(病原生物与免疫学实验)实验六白喉杆菌、厌氧菌、分枝杆菌病毒及其它微生物
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病原生物及免疫学实验指导实验目的及实验室规则一、实验目的二、实验室规则实验一一、显微镜油镜头的使用和保护法(操作)二、细菌的基本形态和特殊结构观察(示教)三、细菌涂片和革兰染色法(示教)实验二一、培养基的制备原则和培养基种类介绍(示教)二、细菌接种法三、细菌的生长现象及代谢产物的观察(示教)实验三一、空气、咽喉部细菌的检查(操作)二、常用消毒灭菌器和滤菌器(示教)三、紫外线杀菌试验(示教)四、皮肤消毒试验(操作)五、药物敏感试验(纸片法,示教)实验四一、免疫细胞二、豚鼠过敏反应(示教或观看录像)三、抗原抗体反应四、常用生物制品(示教)实验五一、化脓性球菌二、肠道杆菌及其他细菌实验六一、病毒包涵体的观察(示教)二、乙肝病毒酶联免疫吸附试验结果观察(示教)三、螺旋体、立克次体形态观察(示教)四、真菌形态和培养物观察(示教)实验七一、蠕虫成虫、虫卵及幼虫形态观察(示教)二、中间宿主标本观察(示教)三、粪便中寄生虫检查实验八医学原虫形态观察(示教)病原生物及免疫学基础实验实验目的及实验室规则一、实验目的病原生物及免疫学基础实验是本课重要的组成部分,通过实验,加深对基础理论知识的理解;通过实验操作,掌握有关的基础操作技能和无菌技术,建立无菌观念;通过正确地观察和分析实验结果,培养学生实事求是的科学态度、严肃认真的工作作风及分析和解决问题的能力。
二、实验室规则(一)进入实验室要穿工作服,离开室前脱下并折放好,工作服要经常清洗,保持洁净。
(二)非实验室必备的物品不准带入实验室。
带进实验室的必要教材和文具,要远离操作部位。
(三)实验室内绝对禁止饮食、吸烟或舔铅笔等。
(四)实验室内保持肃静,禁止谈笑和高声说话,以利集中精神完成实验操作。
(五)凡具有传染性的培养物、带菌材料、动物、器具等,均按要求处理,不得随便乱放或用水冲洗。
实验室内的任何物品不得携出室外。
(六)实验中一旦发生意外,如划破皮肤,细菌污染实验台、地面、手或衣物时,应该及时报告老师,按有关程序妥善处理。
实验七分枝杆菌及其它病原菌【目标】①熟悉霍乱弧菌、结核分枝杆菌、破伤风梭菌、白喉棒状杆菌、铜绿假单胞菌等病原菌的形态和结构。
②掌握结核分枝杆菌染色的方法及结果观察。
③了解厌氧培养的常用方法。
一、形态观察【材料】霍乱弧菌、破伤风梭菌、肉毒梭菌、产气荚膜梭菌、结核分枝杆菌、白喉棒状杆菌、铜绿假单胞菌、百日咳鲍特菌、炭疽芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌、脆弱类杆菌等标本片。
【方法】显微镜下观察各种标本片(注意各菌的形态、大小、排列、染色性、特殊结构及其它有鉴别意义的特征)并绘图。
霍乱弧菌破伤风梭菌产气荚膜梭菌白喉结核分枝杆菌铜绿假单胞菌炭疽芽胞杆菌脆弱类杆菌分枝杆菌及其它细菌二、培养物观察【材料】铜绿假单胞菌、破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、结核分枝杆菌的培养物。
【方法】观察几种细菌在培养基中生长现象。
细菌在培养基中的生长现象菌种培养基生长现象铜绿假单胞菌普通琼脂平板光滑扁平湿润有特殊气味的灰绿色或蓝緑色菌落破伤风梭菌肉渣培养基肉汤混浊、肉渣微变黑、有腐败臭味普通琼脂平板菌落中心紧密、周边疏松、不整齐呈剧齿状产气荚膜梭菌牛乳培养基汹涌发酵现象结核分枝杆菌曲罗登培养基乳白色或米黄色、干燥颗粒状似花菜心菌落三、厌氧培养方法厌氧菌对氧敏感,在有氧时不能生长。
要培养专性厌氧菌,必须创造一个无氧的环境。
人工培养时,可利用物理.化学或生物学方法去除培养基或培养环境中的氧气,或加入还原剂降低其氧化还原电势。
培养厌氧菌的标本采集可用针筒运送法等方法。
