第五章 免疫学应用
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免疫学概论第5章抗原和抗体的制备与应用
免疫学概论第5章抗原和抗体的制备与应用抗原和抗体是免疫学研究中的重要概念。
抗原是指能够引起免疫系统产生免疫应答的分子结构，而抗体则是免疫系统分泌的特异性蛋白质，可以与抗原结合并发挥免疫效应。
本章将介绍抗原和抗体的制备方法以及它们的应用。
一、抗原的制备方法1.天然抗原的制备：天然抗原通常是从生物体中提取的，如细菌、病毒、真菌、寄生虫等。
制备天然抗原通常需要对生物体进行破碎、分离和纯化等处理，以获取纯度较高的抗原。
2.合成抗原的制备：合成抗原是通过化学合成的方法来制备的。
通常使用聚肽或核酸合成的方法，根据抗原的氨基酸序列或基因序列来合成对应的抗原。
3.基因工程抗原的制备：基因工程技术可以用来制备特定的抗原。
通过将抗原基因导入表达载体中，并在宿主细胞中进行表达和纯化，可以得到大量目的抗原。
二、抗体的制备方法1.多克隆抗体的制备：多克隆抗体是通过免疫动物体内的多个B细胞克隆产生的。
通常的制备方法是将抗原注射到免疫动物体内，激发免疫应答，然后收集免疫动物体内产生的抗体。
2.单克隆抗体的制备：单克隆抗体是通过单个B细胞克隆产生的，具有较高的特异性和单一性。
制备单克隆抗体的方法通常是将免疫动物体内的充满抗体的B细胞与肿瘤细胞融合，形成细胞系，然后通过筛选得到单一的抗体。
三、抗原和抗体的应用1.诊断应用：抗原和抗体在临床诊断中有着重要的应用价值。
例如，通过检测体液中特定抗体的存在可以判断其中一种疾病的感染与否；或者通过检测其中一种抗原的存在可以诊断其中一种疾病。
2.治疗应用：抗体在治疗上有着广泛的应用。
例如，通过使用单克隆抗体来治疗肿瘤、自身免疫疾病等；或者使用抗菌药物来干扰病原体的免疫逃逸机制。
3.科研应用：抗原和抗体在科研中有着重要的作用。
例如，抗原可以用来激发动物体内的免疫应答，从而研究免疫机制；抗体可以用来检测抗原，评估其存在数量和分布情况。
4.工业应用：抗原和抗体在工业上也有广泛的应用。
例如，抗原和抗体可以用来检测食品中的化学物质残留、环境中的污染物等；或者用来检测疫苗的有效性和质量。
《免疫学应用》课件
《免疫学应用》PPT课件
欢迎来到《免疫学应用》课程！在这个课程中，我们将深入探讨免疫学在医 学和生物学中的应用，以及它对人类健康的重要性。
什么是免疫学
免疫学是研究机体免疫系统及其功能的学科。它涉及如何识别病原体、攻击病原体以及记忆病原体的过程。
免疫学在医学和生物学中的应用
医学应用
免疫学为疾病的诊断、预防和治疗提供了重要的 方法和工具。
生物学应用
免疫学帮助我们理解机体对病原体的防御机制以 及免疫系统的调节机制。
免疫学研究方法
细胞免疫学
• 淋巴细胞分型和鉴定 • 免疫球蛋白检测
分子免疫学
• DNA克隆 • 蛋白质印迹分析
免疫反应
1 识别病原体
免疫系统通过识别病原体上的特定结构，如抗原，来触发免疫反应。
2 攻击病原体
免疫系统利用各种免疫细胞和分子，如抗体和细胞因子，攻击和摧毁病原体。
自身免疫疾病 过敏反应 免疫缺陷病
免疫系统错误地攻击机体自身组织，导致疾病发 生。
免疫系统对无害的物质产生过度反应，导致过敏 症状。
免疫系统功能不全，导致机体难以抵御病原体， 易感染。
Hale Waihona Puke 免疫治疗原理和方法
免疫治疗利用免疫系统来治疗疾病，例如癌症。它 可以增强免疫系统的攻击能力。
应用领域和前景
免疫治疗在癌症、自身免疫疾病等领域有着广泛的 应用前景。
3 记忆病原体
一旦免疫系统与特定病原体接触过，它会形成对该病原体的记忆，以便更快更有效地对 抗再次感染。
细胞调节和免疫反应
1
细胞因子和化学介质
细胞因子和化学介质在免疫反应中起到调节作用，可以促进或抑制免疫系统的活 性。
2
免疫调节
欢迎来到《免疫学应用》课程！在这个课程中，我们将深入探讨免疫学在医 学和生物学中的应用，以及它对人类健康的重要性。
什么是免疫学
免疫学是研究机体免疫系统及其功能的学科。它涉及如何识别病原体、攻击病原体以及记忆病原体的过程。
免疫学在医学和生物学中的应用
医学应用
免疫学为疾病的诊断、预防和治疗提供了重要的 方法和工具。
生物学应用
免疫学帮助我们理解机体对病原体的防御机制以 及免疫系统的调节机制。
免疫学研究方法
细胞免疫学
• 淋巴细胞分型和鉴定 • 免疫球蛋白检测
分子免疫学
• DNA克隆 • 蛋白质印迹分析
免疫反应
1 识别病原体
免疫系统通过识别病原体上的特定结构，如抗原，来触发免疫反应。
2 攻击病原体
免疫系统利用各种免疫细胞和分子，如抗体和细胞因子，攻击和摧毁病原体。
自身免疫疾病 过敏反应 免疫缺陷病
免疫系统错误地攻击机体自身组织，导致疾病发 生。
免疫系统对无害的物质产生过度反应，导致过敏 症状。
免疫系统功能不全，导致机体难以抵御病原体， 易感染。
Hale Waihona Puke 免疫治疗原理和方法
免疫治疗利用免疫系统来治疗疾病，例如癌症。它 可以增强免疫系统的攻击能力。
应用领域和前景
免疫治疗在癌症、自身免疫疾病等领域有着广泛的 应用前景。
3 记忆病原体
一旦免疫系统与特定病原体接触过，它会形成对该病原体的记忆，以便更快更有效地对 抗再次感染。
细胞调节和免疫反应
1
细胞因子和化学介质
细胞因子和化学介质在免疫反应中起到调节作用，可以促进或抑制免疫系统的活 性。
2
免疫调节
免疫学应用ppt课件
教学过程
（2）沉淀反应：
单向琼脂扩散试验
教学过程
（2）沉淀反应：
双向琼脂扩散试验
教学过程
（2）沉淀反应：
-
对流免疫电泳
+
教学过程
（3）补体结合反应：
补体结合反应
教学过程
——免疫荧光技术 3、免疫标记技术：
免疫荧光直接法
免疫荧光间接法
教学过程
（3）、酶免疫分析
1、包被抗体 洗 2、加抗原 洗 3、加酶标抗体 洗 1、包被抗原 洗 2、加抗体 洗 3、加酶标抗 球蛋白 洗 4、加底物显色 ELISA间接法
常见疾病： Ⅰ型 过敏性休克、呼吸道过敏反应、消化道过敏反应、皮肤过敏反应 Ⅱ型 输血反应、新生儿溶血、药物过敏性血细胞减少症、甲亢、肺出血肾炎综合症 Ⅲ型 局部免疫复合物病、全身免疫复合物病（血清病、链球菌感染性肾小球肾炎、 类风湿关节炎、系统性红斑狼疮） Ⅳ型 传染性迟发型超敏反应、接触性皮炎、移植排斥反应
（二）人工自动免疫的注意事项：
