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免疫学检测中干扰因素

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ELISA检测的干扰因素与方法

ELISA检测的干扰因素与方法

ELISA检测的干扰因素与方法ELISA应用最广，但这种固相测定技术非完美无缺，把握实验过程中每一个可能出现差错的关键性问题，采取相应的举措，才有可能使实验性误(漏)诊减少到最低限度。

1. 表面效应首先必须明确指出的是，：“固相”ELISA与传统的“液相”血清学试验的最大.最本质的区别是有一个预先固相抗原或抗体到载体表面的步骤，以及抗原与抗体结合反应由液态环境移到了固相载体表面进行。

蛋白质分子在吸附过程中，为了克服与固相载体之间的排斥力，需要重新分布其表面的功能性基因，使疏水性基因充分暴露，然后，局部接触区域的偶极分子脱氢，再通过范德瓦尔斯力吸引而固相到载体表面。

表面效应可直接影响抗原，抗体的构象和功能。

此外，表面效应亦影响抗原和抗体结合反应的动力学过程。

(1)固相导致抗原的变化为了测定抗体水平，需预先将抗原固相(包被)到极性和水性的聚苯乙烯(PS)或聚氯乙烯(PVC)酶标板上。

用直接物理吸附方法固相蛋白抗原及DNA等，导致的变化是多方面的，可引起分子构象和抗原性发生改变。

酶活性测定时可消失。

牛血清白蛋白固相之后，其抗原价可由5价降为1价。

此外，发现被动吸附方法固相铁蛋白，呈团串状，不均一的随机分布，这种影响质控的情况具有普遍性。

最后，大多数小分子半抗原不易直接吸附到载体表面。

解决这一难题的方法，一般是采用在小分子抗原上，先偶联上葡聚糖，明胶等手臂后再进行固相包被。

对于有多重表达抗原决定簇的大分子抗原，用抗体桥式包被法可避免表面效应的影响。

将蛋白抗原吸附于胶体AI(OH)3后再固相也可以避免蛋白变性。

用Y射线辐照(400GY)PS板，不但可增加蛋白抗原吸附能力，而且还有降低抗体测定本底的作用。

(2)固相对抗体的影响直接吸附固相抗体(Igs)分子，除了呈团串状，不均分布和易解吸等一般不利因素之外，Igs分子摊开在载体表面，不但构象发生改变，而且影响抗体的活性，如IgG的结合价减少，可由2价变为1价，甚至完全失活。

“CK-MB”测定的“干扰”现象及原因分析

“CK-MB”测定的“干扰”现象及原因分析

“CK－MB”测定的干扰现象及实验对策湖北省兴山县人民医院彭兰张娥、万芳、邹志宝443711【摘要】目的：探讨“CK－MB”升高的干扰原因及实验对策。

方法：采用免疫抑制法测定“CK－MB”，采用酶偶联速率法测定总CK活性。

结果，10名健康献血员、56名本院心内科人、15名本院收治的恶性肿瘤病人三组人员同时检测“CK－MB”及总CK活力；在正常献血员中有一例CK－MB值异常升高，达总活性的61%；在56例心内科病人血清中CK－MB单项升高16例，总CK单项升高33例，二项指标同时升高28例；在15例恶性肿瘤患者血清中CK －MB单项升高7例，总活性升高2例，二项同时升高1例。

结论：采用免疫抑制法CK－MB作为心肌梗塞诊断指标的特异性仍须探讨，实验存在较多的干扰因素，且CK－MB结果升高与恶性肿瘤有密切关系。

【关键词】：CK－MB 总CK 干扰用免疫抑制法检测血清CK-MB活性,观察其活力单位及与CK 的比值关系作为诊断急性心肌梗死的相对特异性指标、预测冠状动脉再通的治疗效果和观察病情变化等,已被临床广泛应用。

一般情况下正常人CK-MB主要存在于人体心肌细胞内,血清中CK的存在形式主要是CK-MM,只有少量CK-MB,不超过总活性的5%,心肌梗死发生时最高值也不超过38%。

