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第十五章弧菌科及检验本章内容一、弧菌属（一）霍乱弧菌（二） O139 型霍乱弧菌（三）副溶血性弧菌（四）其他弧菌二、气单胞菌属与邻单胞菌属（一）气单胞菌属（二）邻单胞茵属革兰阴性直杆菌或弧菌有极端鞭毛氧化酶阳性动力阳性发酵葡萄糖弧菌属——分类根据细菌的抗原性、生化特性、DNA同源性、致病性和耐盐性等将弧菌分为四类：① O1群霍乱弧菌；②不典型O1群霍乱弧菌 : 能被 O1群血清凝集但不产生致病毒素；③非 O1 群霍乱弧菌；④其他弧菌：包括副溶血性弧菌、溶藻弧菌、河弧菌、创伤弧菌、麦氏弧菌和拟态弧菌。
大多数为非病原菌，对人类致病的主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌，分别引起霍乱和食物中毒。
霍乱弧菌——生物学特性形态与结构形态：弧形或逗点状，“鱼群状”。
人工培养后呈杆状。
染色： G-。
特殊结构：有菌毛，无芽胞，部分有荚膜。
一端有一根粗而长的鞭毛，悬滴观察可见穿梭样或流星状运动。
·培养特性营养要求：不高，可无盐生长。
气体环境：兼性厌氧。
菌落特征：耐碱不耐酸。
pH8.5 的碱性蛋白胨水：培养6～ 9h，增菌形成菌膜。
碱性琼脂平板：较大圆形扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。
硫代硫酸盐 - 柠檬酸盐 - 胆盐 - 蔗糖琼脂平板（ TCBS）：较大黄色菌落。
亚碲酸钾琼脂平板：还原亚碲酸钾成金属碲，使菌落中心呈灰褐色。
庆大霉素琼脂：形成的菌落中心呈灰褐色。
·抗原·变异性：有形态变异、菌落变异、溶血性变异和毒力变异。
霍乱弧菌——微生物检验及鉴定·标本采集：以粪便（米泔水样便）为主，尽可能在用药之前采取。
及时接种适宜培养基。
常用的保存或运送培养基有碱性蛋白胨水、文- 腊二氏保存液和卡 - 布运送培养基等。
·形态学检查：①动力观察：米泔水样粪便悬滴观察可见流星或穿梭状运动的细菌。
②制动试验：加霍乱多价诊断血清后弧菌凝集，运动停止。
③涂片染色：革兰染色，观察革兰染色阴性呈鱼群状排列的弧菌。
厌氧性细菌及检验● 考点概念及分类分布与临床意义厌氧菌标本的采集与送检分离与鉴定常见厌氧性细菌【内容讲解】一、厌氧菌概述概念：一大群专性厌氧，必须在无氧环境中才能生长的细菌。
分类：二、厌氧菌感染（一）厌氧菌在正常人体的分布及感染类型1.厌氧菌在正常人体的分布正常人的肠道、口腔、阴道等处均有大量的厌氧菌寄居。
厌氧菌与需氧菌和兼性厌氧菌共同组成人体的正常菌群，其中绝大多数为无芽胞厌氧菌。
其中肠道中的厌氧菌数量是大肠埃希菌的1000～10000倍。
表5-22-2 重要的厌氧菌种类及其在正常人体内的分布--------------------------------------------------------------------------厌氧菌皮肤上呼吸道口腔肠道尿道阴道--------------------------------------------------------------------------一、芽胞菌革兰阳性杆菌梭状芽胞杆菌属0 0 ±＋＋±±二、无芽胞菌（一）革兰阳性杆菌乳杆菌属0 0 ＋＋＋±＋＋双歧杆菌属0 0 ＋＋＋0 ±优杆菌属±±＋＋＋0 ±丙酸杆菌属＋＋＋＋＋＋？±放线菌属0 ±＋＋＋ 0 0（二）革兰阴性杆菌类杆菌属0 ＋＋＋＋＋梭杆菌属0 ＋＋＋＋＋±普雷沃菌属0 ＋＋＋＋＋＋＋紫单胞菌属0 ＋＋＋＋＋＋＋（三）革兰阳性球菌消化球菌属＋＋＋＋＋＋±＋＋消化链球菌属＋＋＋＋＋＋±＋＋（四）革兰阴性球菌韦荣菌属 0 ＋＋＋±＋--------------------------------------------------------------------------2.外源性感染梭状芽胞杆菌属引起的感染，其细菌及芽胞来源于土壤、粪便和其他外界环境。
实验六、厌氧菌检验一、厌氧培养1、刨肉基法方法：将破伤风梭菌、产气荚膜梭菌分别接种在庖肉培养基中，35℃48h，观察结果。
2、厌氧罐法方法：将破伤风梭菌接种在高渗芽孢培养基中并放置于厌氧罐中；将破伤风梭菌、产气荚膜梭菌分别接种在血平板中并置于厌氧罐中，放厌氧袋，密闭，置35℃48h观察结果。
二、观察厌氧菌培养结果：1、庖肉基1）破伤风梭菌：肉汤混浊，部分消化，微变黑，有少量气体，有腐败性恶臭味。
2）产气荚膜梭菌：产生气体，肉渣呈粉红色，不被消化。
2、血平板1）破伤风梭菌：呈薄膜状生长，菌落半透明、灰白色、边缘疏松呈羽毛状，伴β溶血。
