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1. 准备好种子罐和接种材料。
清洁并消毒种子罐和其他接种材料，如滤纸、培养基和移液器。
10L-在位灭菌发酵罐操作规程一、灭菌（在位灭菌）1、水箱中装入足够的蒸馏水；2、检查罐线连接是否完好；3、打开蒸汽发生器、至排气口有蒸汽冒出时关闭排汽口；4、在蒸汽工作时，把培养基加入到发酵罐中，关紧各阀门；5、用钟罩罩上发酵罐，并用螺母固定结实；6、蒸汽发生器达到设定的压力时，打开通气阀门使蒸汽通入发酵罐的下部；7、然后打开发酵罐上下的连接阀门，使蒸汽通入上部至钟罩顶有蒸汽冒出；8、关闭钟罩顶的阀门，使温度上升；9、调整蒸汽通入的速度，使温度以比较快的速度升至95℃；10、用比较慢的速度升至120℃，并维持15min；11、关闭通气阀，停止通入蒸汽，待钟罩内温度降至室温时，打开钟罩顶的阀门排汽；12、汽排净后，拿下钟罩，把各罐线连接好。
二、发酵培养1、在控制器上设定好发酵的温度pH、搅拌转速等参数；2、连接好pH电极、温度电极，打开相应控制软件；3、调整无菌空气的流量；4、在酒精火焰的保护下，将菌种加入到发酵罐中；5、打开冷却水，在控制器上按键开始发酵，控制系统自动记录数据。
三、发酵完毕1、停止发酵，记录数据保存；2、把发酵液排出进行后续处理，用水洗净发酵罐；3、在计算机上记录的数据存盘，关闭控制器；4、在计算机上处理记录的数据。
5L-玻璃发酵罐操作规程一、发酵准备1、检查各罐电路及罐体供水；2、注入培养基，安装好pH电极、DO电极；3、设定发酵条件；4、pH电极零点和斜率进行标定，DO电极零点标定；5、连接好公用罐线，并保证安全可靠；6、过滤器胶管用弹簧夹夹紧，防止在消毒过程中培养基倒流进入空气过滤器；7、用闷冒盖紧pH电极上端口，防止因电缆插口受潮导致电极故障；8、溶氧电极上端口用吕铂纸包裹，防止因电缆插口受潮导致电极故障；9、盖紧其它罐盖接口，移去排汽冷凝器冷却水进出口的水管；10、离位实罐灭菌：玻璃罐体及各补料瓶盖好牛皮纸放入灭菌锅，灭菌过程温度升降要缓慢；11、灭菌结束，尽快将罐体放回原位，并尽快通入空气。
酵母培养物产品发酵过程各环节操作规程菌种室操作规程1、菌种室和无菌室应保持整洁，严禁在其内饮食，无菌室应定期进行消毒灭菌，并进行无菌检查。
2、所用培养基及操作工具必须灭菌后才可带入无菌室。
3、进入无菌室工作人员应换上无菌衣，无菌鞋及无菌口罩。
4、操作前先用75％酒精擦手，待酒精挥发后点燃酒精灯，之后进行操作。
5、操作完毕，整理好工作台，然后离开。
6、对菌种室的菌中和资料应保密，不得外流。
7、所用药品不得品尝8、显微镜及其它贵重仪器，要细心操作，轻拿轻放，保护好，并做好使用记录。
9、所做实验，认真做好记录，以便总结分析。
10、实验时切勿将酒精等易燃物品接近火源，如遇险情，应及时采用适当的灭火措施。
11、工作完毕，所用仪器，药品放回原处，保持工作台洁净。
12、离开工作室前，应检察门窗，电源灯，火源，然后离开。
13、报废菌种，应灭菌处理后倒入下水道，实验后不用的药品，倒入所指定的地方。
发酵罐灭菌操作规程一、空消1、打开夹套底阀，把夹套中的水排尽。
2、打开排气阀门。
3、分别打开空气蒸汽阀门、物料管蒸汽阀门、取样管蒸汽阀门，三路蒸汽同时进气。
4、当罐内温度上升到95℃调节三路蒸汽阀门，使温度平衡升至125℃时，再调节进排气阀门，使温度控制在125℃左右保温40分钟。
5、灭菌结束后，关闭所有进气阀门，打开排气阀门，排气待发酵罐冷却后，方可打开罐盖，然后进行配料。
二、实消1、开启电机搅拌，打开排气阀门。
2、分别打开空气蒸汽阀门、料管蒸汽阀门、取样管蒸汽阀门、三路管道同时进蒸汽。
3、当温度升至100℃时，调节四路蒸汽阀门，使温度平缓的上升至116℃，再调节进排气阀门，使温度控制在114℃-116℃之间，保温20分钟。
