柴胡皂苷合成途径中三个关键酶基因片段的克隆与序列分析

皂苷是一类具有广泛生物活性的天然化合物，它们在植物界中分布广泛，尤其在许多中草药和食用植物中含量丰富。

至今，科学家们已经从各种植物中分离出了30多种皂苷成分，这些成分因其独特的结构和生物活性而备受关注。

以下将对这些皂苷成分进行详细的介绍和探讨。

一、皂苷的概述皂苷是一类具有表面活性的化合物，其分子结构中含有糖基和苷元两部分。

糖基部分通常是由葡萄糖、半乳糖等单糖组成的多糖链，而苷元部分则是由甾体、三萜等化合物构成的。

这种特殊的结构使得皂苷具有降低水溶液表面张力的能力，从而产生泡沫，因此皂苷也被称为皂素。

二、皂苷的种类与功能1. 人参皂苷：人参皂苷是从人参中提取的一类重要活性成分，具有多种药理作用。

如人参皂苷Rg1、Rb1等能够增强免疫力、改善心血管功能、抗衰老等。

此外，人参皂苷还具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化等作用，对于多种疾病的治疗和预防具有积极意义。

2. 薯蓣皂苷：薯蓣皂苷是从薯蓣科植物中提取的一类皂苷成分，具有显著的降血脂、抗动脉粥样硬化等作用。

薯蓣皂苷能够降低血液中的胆固醇和甘油三酯水平，减少脂质在血管壁的沉积，从而预防心血管疾病的发生。

3. 柴胡皂苷：柴胡皂苷是从柴胡中提取的一类活性成分，具有抗炎、抗病毒、抗肿瘤等作用。

柴胡皂苷能够调节免疫系统功能，增强机体对病原体的抵抗能力，对于感冒、肝炎等疾病的治疗具有显著效果。

4. 七叶皂苷：七叶皂苷是从七叶树中提取的一类皂苷成分，具有抗炎、抗渗出、消肿胀等作用。

七叶皂苷能够促进血液循环，改善微循环障碍，对于静脉曲张、痔疮等疾病的治疗具有积极意义。

除了上述几种皂苷外，还有许多其他类型的皂苷成分，如甘草皂苷、知母皂苷、远志皂苷等。

这些皂苷成分在植物中的含量和种类因植物种类和生长环境的不同而有所差异。

三、皂苷的生物合成与提取方法皂苷的生物合成是一个复杂的过程，涉及多个酶促反应和基因调控。

在植物体内，皂苷的合成主要发生在细胞质和质体中，通过一系列的酶促反应将前体物质转化为皂苷成分。

实验五、柴胡中皂苷类成分的提取、分离和鉴定一、实验目的1.掌握柴胡中总皂苷的提取分离方法及操作2.熟悉三萜皂苷类化合物的检识及鉴定方法二、实验原理柴胡是伞形科柴胡属植物柴胡干燥的根，是我国传统中药中重要和常用的药材。

我国药典规定北柴胡(Bupleurum chinenseDC．)和狭叶柴胡(Bupleurumscorzonerifolium Willd．)为正品供药用。

我国柴胡资源极其丰富，主要分布于我国的陕西、内蒙古、甘肃、青海、宁夏、河北等地。

柴胡是柴胡滴丸，小柴胡汤等中药产品的主要成分。

研究发现柴胡皂苷具有解表和里疏肝解郁、升举阳气之功效。

一、柴胡化学成分柴胡的化学成分比较复杂，除含皂苷、挥发油，尚含有黄酮、多元醇、植物甾醇、香豆素、脂肪酸成分1等有效成分，尤其以柴胡皂苷为主。

迄今为止，从柴胡根、种子的不同部位中已分离到50多种单体皂苷成分。

这些皂苷成分有a、c、d、b1、b2、b3、b4等，其中以皂苷a、d的生物活性最为显著。

（柴胡中主要含有柴胡皂苷a、c、d）1.皂苷a（C42H68O13）物理性质：本品为结晶粉末，易溶于水，稀醇，特别是热水和热醇，在丁醇和戊醇中溶解性大，难溶或不溶于苯，乙醚，氯仿等溶剂。