但在日常检测工作中经常发现临床血清标本中CK-MB检测值与理论值不符合,最多见的就是CK-MB检测值大于总CK检测值的现象。

现就肌酸激酶及其同工酶的组成、临床意义和检测的方法学等方面简要分析其原因并就解决方法提出建议。

CK－MB存在于心肌细胞胞浆中，CK－MB作为诊断急性心肌梗塞或心肌坏死的特异时指标，在心肌坏死症状发作4－5小时达正常上限，12－24小时达高峰，72小时逐步恢复。

基层实验室多采用免疫抑制法测定CK－MB，对不同病程的心肌病提供较特异诊断，本室通过三组不同人群的CK－MB测验结果发现，采用免疫抑制法测定CK－MB指标有假性增高现象，与临床体征明显不符，现先从实验原理探讨；免疫抑制法测定CK－MB是用抗体将M亚基抑制，测定B亚基，结果乘以2即为CK－MB活性，当血清中出现文献报道中的巨CK或CK－BB及其它成份时，由于它们不受抗M亚基抗体抑制，其活性已完全测出，再乘以系数2,就可能出现CK－MB升高或高于总CK的现象，造成CK－MB结果失真，本室从1999.9-2000.5共收集71份血清测定CK－MB及总CK活性，现将实验中出现的异常结果提出探讨。

病原免疫学干扰现象名词解释

病原免疫学干扰现象名词解释

病原免疫学干扰现象名词解释
干扰现象名词解释：两种病毒同时感染一种宿主细胞时，常发生一种病毒抑制另一种病毒的现象。

病毒间干扰的机制概括起来包括：病毒作用于宿主细胞，诱导产生干扰素。

除干扰素外，还有其它因素也能干扰病毒的增殖，如：第一种病毒占据或破坏了宿主细胞的表面受体或者改变了宿主细胞的
代谢途径因而阻止另一种病毒的吸附或穿入，如粘病毒等。

另外，也可能是阻止第二种mRNA的转译，如脊髓灰质炎病毒干
扰水泡性口炎病毒；还有可能是在复制过程中产生了缺陷性干扰颗粒，能干扰同种的正常病毒在细胞内复制，如流感病毒在鸡胚尿囊液中连续传代，则DIP逐渐增加而发生自身干扰。

免疫透射比浊法常见干扰因素的识别与应对策略

免疫透射比浊法常见干扰因素的识别与应对策略

作者简介：贾珂珂，女，1976年生，硕士，副主任技师，主要从事临床生化检验工作。

通信作者：崔丽艳，E-mail ：。

免疫透射比浊法常见干扰因素的识别与应对策略贾珂珂， 孙文苑， 聂　睿， 崔丽艳（北京大学第三医院检验科，北京 100191）摘要：免疫透射比浊法检测结果的准确性常受到一些干扰因素的影响，如样本性状、内源性干扰、钩状效应和携带污染等，这些干扰因素可使检测结果假性升高或降低，影响临床诊断和治疗监测等。

文章对免疫透射比浊法常见的干扰因素及机制进行综述，以帮助检验人员识别和确认可能存在的干扰，及时纠正检测结果，尽可能减少不良后果的发生。

关键词：免疫透射比浊法；样本性状；内源性干扰；钩状效应；携带污染；干扰Detection and prevention of common interference in turbidimetric immunoassay JIA Keke ，SUN Wenyuan ，NIE Rui ，CUI Liyan.（Department of Clinical Laboratory ，Peking University Third Hospital ，Beijing 100191，China ）Abstract ：The accuracy of turbidimetric immunoassay is affected by a few interference factors ，such as sample appearance ，endogenous interference ，hook effect and carry-over contamination. These interference factors may cause the results increasing or decreasing falsely and further affect clinical diagnosis and treatment monitoring. The laboratory staff should be familiar with common interference factors and mechanisms ，communicate with doctors in time and identify ，confirm and prevent possible interference ，in order to reduce the occurrence of adverse events.Key words ：Turbidimetric immunoassay ；Sample appearance ；Endogenous interference ；Hook effect ；Carry-over contamination ；Interference文章编号：1673-8640（2021）04-0362-07 中图分类号：R446.1 文献标志码：A DOI ：10.3969/j.issn.1673-8640.2021.04.002免疫比浊法是将液相内的沉淀反应与现代光学仪器和自动分析技术相结合的一种分析技术，常用方法为免疫散射比浊法和免疫透射比浊法。