1、接种对象：免疫力差、流行地区的易感者等； 2、接种剂量、次数和间隔时间：死疫苗2-3次，间隔7-10天； 活疫苗1次；类毒素2次，间隔4-6周。 3、接种途径：死疫苗多皮下注射、活疫苗多皮内注射、皮上 划痕或以自然感染途径接种。 4、接种后反应：接种24小时左右局部出现红肿、疼痛、淋巴 结肿大；短暂发热、头痛、恶心等，一般症 状轻微，数天恢复正常。 5、禁忌症：高热、严重心、肝、肾疾病、传染病、恶性肿 瘤、孕妇等。正在使用免疫抑制剂治疗的病人， 不宜使用活疫苗。
抗原抗体反应
免疫学诊断都是以免疫学原理为基础的
阅读课文并回答： 1、抗原抗体的结合
2、抗原抗体反应的特点
3、抗原抗体反应的影响因素
免疫学基础第五章免疫学的应用
二、细胞免疫功能的检测
（一）T细胞数量检测 通过检测T细胞表面的CD（CD3分子）
抗原来了解外周血T细胞数量和亚群的变化。 一般采用免疫荧光法测定。正常外周血淋 巴细胞中荧光阳性细胞占60%~80%。
（二）T细胞亚群检测 T细胞的不同亚群各有其特有的分化抗
原，如CD4Th细胞, CD8Tc细胞，因此可用 其相应的单克隆抗体进行检测。正常值为 CD4 占淋巴细胞数的55%~60%，CD8占淋 巴细胞数的20%~30%；CD4／CD8为2:1。
人工的方法给机体注射特异性抗体等制剂，使机体获 得特异性免疫力称为人工被动免疫。常用的生物制品有：
（一）抗毒素 通常是用类毒素多次免疫马，取其血清分离 、
纯化而制成的。
（二）人免疫球蛋白制剂 是从大量的人混合血浆或胎盘血 中分离制成，分别称为人血浆丙种球蛋白和胎盘球蛋白。
人工主动免疫与人工被动免疫的比较
一、人工主动免疫制剂
人工的方法给机体接种抗原，使机体获得特异性 免疫力的方法。常用的生物制品主要是疫苗和类毒素。
（一）疫苗
第一代疫苗： 死疫苗、活疫苗。 第二代疫苗：亚单位疫苗、基因工程疫苗
。
第三代疫苗： DNA疫苗又称核酸疫苗。
（二）类毒素 细菌外毒素经0.3％~0.5％甲醛处理，失
去毒性，保留抗原性制成类毒素。
PHA是一种常用的非特异性有丝分裂原, 皮内注射后与注射局部的T淋巴细胞表面的相 应丝裂原受体结合,刺激T细胞发生有丝分裂, 增殖的淋巴细胞6~12小时在局部出现红肿硬 结, 24~48小时达高峰。
（2）特异性抗原皮肤试验 常用的为结核菌素 (OT)试验。将定量的OT
注射到受试者前臂皮内，24~48小时在注射的局 部形成红肿硬结，直径大于0.5cm为阳性。阳性 说明机体对结核杆菌有特异性免疫力,同时间接说 明受试者细胞免疫功能正常。
免疫学的应用
DNA疫苗
抗体
[提醒] 与病原体相比，相同的是疫苗具有病原体的抗原特性，不同的 是疫苗失去病原体的感染力。
• 二、器官移植
生理功能 器官保存 外科手术
免疫抑制剂
丧失功能
供者与受者 一半以上
免疫抑制剂
• 三、免疫学的应用
免疫排斥
病原体
肿瘤标志物 免疫增强
免疫抑制
(1)法国科学家巴斯德有关疫苗的研制，开创了科学地进行免疫接种的新 时期。( √ ) (2)疫苗是含有少量病原体的生物制品。( × ) (3)注射流感疫苗后，就不会再患流感。( × ) (4)人类中不存在HLA完全相同的两个个体。( × ) (5)治疗系统性红斑狼疮常使用免疫增强剂。( × )
1．预防传染病的疫苗家族中增加的新一代疫苗——DNA疫苗，由病原 微生物中的一段表达抗原的基因制成，这段基因编码的产物仅仅引起机 体的免疫反应。下列关于DNA疫苗的叙述，错误的是 ( )
A.DNA疫苗进入人体能够产生特异性免疫
√B．导入人体的DNA疫苗在体内直接产生抗体，起到免疫作用
C．DNA疫苗的接种可以达到预防特定微生物感染的目的
知识点一 疫苗
目前应用的疫苗主要有三种类型：减毒活疫苗、灭活的死疫苗和新型疫 苗，各有优缺点。
(1)减毒活疫苗 接种后能感染人体而使人产生免疫力，从而达到预防效果。如“糖丸” 就是一种减毒活疫苗，口服后可预防小儿脊髓灰质炎。 (2)灭活的死疫苗 这类疫苗中的病原体已被杀死，安全性很好，但产生的免疫效果不如减 毒活疫苗，常需要多次强化免疫，如狂犬病疫苗、流感疫苗。
• 核心知识小结
免疫预防
免疫治疗
[答题必备] 1.疫苗通常是用灭活的或减毒的病原体制成的生物制品。 2.接种疫苗后，人体内可产生相应的抗体，从而对特定传染病具有抵抗 力。 3.医学上把用正常的器官置换丧失功能的器官，以重建其生理功能的技 术叫作器官移植。
免疫学的应用
目录
考一点、一疫细苗胞的多样性和统一性
情境探疑
(3)新型疫苗 新型疫苗包括DNA疫苗和RNA疫苗。 ①DNA疫苗 DNA疫苗是指将编码某种蛋白质抗原的重组真核表达载体(如质粒)直接注射到 动物体内，使外源基因在活体内表达，产生的抗原(外源基因表达的蛋白质)激 活机体的免疫系统。 ②RNA疫苗 RNA疫苗的机理是将编码抗原决定簇的mRNA通过一定的设计和修饰，导入 细胞，以细胞为“工厂”，生产相应的蛋白质，进而引起机体产生免疫应答。
目录
考一点、一疫细苗胞的多样性和统一性
典例应用
例2 我国陈薇团队研发的以腺病毒为载体的重组新冠疫苗临床测试成功，单 针接种该疫苗即可起到保护作用。下表为现阶段全球接种的主要新冠疫苗 及其有效成分。下列叙述错误的是( )
疫苗类型 腺病毒重组新冠疫苗
RNA新冠疫苗 灭活新冠疫苗 抗新冠病毒血清 抗新冠病毒单克隆抗体
4.4 免疫学的应用
课标内容 (1)阐明疫苗发挥作用的原理。(2)说出器官移植面临的问题，认同器 官捐献。
目录
考知点识一点细1 胞疫的苗多样性和统一性
灭活的或减毒的病原体
特定传染病
相应的抗体
免疫反应 免疫预防
目录
考知点识一点细2 胞器的官多移样植性和统一性 1.概念
医学上把用正常的器官置换__丧__失__功__能____的器官，以重建其生理功能的技术 叫作器官移植。
目录
考一点、一疫细苗胞的多样性和统一性
情境探疑
2.分析材料，回答问题： 材料 脊髓灰质炎(俗称小儿麻痹症)是由脊髓灰质炎病毒引起的严重危害儿童 健康的急性传染病。口服糖丸可以预防该病。糖丸其实是将脊髓灰质炎病毒 的致病力减弱后，做成的疫苗，即脊髓灰质炎减毒活疫苗。 (1)从免疫学的角度看，糖丸中的减毒活病毒相当于__抗__原__。
第五章 免疫学检测及应用
双 相 免 疫 扩 散 试 验
返回
FLASH
1
FLASH
2
（3）免疫电泳 （immunoelectrophoresis）
免疫电泳
FLASH
返回
（4）火箭电泳试验
返回
（5）免疫印渍技术
（immunoblotting）
又称Western blotting 电泳 印渍及检测
免 疫 印 渍
返回
（1）补体结合试验
（complement fixation test）
1901年由Bordet和Gengou首 先应用溶血反应作为指示系统， 建立的检测抗原抗体反应的方法。
补体结合试验原理