化学反应：Molish 反应阳性，Lieberman-Burchard 反应产生紫色。

2.皂苷c（C48H78O17 ）物理性质：易溶于水，稀醇，特别是热水和热醇，在丁醇和戊醇中溶解性大，难溶或不溶于苯，乙醚，氯仿等溶剂。

化学性质：Molish 反应阳性，Lieberman-Burchard 反应产生紫色。

3.皂苷d（C42H68O13 ）物理性质：白色粉末，易溶于热水、稀醇、热甲醇和热乙醇。

化学性质：Molish 反应阳性，Lieberman-Burchard 反应产生紫色三萜皂苷类，由于糖分子的引入，使极性增大，可溶于水，易溶于热水、稀醇、热甲醇和热乙醇中，几乎不溶于或难溶于丙酮、乙醚以及石油醚等极性小的有机溶剂。

柴胡皂苷吸收、聚集特性及隐性柴胡皂苷的研究柴胡皂苷吸收、聚集特性及隐性柴胡皂苷的研究柴胡皂苷是一类重要的有效成分，广泛存在于柴胡植物中，并具有多种药理活性。

对柴胡皂苷的吸收、聚集特性以及隐性柴胡皂苷的研究已成为近年来药学和生物医学领域的热点研究内容。

首先，我们来探讨柴胡皂苷的吸收特性。

研究表明，柴胡皂苷可以通过口服、注射、皮肤渗透等途径被人体吸收。

口服是最常见的给药途径，柴胡皂苷在胃肠道中可以进行被动扩散、主动转运等吸收方式，其中活性转运是一种重要的途径。

柴胡皂苷在胃肠道中吸收不完全，主要原因是其分子结构复杂、极性较大，导致其在胃肠道腔内和黏膜下层聚集，形成粘附。

此外，肝脏对柴胡皂苷的吸收也有一定的影响，肝细胞具有较强的吸收和代谢能力，柴胡皂苷在通过肝脏时可能发生代谢转化。

其次，让我们了解柴胡皂苷的聚集特性。

柴胡皂苷具有亲油性和亲水性的双重亲性特点，这是由其分子结构中两个部分组成的。

柴胡皂苷中的脂溶性醇基团能与疏水性官能团结合，使其具有较好的亲油性；而醛缩基团则使其具有较好的亲水性。

这种亲油性和亲水性的双重特性使得柴胡皂苷在生物体内具有一定的聚集能力。

研究发现，柴胡皂苷在水溶液中可以形成各种聚集态，如胶束、尸体、微粒等，这些聚集态对其在体内的吸收、分布、代谢和药效均具有重要影响。

最后，我们来讨论隐性柴胡皂苷的研究。

隐性柴胡皂苷是指体内代谢后形成的柴胡皂苷代谢物。

研究发现，柴胡皂苷经过代谢转化后，可以形成多种隐性柴胡皂苷，其中以柴胡皂苷的醛缩基团与多种代谢酶反应而生成的醛缩衍生物最为常见。

隐性柴胡皂苷在体内具有较好的稳定性，对柴胡皂苷的药效、毒性和代谢途径研究具有重要意义。

此外，隐性柴胡皂苷可能对柴胡皂苷的疗效产生影响，因此对隐性柴胡皂苷进行深入研究有助于揭示柴胡皂苷的作用机制和药效评价。

综上所述，柴胡皂苷的吸收、聚集特性以及隐性柴胡皂苷的研究是目前药学和生物医学领域的热点研究内容。

深入探究柴胡皂苷的吸收、聚集机制以及隐性柴胡皂苷的代谢途径对于揭示柴胡皂苷的作用机制和药效评价具有重要意义，有助于进一步开发和利用柴胡皂苷的药理活性综上所述，柴胡皂苷具有较好的亲油性和亲水性，使其在生物体内具有聚集能力。

柴胡中皂苷类成分的提取、分离和鉴定一、实验目的1.掌握柴胡中总皂苷的提取分离方法及操作2.熟悉三萜皂苷类化合物的检识及鉴定方法二、实验原理柴胡是伞形科柴胡属植物柴胡干燥的根，是我国传统中药中重要和常用的药材。