4、灭菌结束后，关闭四路蒸汽阀门，使罐内压力低于空气压力后，再打开空气进气阀门，进气保压，然后打开冷却水阀门，进气冷却，等待接种。
高效空气过滤器消毒操作规程1、关闭空气阀门后，一定要彻底排尽过滤器内的空气，是压力表指针显示为零。
淄博xx有限公司发酵车间操作规程二零xx年x月x日修订本规程涵盖本工段安全操作要求、技术操作要求、卫生要求、环保要求、物流要求五个方面，涉及设备安全、人身安全、工艺技术实施安全、物流安全、环境安全。
本工段所有操作必须按照本规程进行，任何与本规程不一致的操作，均视为违章。
一、一级种子罐操作规程1、空罐灭菌先缓慢开启所有的直接蒸汽阀门。
直接蒸汽阀们包括三路：一是与风管相联的直接蒸汽阀门，二是取样口蒸汽阀门，三是移种整齐阀门。
然后缓慢开启所有排汽阀门。
排汽阀门包括四路：一是接种口，二是排风口，三是葡萄糖入口，四是柠檬酸铵入口。
观察温度和罐压的变化情况。
当温度升到100℃时，保持罐压0.05到0.1Mpa，开大排汽阀门和进汽阀门。
当温度升到120℃时，罐压保持0.1Mpa，关小所有进汽和排汽阀门，保温保压10分钟。
然后关闭所有进汽和排汽阀门，缓慢开启进风阀门，打开排污阀，排放罐内蒸汽冷凝水。
开启排污阀门前必须先观察一楼排水管附近是否有人，避免热水涨管伤人。
冷凝水放完以后，关闭进风阀门，打开排风阀门，排空罐内压力。
排空压力表指示为“0”、转子流量计显示无风排出时，视为排空。
然后打开接种口阀门，观察无明显排风现象时，方可打开罐盖，准备上罐。
2、上罐罐内加水至下风头上边缘，开启进风阀门，把配好的葡萄糖在通风情况下投入罐内，然后加水至距离罐口87厘米处，关闭进风阀门，投入其他营养盐。
营养盐投放前应严格核实组成及配比，并确认无误。
然后开启进风阀门，取样检测固形物。
如固形物高于20，继续加水至离罐口58厘米；如固形物低于20，保持通风15分钟后再次取样检测。
如仍然低于20，应取样检测还原糖含量，并根据检测结论相应添加一定数量的葡萄糖，然后关闭进风阀门，加水至58厘米处。
之后，取样检测固形物、还原糖、PH值。
还原糖20±1，固形物20±1视为合格；还原糖超出15-25范围时，判断物料不合格，不得进入下步操作。
发酵操作规程（空气系统，种子罐，发酵罐）：一,使用前的技术准备 1 . 上岗前的技术培训：发酵罐是机电一体化的高科技设备,因此; 操作人员上岗前必须进行技术培训,使他们熟悉整个系统的工作原理,管路, 阀门的操作程序,并对空压机,能正确操作使用.未经培训的人员,不得单独上岗操作. 2. 设备使用之前, 应先检查电源是否正常, 空压机, 循环水系统是否能正常工作. 3. 检查系统上的阀门, 接头及紧固螺钉是否拧紧. 4. 开动空压机, 用0.15Mpa 压力, 检查发酵罐, 过滤器, 管路, 阀门的密封性能是否良好,有无泄漏. 5. 溶氧仪, pH 仪, PLC 系统应根据使用说明书进行检查, 校正. 6. 上岗人员对上述各项必须能熟练操作.二,空消在投料前,气路,料路,发酵罐必须用蒸汽进行灭菌,消除所有死角的杂菌,保证系统处于无菌状态. 1. 空气管路的空消( 1 ) 空气管路上有除水减压阀,和除菌过滤器.除水减压阀不能用蒸汽灭菌,因此在空气管路通蒸汽前,必须将通向除水减压阀的阀门KQF1 关死,使蒸汽通过蒸汽过滤器然后进入除菌过滤器. (2) 空消过程中, 除菌过滤器下端的排气阀应微微开启, 排除冷凝水. (3) 空消时间应持续40 分钟左右,压力０.1Mpa, 设备初次使用或长期不用后启动时, 当最好采用间歇空消, 即第一次空消后, 暂定2～3小时再空消一次, 以便消除芽孢. (4) 经空消后的过滤器, 应通气吹干, 约30 分钟, 然后将气路阀门关闭. 2. 