AgilentHPLC1100ChemStation高级操作培训(安捷伦科技公司)

Agilent 1100型HPLC操作指南一、实验准备1、样品和流动相过滤（通常过0.2μm滤膜）、超声脱气5min。

2、更换四元泵流动相，泵头清洗溶剂（10％的异丙醇）。

二、启动液相色谱仪1、自上而下依次打开真空脱气机、四元泵、柱温箱（根据需要）、检测器电源，等待系统自检通过，黄灯表示闲置、绿灯表示运行、红灯表示出错。

2、打开电脑，双击电脑桌面的“仪器联机”打开操作安捷伦化学工作站，软件会自动检测到开启的所有硬件设备。

3、更换流动相存储瓶，旋松“排气阀（purge阀）”，将所换的溶剂瓶的流量设至高流速5mL/min，进行清洗和排放气泡，至管线中无气泡时关闭排气阀。

4、使用的流动相中含有缓冲盐时，需打开泵头清洗溶剂，使其逐滴流出，防止缓冲盐在柱子和泵头结晶析出，影响系统压力。

5、安装色谱柱：依次安装在线过滤器、预柱、色谱柱（注意方向，箭头指向检测器）。

设置溶剂比例，1mL/min流速，平衡色谱柱。

三、样品测试及数据分析1、编辑方法。

选择编辑完整方法，依次设定流动相比例和流速、柱温箱温度、检测器扫描波长等参数，保存方法。

2、运行方法，监测基线至稳定走平。

3、手动单针进样：设定样品名、数据文件存储位置，点击运行方法；将手动进样器扳至“Load”上样，上样完扳至“Inject”，工作站开始记录信号。

4、测试完毕，点击桌面的“仪器脱机”打开工作站，进行数据处理，积分，定量分析方法建立、报告输出等。

四、实验结束、关机。

1、实验结束，冲洗系统、色谱柱。

冲洗原则（以反相C18为例）：先用90％水，10％乙腈（或其它有机相）冲洗水溶性物质；30min后改为50％水，50％乙腈；再过30min 后，改为100％乙腈，再冲洗30min后结束。

2、实验结束，停止泵，关闭化学工作站，关闭电脑，关闭仪器的四部分电源。

3、卸下色谱柱，清理流动相，将各个抽滤头浸泡在有机相中，整理桌面、地面杂物。

注意事项：1、挥发性有毒有机相（甲醇、乙腈、正己烷等）需尽量包严实。

Agilent 1100 LC现场培训教材安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部一、培训目的：● 基本了解1100LC硬件操作。

● 掌握化学工作站的开机，关机，参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作。

二、 培训准备：1、仪器设备： Agilent 1100LC●G1310A :(单元泵)；G1312A(二元泵)；G1311A(四元泵)。

● G1313A（自动进样器）。

● G1316A（柱温箱）。

● G1314A（VWD检测器）。

● G1362A（示差检测器）。

● G1315A/B (DAD检测器)。

● G1321A (FLD检测器)。

● 色谱柱: Zorbax eclipse XDB C8,150mm×4.6mm i.d。

2、溶剂准备：● 色谱级纯或优级纯乙腈（ACN）或甲醇。

●二次蒸馏水基本操作步骤:(一)、开机：1、打开计算机,进入Windows NT （或Windows 2000）画面,并运行Bootp Server程序。

2、打开 1100 LC 各模块电源。

3、待各模块自检完成后，双击Instrument 1 Online图标，化学工作站自动与1100LC通讯，进入的工作站画面如下所示。

4、从“View”菜单中选择“Method and Run control”画面, 单击”View”菜单中的“Show Top Toolbar”，“Show status toolbar”，“System diagram”,”Sampling diagram”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。

5、把流动相放入溶剂瓶中。

6、打开Purge阀。

7、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入泵编辑画面。

8 、设Flow：5ml/min，单击OK。

9、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump control选项，选中On，单击OK，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止。

目的：规范AgilentllOO高效液相色谱仪操作程序范围：适用于实验中心AgilentllOO高效液相色谱仪的使用责任：实验中心相关人员对此程序负责内容：1.仪器组成及开机1.1仪器组成：Agile ntllOO高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。