免疫学检测中的干扰因素

免疫学检测中的干扰因素

免疫检测技术- 标记物
免疫测定技术均是以标记物示踪作为基 础，同位素、荧光素、酶是经典的三大标记 免疫测定技术。这三大标记技术发展了各种 各样的免疫测定方法，如RIA、ELISA、荧光 免疫测定、免疫化学发光测定等，目前应用 这三大标记技术的检测试剂盒在临床广为应 用。近年来，作为免疫测定发展方向的非同 位素标记技术以其敏感、安全等倍受关注。
免疫学检测方法中的 干扰因素和对策
第二军医大学附属长海医院实验诊断科
沈 茜
随着基础免疫学研究的深入和现代免 疫学理论的建立，使大量免疫学检测技术 被不断地创新、发明；在临床疾病诊治的 应用中也不断地推陈出新。目前应用免疫 学原理检测的检验项目占到三级综合医院 检验科全部检验项目的1／4，医疗收入约 占1／3。这就要求检验人员不断掌握最新 的临床免疫学知识和各种新的检验方法， 了解检验项目的基本原理。
干扰因素和对策- 类风湿因子
收集10份RF31～＞1000IU/L的患者血清， 在美国和欧洲66各临床实验室进行74个项目 的免疫竞争法或免疫夹心法检测，仪器和试 剂均配套。3445个结果中8.7％为假阳性。错 误高值结果中的21％（所有结果的1.8％）引 起了临床的错误诊断，在使用RF吸附剂后再 检测，错误结果得到纠正。39％的假阳性结 果也可在使用RF吸附剂后降低。
干扰因素和对策- 外源性物质
冻存后融解的标本，蛋白质局部浓缩， 分布不均，应充分混合后再测定，但混匀时 应轻柔，不可强烈振荡。标本的反复冻融所 产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子 产生破坏作用，从而引起假阴性结果。
操作流程不当－造成结果的改变
我们对HBV血清标志物五项指标仅抗HBc总抗体单阳性的血清实行了严格的复检 措施，发现初、复检结果的符合率＜50%。 偏差如此之大是无法用实验人员操作不当解 释的。抗-HBc总抗体采用竞争抑制ELISA法 检测, 日常工作中无论标本多少，必然是先 加完血清标本后再加抗-HBc-HRP。这样， 血清中的抗-HBc与抗-HBc-HRP存在着明显 的‚不公平竞争‛。

免疫检测中的干扰

免疫检测中的干扰

免疫检测中的干扰选译自《The Immunoassay Handbook (Fourth Edition)》翻译：武汉原谷生物科技有限责任公司免疫检测试验是现代临床实验室中一种重要的高敏检测技术, 但它们的致命弱点是它们易受干扰。

在病人的样本中存在干扰物质会导致错误的测试结果, 无论是假阳性或假阴性。

这个测试错误可能在临床上很重要, 并会导致对病人的误诊和灾难性后果。

对免疫检测试验中的干扰问题早已有大量综述性文章(Boscato et al., 1989; Boscato and Stuart, 1986, 1988; Braunstein, 2002; Diamandis, 2004; Ismail and Barth, 2001; Ismail et al., 2002b; Itoh and Yamaguchi, 1995; Jones, 2002; Kohse and Wisser, 1990; Kricka, 1999, 2000; Kricka et al., 1990; Kroll and Elin, 1994; Levinson, 1992; Tate and Ward, 2004; Van Kroonenburgh and Pauwels, 1988; Weber et al., 1990)。