发酵罐空消(1)发酵罐是将蒸汽直接通入罐内进行空消. (2) 空消时, 应将罐上的接种口, 排气阀, 及料路阀门微微打开, 使蒸汽通过这些阀门排出, 同时保持罐压为0.13～0.15Mpa. (3) 空消时间为30 分钟, 特殊情况下, 可采用间歇空消. ( 4) 空消结束后, 应将罐内冷凝水排掉. 注意: 1.发酵罐空消时, 应将夹套内的水放掉, 空消时最好将夹套排水阀打开, 以防夹套水排不净. 2.空消时, 溶氧, pH 电极应取出, 可以延长其使用寿命.三,实消:实消是当罐内加入培养基后,用蒸汽对培养基进行灭菌的过程. 1. 空消结束后, 首先需将pH, Do 电极校正好后装入罐体中的接头中, 然后将配好的培养基从加料口加入罐内,此时夹套内应无冷却水. 2. 一般培养基的配方量以罐体全容积７０—７５%左右，根据培养基的泡沫而定。
火焰接种规程1 目的建立火焰接种操作规程，规范其操作。
2 范围适用于发酵接种的操作。
3 责任车间组织制定并实施，生产部和质管部监督实施。
4 生产前准备4.1 检查岗位卫生是否符合要求。
4.2 检查有关SOP现行版本和记录是否齐备。
4.3 检查所用设备、仪器是否有完好的状态标识。
4.4 检查仪器、计量器具、衡器具是否已清洁并校验在有效期内。
4.5 检查人员着装是否符合规定，是否做好了必要的防护措施。
5 生产操作过程5.1 接种时间由霉菌人员根据生产情况决定，并提前通知消毒和看罐岗位，以便做好准备工作。
接种时优先使用最早送来的菌液。
若送来的菌液超过24小时则不能进罐应退还种子室。
5.2 接种现场不得超过5人，看罐一个，霉菌两个，消毒两个，消毒工提前半小时将门窗关好，将接种屏风准备好，保证接种现场无通风，然后再用0.2％新洁尔灭喷洒现场。
5.3 待罐温降到31±2℃时,进行接种准备工作。
5.4 霉菌人员用0.2％新洁尔灭浸泡手套，用肥皂彻底洗手，用0.2％新洁尔灭纱布擦手，取出接种手套拧干，整理好着装，把准备好的菌液用0.2％新洁尔灭擦试瓶壁，到种子罐接种现场。
5.5 消毒人员做好卸压工作，并用0.2％新洁尔灭再对接种周围环境进行喷雾。
将罐压降至0.05-0.06Mpa时，戴好保护手套，点火焰圈把接种口下小球阀关闭.拧开上球阀。
把皮管接入接种口缓慢打开下球阀，将火焰圈取下扑灭。
缓慢开打排气泄压到0.02-0.03Mpa.再升压到0.06-0.0.08 Mpa。
重复3-4次.直至接种瓶内的菌液压完。
消毒人员在火焰保护下将接种帽拧紧之后立即打开空气进气阀，调节排气阀，控制流量使种子罐压达到0.045-0.055MPa，然后与看罐人员进行交接。
(接种安全风险:火焰烫伤。
风险水平:一般风险。
伤害程度:二级。
可能性:二级。
防范措施:正确操作穿戴好焊工手套，准备烫伤药膏)，整个接种过程不得超过10分钟。
发酵岗位工艺操作规程1.目的及适用范围1.1 本规定的目的是严格工艺操作，提高工作质量，保证安全文明生产。
1.2本规定适用于发酵工序消毒、接种、移种、温度控制、压力通气量控制、冷冻、取样、加热放罐、输送的过程控制。
2.相关文件:无3.发酵岗位使用专业术语3.1 延滞期：培养基接种以后，细胞并不立即生长繁殖，其细胞数在一定时期内无明显增加，这一阶段称为延滞期。
延滞期是细胞在环境改变后表现出来的一个适应阶段，这是一个静态到动态的过程，须缓慢控制，即用低转速来控制好溶氧。
3.2 对数生长期：细胞经过延滞期后适应了新环境，生理状态也较为活跃，细胞开始迅速繁殖，由于细胞以分裂方式繁殖，细胞数目呈几何级数增加，故称对数生长期。
进入对数生长期可提高转速满足菌种对氧的高呼吸要求。
3.3 稳定期：随着细胞的生长繁殖，培养基中营养物质渐趋耗尽，而代谢产物的逐渐增多，以及菌生长引起周围环境条件（如PH值、温度等）的变化，使的细胞的繁殖速度逐渐降低，当细胞的繁殖速率与死亡速率相等时，细胞生长进入稳定期，细胞浓度达到最大。
3.4 衰亡期：培养基中营养成分耗尽，代谢产物大量堆积，这时能够继续繁殖的细胞数越来越少直至为零，而死亡的细胞则越来越多，即活细胞数显著下降，故此时期称为衰亡期。