是根据补体作用无特异性的 特点设计的，补体能与任何抗原 与抗体反应所形成的复合物吸附 并激活补体的原理而设计的一种 血清学反应。
红 细 胞 凝 集 反 应
红细胞凝集反应的结果
返回
2．间接凝集反应
（indirect agglutination）
用可溶性抗原（或抗体）包被在 一种与免疫无关的、具一定大小的不 溶性颗粒（即载体颗粒，如：乳胶颗 粒或红细胞）的表面，然后与相应抗 体（或抗原）作用，在有适宜电解质 存在的条件下，结合产生的凝集现象。
凝集反应中的抗体称为凝集素 而抗原为凝集原
凝集反应的特性
凝集反应的原理和影响因素与沉淀 反应相同，但凝集反应有如下特性： 1．凝集反应中的抗原为较大的颗粒 抗原，离心沉淀可使颗粒下沉，而在 沉淀反应中，抗原却是最细微的胶状 溶液，溶液大多清晰透明。
２．凝集反应中凝集块主要由抗原悬液 形成，而在沉淀反应中，沉淀物主要 由抗体形成。 ３．凝集反应因为抗原分子大，为使抗 原与抗体在等当点发生反应，需稀释 免疫血清中的抗体，使抗体分子不致 于过多，而沉淀反应因抗原分子小， 具有较大的反应面积，为了不使抗原 过多则需稀释抗原。 返回
免疫学应用ppt
原理 抗原抗体特异性结合
检测
特 点
•
➢特异性：抗原-抗体的结合。 ➢可逆性：抗原抗体结合是分子表面的非共价键
结合。 ➢比例性：抗原和抗体结合是否呈现可见的反应
现象，于两者的分子比例密切相关。 ➢阶段性：抗原抗体反应可分为两个阶段
特异性结合阶段 可见的反应阶段
（一）、基于抗原抗体反应的检测
凝集反应：指颗粒性抗原（如细菌、红细胞等）与相应抗体 在合适条件下结合，出现肉眼可见的凝集现象的反应
（二）、免疫细胞功能的检测
利用已筛选建立的与某种细胞因子独特的生 物效应高度敏感的细胞系进行检测。
利用抗原抗体特异性结合反应的特性，定量检测细 胞因子。常用的方法包括ELISA、RIA、免疫印迹 法、流式细胞术等。此外，还可利用酶标或荧光标 记的抗细胞因子单克隆抗体，原位检测细胞因子在 细胞内的合成及分布情况。
方
直接凝集反应：指
间接凝集反应：指将
法
将天然颗粒性抗原 直接与相应抗体在
可溶性抗原（抗体） 包被在载体颗粒表面，
电解质存在的条件
再与相应抗体（抗原）
下结合，出现凝集
结合出现凝集现象的
现象的反应
反应。
蛋白质芯片技术：蛋白质芯片技术又称蛋白质微阵列,可实 现快速、准确、高通量地检测不同蛋白质（即靶蛋白），探 针具有多样性。
（一）、基于抗原抗体反应的检测
颗粒性抗原
抗体（凝集素）
直接凝集反应
（一）、基于抗原抗体反应的检测
方
沉淀反应：可溶性抗原与相应抗体结合后出现沉淀物，此
法
类反应称为沉淀反应。沉淀反应分为液相沉淀反应与凝胶内
沉淀反应两大类。
单向免疫沉淀
是将一定量已知抗体混于琼脂凝胶中制成琼 脂板，在适当位置打孔后将抗原加入孔中扩 散。抗原在扩散过程中与凝胶中的抗体相遇， 形成以抗原为中心的沉淀环，环的直径与抗 原含量呈正相关
免疫学应用
以上内容仅供参考，建议查阅专业书籍或文献获取更 准确的信息。
05
免疫学在其他领域的应用
免疫学在农业中的应用
疫苗研发
利用免疫学原理，研发针 对农业动物疫病的疫苗， 提高动物健康水平，减少 疾病传播。
生物防治
利用免疫学手段，研发具 有抗病、抗虫等功能的转 基因作物，降低农药使用 量，保护生态环境。
食品安全检测
疫苗生产与质量控
制
疫苗的生产需要在严格的质量控 制下进行，以确保疫苗的品质和 安全性。
肿瘤免疫治疗
肿瘤免疫学基础
临床应用与疗效
肿瘤免疫治疗基于免疫系统对肿瘤细 胞的识别和攻击，通过调节免疫反应 来控制和消除肿瘤。
肿瘤免疫治疗在临床应用中取得了一 定的疗效，但仍然存在一些挑战，如 免疫反应的调控和个体差异等。
临床应用与疗效
免疫疗法在自身免疫性疾病治疗中取得了一定的疗效，但仍需进一步 研究和优化治疗方案。
移植免疫
移植排斥反应
移植免疫涉及供、受者之间的免疫反应，其中排斥反 应是最常见的问题之一。
免疫抑制治疗
为了防止排斥反应，接受器官或组织移植的患者需要 接受免疫抑制治疗，以降低免疫系统的攻击性。
监测与调整治疗方案
免疫学应用
汇报人：可编辑
2024-01-11
目录
• 免疫学基础 • 免疫学在医学中的应用 • 免疫学在生物科技中的应用 • 免疫学在环境科学中的应用 • 免疫学在其他领域的应用
01
免疫学基础
免疫系统的组成
免疫器官
01
包括胸腺、骨髓、淋巴结和脾脏等，是免疫细胞产生、分化、
成熟和存储的场所。
免疫细胞
I型（过敏反应）、II型（细胞毒型）、III型（免疫复合物型）和IV型（
免疫学应用(课件)
免疫学应用
免疫预防：利用各 种生物或非生物制 剂来建立机体的免 疫应答，以达到预 防疾病的目的。
用免疫学原理， 防病、治病所 采取的措施
免疫治疗：应用免 疫学原理，针对疾 病的发生机制，增 强机体的免疫功能， 以达到治疗目的所 采取的措施。
特
自然
自然主动免疫：自然感染
异
免疫
自然被动免疫： IgG通过胎盘、初乳SIgA
较好，维持3-5年甚至更长时间
较小,但有毒力回复突变
3.人工被动免疫生物制品
✓抗毒素：外/类毒素→马→Ab ✓人丙种球蛋白：血浆和胎盘丙种球蛋白 ✓细胞因子
✓单抗/基因工程抗体
人工被动免疫注意事项
提示
✓注意防止超敏反应 ✓早期和足量 ✓不滥用丙球
被动免疫不能激活免疫系 统，故不能产生记忆反应， 其保护作用是短暂的。
6个月 乙肝疫苗（第3针）
1个月 2个月
3个月
乙肝疫苗（第2针）
三价脊灰疫苗（初服） 三价脊灰疫苗（复服），百白破（第 1针）
8个月 1.5岁
4岁
麻疹疫苗（初种）
三价脊灰疫苗（加服），百白破 （加强）
三价脊灰疫苗（加服），麻疹疫苗 （复种）
4个月
三价脊灰疫苗（复服），百白破（第 2针）
7岁
BCG（复种），麻疹疫苗（复种）， 百白破（加强）
4 ．新型疫苗
1）亚单位疫苗：提取有效免疫原成分。如HA、NA，HBSAg 2）合成肽疫苗：人工合成抗原肽。 3）基因工程疫苗
编码免疫原基因→载体→体内 ↓
酵母菌、大肠杆菌（体外培养）
如：重组抗原疫苗、重组载体疫苗、DNA疫苗、转基因植物疫苗
5.计划免疫 我国儿童计划免疫程序
年龄
免疫预防：利用各 种生物或非生物制 剂来建立机体的免 疫应答，以达到预 防疾病的目的。
用免疫学原理， 防病、治病所 采取的措施
免疫治疗：应用免 疫学原理，针对疾 病的发生机制，增 强机体的免疫功能， 以达到治疗目的所 采取的措施。
特
自然
自然主动免疫：自然感染
异
免疫
自然被动免疫： IgG通过胎盘、初乳SIgA
较好，维持3-5年甚至更长时间
较小,但有毒力回复突变
3.人工被动免疫生物制品