我国药典规定北柴胡(Bupleurum chinenseDC．)和狭叶柴胡(Bupleurumscorzonerifolium Willd．)为正品供药用。

我国柴胡资源极其丰富，主要分布于我国的陕西、内蒙古、甘肃、青海、宁夏、河北等地。

柴胡是柴胡滴丸，小柴胡汤等中药产品的主要成分。

研究发现柴胡皂苷具有解表和里疏肝解郁、升举阳气之功效。

一、柴胡化学成分柴胡的化学成分比较复杂，除含皂苷、挥发油，尚含有黄酮、多元醇、植物甾醇、香豆素、脂肪酸成分1等有效成分，尤其以柴胡皂苷为主。

迄今为止，从柴胡根、种子的不同部位中已分离到50多种单体皂苷成分。

这些皂苷成分有a、c、d、b1、b2、b3、b4等，其中以皂苷a、d的生物活性最为显著。

（柴胡中主要含有柴胡皂苷a、c、d）1.皂苷a（C42H68O13）物理性质：本品为结晶粉末，易溶于水，稀醇，特别是热水和热醇，在丁醇和戊醇中溶解性大，难溶或不溶于苯，乙醚，氯仿等溶剂。

化学反应：Molish 反应阳性，Lieberman-Burchard 反应产生紫色。

2.皂苷c（C48H78O17 ）物理性质：易溶于水，稀醇，特别是热水和热醇，在丁醇和戊醇中溶解性大，难溶或不溶于苯，乙醚，氯仿等溶剂。

化学性质：Molish 反应阳性，Lieberman-Burchard 反应产生紫色。

3.皂苷d（C42H68O13 ）物理性质：白色粉末，易溶于热水、稀醇、热甲醇和热乙醇。

化学性质：Molish 反应阳性，Lieberman-Burchard 反应产生紫色三萜皂苷类，由于糖分子的引入，使极性增大，可溶于水，易溶于热水、稀醇、热甲醇和热乙醇中，几乎不溶于或难溶于丙酮、乙醚以及石油醚等极性小的有机溶剂。

天然药物化学课程实验柴胡皂苷的提取及结构鉴定XXXXXXXXXXXX柴胡皂苷⏹【产品名称】柴胡提取物⏹【英文名称】Radix Stellaviae⏹【拉丁名称】Radix Bupleuri⏹【来源】本品为伞形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或狭叶柴胡Bupleurum scorzoner-ifolium Willd.的干燥根。