3.5 球状菌：球状菌又可细分为单球菌、双球菌、四连球菌、八叠球菌、链球菌、葡萄球菌。
3.6 杆状菌：3.6.1 按菌的长短细分为长杆菌和短杆菌。
3.6.2 按菌的粗细细分为粗杆菌和细杆菌。
3.6.3 按菌的相连个数细分为单杆菌、双杆菌、链杆菌。
3.7 螺旋状菌：螺旋状菌又可细分为弧菌和螺旋菌。
注：芽孢菌（又称内生孢子）不具有分类学上的意义，其只是细菌（一般为杆菌，球菌也有）在生长过程中细胞内部产生了一些圆状或椭圆状的空心，以抵抗不良环境对其的影响。
4.职责：4.1 认真执行本公司各项管理规定和规章制度。
4.2 严格按单体操作规程和设备操作规程操作，严禁超温、超压，违章操作。
发酵罐安全技术操作规程一、运行前的准备1. 发酵罐内部检查1.1 检查调正并拧紧拉杆1.2 检查搅拌轴各部位定位轴承（底轴承、中轴承、上轴承）是否正常1.3 各部位紧固螺栓是否拧紧1.4 联轴节是否紧固，有无移位、变形1.5 清除罐内异物2. 罐外检查2.1 检查控制柜各元器件是否正常，三相电压是否均衡，电压一般应在370-400V范围内2.2 检查各种测量、显示仪器仪表（溶氧仪、PH仪、温度仪、流量计、压力表等）是否正常并校正2.3 检查系统上各个阀门、接头、机架、电机等螺栓是否拧紧；甲醇、氨水补给系统是否正常2.4 检查过滤器是否清洁正常2.5 关闭系统各个进出阀门，开启压缩空气保持罐压在0.15MPa，检查发酵罐、过滤器、管路、阀门、机械密封、人孔的密封性能是否良好，有无泄漏2.6 开启水冷却系统，检查水压是否足够，管路无泄漏2.7 打开蒸汽管路疏水装置旁通阀排尽积水后关闭；缓慢开启蒸汽阀至1/4时，观察后蒸汽管路中的疏水阀工作是否正常，正常后再逐步开大，避免管路因“水锤”现象发生振动破发生事故。
2.8 合闸接通控制电源，启动搅拌运行1-2分钟看其运行是否平稳，有无异响二、空消灭菌在投料前，气路、料路、发酵罐及各接管采用蒸汽进行空消灭菌，消除所以死角的杂菌，保正系统处于无菌状态三、实消灭菌在罐内投入培养基后，按工艺规程通入蒸汽对培养基进行彻底灭菌四、运行及管理4.1 启动搅拌运行，按工艺规程进行接种与培养4.2 经常观察电机电流表电流是否正常。
60吨发酵罐电流<170A；30吨发酵罐电流<110A；6吨发酵罐电流<21A；500L 发酵罐电流<4A4.3 经常观察电机、搅拌轴承温升情况，温升不超过65℃（手可接触3秒）；运行平稳无异响4.4 经常观察各仪器仪表、流量计、发酵罐温度显示正常4.5 保持罐压在0.03-0.05MPa4.6 根据工艺规程，发现异常及时、准确地进行调整五、停机出料5.1 发酵结束后，冷却降温，按下停止按钮（红色）停止搅拌，截断电源开关5.2 出料采用压力输送时，控制罐压<0.1MPa5.3 出料完成后，取出溶氧、PH电极，进行清洗保养5.4 及时、彻底清洗发酵罐及其配套设施六、安全注意事项与维护保养6.1 经常打扫设备及其环境卫生，保持设备及环境整洁6.2 严禁将水泼洒到电器设备、仪器仪表上6.3 过滤器滤芯、空气分布器要经常检查清洗或更换6.4 出料完成后，要及时清洗。
10JS发酵罐操作规程1.空罐准备工作1）清洗发酵罐后，盖紧罐盖，旋紧罐盖上压紧螺栓。
2）标定pH、DO电极，将电极插入罐体侧面的传感器接口内并及时的锁紧螺母，确保安装妥当，防止高压下传感器弹出伤人。
3）关闭发酵罐所有与外界相连接口的阀门。
4）装培养基，盖紧进料口。
2.灭菌1）预热（1）预先开启蒸汽发生器、空压机及水源开关（2）开搅拌器，调转速为200—300rpm，温度设为手动，进气三通阀抬到S档。
（3）开排气阀，开排夹套冷凝水阀。
其它所有阀门均为关闭（4）打开总蒸汽阀，打开夹套蒸汽阀，夹套进蒸汽，至培养基温度到98℃。
2）实罐灭菌：温度至98℃时进入实罐灭菌阶段。