✓抗毒素：外/类毒素→马→Ab ✓人丙种球蛋白：血浆和胎盘丙种球蛋白 ✓细胞因子
✓单抗/基因工程抗体
人工被动免疫注意事项
提示
✓注意防止超敏反应 ✓早期和足量 ✓不滥用丙球
被动免疫不能激活免疫系 统，故不能产生记忆反应， 其保护作用是短暂的。
6个月 乙肝疫苗（第3针）
1个月 2个月
3个月
乙肝疫苗（第2针）
三价脊灰疫苗（初服） 三价脊灰疫苗（复服），百白破（第 1针）
8个月 1.5岁
4岁
麻疹疫苗（初种）
三价脊灰疫苗（加服），百白破 （加强）
三价脊灰疫苗（加服），麻疹疫苗 （复种）
4个月
三价脊灰疫苗（复服），百白破（第 2针）
7岁
BCG（复种），麻疹疫苗（复种）， 百白破（加强）
4 ．新型疫苗
1）亚单位疫苗：提取有效免疫原成分。如HA、NA，HBSAg 2）合成肽疫苗：人工合成抗原肽。 3）基因工程疫苗
编码免疫原基因→载体→体内 ↓
酵母菌、大肠杆菌（体外培养）
如：重组抗原疫苗、重组载体疫苗、DNA疫苗、转基因植物疫苗
5.计划免疫 我国儿童计划免疫程序
年龄
免疫学应用-PPT课件精选全文
将PHA注射于受试者前臂屈侧皮内， 6-12小时后局部出现红斑硬结，24-48 小时达高峰，即为阳性反应，常用于检 测细胞免疫水平。
祝愿 同学 们前 程似 锦！
免疫标记技术：——免疫荧光技术
免疫荧光直接法
免疫荧光间接法
免疫标记技术：——免疫酶技术
1、包被抗体 洗
1、包被抗原 洗
2、加抗原 洗
2、加抗体 洗
3、加酶标抗体 洗
3、加酶标抗球 蛋白
洗
4、加底物显色 ELISA双抗体夹心法
4、加底物显色 ELISA间接法
免疫标记技术：—放射免疫测定法（RIA）
细胞免疫检测——T细胞亚群测定
用间接荧光法 检测CD4和CD8 T细胞
CD4/CD8正常 比值为1.7-2.0左 右。
细胞免疫检测——淋巴细胞转化试验
---细胞介导的细胞毒试验
B细胞的检测
B细胞数量的检测 (1)膜表面免疫球蛋白(SmIg)的检测：SmIg是 B细胞特有的表面标志，因此是鉴定B细胞的可 靠指标。用抗SmIg抗体，借助直接免疫荧光法 或免疫组织化学法进行检测。
(2)间接免疫荧光法：应用针对B细胞表面抗 原(CDl9、CD20、CD21、CD22等)的特异性 单克隆抗体，以间接免疫荧光法对B细胞进 行鉴定和计数。
B细胞功能测定
B细胞增生试验 原理与T细胞增生试验相同； 但刺激物主要为美洲商陆(PWM)、富
含SPA的金葡菌、细菌脂多糖等。
体内免疫学检测
放射免疫测定法（RIA）是将放射性核 素分析的灵敏性和抗原抗体反应的特异性结 合的测定技术。具有灵敏、精确、特异性高、 易规范化及自动化等优点的一种先进的免疫 标记技术。
免疫标记技术：—金免疫技术（金标法）
祝愿 同学 们前 程似 锦！
免疫标记技术：——免疫荧光技术
免疫荧光直接法
免疫荧光间接法
免疫标记技术：——免疫酶技术
1、包被抗体 洗
1、包被抗原 洗
2、加抗原 洗
2、加抗体 洗
3、加酶标抗体 洗
3、加酶标抗球 蛋白
洗
4、加底物显色 ELISA双抗体夹心法
4、加底物显色 ELISA间接法
免疫标记技术：—放射免疫测定法（RIA）
细胞免疫检测——T细胞亚群测定
用间接荧光法 检测CD4和CD8 T细胞
CD4/CD8正常 比值为1.7-2.0左 右。
细胞免疫检测——淋巴细胞转化试验
---细胞介导的细胞毒试验
B细胞的检测
B细胞数量的检测 (1)膜表面免疫球蛋白(SmIg)的检测：SmIg是 B细胞特有的表面标志，因此是鉴定B细胞的可 靠指标。用抗SmIg抗体，借助直接免疫荧光法 或免疫组织化学法进行检测。
(2)间接免疫荧光法：应用针对B细胞表面抗 原(CDl9、CD20、CD21、CD22等)的特异性 单克隆抗体，以间接免疫荧光法对B细胞进 行鉴定和计数。
B细胞功能测定
B细胞增生试验 原理与T细胞增生试验相同； 但刺激物主要为美洲商陆(PWM)、富
含SPA的金葡菌、细菌脂多糖等。
体内免疫学检测
放射免疫测定法（RIA）是将放射性核 素分析的灵敏性和抗原抗体反应的特异性结 合的测定技术。具有灵敏、精确、特异性高、 易规范化及自动化等优点的一种先进的免疫 标记技术。
免疫标记技术：—金免疫技术（金标法）
免疫学的应用(讲义)(原卷版)
4.4 免疫学的应用知识点1：疫苗 ★★☆1. 定义：通常是用 的或 的病原体制成的生物制品。
2. 作用：接种疫苗后，机体内可产生相应的 ，从而对特定传染病具有抵抗力。
3. 特点： 、 。
【微点拨】➢ 疫苗不必包含一个完整的病原体。
一般情况下，引起免疫反应的并不是整个病原体，而是病原体所罕有的抗原。
因此，可以利用病原体的某些成分（如蛋白质、多糖荚膜）及其产物制备疫苗。
【典例1】 （2023•通许县三模）如表是5种新冠疫苗，其中S 蛋白是新冠病毒识别并感染靶细胞的重要蛋白，可作为抗原被宿主免疫系统识别并应答。
相关叙述正确的是（ ）类型研发策略 灭活疫苗 新冠病毒经培养、增殖，用理化方法灭活后制成疫苗腺病毒载体疫苗利用改造后无害的腺病毒作为载体，携带S 蛋白基因，制成疫苗。
接种后，S 蛋白基因启动表达亚单位疫苗通过基因工程方法，在体外合成•S 蛋白，制成疫苗 核酸疫苗 将编码S 蛋白的核酸包裹在纳米颗粒中，制成疫苗。
接种后，在人体内产生S 蛋白 减毒流感病毒载体疫苗 利用减毒流感病毒作为载体，携带S 蛋白基因，并在载体病毒表面表达S 蛋白，制成疫苗A ．与灭活疫苗相比，减毒流感病毒载体疫苗自身不含S 蛋白抗原B ．亚单位疫苗通常不引发细胞免疫C．腺病毒载体疫苗在制备过程中利用了基因突变的原理D．核酸疫苗的化学本质是蛋白质【变式1】（2023•南江县模拟）葛洪在《肘后备急方》中记载“疗狂犬咬人方，乃杀所咬之犬，取脑敷之，后不复发”。
后唐代孙思邈在《千金要方》、崔知悌在《纂要方》、王焘在《外台秘要》里也都有类似记载。
这种方法其实是世界上最早的疫苗雏形。
下列关于疫苗的说法，错误的是（）A．疫苗必须包含一个完整的病原体B．“糖丸爷爷”顾方舟研制的“糖丸”——脊髓灰质炎活疫苗可以通过口服接种C．接种疫苗后，机体内产生相应的抗体和记忆细胞D．一般情况下，不建议患有免疫缺陷病的儿童接种疫苗【变式2】（2023春•皮山县校级期末）检发现小王体内没有乙肝抗体，医生建议他注射乙肝疫苗．注射的乙肝疫苗和免疫方式分别是（）A．抗体、特异性免疫B．抗体、非特异性免疫C．抗原、特异性免疫D．抗原、非特异性免疫知识点2：器官移植★☆☆1.定义：医学上把用正常的器官置换丧失功能的器官，以重建其生理功能的技术叫作器官移植。
免疫学应用(病原生物学与免疫学课件)
既往的第一代疫苗主要用于预防感染性 疾病的传播，第二代、第三代疫苗则有向肿 瘤、免疫病等方向发展的趋势。
