性冻存菌株，经涂片抗酸染色均为阳性。

应用 PNB/T C H生长试验法、MPB64检测法、PCR-荧光探针法及微阵列基因芯片法对11株标准菌株及238株临床分离 株进行鉴定;以微阵列基因芯片法菌种鉴定结果为参照，评价PNB/T C H生长试验法、MPB64检测法、PCR-荧光探 针法鉴别M T B C与N T M的效能。

结果以微阵列基因芯片法菌种鉴定结果为参照，PNB/T C H生长试验法、MPB64检测法、PGR-荧光探针法检测M T B C的敏感度分别为100_ 0%(206/206)、98. 5%(203/206)、100. 0% (206/206);特异度分别为 96. 9%(31/32)、100. 0%(32/32)、100. 0%(32/32);符合率分别为 99. 6%(237/238)、98. 7%(235/238)、100. 0%(238/238); K冲/« 值分别为 0• 98、0. 95、1.00。

PN B/TC H生长试验法、MPB64 检测法、PCR-荧光探针法检测周期分别为28 d、0. 5 h、0. 5 d，检测平均成本分别为20、40、60元。

比较液体培养与改良罗氏培养检测结核分枝杆菌的应用效果分析摘要：目的比较分析液体快速培养与改良固体罗氏培养检测结核分枝杆菌的应用效果。

方法选取2018年10月到2019年10月到我中心就诊的活动性肺结核患者80例,对每份病例标本分别进行改良罗氏培养法和液体培养法,统计改良罗氏培养法和液体培养法的阳性率、污染率及培养时间。

结果改良罗氏培养法和液体培养法的阳性符合率分别为10%(8/80)和11.25%(9/80)。

所需的培养时间分别为28.0(25.0～31.0)d和16.5(14.0～19.0)d。

结论液体培养法阳性率与改良罗氏培养法基本一致,报告时间平均缩短至16.5d,比改良罗氏培养法提前10.0d以上,为临床早诊断、早治疗提供了可靠依据,而且为后续进行的药敏试验提供了可靠依据。

关键词：液体培养法；改良罗氏培养法；结核分枝杆菌To compare the application effect of liquid culture and modified Roche culture in detection of Mycobacterium tuberculosisAbstract: Objective To compare and analyze the effect of rapid liquid culture and improved solid Roche culture in the detection of Mycobacterium tuberculosis.Methods a total of 80 active pulmonary tuberculosis patients who visited our center from October 2018 to October 2019 were selected. The positive rate, contamination rate and culture time of the improved roche culture method and liquid culture method were counted for each case specimen.Results The positive coincidence rate of improved Roche culture method and liquid culture method was 10%(8/80) and 11.25%(9/80), respectively.The required culture time was 28.0(25.0 ~ 31.0)d and 16.5(14.0 ~ 19.0)d,respectively.Conclusion The positive rate of the liquid culture method was basically consistent with the improved Roche culture method, and the reporting time was shortened to 16.5d on average, more than 10.0d earlier than the improved Roche culture method, which provided a reliable basis for early clinical diagnosis and treatment, as well as a reliable basis for the subsequent drug sensitivity test.Keywords: liquid culture method;Improved Roche culture method;Mycobacterium tuberculosis引言结核病是由结核分枝杆菌引起的、经呼吸道传播，严重危害人类健康的慢性传染病。