（1）停搅拌，微开空气过滤器前的冷凝水阀，开二路蒸汽阀，待冷凝水排尽后，关闭冷凝水阀，三通阀换到F档，蒸汽进罐。
（2）当罐温达到100℃两分钟后，关闭排尾气阀，调节蒸汽阀，维持过滤器前压力为0.12—0.16Mpa，同时必须保证蒸汽阀有一定的开度，不得关死。
（3）达到预定温度时，打开排尾气阀，至有一定量蒸汽排出，关紧或微开夹套蒸汽阀，微开罐底阀（至视镜处培养基翻动有少量变化为宜），根据罐压和罐温变化的趋势，及时调节蒸汽阀和罐底阀。
罐压和罐温维持在预定范围内开始计时。
旋松接种口盖至有少量蒸汽冒出。
此阶段也可灭菌取样管。
3）灭菌完成及降温（1）保温结束后，旋紧接种口，旋紧罐底阀，关小排气阀，关紧取样器蒸汽阀。
（2）关闭一路、二路蒸汽阀，过滤器三通阀置于S档。
缓缓开启空气阀，开启排冷凝水阀。
利用空气吹干空气过滤器膜。
（3）关闭夹套排气阀，打开夹套进水阀和循环管线切断阀。
设定发酵温度，温度控制方式为“自动”，发酵罐进入自动降温。
100℃时可以开搅拌。
（4）打开尾气冷凝器水阀。
当罐压接近0.05Mpa时，过滤器冷凝水排尽后，关闭过滤器冷凝水阀，将三通阀放回F挡，空气进罐。
注意：在降温过程中，始终监视罐压，严禁压力掉零。
3.发酵当温度降至发酵所需温度时进入发酵阶段1）设置各发酵参数为发酵工艺值，此时标定溶氧电极为100%。
1 目的:制定种子罐的正确使用清洁保养方法，规范生产部对种子罐的清洁操作。
严格按照本操作规程操作，不得随意更改操作规程。
2 范围: 种子罐灭菌.3. 职责: 所有使用种子罐的人员对本制度的执行负责。
4. 程序：4.1 种子罐灭菌操作步骤4.1.1 准备工作4.1.1.1空气源的检查4.1.1.1.1主要检查空气压力在0.2—0.25MPa之间。
4.1.1.2管道，阀门的检查4.1.1.2.1检查管道，阀门是否有泄漏。
如有泄漏，应进行调整。
4.1.1.3电气仪表的检查4.1.1.3.1检查种子罐温度显示是否准确;检查压力表,安全阀。
4.1.1.4 pH、DO值的校正4.1.1.4.1校正pH、DO电极(详见pH、DO电极使用操作)。
4.1.1.4.2将校正好的pH、DO电极插入安装孔内,并用螺母旋紧,可靠固定。
4.1.1.5纯蒸汽的检查4.1.1.5.1检查管道是否已有纯蒸汽4.1.2 精过滤器灭菌4.1.2.1 调节蒸汽总过滤器前总蒸汽阀，使其压力在0.12-0.13Mpa之间。
4.1.2.2 调节压缩空气总阀，使其压力在0.2Mpa。
4.1.2.3 打开流量计压缩空气阀，使预过滤器压力在0.2Mpa。
4.1.2.4 关闭预过滤器与精过滤器中间的MDV07阀，慢慢打开MDV06阀，微开MDV08阀，打开MDV09，让纯蒸汽通过精过滤器。
打开MDV11；MDV16；MDV14；MDV13有气冒出。
打PPV01排气。
保证精过滤器压力在0.1Mpa以上，保持20分钟。
4.1.2.5 精过滤器灭菌结束，依次关闭MDV06阀和MDV11阀。
打开预过滤器与精过滤器中间的MDV07阀，在屏幕按下压缩空气恒流自动“关”显示为“开”，把MBV01打开，并用压缩空气吹干精过滤器。
4.1.2.6用压缩空气吹精过滤器30分钟，关闭MDV08,PPVO1阀。
4.1.2.5 精过滤器灭菌结束。
4.1.3 种子罐空罐灭菌4.1.3.1将种子罐四周内表面用抹布擦洗干净,表面无污物.4.1.3.2打开左夹套MBV10阀，排空种子罐在夹套中的冷却水，排完后关闭MBV10阀，打开MBV09阀。
发酵系统操作规程一、发酵前准备工作（1）检查电源是否正常，空压机、微机系统和循环水系统是否正常工作.（2）检查系统上的阀门、接头及紧固螺钉是否拧紧。
（3）开动空压机,用0.15Mpa压力，检查种子罐、发酵罐、过滤器、管路、阀门等密封性是否良好,有无泄漏。
罐体夹套与罐内是否密封（换季时应重点检测），确保所有阀门处于关闭状态（电磁阀前方的阀门除外)。