我国计划免疫情况
基础接种 加强接种
年龄
出生 1个月 2个月 3个月 4个月 5个月 6个月 8个月 1岁
1岁半 2岁 3岁 4岁 5岁
疫苗种类
卡介苗、乙肝疫苗 乙肝疫苗第2针 脊髓灰质炎疫苗初服 脊髓灰质炎疫苗复服、百白破第1针 脊髓灰质炎疫苗复服、百白破第2针 百白破第3针 乙肝疫苗第3针、流脑多糖疫苗第1针（12月份接种） 麻疹疫苗初种 乙脑疫苗免疫2针，间隔7 ~ 10天（5月份接种）
人工主动免疫注意事项
1、接种对象：免疫力差、流行地区的易感者等； 2、接种剂量、次数和间隔时间：死疫苗2-3次，间隔7-10天；
活疫苗1次；类毒素2次，间隔4-6周。 3、接种途径：死疫苗多皮下注射、活疫苗多皮内注射、皮上
划痕或以自然感染途径接种。 4、接种后反应：接种24小时左右局部出现红肿、疼痛、淋巴
百白破加强1针、麻疹疫苗复种、脊髓灰质炎疫苗加服、流脑多糖疫苗第2针（12份接种） 乙脑疫苗加强1针、（5月份接种） 乙脑疫苗加强1针、（5月份接种） 脊髓灰质炎疫苗加强1次 百白破加强1针、麻疹疫苗复种、乙脑疫苗加强1针
二、免疫治疗
免疫治疗（immunotherapy): 指利用免疫学原理，针对疾病的发生机制，
性
免
人工主动免疫：接种疫苗、类毒素等
疫 人工免疫
人工被动免疫：注射抗毒素、
丙种球蛋白
o
（一）人工主动免疫 (artificial active immunization)
疫苗——用于人工主动免疫的生物制剂，可以用微生物、
动物或人体的组织、体液等为原料，采用生物学技术制 备成的免疫学制剂。
我国计划免疫情况
基础接种 加强接种
年龄
出生 1个月 2个月 3个月 4个月 5个月 6个月 8个月 1岁
1岁半 2岁 3岁 4岁 5岁
疫苗种类
卡介苗、乙肝疫苗 乙肝疫苗第2针 脊髓灰质炎疫苗初服 脊髓灰质炎疫苗复服、百白破第1针 脊髓灰质炎疫苗复服、百白破第2针 百白破第3针 乙肝疫苗第3针、流脑多糖疫苗第1针（12月份接种） 麻疹疫苗初种 乙脑疫苗免疫2针，间隔7 ~ 10天（5月份接种）
人工主动免疫注意事项
1、接种对象：免疫力差、流行地区的易感者等； 2、接种剂量、次数和间隔时间：死疫苗2-3次，间隔7-10天；
活疫苗1次；类毒素2次，间隔4-6周。 3、接种途径：死疫苗多皮下注射、活疫苗多皮内注射、皮上
划痕或以自然感染途径接种。 4、接种后反应：接种24小时左右局部出现红肿、疼痛、淋巴
百白破加强1针、麻疹疫苗复种、脊髓灰质炎疫苗加服、流脑多糖疫苗第2针（12份接种） 乙脑疫苗加强1针、（5月份接种） 乙脑疫苗加强1针、（5月份接种） 脊髓灰质炎疫苗加强1次 百白破加强1针、麻疹疫苗复种、乙脑疫苗加强1针
二、免疫治疗
免疫治疗（immunotherapy): 指利用免疫学原理，针对疾病的发生机制，
性
免
人工主动免疫：接种疫苗、类毒素等
疫 人工免疫
人工被动免疫：注射抗毒素、
丙种球蛋白
o
（一）人工主动免疫 (artificial active immunization)
疫苗——用于人工主动免疫的生物制剂，可以用微生物、
动物或人体的组织、体液等为原料，采用生物学技术制 备成的免疫学制剂。
免疫学应用
人工被动免疫
定义：人为给予免疫效应物质，建立的保 护性免疫（力） 制剂：动物抗血清 普通多价人免疫球蛋白 高价（特异性）人免疫球蛋白 用途：紧急预防、治疗
被动免疫制剂及其用途
制剂类型 多价人Ig 高价（特异性）人Ig 用途 免疫缺陷病、甲肝、麻疹 乙肝、百日咳、风疹、破伤风 播散性牛痘、水痘、Rh血型不合 马抗血清 蜘蛛毒、蛇毒、白喉毒素、 肉毒毒素
待检样品
凝集
待检样品 凝集抑制
液相内沉淀反应
絮状沉淀反应 环状沉淀反应
抗血清 抗原 + — 抗原 抗体 + —
凝胶内沉淀反应
免疫扩散技术 免疫电泳技术
火箭电泳 单向扩散试验 对流电泳 双向扩散试验 免疫电泳
免疫荧光技术
直接法 间接法
补体法
双标记法
结合相
游离相
放射免疫分析技术
结 40 合、 游 离 30 相 放 射 20 性 含 量 10 比 值 1 2 5 10 20 50 100
免疫激活剂
微生物制剂： 微生物制剂：卡介苗 多糖类制剂：香菇多糖、灵芝多糖、黄芪多糖 多糖类制剂：香菇多糖、灵芝多糖、 胸腺肽 细胞因子
常见的免疫增强剂
类型 免疫因子 微生物制剂 化学药物 中药制剂 举例 转移因子、免疫核糖核酸、 转移因子、免疫核糖核酸、胸腺肽 卡介苗、短小棒状杆菌、脂磷壁酸 卡介苗、短小棒状杆菌、 左旋咪唑、 左旋咪唑、西咪替丁 香菇多糖、灵芝多糖、 香菇多糖、灵芝多糖、黄芪多糖
可逆性
Ag+Ab
K（亲和常数）=
Ag Ab
抗原抗体反应的影响因素
1、电解质
2、酸碱度（pH值6-8）
3、温度（37-42。C）
经典血清学反应的种类
免疫学的应用
2.在进行器官移植或骨髓移植时，为什么都要先进行配型，即 检查供体和受体之间的组织相容性呢？
受体和供体的组织相容性抗原越一致，在进行移植时发生 免疫排斥的可能性就越低，移植的器官就越容易存活。如果 配型不合适，发生排斥的可能性就大，就不适合移植。
二、器官移植
3.利用由自体干细胞培养出的组织、器官进行移植，有何优点？
断上得到了广泛的应用
例
检测病原体 检测肿瘤标志物
用
免疫 治疗
对于免疫功能低下者使用免疫
增强疗法，对于有些疾病则使 用免疫抑制剂疗法。
事 例
类风湿性关节炎 系统性红斑狼疮
课堂小结
Thanks
拓展思维
一、疫苗
若被一条毒蛇咬伤，最有效地治疗方法是什么？
尽快注射相应的抗蛇毒血清。
二、器官移植
1.概念：医学上把用正常的器官置换丧失功能的器官， 以重建其生理功能的技术。 2.意义：治疗多种重要疾病的有效手段。
二、器官移植
阅读教材P83思考·讨论：器官移植所面临的问题及希望。
讨论
1.最初进行的器官移植，为什么总是不成功呢？ 可能主要是没有考虑免疫排斥问题。
由自体干细胞培养出的组织、器官进行的移植，和自身的 组织相容性抗原一致，移植后发生免疫排斥的可能性很小。
4.在进行器官移植时，运用免疫抑制剂可以提高成活率。但这 些药物会使淋巴细胞减少，因而患者容易患感染性疾病。这一 问题如何解决？
需要在用免疫抑制剂药物与预防感染之间寻求平衡，并尽 量使运用免疫抑制剂的病人避免接触病原体，或通过适当的 锻炼，提高自身免疫力。
麻疹补充接种
儿童预防接种
新冠疫苗自愿试种
一、疫苗
接种疫苗时遇到的问题
结合自己的疫苗接种经历，讨论以下问题。
受体和供体的组织相容性抗原越一致，在进行移植时发生 免疫排斥的可能性就越低，移植的器官就越容易存活。如果 配型不合适，发生排斥的可能性就大，就不适合移植。