在这里, 我们概述了免疫检测分析中干扰的范围, 消除因其存在于生物体液中的分析问题的方法, 和临床重要的例子。

免疫分析干扰是一个长期存在的问题, 可追溯到1900s 早期的血清学测试(Page and Heimoff, 1946; Seelman, 1918)。

正如一位作者在书信中所述, Wassermann 检测梅毒 (Seelman, 1918):" 在死亡和税收之外, 只有一件事我比这两者更确信的是，如果通过所描述的方法对我的血液进行测试，得到了一个阳性结果，我不会接受这是最终的诊断结果, 而是继续用另一种更准确和更可靠的方法进行测试。

免疫学检测方法中的干扰因素及对应措施

免疫学检测方法中的干扰因素及对应措施在现代临床中对于多种疾病的诊断均会应用到免疫学检查方法，获取到免疫检验结果能够为疾病确诊提供可靠依据。

但在免疫学检测全过程中，基于设备或人员操作等因素可能影响到工作顺利进行，或直接造成检验结果的不可靠。

针对此，需采用有效方式强化免疫学检测管理，以确保其能够为临床实践提供具有可靠性的数据。

结合本人工作经验对免疫学检测的干扰因素进行总结，并提出应对措施。

什么是免疫学检测方法？免疫学检测方法是临床疾病诊断中常用的检查手段。

可将其进一步分为体液免疫学检测与细胞免疫学检测。

其中体液免疫学检测是通过抗原与相应抗体在体外发生特异性结合并参考辅助因子参与下出现的反应，对疾病进行判断。

细胞免疫学测定方法是通过对多种免疫细胞表面独有标志物及产生细胞因子的测定，观察机体细胞免疫水平。

在体液免疫学检测中所观察到的凝集反应是颗粒性抗原与相应抗体特异性结合电解质参与下，形成肉眼能够观察到的凝集物，此种现象被称之为凝集反应。

在免疫学检测中，免疫荧光法的应用较为常见。

此种检测方式具体通过对于荧光素染料的应用标记抗体并不会影响其活性，此种抗体被称之为荧光抗体。

利用已知种类的荧光抗体浸染需要检测的含有抗原细胞或组织切片，若通过观察发现抗原则抗原与此抗体出现特异性结合，形成复合物，粘着在细胞上，在荧光显微镜下可观察到荧光可见物，能够辅助对相应疾病作出判断。

免疫学检测方法干扰因素1 准备工作常见干扰因素在免疫学检测之前，需要做好相应准备工作，包括对材料的采集以及设备准备等，而在此期间也存在诸多因素能够影响到最终检验结果。

例如免疫检验科质量管理体系不够完善，对科室内检测工作人员未能够给予系统化且有针对性的培训，可能导致检测人员自身缺乏风险防控意识，在临床工作中容易出现操作失误等问题。

在样本采集过程中，若相关工作人员没有接受过系统化培训，或其自身安全意识不强，则可导致其样本采集时间与采集部位不合理，致使样品出现溶血或损坏等情况影响到最终检测结果。

影响elisa结果的若干内源性干扰因素

内源性干扰因素一般包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体、因使用鼠抗体治疗或诊断诱导的抗鼠Ig抗体、交叉反应物质等。

在日常的临床血清(浆)标本中，有相当比例不同程度的含有上述各种干扰物质，从而导致测定结果的假阳性。

1.类风湿因子(rheumatoid factors,RF)在类风湿患者、其他疾病以及正常人血清中,常含有较高或不同浓度的RF，RF一般为TgM型，亦有IgG和IgA型，RF具有与变性IgG产生非特异结合的特点，因为在elisa测定中，其可与固相上包被的特异抗体IgG以及随后加入的酶标的特异抗体IgG结合，从而出现假阳性结果。

尤其是在捕获法IgM型特异抗体的测定中表现最为明显，因为此时固相包被的抗体为抗人弘链抗体，IgM型RF的存在可使其大量结合于固相。

为避免RF对ELISA测定的干扰，通常可以采取下述措施：(1)稀释标本：这在判断急性病原体感染的特异IgM抗体如抗HAVIgM，抗HBclgM， TORCH的IgM 抗体检验等尤为有用。