（4）检查水(冷却水）压、电压、气（汽）压能否正常供应。
进水压维持在0.12Mpa,允许在0.15-0。
2Mpa范围变动，不能超过0.3Mpa，温度应低于发酵温度10℃；单相电源AC220V±10％，频率50Hz,罐体可靠接地;输入蒸汽压力应维持在0。
4Mpa,进入系统后减压为0.24MPa；空压机压力值0.8Mpa，空气进入压力应控制在0.25—0。
30MP（空气初级过滤器的压力值)。
（5）温度、溶氧电极、PH电极校正及标定,详见触摸屏PH、DO的标定帮助.（6）检查各电机能否正常运转(共4个）.电磁阀能否正常吸合（整套系统共11个电磁阀）.二、灭菌1.发酵系统安装好后的初次清洗罐内的清洗:酸碱罐、补料罐、种子罐可将罐体上方的法兰卸开,由操作工采用洁净布手动清洗，结束后排尽罐内的污水，在多冲洗几遍即可。
发酵罐的清洗可采用自来水管通过手孔向罐体内壁冲洗，当水位上升到搅拌轴的第二片叶轮时停止冲洗，开动电机搅拌清洗。
各管路的清洗,可以先采用清水冲洗,再根据相应功能采用相应的清洗介质（清洗管路时应以保护管路中的各种元件为前提），具体步骤可参考“空气管路的灭菌”.如果发酵系统长时间不用或培养的菌体与上一批次的不相同时，可采用2％NaOH清洗,其他各罐也可以采用发酵罐的清洗方式清洗，清洗结束后应对发酵系统灭菌.2.空气管路的灭菌（1）空气管路上的除菌过滤器,使用蒸汽通过减压阀(空气减压阀不能进行蒸汽灭菌，所以空气预过滤器不灭菌）、蒸汽过滤器然后进入除菌过滤器.（2）空气除菌过滤器的滤芯不能承受高温高压，因此,将蒸汽减压阀调整在0.13MPa，不得超过0.15MPa。
任务三：发酵罐实消、接种子任务二；发酵罐接种引导课文通过本任务的学习你应该能够掌握下列知识：1．掌握小型发酵罐无菌接种的原理和方法。
2．理解杂菌污染的途径和防治方法。
3. 掌握接种安全操作规程通过操作训练你应该具有下列能力：1. 能进行发酵罐无菌接种操作。
2．对接种异常问题能及时预见、反应、处理。
3. 能严格按照安全操作规程进行操作。
前面我们已经制备了符合要求的产黄青霉菌种子，进行了发酵罐的清洗及空消、实消，接下来的任务就是进行接种了，那么发酵罐接种的知识你了解多少呢？一、无菌接种的必要性：案例：山东省某大型制药企业的2号发酵生产车间连续发生染菌污染事件，且每次杂菌的种类基本相同，分析可能染菌的原因，提出检查方案和防治措施。
分析：若排除了管路灭菌、空消、实消不彻底而导致染菌的因素外，能导致污染的另外一个原因就是接种操作不规范引起的。
我们的发酵属于纯培养，是由单一菌种接种以后进行的培养，其中不可以有任何杂菌，否则会影响产品的使用效果，所以为了确保每一批发酵的成功，在上罐之前，发酵人员必须具备以下两种意识：⏹无菌意识⏹安全意识二、接种量的确定接种量指移入的种子液体积与接种后培养液体积的比例接种量的大小决定于生产菌种在发酵罐中生长繁殖的速度，采用较大的接种量可以缩短发酵罐中菌丝繁殖达到高峰的时间，使产物的形成提前到来，并可减少杂菌的生长机会。
但接种量过大或过小，均会影响发酵。
接种量过大会引起溶氧不足，影响产物合成；而却会过多移入代谢废物；接种量过小会延长培养时间，降低发酵罐的生产率。
通常接种量：细菌1-5%，酵母菌5-10%，霉菌7-15%，有时20-25%。
二、发酵罐接种的方法一般情况下，发酵罐接种有三种方法：①火圈直接倒种②注射器接种③压力差接种。
前两种方法适用于小型发酵罐，第三种方法适用于大型工业化生产发酵罐。
1、火圈直接倒种法操作规程如下：⏹当发酵液温度降到接种温度时即可进行接种。
⏹准备合格的摇床菌种。
种子罐作业指导书
1目的
按照工艺要求生产无污染洁净的酵母纯培养物。
2范围
适合于发酵工段。
3操作原则：必须无菌操作。
4 工艺要求
用CIP清洗系统，将罐洗净
空消温度：90℃，时间30分钟
空消温度：121℃，时间40分钟
卸压： 103℃打开风阀