二、器官移植
3.利用由自体干细胞培养出的组织、器官进行移植，有何优点？
断上得到了广泛的应用
例
检测病原体 检测肿瘤标志物
用
免疫 治疗
对于免疫功能低下者使用免疫
增强疗法，对于有些疾病则使 用免疫抑制剂疗法。
事 例
类风湿性关节炎 系统性红斑狼疮
课堂小结
Thanks
拓展思维
一、疫苗
若被一条毒蛇咬伤，最有效地治疗方法是什么？
尽快注射相应的抗蛇毒血清。
二、器官移植
1.概念：医学上把用正常的器官置换丧失功能的器官， 以重建其生理功能的技术。 2.意义：治疗多种重要疾病的有效手段。
二、器官移植
阅读教材P83思考·讨论：器官移植所面临的问题及希望。
讨论
1.最初进行的器官移植，为什么总是不成功呢？ 可能主要是没有考虑免疫排斥问题。
由自体干细胞培养出的组织、器官进行的移植，和自身的 组织相容性抗原一致，移植后发生免疫排斥的可能性很小。
4.在进行器官移植时，运用免疫抑制剂可以提高成活率。但这 些药物会使淋巴细胞减少，因而患者容易患感染性疾病。这一 问题如何解决？
需要在用免疫抑制剂药物与预防感染之间寻求平衡，并尽 量使运用免疫抑制剂的病人避免接触病原体，或通过适当的 锻炼，提高自身免疫力。
麻疹补充接种
儿童预防接种
新冠疫苗自愿试种
一、疫苗
接种疫苗时遇到的问题
结合自己的疫苗接种经历，讨论以下问题。
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1. T细胞功能测定：
(1) 细胞增殖(转化)试验： 可分为非特异性丝裂原和特异性抗原两类。 * 丝裂原主要有PHA、Con A和PWM； * 抗原刺激物有破伤风类毒素、 PPD和白色 念珠菌等；
淋 巴 细 胞 增 殖 实 验
(2) T细胞介导的细胞毒试验：CTL
2. B细胞功能判定
(1) B细胞增殖(转化)试验 (2) 溶血空斑形成试验
体或抗原连接后并不改变抗原抗体的免疫特性， 具有灵敏度高、快速、可定性、定量、定位等优
点。
1．酶免疫技术(enzyme
immunoassay, EIA)
此法将抗原-抗体反应的特异性与酶催化作用 的高效性相结合，借助酶作用于底物的显色反应 判定结果。应用酶标测定仪测定光密度（ OD ）值
可反映抗原含量，灵敏度达 ng/ml 甚至 pg/ml 水平。
缺点：稳定性差，不易保存，存在回复突变的危险
如卡介苗，牛痘，麻疹等
死疫苗与活疫苗的区别
区别要点 制剂 接种剂量及次数 死疫苗 死病原体、强毒株 量大，2-3次 活疫苗 活病原体、弱毒株 或无毒株 量小，多为1次
安全性
免疫效果 稳定性 常用疫苗
好
较差，6月-2年 稳定、易保存，有效 期约1年
差，毒力回复危险
2．双向免疫扩散
3．对流免疫电泳
单向免疫扩散(single immunodiffusion)
双向免疫扩散(double immunodiffusion)
单扩与双 扩原理
（三）免疫标记技术
用荧光素、酶、放射性核素或化学发光物质等标
记抗体或抗原，进行抗原 -抗体反应的检测，是目
前应用最为广泛的免疫学检测技术。标记物与抗
能具有双向调节功能。对过低的免疫应答起促进作用
；对过高的免疫应答起抑制作用。 1、左旋咪唑 2、卡介苗 3、多糖类物质
免疫抑制剂:
是一类抑制机体免疫功能的生物或非生物制剂。
1、肾上腺皮质激素
2、环磷酰胺 3、环孢霉素A 4、FK-506（他克莫司胶囊） 5、抗人T细胞抗体
6、抗细胞因子抗体
第三节 免疫学诊断
常见的标记物为：辣根过氧化物酶（HRP）和碱性
磷酸酶（AP）
常用的方法如下：
（1）酶联免疫吸附试验 (enzyme linked
immunosorbent assay，ELISA)
（2）免疫细胞或组织化学（immunocytochemistry
or immunohistochemistry,ICC or IHC)
4、湿疹及其他严重皮肤病
我国推荐的儿童免疫程序 年 龄 出生时 1 个月 2 个月 3 个月 4 个月 5 个月 6 个月 8 个月 1. 5~ 2 岁 4 岁 7 岁 12岁 疫 苗 卡介苗, 乙肝疫苗 1 乙肝疫苗 2 三价脊髓灰质炎疫苗 1 三价脊髓灰质炎疫苗 2 ，百白破 1 三价脊髓灰质炎疫苗 3 ，百白破 2 百白破 3 乙肝疫苗 3 麻疹疫苗 百白破 4 三价脊髓灰质炎疫苗 4 卡介苗，麻疹疫苗， 白喉破伤风二联疫苗 卡介苗（农村）
称免疫学预防。
免疫学预防在传染病的控制方面贡献巨 大，尤其是病毒性疾病的有效控制应归 功于疫苗的广泛接种。
生物制品
指免疫学预防、治疗和诊断用的生物制剂，由 微生物及其代谢产物、人和动物的免疫血清/细胞 制备而成。 根据输入的物质不同，人工免疫分为： 人工主动免疫 人工被动免疫
人工主动免疫与人工被动免疫的比较
人工主动免疫的接种物
疫苗（Vaccine）：细菌，病毒，螺旋体，立
克次体和类毒素等抗原性生物制品统称为疫
苗。 理想疫苗的标准：安全；有效；实用
分 类：
1、死疫苗（death vaccine）:选用免疫原性强的微 生物标准株经大量培养后，用物理或化学方法将其
杀死或灭活而制成的预防制剂。如霍乱、伤寒、百
利用免疫学检验方法辅助诊断疾病或对机体免疫 状态进行评估。
一、抗原抗体基本检测方法
根据抗原的性质、结合反应的现象、参与反应的 成分等因素分类：
（一）凝集反应
（二）沉淀反应
（三）免疫标记技术
（一）凝集反应
颗粒性抗原（细菌或细胞等）与相应抗体结合，
在一定条件下，出现肉眼可见的凝集物现象，称
为凝集反应。 1．直接凝集反应：细菌或红细胞与相应抗体直接 反应，可出现细菌或红细胞凝集现象。 2．间接凝集反应：检测针对可溶性Ag的Ab 3．间接凝集抑制试验
用于检测特异性抗体。用已知抗原包被固相，加入
待检血清标本，再加酶标记的二抗，加底物观察显 色反应。
间接法图示
2．荧光免疫技术(immunofluorescence,IF)
此法乃用荧光素与抗体连接成荧光抗体，再
与待检标本中抗原反应，置荧光显微镜下观察， 抗原-抗体复合物散发荧光，借此对抗原进行定性 或定位。
日咳、狂犬病、钩端螺旋体疫苗。
优点：诱导特异性抗体产生，易制备，安全，易保存 缺点：不能繁殖，需多次注射，免疫效果差，注射局部 和全身反应明显
2、减毒活疫苗（live-attenuated Vaccine）：经过长
期人工传代使病原微生物发生毒力变异而得到的减
毒株或无毒株。
优点：一次接种即可获得长久免疫力，类似自然状态 下的轻型或隐性感染。诱导体液免疫和细胞免疫。
1） ELISA
是酶免疫测定中应用最广的技术，用于测定可溶 性抗原或抗体。