按性状不同，分别习称“北柴胡”及“南柴胡”。

春、秋二季采挖，除去茎叶及泥沙，干燥。

⏹【功能主治】和解表里，疏肝，升阳。

用于感冒发热，寒热往来，胸胁胀痛，月经不调，子官脱垂，脱肛。

柴胡皂苷理化性质⏹ 1.物理性质三萜皂苷分子大，不易结晶，大多数为白色或乳白色无定形粉末，仅少数为结晶体，皂苷元大多有完好的结晶。

皂苷多数为具有苦味和辛辣味，且多具有吸湿性。

三萜皂苷有降低水溶液表面张力的作用，其水溶液经常强烈振摇能产生持久性泡沫，不因加热而消失。

三萜皂苷的熔点都很高，常在熔融前分解，分解点多在200℃-300℃之间。

⏹ 2.溶解度三萜皂苷一般可溶于水，易溶于热水、含水稀醇、热甲醇和热乙醇中，几乎不溶或难溶于丙酮、乙醚、苯等有机溶剂。

皂苷在正丁醇或戊醇提取皂苷，可使之与亲水性杂质分离。

三萜皂苷元能溶于石油醚、苯、乙醚、三氯甲烷等有机溶剂，而不溶于水。

⏹3.金属盐类反应三萜皂苷的水溶液可与一些金属盐类，如铅盐、钡盐、铜盐等产生沉淀。

酸性皂苷水溶液，加入中性盐类即生成沉淀；中性皂苷水溶液则需加入碱式醋酸铅或氢氧化钡等碱性盐类才能产生沉淀。

⏹4.显色反应三萜皂苷在无水条件下，与强酸（硫酸、磷酸、高氯酸）、中强酸（三氯乙酸）或Lewis酸（氯化锌、三氯化锑）作用，会出现一系列显色变化或荧光。

⏹5.光谱特征除少数化合物如甘草酸、远志皂苷等外，大多数三萜化合物无明显的紫外吸收或仅在200 nm附近有末端吸收柴胡皂苷的现代药理综述⏹1对中枢神经系统作用1．1抗惊厥作用1 . 2抗癫痫作用⏹2抗肿瘤作用⏹3护肝作用⏹4抗炎、免疫抑制作用⏹5促胰腺腺泡酶分泌作用柴胡皂苷的提取⏹取一定量的北柴胡根部干粉，加入70％乙醇浸泡3 d，纱布滤纸过滤后收集滤液，滤渣继续重复上述操作2次，最后合并3次所得的滤液。

D01：10. 13193/j.issn. 1673-7717.2021.04.007柴胡皂苷a药理学研究进展程玉鹏，姜丽丽，王语哲，仁朋英，高宁，王博(黑龙江中医药大学药学院，黑龙江哈尔滨150040)摘要：柴胡是我国传统中药，其正品为伞形科植物柴胡或狭叶柴胡的干燥根。

由于柴胡广泛的药理活性及临床应用范围，使得关于柴胡及其有效成分的研究受到广泛重视。

柴胡皂苷a是从柴胡中分离得到的具有多种药理活性的天然化合物，在抗肿瘤、抗炎、抗癫痫、保肝护肝等方面均展现出良好的应用前景。

基于C N K I与ISI W e b of K n o w l e d g e数据库查找及追溯了近年来关于柴胡皂苷a的最新研究文献报道，归纳总结了其药理学研究进展，以期为相关研究人员提供参 考。

关键词：柴胡；天然产物；抗肿瘤；抗炎；抗癫痫中图分类号：R285 文献标志码:A文章编号：1673-7717(2021 )04-0024>04Research Progress on Pharmacology of Saikosaponin aC H E N G Y u p e n g,J I A N G Lili,W A N G Y u z h e,R E N Pengying,G A O N i n g,W A N G B o(Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine,Harbin 150040 ,Heilongjiang, China)Abstract ：C h a i h u(Bupleuri R a dix),a traditional Chinese herb,i s the dried root of Chaihu(Bupleurum chinense D C.or Bup-leurum scorzonerifolium Willd. ).T h e research on C h aihu(Bupleuri Radix)and i t s bioactive c o m p o u n d s have been receiving gar­nered plenty of attention,for a wide range of pharmacological and clinical applications.Saikosaponin a,isolated from Chaihu (Bupleuri R a dix),is a kind of natural c o m p o u n d s with m a n y pharmacological activities.There were reports of saikosaponin a a-bout anti- t u mor,anti- inflammatory,anti- epilepsy,liver protection and so o n.Based on C N K I and ISI W e b of knowledge da­tabase,this paper searched and traced the latest literature on pharmacology of saikosaponin a and m a d e a s u m m a r y,in order to provide reference for researchers.Keywords：C h a i h u( Bupleuri R a dix)；natural product；anti- tumor；anti- inflammatory；anti- epilepsy柴胡阜苷a(saikosaponin a,S S a)是中药柴胡的主要有效成分之一，其结构为五环三萜类齐墩果烷型衍生物，分子式为C42 H6s〇13,分子量781 g/m o l，其与柴胡皂苷d互为异构体,区别在 于柴胡皂苷a的16位羟基是p构型，柴胡皂苷d在相应位点 为a构型（图I ),《中华人民共和国药典》m将柴胡皂苷SSa 的含量作为柴胡质量标准的重要指标，对于S S a的药效作用研 究也受到广泛关注。

实验五柴胡中皂苷类成分的提取分离和鉴定引言：柴胡是一种传统中药，在中医学中广泛应用。

柴胡中的皂苷类成分具有广泛的药理活性，对于抗炎、镇痛、抗肿瘤等具有显著的疗效。

本实验旨在提取、分离和鉴定柴胡中的皂苷类成分。

材料与方法：材料：柴胡片、乙醇、正己烷、二甲基亚砜、石油醚、甲醇、氯仿、醋酸乙酯、硅胶、碘化钾、浓盐酸等。

方法：Step 1: 提取柴胡中的皂苷类成分1.将柴胡片研磨成粉末状；2.取适量的柴胡片粉末，用乙醇进行粉碎提取，反复浸提2次；3.将乙醇提取液浓缩至干燥，得到柴胡粗提物。