接种温度：31-33℃
发酵温度：30±0.5℃
发酵PH值：4.0-5.0自然变化
发酵时间:16-20小时
发酵结束指标:酒精份≥1.2%或菌浓度≥14g/l
4.2操作规程
4.2.1用CIP清水(二遍)碱水将罐洗净
4.2.2松开人孔盖和接种口，取样口，压力传感器排污口和排污口打开一半
4.2.3打开汽门，提温至90℃计时：30分钟(各口见汽)
4.2.4打开人孔盖，按工艺配方进行配罐：加水加蜜加营
养盐浓硫酸调节PH值
4.2.5配罐后取样测锤度、PH值达到指标后封罐提温
4.2.6提温到100℃关闭风阀到121℃时计时40分钟，同时打开取样口、排污口排一下，见汽为准
4.2.7 40分钟后卸压降温103℃时打开风阀及冷水循环降温至33℃时，关闭冷水循环，准备接种。
4.2.8 配合菌种员按照无菌操作将2个三角瓶种子接入种子罐。
4.2.9 目测调整风量，在第10小时再调整一次风量。
4.2.10
5注意事项
5.1使用蒸气必须提前15分钟与锅炉房联系。
5.2开启阀门注意安全防止烫伤！
5.3使用浓硫酸、碱液时必须穿戴好防护服,防止酸灼伤!如有灼伤发生,立即按化学物品灼伤处理方法处置,严重时处置后将伤者送至就近医院治疗。
发酵罐用法说明1、确认除安装有电磁阀的所有阀门处于关闭状态。
2、精过滤器消毒打开精过滤器处的排污阀，排尽精过滤器内的冷凝水，时间不少于5分钟。
然后打开蒸汽过滤器的出口阀，调节精过滤器处的排污阀精过滤器消毒压力维持在0.11Mp a～0.12 Mp a之间（温度为120℃～123℃），时间确保25～30分钟之间。
消毒后关闭蒸汽过滤器的出口阀的同时，迅速打开精过滤器的进气阀，用压缩空将精过滤器吹干，吹干时间确保25～30分钟之间。
吹干后，对整个空气系统进行保压，压力维持在0.12Mpa-0.15Mpa之间。
注意事项：对于过滤器进行蒸汽消毒时，首先必须排尽蒸汽管路中的冷凝水，并控制蒸汽压力不超过0.13Mpa。
操作时阀门应打开缓慢，防止压力冲击。
空气流量计不能灭菌。
3、与精过滤器相连管道灭菌打开控风阀处的蒸汽阀、蒸汽过滤器的出口阀、精过滤器处的排污阀，使压力维持在0.1~0.12Mpa之间维持15~20分钟。
关闭打开控风阀处的蒸汽阀、蒸汽过滤器的出口阀。
迅速打开精过滤器的进气阀，用压缩空将精过滤器吹干，吹干时间确保25～30分钟之间。
吹干后，对整个空气系统进行保压，压力维持在0.12Mpa-0.15Mpa之间。
4、种子罐空消关闭夹套排水阀，打开夹套排污阀，同时打开夹套蒸汽阀进气，在排光夹套内冷却水后，关闭夹套蒸汽阀，直至空消结束。
缓慢打开控风阀、底阀、底阀处的蒸汽阀、控风阀处的蒸汽阀，调节罐面排气阀，保持灌压0.15Mpa~0.18Mpa(温度126℃~130℃之间)，计时空消30分钟。
空消完毕后，关闭控风阀、底阀处的蒸汽阀、控风阀处的蒸汽阀，打开取样排污阀开始排污。
排污结束后，关闭底阀和取样排污阀。
开大罐面排气阀，卸去灌压后，待种子罐温度下降到40左右时，关闭罐面排气阀，打开灌面上进料口的螺盖，准备加入培养基。
注意事项：跟蒸汽相连的管道温度比较高小心烫伤。
5、加入培养基调PH将配好的培养基加入到种子罐中，占灌容积的60﹪～65﹪，打开电机搅拌5分后，检测并调整PH, 调整好PH，拧紧灌面上进料口的螺盖，准备培养基实消。
发酵罐操作规程注意事项（6篇）篇11.操作人员需经过专业培训，熟悉设备性能及操作流程。
2.进行任何操作前，务必穿戴好防护装备，遵守安全规定。
3.发酵过程中，严禁擅自离开岗位，密切关注设备运行状态。
4.发现异常情况，不要恐慌，按照应急预案冷静处理。
5.维护保养设备，定期进行检查，确保设备始终处于良好运行状态。
6.遵守环保法规，正确处理废弃物，防止环境污染。
请注意，以上规程应结合实际情况灵活应用，不断优化，以确保发酵过程的安全高效。