优点：灵敏度高、操作简便、稳定性强，可自动 化检测，从而被广泛用于检测多种病原体抗原或 抗体、血液及其他体液中微量蛋白成分、细胞因 子等。
ELISA分类
双抗体夹心法：
用于检测特异性抗原。该试验所用的包被抗体与酶 标抗体应分别针对不同抗原决定基，或其中之一用 多克隆抗体，且相互间应无交叉反应。 间接法：
人工主动免疫 输入的物质 免疫力产生快慢 免疫力维持时间 抗原（疫苗、类毒 素等） 较慢，约1~4周 较长，约半年~数年 人工被动免疫 抗体、活化的淋巴 细胞、细胞因子等 快，立即发挥作用 较短，2~3周 传染性疾病的治疗 或紧急预防
主要用途
预防传染性疾病
人工主动免疫(artificial active immunization)：
百白破：百日咳杆菌死疫苗+白喉类毒素+破伤风类毒素
4、新型疫苗
亚单位疫苗（Subunit Vaccine）：纯化/提纯
合成疫苗：诱导机体产生保护性免疫，抗原肽→载体、佐剂
基因工程疫苗：DNA重组技术
人工被动免疫的接种物
1、抗毒素（antitoxin）
是用细菌外毒素或类毒素免疫大型动物制备的免疫血清，具 有中和外毒素毒性的作用。主要用于某些外毒素所致疾病的
各种凝集反应示意图
（二）沉淀反应
可溶性抗原（血清蛋白、外毒素、细菌滤液等）与
相应抗体结合，在一定条件下，形成出现肉眼可见
的沉淀物的现象称为沉淀反应。 该反应多用半固体琼脂凝胶作为介质进行琼脂扩散 或免疫扩散，即可溶性抗原与抗体在凝胶中扩散，
在比例合适处相遇即形成可见的白色沉淀。
（二）沉淀反应
1．单向免疫扩散
荧光免疫技术图示
3．放射免疫测定法(radioimmunoassay,
RIA)
用放射性核素标记抗原或抗体进行免疫学检
测。该法兼有放射性核素的高灵敏度和抗原-抗体
反应的特异性，检测灵敏度达 pg 水平。常用于标
记的放射性核素为 125I 和 131I ，分为液相和固相两 种方法。
该法常用于测定微量物质，如胰岛素、生长
激素、甲状腺素、孕酮等激素，吗啡、地高辛、
IgE等。
４．化学发光免疫分析
将发光物质（如吖啶酯、鲁米诺等）标记抗 原或抗体，发光物质在反应剂（如过氧化阴离子
）激发下发射光子，通过自动发光分析仪测定光
子产量，可反映待检样品中抗体或抗原含量。 该法灵敏度高，常用于检测血清超微量活性 物质（甲状腺素等激素）。
较好，3-5年 不稳定，难保存， 4℃冰箱保存数周
霍乱、伤寒、百日咳、 卡介苗、腮腺炎、 流脑、狂犬病、甲肝 麻疹、脊髓灰质炎、 及乙肝等疫苗 风疹及水痘等疫苗
3、类毒素（Toxid）：细菌外毒素经0.3-0.4%甲醛处 理，使其毒性减弱而保留其免疫原性。类毒素注入机
体后可诱导产生抗毒素，从而中和外毒素的毒性。
第二节 免疫学治疗
针对机体低下或亢进的免疫状态，人为地增强或 抑制机体的免疫功能以达到治疗疾病的治疗方法。 １、免疫增强疗法 主要用于治疗感染、肿瘤、 免疫缺陷等免疫功能低下的疾病。 ２、免疫抑制疗法 主要用于治疗超敏反应、自 身免疫性疾病、移植排斥、炎症等。
免疫增强剂：免疫调节剂
指能增强、促进或调节机体免疫功能的生物或非生 物制剂。 特点：对机体正常免疫功能无影响，对异常免疫功
荧光免疫技术分类
（1）直接荧光法：荧光素直接标记抗体，对标本进 行检测。该法优点是特异性高，缺点是检查任一
抗原均须制备相应荧光抗体。
（2）间接荧光法：用一抗与标本中抗原结合，再用
荧光素标记的二抗进行检测。该法优点是敏感度
比直接法高，制备一种荧光素标记的二抗即可用
于多种抗原的检测,但非特异性反应亦增强。
熟悉死疫苗与活疫苗的特点及应用； 了解抗原抗体反应的原理、常用类型及免
疫学治疗。
前
言
免疫学的临床应用包括两个方面：
（1）应用免疫学理论阐明疾病的发病机制、发展规
律；
（2）应用免疫学的原理预防、治疗、诊断疾病。
本章主要介绍免疫学在疾病的预防、治疗、诊断方
面的应用。
第一节 免疫学预防
机体获得特异性免疫力的方式包括：
治疗和紧急预防。使用时注意超敏反应，用前做皮试。
2、人免疫球蛋白：胎盘球蛋白和血浆丙种球蛋白
分别由健康产妇胎盘血和正常人血浆中提取的丙种球蛋白制
(1) 细胞增殖(转化)试验： 可分为非特异性丝裂原和特异性抗原两类。 * 丝裂原主要有PHA、Con A和PWM； * 抗原刺激物有破伤风类毒素、 PPD和白色 念珠菌等；
淋 巴 细 胞 增 殖 实 验
(2) T细胞介导的细胞毒试验：CTL
2. B细胞功能判定
(1) B细胞增殖(转化)试验 (2) 溶血空斑形成试验
体或抗原连接后并不改变抗原抗体的免疫特性， 具有灵敏度高、快速、可定性、定量、定位等优
点。
1．酶免疫技术(enzyme
immunoassay, EIA)
此法将抗原-抗体反应的特异性与酶催化作用 的高效性相结合，借助酶作用于底物的显色反应 判定结果。应用酶标测定仪测定光密度（ OD ）值
可反映抗原含量，灵敏度达 ng/ml 甚至 pg/ml 水平。
缺点：稳定性差，不易保存，存在回复突变的危险
如卡介苗，牛痘，麻疹等
死疫苗与活疫苗的区别
区别要点 制剂 接种剂量及次数 死疫苗 死病原体、强毒株 量大，2-3次 活疫苗 活病原体、弱毒株 或无毒株 量小，多为1次
安全性
免疫效果 稳定性 常用疫苗
好
较差，6月-2年 稳定、易保存，有效 期约1年
差，毒力回复危险
2．双向免疫扩散
3．对流免疫电泳
单向免疫扩散(single immunodiffusion)
双向免疫扩散(double immunodiffusion)
单扩与双 扩原理
（三）免疫标记技术
用荧光素、酶、放射性核素或化学发光物质等标
记抗体或抗原，进行抗原 -抗体反应的检测，是目
前应用最为广泛的免疫学检测技术。标记物与抗
能具有双向调节功能。对过低的免疫应答起促进作用
；对过高的免疫应答起抑制作用。 1、左旋咪唑 2、卡介苗 3、多糖类物质
免疫抑制剂:
是一类抑制机体免疫功能的生物或非生物制剂。
1、肾上腺皮质激素
2、环磷酰胺 3、环孢霉素A 4、FK-506（他克莫司胶囊） 5、抗人T细胞抗体
6、抗细胞因子抗体
第三节 免疫学诊断
常见的标记物为：辣根过氧化物酶（HRP）和碱性
磷酸酶（AP）
常用的方法如下：
（1）酶联免疫吸附试验 (enzyme linked
immunosorbent assay，ELISA)
（2）免疫细胞或组织化学（immunocytochemistry
or immunohistochemistry,ICC or IHC)
4、湿疹及其他严重皮肤病