厌氧培养方法很多,可根据实验要求选用。
(一)生物学培养法——庖肉培养法【原理】由于庖肉培养基中的肉渣含有饱和脂肪酸及谷胱甘肽,能吸收培养基中的氧,降低其氧化还原电势。
若在其液面覆盖一层灭菌的凡士林,除可隔绝空气中游离氧继续进入培养基外,尚可借凡士林的上移与否,指示该菌是否产气。
【方法】①将庖肉培养基在水浴液中煮沸10min,冷却。
②接种厌氧菌于庖肉培养基内。
于培养基液面上加灭菌的石蜡或熔化的凡士林1~2ml,隔绝空气。
病原生物学和免疫学实验概述病原生物学和免疫学是生命科学领域中非常重要的学科,对于人类疾病的发生和传播具有重要作用。
病原生物学研究病原微生物的生物学特性、致病机制和传播途径等,而免疫学研究机体的免疫系统以及如何识别和应对病原微生物的感染。
通过病原生物学和免疫学实验,可以更好地了解疾病的发生机制和防治方法。
本文将介绍一些常见的病原生物学和免疫学实验。
病原生物学实验细菌培养细菌培养是病原生物学实验中的基础实验,主要用于研究细菌的生长特性、代谢途径以及致病机制等。
常见的细菌培养基包括肉汤培养基、琼脂培养基等。
实验中,可以通过无菌技术将细菌接种到培养基中,然后进行培养和观察,以研究细菌的生长情况。
细菌荧光染色是病原生物学实验中常用的方法之一,通过给细菌染色,可以观察到其在细胞内的分布情况和形态特征。
常见的细菌荧光染色方法有荧光原位杂交和荧光染料染色等。
通过细菌荧光染色,可以更加直观地了解细菌的结构和功能。
细菌致病性实验细菌致病性实验是病原生物学研究中的关键实验之一,通过研究细菌的毒力因子和致病机制,可以揭示病原菌引起疾病的机理。
常见的细菌致病性实验包括动物感染模型实验和细胞培养实验等。
通过这些实验,可以进一步了解细菌的致病机制,并为相关疾病的防治提供理论依据。
免疫学实验免疫细胞培养免疫细胞培养是免疫学实验中常用的方法之一,通过培养免疫细胞,可以研究其生物学特性和功能。
常见的免疫细胞包括T细胞、B细胞、巨噬细胞等。
在培养过程中,可以通过添加不同的激素和生长因子,来模拟机体内免疫细胞的生长环境,从而研究其功能和代谢途径等。
免疫荧光染色是免疫学实验中常用的方法之一,通过给免疫细胞或组织染色,可以观察到其特定蛋白的表达情况和分布情况。
常见的免疫荧光染色方法有免疫组织化学染色和流式细胞术等。
通过免疫荧光染色,可以研究免疫细胞的分化和活化过程,从而了解免疫应答的机制。
免疫学检测免疫学检测是免疫学实验中非常重要的一个环节,常用于检测机体内抗体和细胞因子的水平以及免疫细胞的功能等。
病原生物学与免疫学基础实验指导(含实
验报告)
实验报告是病原生物学和免疫学基础实验的重要组成部分,它是将病原体研究的结果进行记录和总结,以及对传染病研究过程中出现的问题进行思考和分析的重要文档。
实验报告应包括实验背景、实验目的、实验材料、实验方法、实验结果、讨论和总结等内容。
实验过程中,应注意操作安全,遵守医学实验室安全规定,并严格按照实验方案操作。
在此基础上,可以运用各种分析仪器和技术,如荧光显微镜、免疫组化、超微结构技术等,更加深入地分析病原体的形态、结构和生物特征,从而更好地了解传染病的机理和免疫机制。
病原生物学和免疫学基础实验是传染病研究的基础,它们提供了系统的结构和功能分析,使我们能够更好地了解传染病的发生机制,为传染病的诊断和治疗提供有效的参考依据。
实验报告的撰写是实验的重要组成部分,在实验报告中可以清楚地总结实验的目的、方法、结果、讨论和总结等内容,从而更好地帮助我们了解传染病的发生机理,为传染病的预防和治疗提供参考和指导。
病原微生物学实验报告一、实验目的1. 熟悉病原微生物的形态、结构和生长特性。
2. 掌握病原微生物的分离、纯化和鉴定方法。
3. 了解病原微生物在疾病发生和发展中的作用。
二、实验原理1. 病原微生物的形态、结构和生长特性:病原微生物是一类能引起人类和动物传染病的微生物,包括细菌、病毒、真菌和寄生虫等。
