【特别提醒】 细胞膜上的载体与基因工程中的载体的两个“不同” (1)化学本质不同: ①细胞膜上的载体化学成分是蛋白质。 ②基因工程中的载体可能是物质,如质粒(DNA),也可能是生物,如噬菌体、动植 物病毒等。 (2)功能不同: ①细胞膜上的载体功能是协助细胞膜控制物质进出细胞。 ②基因工程中的载体是一种“分子运输车”,把目的基因导入受体细胞。
列的。如
以中心线为轴,两侧碱基互补对称;
以 为轴,
两侧碱基互补对称。
(3)限制酶切割方式: ①上下交错切割:限制酶在DNA双链的不同位置切割DNA(即在识别序列的中轴线 两侧切割),产生的DNA片段的末端两条链一长一短,不是平齐的,即黏性末端, 如图:
②上下对称切割:限制酶在DNA双链的相同位置切割DNA(即沿着识别序列的中轴 线切割),这样产生的末端两条链平齐,即平末端,如图:
2.方法步骤: (1)研磨:取30g洋葱切碎,倒入10 mL研磨液研磨。 (2)除杂:漏斗中垫上纱布过滤后,在4 ℃冰箱静置后取_上__清__液__,1 500 r/min的 转速下离心后取_上__清__液__。 (3)提取:加入体积相等、体积分数95%酒精,溶液出现白色的丝状物是_D_N_A_。 方法一:用玻璃杯按_一__个__(填“一个”或“两个”)方向搅拌,卷起丝状物,用滤 纸吸去上面的水分。 方法二:10 000 r/min的转速下离心5 min,取_沉__淀__物__晾干。
名称 限制酶
DNA 连接酶
DNA 聚合酶 DNA (水 解)酶
解旋酶
作用部位 磷酸二酯键 磷酸二酯键
磷酸二酯键
磷酸二酯键 碱基对之 间的氢键
作用结果
将DNA切成两个片段
将两个DNA片段连接为一个 DNA分子