1.2开机：1.2.1接通电源，打开计算机及工作站其它各部件开关，约30秒钟后，各部件进入待机状态，指示灯为黄色或无色。

1.2.2 打开HP ChemStations,进入Instrument 1 online 状态，约30 秒钟后, 计算机进入工作站的操作页面。

该页面主要由以下几部分组成：最上方为命令栏，依次为File,Run Con trol,I nstrume nt 等；命令栏下方为快捷操作图标，由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等；左边为样品信息栏；中部为工作站各部件的工作流程示意图，依次为进样器—输液泵—柱温箱—检测器—数据处理—报告；中下部为动态监测信号；右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。

2.色谱条件的设定（色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现）2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。

将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击“ 0K，即完成。

2.2调用已设置好的文件在命令栏“ Method下，选择“ Load Method ”，或直接单击快捷键操作的“ Load Method'图标，选定文件名，单击“0K，此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。

如欲进行修改，贝何同2.1项下，在色谱工作参数中作修改；亦可在命令栏“Method'下，选择“ Edit Entire Method,在每个页面中键入设定值，单击“ 0K。

Agilent1100高效液相色谱仪操作规程1.仪器组成及开机1.1仪器组成：Agilent1100高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。

1.2开机：1.2.1接通电源，打开计算机及工作站其它各部件开关，约30秒钟后，各部件进入待机状态，指示灯为黄色或无色。

1.2.2打开HP ChemStations,进入Instrument 1 online状态，约30秒钟后，计算机进入工作站的操作页面。

该页面主要由以下几部分组成：最上方为命令栏，依次为File,Run Control,Instrument等；命令栏下方为快捷操作图标，由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等；左边为样品信息栏；中部为工作站各部件的工作流程示意图，依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告；中下部为动态监测信号；右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。

2.色谱条件的设定(色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。

将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击“OK”，即完成。

2.2 调用已设置好的文件在命令栏“Method”下，选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标，选定文件名，单击“OK”，此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。

如欲进行修改，则可同2.1项下，在色谱工作参数中作修改；亦可在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页面中键入设定值，单击“OK”。

即完成。

2.3 编辑新文件先在命令栏“Method”下，选择“New Method”, 之后再在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页面中键入设定值，完成后，Save Method”, 先在命令栏“Method”下选择“Save Method”，给新文件命名，单击“OK”。

安捷伦1100高效液相色谱仪操作规程1、操作前的准备流动相的配制，流动相应用0.22μm或0.45μm的滤膜过滤，超声。

2、仪器的操作2.1接通电源，打开电脑，双击桌面上的“仪器1联机”，进入工作站；单击菜单栏中的“运行控制”选择“样品信息”输入“操作者姓名”或者单击菜单栏中的“序列”选择“序列参数”中输入“操作者姓名”；将A、B、C、D四个通道的溶剂量设置好。

2.2排气逆时针旋松排空阀，将流速设为5ml/min，四个通道逐个进行排液，排液至整个管路没有气泡为止。

2.3首选项的设置单击菜单栏中的“视图”选择“全部菜单”，再单击菜单栏中的“视图”选择“首选项”，在“路径”选项卡中分别设定“序列路径”、“数据路径”、“方法路径”，（具体操作时只要单击“添加”后选择相应的路径即可）单击“确定”。

2.4编辑仪器方法2.4.1单击“方法”选择“编辑完整方法”，根据需要钩选项目，“方法信息”，“仪器/采集”，“数据分析”，“运行时选项表”，单击“确定”。

2.4.2 出现“方法信息”窗口，如有需要输入方法信息（方法用途等），单击“确定”。

2.4.3出现“设置泵”窗口，根据方法需要设置“流速”、“停止时间”、“流动相比例”，将压力上限设为400bar，单击“确定”。

2.4.4出现“设置进样器”窗口，根据需要选择进样方法“标准进样”、“洗针进样”、“使用进样程序进样”（一般选择“标准进样”），输入相应的“进样量”，单击“确定”。

2.4.5出现“柱温箱温控方法”，输入“柱温”或“不控制”，单击“确定”。

2.4.6出现“VWD信号”窗口，输入所要的检测波长，单击“确定”。

2.4.7出现“信号细节”窗口，单击“确定”。

2.4.8出现“编辑积分事件”窗口，单击“确定”。

2.4.9出现“报告设定”窗口，选择所需的“报告格式”，“信号选项”中设定好图谱的量程，单击“确定”。

2.4.10出现“仪器曲线”窗口，单击“确定”。

2.4.11出现“运行时选项表”，根据需要设定相关的参数，一般在设定方法时，只要单击“确定”即可。