因为急性感染时，血循环中特异的IgM抗体滴度通常很高，而RF滴度通常相对要低得多。

因此，在测定前对标本进行稀释，特异的IgM因高滴度存在仍可检出，而非特异的RF则会因为稀释变成非常低的滴度，从而对测定几乎不产生干扰。

现在，有些特异IgM检测elisa试剂盒不要求稀释标本，直接检测，这样虽然方便了实验室技术人员的操作，但容易出现假阳性结果，并且由于某些慢性感染，如HBV的感染，血循环中抗HBelgM可持续以一定的滴度存在，标本不做稀释即进行检测，即可出现阳性结果，从而失去抗HBclgM用于HBV急性感染的诊断价值。

因此，在临床实验室，一定要使用要求对标本做1:1000稀释的试剂盒进行检验，从而保证相应检测项目结果的可靠性及临床应用价值。

(2)改变酶标抗体：由于RF结合的是IgG的Fc片段，如果将待酶标的抗体的F，片段酶切夫除，仅留下具有特异结合功能的F(ab’)2部分标记酶，则在测定中即可避免RF的干扰。

免疫检测中的干扰因素及排除方法

钩状效应干扰排除对策 用正常人血清系列10倍稀释再检测 不易避免，依据患者的临床诊断 查看患者的其他检查结果及历史结果 严格审核异常的测定值和少见模式 使用免疫滲透层析法快速验证 尽可能使用二步法进行检测
二、内源性干扰因素及对策——人抗动物（如鼠、羊、兔等）抗体
人抗动物（如鼠、羊、兔等）抗体： 在临床上，有使用鼠源性单抗进行靶向治疗，及使用放射性标记鼠源性单 抗进行影像诊断等，均有可能使相应患者体内产生抗属抗体。对使用鼠源 性单抗的酶免测定时，可产生假阳性结果。
人抗动物（如鼠、羊、兔等）抗体干扰排除对策 使用特异的抗体F（ab）片段作为固相或测定酶标抗体 在标本或标本稀释液中加入过量的鼠Ig，封闭可能存在的抗属抗体。 使用特异的鸡抗体IgG作为固相和测定抗体，鸡IgG不与人抗属抗体反应。
二、内源性干扰因素及对策——自身抗体
自身抗体：如甲状腺球蛋白、抗胰岛素、抗甲状腺激素抗体 等，能与其相应靶抗原结合形成复合物，在ELISA方法中可 干扰相应抗原抗体的测定。
三、外源性干扰因素及对策——溶血
溶血： 要注意避免严重溶血，血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的 活性，因此，在以HRP为标记酶的ELISA测定中，如血清标本中血红蛋白 浓度高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的HRP 底物反应显色。另外，机械强力震荡、突然反复冻融、低渗溶液、过酸、 过碱，以及酒精、乙醚、皂碱、胆碱盐等均可以起溶血。
三、外源性干扰因素及对策——纤维蛋白或标本凝固不全
纤维蛋白或标本凝固不全 血液标本采集后，如采集管中无抗凝剂或促凝集，则血液通常在半小时后 开始凝固，18~24h完全凝固。日常检测中，常在血液还未开始凝固时即分 离血清，此时离出的“血清”并非为完全血清，其中会残留部分纤维蛋白 原，如将其加入微孔中，在ELISA测定过程中仍可以形成肉眼可见的纤维 蛋白块，易造成假阳性结果。