它们具有特定的形态、结构和生长特性,通过观察这些特征可以初步判断微生物的种类。
2. 病原微生物的分离、纯化和鉴定:分离是将病原微生物从混合物中单独提取出来;纯化是通过一系列无菌操作将分离出的微生物纯化;鉴定是通过形态、结构、生理生化特性和分子生物学方法确定微生物的种类。
3. 病原微生物在疾病发生和发展中的作用:病原微生物侵入宿主后,可引起宿主免疫反应,进而导致疾病的发生和发展。
了解病原微生物的致病机制对于预防和治疗疾病具有重要意义。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:病原微生物培养基、实验用菌株、实验动物、试剂盒等。
2. 实验仪器:显微镜、生物安全柜、离心机、PCR 仪、培养箱等。
四、实验步骤1. 病原微生物的分离:(1)取适量实验材料(如样本、病变组织等)加入无菌生理盐水,研磨均匀。
(2)将研磨液分别接种到不同培养基上,37℃培养24-48小时。
(3)观察培养基上的生长情况,挑选可疑菌落进行纯化。
2. 病原微生物的纯化:(1)将分离出的可疑菌落分别接种到新的培养基上,37℃培养24-48小时。
(2)重复上述步骤,直至获得纯化的菌株。
3. 病原微生物的鉴定:(1)观察菌株的形态、结构和生长特性,记录观察结果。
(2)进行生理生化实验,如发酵试验、气体产生试验等,记录实验结果。
(3)采用分子生物学方法,如PCR、序列分析等,确定微生物的种类。
4. 病原微生物致病机制的研究:(1)观察菌株对实验动物的感染能力,观察感染后的病理变化。
(2)检测感染动物的免疫反应,如血清抗体水平等。
(3)分析病原微生物的毒力因子,如毒素、侵袭性酶等。
第1篇一、实验目的1. 熟悉白喉杆菌的培养特性。
2. 掌握白喉杆菌的分离、纯化和培养方法。
3. 了解白喉杆菌的生物学特性。
二、实验原理白喉杆菌(Corynebacterium diphtheriae)是一种革兰氏阳性菌,是引起白喉病的病原菌。
白喉杆菌的培养特性为需氧或兼性厌氧菌,最适温度为37℃,最适pH 为7.2~7.8。
在含血液、血清或鸡蛋的培养基上生长良好。
本实验通过培养白喉杆菌,观察其菌落形态,并利用亚碲酸钾血琼脂平板对其进行鉴定。
三、实验材料1. 白喉杆菌菌种2. 细菌培养箱3. 细菌接种环4. 亚碲酸钾血琼脂平板5. 37℃恒温培养箱6. pH计7. 电子显微镜四、实验方法1. 培养基制备(1)亚碲酸钾血琼脂平板:将亚碲酸钾、牛肉膏、蛋白胨、琼脂粉、氯化钠和蒸馏水按比例混合,加热溶解,调节pH值至7.2~7.8,分装于培养皿中,高压灭菌后备用。
2. 菌种接种(1)将白喉杆菌菌种接种于亚碲酸钾血琼脂平板中央,用接种环划线接种。
(2)将平板置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
3. 观察与记录(1)观察菌落形态,记录菌落颜色、大小、形状、边缘等特征。
(2)用接种环挑取少量菌落,进行革兰氏染色,观察细菌染色特性。
(3)用电子显微镜观察白喉杆菌的形态特征。
4. 结果分析(1)根据菌落特征、革兰氏染色和电子显微镜观察结果,判断是否为白喉杆菌。
(2)分析白喉杆菌的生长状况、菌落形态、染色特性和形态特征。
五、实验结果1. 菌落形态:白喉杆菌在亚碲酸钾血琼脂平板上生长,形成灰白色、光滑、圆形凸起的菌落。
2. 革兰氏染色:白喉杆菌革兰氏染色阳性,菌体呈棒状,两端膨大。
3. 电子显微镜观察:白喉杆菌菌体呈棒状,两端膨大,排列不规则,常呈L、V、X、T等字形或排成栅栏状。
六、实验讨论1. 白喉杆菌在亚碲酸钾血琼脂平板上生长,形成灰白色、光滑、圆形凸起的菌落,符合其培养特性。
2. 革兰氏染色和电子显微镜观察结果表明,本实验分离到的菌种为白喉杆菌。