我国推荐的儿童免疫程序 年 龄 出生时 1 个月 2 个月 3 个月 4 个月 5 个月 6 个月 8 个月 1. 5~ 2 岁 4 岁 7 岁 12岁 疫 苗 卡介苗, 乙肝疫苗 1 乙肝疫苗 2 三价脊髓灰质炎疫苗 1 三价脊髓灰质炎疫苗 2 ，百白破 1 三价脊髓灰质炎疫苗 3 ，百白破 2 百白破 3 乙肝疫苗 3 麻疹疫苗 百白破 4 三价脊髓灰质炎疫苗 4 卡介苗，麻疹疫苗， 白喉破伤风二联疫苗 卡介苗（农村）
称免疫学预防。
免疫学预防在传染病的控制方面贡献巨 大，尤其是病毒性疾病的有效控制应归 功于疫苗的广泛接种。
生物制品
指免疫学预防、治疗和诊断用的生物制剂，由 微生物及其代谢产物、人和动物的免疫血清/细胞 制备而成。 根据输入的物质不同，人工免疫分为： 人工主动免疫 人工被动免疫
人工主动免疫与人工被动免疫的比较
人工主动免疫的接种物
疫苗（Vaccine）：细菌，病毒，螺旋体，立
克次体和类毒素等抗原性生物制品统称为疫
苗。 理想疫苗的标准：安全；有效；实用
分 类：
1、死疫苗（death vaccine）:选用免疫原性强的微 生物标准株经大量培养后，用物理或化学方法将其
杀死或灭活而制成的预防制剂。如霍乱、伤寒、百
利用免疫学检验方法辅助诊断疾病或对机体免疫 状态进行评估。
一、抗原抗体基本检测方法
根据抗原的性质、结合反应的现象、参与反应的 成分等因素分类：
（一）凝集反应
（二）沉淀反应
（三）免疫标记技术
（一）凝集反应
颗粒性抗原（细菌或细胞等）与相应抗体结合，
在一定条件下，出现肉眼可见的凝集物现象，称
为凝集反应。 1．直接凝集反应：细菌或红细胞与相应抗体直接 反应，可出现细菌或红细胞凝集现象。 2．间接凝集反应：检测针对可溶性Ag的Ab 3．间接凝集抑制试验
用于检测特异性抗体。用已知抗原包被固相，加入
待检血清标本，再加酶标记的二抗，加底物观察显 色反应。
间接法图示
2．荧光免疫技术(immunofluorescence,IF)
此法乃用荧光素与抗体连接成荧光抗体，再
与待检标本中抗原反应，置荧光显微镜下观察， 抗原-抗体复合物散发荧光，借此对抗原进行定性 或定位。
日咳、狂犬病、钩端螺旋体疫苗。
优点：诱导特异性抗体产生，易制备，安全，易保存 缺点：不能繁殖，需多次注射，免疫效果差，注射局部 和全身反应明显
2、减毒活疫苗（live-attenuated Vaccine）：经过长
期人工传代使病原微生物发生毒力变异而得到的减
毒株或无毒株。
优点：一次接种即可获得长久免疫力，类似自然状态 下的轻型或隐性感染。诱导体液免疫和细胞免疫。
1） ELISA
是酶免疫测定中应用最广的技术，用于测定可溶 性抗原或抗体。
优点：灵敏度高、操作简便、稳定性强，可自动 化检测，从而被广泛用于检测多种病原体抗原或 抗体、血液及其他体液中微量蛋白成分、细胞因 子等。
ELISA分类
双抗体夹心法：
用于检测特异性抗原。该试验所用的包被抗体与酶 标抗体应分别针对不同抗原决定基，或其中之一用 多克隆抗体，且相互间应无交叉反应。 间接法：
人工主动免疫 输入的物质 免疫力产生快慢 免疫力维持时间 抗原（疫苗、类毒 素等） 较慢，约1~4周 较长，约半年~数年 人工被动免疫 抗体、活化的淋巴 细胞、细胞因子等 快，立即发挥作用 较短，2~3周 传染性疾病的治疗 或紧急预防
主要用途
预防传染性疾病
人工主动免疫(artificial active immunization)：
百白破：百日咳杆菌死疫苗+白喉类毒素+破伤风类毒素
4、新型疫苗
亚单位疫苗（Subunit Vaccine）：纯化/提纯
合成疫苗：诱导机体产生保护性免疫，抗原肽→载体、佐剂
基因工程疫苗：DNA重组技术
人工被动免疫的接种物
1、抗毒素（antitoxin）
是用细菌外毒素或类毒素免疫大型动物制备的免疫血清，具 有中和外毒素毒性的作用。主要用于某些外毒素所致疾病的
各种凝集反应示意图
（二）沉淀反应
可溶性抗原（血清蛋白、外毒素、细菌滤液等）与
相应抗体结合，在一定条件下，形成出现肉眼可见
的沉淀物的现象称为沉淀反应。 该反应多用半固体琼脂凝胶作为介质进行琼脂扩散 或免疫扩散，即可溶性抗原与抗体在凝胶中扩散，
在比例合适处相遇即形成可见的白色沉淀。
（二）沉淀反应
1．单向免疫扩散
荧光免疫技术图示
3．放射免疫测定法(radioimmunoassay,
RIA)
用放射性核素标记抗原或抗体进行免疫学检
测。该法兼有放射性核素的高灵敏度和抗原-抗体
反应的特异性，检测灵敏度达 pg 水平。常用于标
记的放射性核素为 125I 和 131I ，分为液相和固相两 种方法。
该法常用于测定微量物质，如胰岛素、生长
激素、甲状腺素、孕酮等激素，吗啡、地高辛、
IgE等。
４．化学发光免疫分析
将发光物质（如吖啶酯、鲁米诺等）标记抗 原或抗体，发光物质在反应剂（如过氧化阴离子
）激发下发射光子，通过自动发光分析仪测定光
子产量，可反映待检样品中抗体或抗原含量。 该法灵敏度高，常用于检测血清超微量活性 物质（甲状腺素等激素）。
较好，3-5年 不稳定，难保存， 4℃冰箱保存数周
霍乱、伤寒、百日咳、 卡介苗、腮腺炎、 流脑、狂犬病、甲肝 麻疹、脊髓灰质炎、 及乙肝等疫苗 风疹及水痘等疫苗
3、类毒素（Toxid）：细菌外毒素经0.3-0.4%甲醛处 理，使其毒性减弱而保留其免疫原性。类毒素注入机
体后可诱导产生抗毒素，从而中和外毒素的毒性。
第二节 免疫学治疗
针对机体低下或亢进的免疫状态，人为地增强或 抑制机体的免疫功能以达到治疗疾病的治疗方法。 １、免疫增强疗法 主要用于治疗感染、肿瘤、 免疫缺陷等免疫功能低下的疾病。 ２、免疫抑制疗法 主要用于治疗超敏反应、自 身免疫性疾病、移植排斥、炎症等。
免疫增强剂：免疫调节剂
指能增强、促进或调节机体免疫功能的生物或非生 物制剂。 特点：对机体正常免疫功能无影响，对异常免疫功
荧光免疫技术分类
（1）直接荧光法：荧光素直接标记抗体，对标本进 行检测。该法优点是特异性高，缺点是检查任一
抗原均须制备相应荧光抗体。
（2）间接荧光法：用一抗与标本中抗原结合，再用
荧光素标记的二抗进行检测。该法优点是敏感度
比直接法高，制备一种荧光素标记的二抗即可用
于多种抗原的检测,但非特异性反应亦增强。
熟悉死疫苗与活疫苗的特点及应用； 了解抗原抗体反应的原理、常用类型及免
疫学治疗。
前
言
免疫学的临床应用包括两个方面：
（1）应用免疫学理论阐明疾病的发病机制、发展规
律；
（2）应用免疫学的原理预防、治疗、诊断疾病。
本章主要介绍免疫学在疾病的预防、治疗、诊断方
面的应用。
第一节 免疫学预防
机体获得特异性免疫力的方式包括：
治疗和紧急预防。使用时注意超敏反应，用前做皮试。
2、人免疫球蛋白：胎盘球蛋白和血浆丙种球蛋白
分别由健康产妇胎盘血和正常人血浆中提取的丙种球蛋白制