免疫学检测方法中的干扰因素及注意的问题重点


标本管中添加物质的影响： 抗凝剂、酶 抑制剂及分离血清的分离胶等均对免疫检测有 一定干扰作用。
标本保存不当： 在冰箱中保存过久的标 本，会造成假阳性；有时抗原或抗体免疫活性 减弱，也会出现假阴性。
操作流程不当－造成结果的改变
对HBV血清标志物五项指标仅抗-HBc总抗体 单阳性的血清实行了严格的复检措施，发现初、复 检结果的符合率＜50%。偏差如此之大是无法用实 验人员操作不当解释的。抗-HBc总抗体采用竞争抑 制ELISA法检测, 日常工作中无论标本多少，必然 是先加完血清标本后再加抗-HBc-HRP。这样，血 清中的抗-HBc与抗-HBc-HRP存在着明显的“不 公平竞争”。
免疫学检测方法中的干 扰因素及注意的问题
组员：吴聪聪 王泽成 沈杨
吕林 包银伟
发言人：包银伟
PPT制作：吴聪聪
高迪
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பைடு நூலகம்
背景介绍
2
干扰因素
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注意事项
背景简介
免疫学检测就是利用抗原和抗体高度特异性结 合的原理而检测分析微量物质的方法。从20世纪 50年代美国学者Berson和Yallow发明了放射免
疫测定技术检测胰岛素起，免疫学检测技术经历了
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加样同时加入抗-HBc-HRP放置不同时间对检 测结果的影响
放置时 间min 阴性标 本数 临界值－标本A ＜0.3 0 75 10 450nm 假阳性 (%) 假阴性 (%)
0.3~0. ＞0.7 7 3 6 0 0
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免疫学检测- 干扰因素
标本自身及前处理所造成的干扰因素 －类风湿因子（RF） －嗜异性抗体 －自身抗体 －补体 －纤维蛋白 －溶血或黄疸 －交叉反应物质 －外源性物质
干扰因素和对策- 类风湿因子
患者体内存在的类风湿因子能显著干扰 许多免疫学检测方法，IgM、IgG型RF可以与 免疫检测系统中的捕获抗体及标记二抗的Fc 段直接结合，从而导致检测结果假阳性或假 性升高。RF对不同检测系统的干扰程度有所 差异，影响程度并不与RF的浓度成正比 。目 前，在临床工作中使用的免疫检测试剂盒大 部分均没有很好地防止RF干扰的措施，国外 著名公司要好于国内公司。
4
/L天然MAK33或15mg/L热处理
MAK33后结果正常
4 仅加入15mg/L热处理MAK33后
3
结果正常
0.08 0.06
干扰因素和对策- 嗜异性抗体
使用Access免疫化学发光检测系统测
定TSH、PSA、βHCG和皮质醇，前三项为
双位点非竞争法，后为竞争法。160份标本
测定HCG有5份（3.1%)假性升高；53份标
免疫检测技术- 标记物
免疫测定技术均是以标记物示踪作为基 础，同位素、荧光素、酶是经典的三大标记 免疫测定技术。这三大标记技术发展了各种 各样的免疫测定方法，如RIA、ELISA、荧光 免疫测定、免疫化学发光测定等，目前应用 这三大标记技术的检测试剂盒在临床广为应 用。近年来，作为免疫测定发展方向的非同 位素标记技术以其敏感、安全等倍受关注。
干扰因素和对策- 自身抗 体 嗜靶抗原的自身抗体，如抗甲状腺球蛋
白、抗胰岛素等嗜靶抗原的自身抗体，能与 靶抗原结合形成复合物，在免疫检测系统中 均可对靶抗原的测定结果造成负性干扰。
判断嗜靶抗原的自身抗体对检测的负干 扰，因紧密结合患者的疾病诊断、病史、其 他实验检查的结果综合分析。如甲亢、甲低、 I型糖尿病等。
免疫学检测方法中的 干扰因素和对策