在具体操作中，务必以人员安全为首要考虑，遵循科学合理的操作原则。
篇21.操作人员应接受专业培训，熟悉设备操作和安全规定。
2.发酵过程中若发现异常情况，如温度、ph值剧烈波动，应立即调整并记录。
3.遵守无菌操作原则，防止微生物污染。
4.在调整参数或添加物料时，要避免对菌体造成冲击。
5.发酵罐运行时，严禁擅自离开岗位，确保实时监控。
6.清洗发酵罐时，避免使用腐蚀性清洁剂，以防设备受损。
7.发酵结束后，所有废弃物应按环保要求妥善处理。
通过严格执行上述规程，我们能确保发酵过程的高效与稳定，从而提升整体生产效益。
篇31.操作人员应接受专业培训，熟悉设备性能和操作方法。
2.操作过程中，禁止随意调整设定参数，避免影响发酵效果。
3.发酵过程中，严禁开启罐盖，以防微生物污染。
4.注意个人防护，穿戴防护服和安全鞋，避免接触有害物质。
5.发现异常情况，立即通知相关人员，不得自行处理。
6.清洁时，使用专用清洁剂，避免使用腐蚀性强的化学试剂。
7.发酵罐周围保持整洁，避免杂物堆积引发安全隐患。
8.遵守企业安全规定，不违反操作规程，确保安全生产。
通过以上规程，我们期望每位操作人员都能养成良好的操作习惯，确保发酵罐的稳定运行，为生产高质量产品提供坚实的保障。
篇41.检修工作必须由专业人员进行，遵守相关的安全规定，如佩戴防护装备，切断电源等。
2.清洁和消毒过程中，应遵循标准操作程序，避免引入污染物。
3.在检查过程中发现异常情况，应立即停止工作，记录问题，并报告给上级和维护团队。
1.0 目的：建立种子罐接种标准操作规程，对操作员工进行培训教育。
2.0 范围：适用于发酵工程部种子罐的接种操作。
3.0 定义：无
4.0 职责：接种操作者、车间主管对本规程负责，QA监督。
5.0 程序：
5.1 接种前准备工作：
5.1.1 在接种前半小时工艺通知值班人员关闭种子罐区窗户，后用1%新洁尔灭
喷洒种子罐区。
5.1.2 准备好1%新洁尔、75%酒精及无菌纱布；确认待接种罐运转正常，罐压在
0.03- 0.05MPa，罐温、pH在工艺要求范围内；接种口硅胶管的末端保
护完好并有活空气微排。
5.1.3 准备好接种用超净台，开启紫外灯，开启风机为高档，紫外灯照射30分
钟。
后关闭紫外灯，开日光灯待接种。
5.1.4 工艺员在接到菌种送来的接种瓶后，检查接种瓶气密性（硅胶塞、夹子
及硅胶管）完好。
5.2 接种：接种操作由工艺员执行，值班人员协助。
所有与接种有关人员在接种前
应洗净双手。
5.2.1 工艺员先用75%酒精消毒双手后，戴上无菌手套，再用75%酒精消毒。
5.2.2 将种子罐接种口末端与接种瓶口末端互相靠近，去除接种口末端纱布，
去除接种瓶口硅胶管末端纱布，将硅胶管口与接种口迅速对接，对接好
后用75％洒精无菌纱布捏紧硅胶管与接种口连接处，防止在按种过程中
管子脱落。
5.2.3 对接完毕，开启蠕动泵将摇瓶种子打入种子罐。
5.3.4 当摇瓶种子瓶里没有种子液进入胶管时，说明摇瓶种子已接完。
5.3.5 摇瓶种子接完后，罐压调至0.03Mpa及以上关闭接种口阀门（防止接种
瓶接种完毕后出现真空现象，导致外面空气进入超净工作台，造成超净
工作台污染），拔下种子罐接种口硅胶管，用沾75%洒精的无菌纱布绑好
接种口，同时将接种瓶硅胶管末端折起用纱布绑好（或用夹子夹好）。
种
子罐接种口硅胶管待清洁后留下批种子进罐用。
接种用硅胶管一个月更
换一次。
5.3.6 超净工作台清洁：按顺序从里到外、从上到下，用1%新洁尔灭纱布擦拭
超净工作台。
吹干后，关闭超净工作台风机。
5.3.7 接种完毕，摇瓶种子瓶由菌种带回清洗。
5.4 同值班人员进行交接，值班人员接收后马上调整相关参数至工艺要求范围，开
车运行。
5.5 各接种相关人员应填好接种记录。
6.0 相关文件:
6.1 硅胶管更换记录
7.0 修订简历:
记录编码：硅胶管更换记录共1页第1页
备注：一个月更换一次。