Step 2: 分离皂苷类成分1.将柴胡粗提物溶解在正己烷中，得到类皂苷的正己烷溶液；2.将正己烷溶液与等量的二甲基亚砜混合，振荡均匀；3.分液，得到上层的正己烷相和下层的二甲基亚砜相；4.重复步骤2和步骤3，直到得到等体积的正己烷相。

Step 3: 鉴定皂苷类成分1.取等体积的正己烷相，用石油醚进行溶解；2.取少量石油醚溶液，加入甲醇和硅胶，搅拌均匀，制备薄层色谱板；3.将制备好的薄层色谱板置于色谱槽中，加入溶剂系统（如正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水），进行上样和上色；4.开始显色后，取出色谱板，用碘化钾溶液进行喷雾显色；5.观察色谱板上形成的斑点，用紫外光进行观察；6.依据斑点的颜色、相对迁移率等特征，进行鉴定。

结果与讨论：通过上述方法，我们成功地提取、分离和鉴定了柴胡中的皂苷类成分。

在薄层色谱鉴定中，观察到柴胡中皂苷类成分的斑点呈现为紫色。

根据斑点的相对迁移率，可以初步判断柴胡中所含的皂苷类成分种类。

结论：本实验成功提取、分离和鉴定了柴胡中的皂苷类成分。

通过本实验的结果，我们可以进一步研究柴胡的药理活性以及其作用机制，为柴胡的临床应用提供科学依据。

#综述#柴胡皂苷类化学成分及药理作用研究进展谢东浩1,2*,蔡宝昌1,安益强3,李霞3,贾晓斌3(1南京中医药大学药学院,江苏南京 210046;2江苏大学附属医院,江苏镇江 212001;3江苏省中医药研究院,江苏南京 210028)摘要:对柴胡皂苷近年来的化学成分及药理作用研究进展进行综述。

关键词:柴胡;柴胡皂苷;化学成分;药理作用;综述中图号:R282.71 文献标识码:A 文章编号:1000-5005(2007)01-0063-03柴胡原名茈胡,2000版5中国药典6收载为伞形科植物柴胡Bu pleu rum chinens e D C.习称/北柴胡0或狭叶柴胡Bu 2pleurum sco rzonerifolium Willd.习称/南柴胡0的干燥根。

江苏地区习用柴胡为狭叶柴胡春季采收的带根全草,又称/春柴胡0、/芽胡0。

柴胡始载于5神农本草经6,列为上品,5伤寒论6、5千金翼方6、5经史证类备急本草6、5和剂局方6、5本草求真6等历代医家名著中均有详细记载[1]。

柴胡具有抗炎、保肝、解热、镇痛等功效,临床用于治少阳症,肝气郁结所致头痛,月经不调,痛经;气虚下陷证;感冒,胃及十二指肠溃疡,胆结石,痢疾,胆汁返流性胃炎[2]。

柴胡根中主要成分为柴胡皂苷,其次含有植物甾醇、侧金盏花醇,以及少量挥发油、多糖;地上部分主要含黄酮类、少量皂苷类、木脂素类、香豆素类成分。

研究发现柴胡皂苷具有抗炎、抗病毒、抗肿瘤、调节内分泌及免疫系统等作用。

本文对柴胡皂苷近年来的化学成分及药理作用研究进展作一综述。

1 柴胡皂苷类化学成分研究柴胡皂苷结构均为五环三萜类齐墩果烷型衍生物,其苷元分为7种不同类型:环氧醚(Ñ),异环双烯(Ò),12-烯(Ó),同环双烯(Ô),12烯-28-羧酸(Õ),异环双烯-30-羧酸(Ö),18-烯型(×)。

柴胡皂苷中一般只含葡萄糖、呋糖、鼠李糖和木糖,此外,除以上各种糖外还有戊糖醇(pentitol)。