随着基础免疫学研究的深入和现代免 疫学理论的建立，使大量免疫学检测技术 被不断地创新、发明；在临床疾病诊治的 应用中也不断地推陈出新。目前应用免疫 学原理检测的检验项目占到三级综合医院 检验科全部检验项目的1／4，医疗收入约 占1／3。这就要求检验人员不断掌握最新 的临床免疫学知识和各种新的检验方法， 了解检验项目的基本原理。
干扰因素和对策- 嗜异性抗体
嗜异性抗体通常是指与其他种类动物的 免疫球蛋白产生反应的人类抗体，具有广泛 的种特异性。免疫检测系统中大量使用单克 隆抗体，嗜异性抗体可与啮齿类动物IgG的 Fc段结合。这样嗜异性抗体既可与检测系统 中的捕获抗体结合、又可和标记抗体结合， 造成检测结果假阳性或假性升高。嗜异性抗 体干扰的程度、频率与患者的疾病状态、年 龄、性别等无关。
本（37.9%)用嗜异性抗体吸附剂吸收后结果
出现差异性下降；有4份标本的结果出现＞
4SD的显著增高，使临床对；49(7):1163～1169
嗜异性抗体的干扰－对策
在标本稀释液或待检标本中加入过量的动 物Ig (s) ，但加入量不足或亚型不同时无 效（要与捕获抗体和标记抗体的Ig亚型 相 同）。 捕获抗体使用F(ab`)2，切除Fc段。
干扰因素和对策- 类风湿因子
收集10份RF31～＞1000IU/L的患者血清， 在美国和欧洲66各临床实验室进行74个项目 的免疫竞争法或免疫夹心法检测，仪器和试 剂均配套。3445个结果中8.7％为假阳性。错 误高值结果中的21％（所有结果的1.8％）引 起了临床的错误诊断，在使用RF吸附剂后再 检测，错误结果得到纠正。39％的假阳性结 果也可在使用RF吸附剂后降低。
Clinical Chemistry 2002;48(11):2008~2016
RF的干扰－对策
捕获抗体用F(ab`)2替代完整的IgG 标本用连有热变性（63℃，10 min）IgG的 固相吸附剂（Euroimmune公司）处理 （将 热变性IgG加入到标本稀释液或血清中同 样 有效），4℃过夜离心后在检测； 检测抗原时，可以用终浓度0.1mol/L 2-巯 基乙醇(2- ME)等加入到标本稀释液或标本
干扰因素和对策- 嗜异性抗体
将11261份血清标本使用荧光时间分辨免 疫分析系统（PE公司，二步法、双位点）检 测CEA，将缓冲液中加入小牛IgG 约210个病 人、3.3~4.7%的标本出现假性升高；加入 15mg/L热处理小鼠IgG（MAK33 ）（Roche） 可将干扰降为0.86%；同浓度天然小鼠IgG无 效；去除捕获抗体或标记抗体的Fc段也可将 干扰降至0.1%。
要保证实验结果的正确性和可靠性，必 须对实验整个过程中各个环节中的干扰因素 有比较清楚的掌握和了解。在本次课中主要 讨生论化的是标本本身内在因素、以及由于人为 因临素检对标本处理不当等引起的外在因素、对 免疫检测结果造成的影响。在了解这些因素 的同时，如何在临床工作中注意和解决这些 干扰，以保证结果的准确性。
Clinical Chemistry 2002；48(4):613~621
表1. 不同处理方法对嗜异性抗体干扰的排除
处理方法
病人数 频率（％）
1 切除捕获抗体Fc段和加入热处 148
理15mg/LMAK33后结果正常
2 仅切除捕获抗体Fc段后结果正
41
常
3.0 0.82
3 切除捕获抗体Fc段或加入15mg
基本概念
抗原：是一类能刺激机体免疫系统产生特异性 免疫应答、并能与相应免疫应答产物（抗体或 致敏淋巴细胞）发生特异性结合的物质。
抗体： 是由抗原刺激 B细胞经分化增殖形成 的浆细胞合成和分泌 的，能与相应抗原发
基本概念
免疫学检测就是利用抗原和抗体高度特异 性结合的原理而检测分析微量物质的方法。从 20世纪50年代美国学者Berson和Yallow发明 了放射免疫测定技术检测胰岛素起，免疫学检 测技术经历了从定性到定量；从常量分析到微 量、超微量分析；从手工检测到全自动化；从 单个标本检测到高通量检测等一系列长足的进 步。