2）产气荚膜梭菌：多数菌株有双层溶血环，内环完全溶血，外环不完全溶血。
3、梭菌平板破伤风梭菌：形成直径1mm 以上不规则的菌落，中心紧密，周边疏松，似羽毛状。
三、涂片、革兰染色镜检：破伤风梭菌产气荚膜梭菌G-，细长，芽胞圆形，比菌体大，G+，粗短大杆菌，两端钝圆，单个或成双排列。
位于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状芽胞椭圆形，位于菌体中央或次极端，芽胞直径不大于菌体四、芽孢染色：制片①5%孔雀绿加热3~5min，水洗甩干；②0.5%沙黄水溶液染色0.5~1.0min，水洗甩干干后镜检，如图所示：菌体呈红色，芽孢呈淡绿色。
破伤风梭菌产气荚膜梭菌五、汹涌发酵试验（试教）产气荚膜梭菌：分解乳糖产酸，使酪蛋白变性，同时产生大量气体，将凝固的酪蛋白冲成蜂窝状，并将液面上的凡土林层向上推挤，甚至冲开管口棉塞，气势凶猛，为“汹涌发酵”。
六、讨论：1、做生化试验时，有些细菌为致病菌，故实验时要保护好自己，且实验废弃物要妥善处理，以免发生有害菌的感染。
2、所有接种的菌株暴露于有氧环境中不得超过20min3、厌氧菌检验：可据厌氧菌的菌体形态、染色反应、菌落性状以及对某些抗生素的敏感性等作出初步鉴定。
最后鉴定则要进行生化反应及终末代谢产物等项检查。
4、破伤风梭菌微生物检验：根据破伤风的典型临床表现即可作出诊断，故一般不作细菌学检查。
绪论单元测试1.原核细胞型微生物仅有原始的核质,没有核膜和核仁,无完整细胞器A:对B:错答案:A2.真核细胞型微生物的细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体，但胞浆内无完整的细胞器A:错B:对答案:A3.医学微生物学是研究与医学和疾病有关的病原微生物的生物学特性、致病性、免疫性，以及特异性诊断和防治措施的学科。
A:错B:对答案:B4.条件致病菌是指由于机体抵抗力下降，寄居部位改变或寄居菌群平衡失调，能引起外源性感染。
A:对B:错答案:B5.病原微生物是指少数引起疾病的微生物。
如：霍乱弧菌、鼠疫耶尔森菌等。
A:对B:错答案:A6.临床微生物学检验技术侧重于感染性疾病的病原体特征、感染性疾病快速、准确的病原学诊断的策略与方法的研究，为临床诊断、治疗和预防提供依据，又称诊断微生物学。
A:对B:错答案:A7.按照大小、结构、组成可将微生物分成几大类A:4B:2C:3D:5答案:C8.下列属于原核细胞型微生物的是A:细菌B:真菌C:立克次体D:支原体答案:ACD9.下列关于微生物的描述哪一项不正确A:结构简单B:肉眼也能直接看见的微小生物C:形体微小D:存在于自然界中答案:B10.非细胞型微生物有A:支原体B:真菌C:立克次体D:病毒答案:D第一章测试1.细菌检验是利用细菌学基本知识和技术，结合临床实际，对患者标本进行检验。
A:错B:对答案:B2.细菌经染色后镜检，主要用于检查生活状态下细菌的动力及运动状况。
A:错B:对答案:A3.麦康凯，伊红美蓝及SS培养中的鉴别用糖为A:麦芽糖B:葡萄糖C:蔗糖D:乳糖答案:D4.细菌的革兰染色性不同主要是因为A:细菌细胞壁结构不同B:营养需要不同C:形态不同D:生理功能不同答案:A5.苯丙氨酸脱氨酶试验的应用说法错误的是A:摩根菌属为阳性B:多用于肠杆菌科细菌的鉴定C:变形杆菌属为阳性D:沙门菌属为阳性答案:D6.有关硫化氢试验说法正确的有A:培养基变绿为阳性B:沙门菌属为阳性C:大肠埃希菌为阳性D:培养基变黑为阳性答案:BD7.用于兼性厌氧菌或厌氧菌活菌计数的方法是A:穿刺接种法B:斜面接种法C:倾注平板法D:平板划线法答案:C8.金黄色葡萄球菌、沙雷菌和变形杆菌三者DNA酶试验为阳性。
临床微生物学检验题库与参考答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1.深部感染的分泌物有很强的恶臭,应首先考虑引起感染的病原体是(2014/2016 年初级士)A、真菌B、支原体C、病毒D、厌氧菌E、需氧菌正确答案：B2.患者女，36 岁。
术后感染，取感染部位渗出液做细菌培养，培养示：血平板菌落小、不溶血、有黄色素，革兰阴性细杆菌，有动力，无芽孢、无荚膜，氧化酶阴性，葡萄糖氧化，可水解七叶苷，液化明胶，DNA 酶阳性。
该患者感染的病原菌是（2016 年初级师）A、铜绿假单胞菌B、嗜麦芽窄食单胞菌C、大肠埃希菌D、芳香黄杆菌E、产碱假单胞菌正确答案：B3.革兰染色所用染料顺序是(2017/2020 年初级士)A、结晶紫-乙醇-碘液-稀释复红B、稀释复红-乙醇-结晶紫-碘液C、结晶紫-碘液-乙醇-稀释复红D、稀释复红-结晶紫-碘液-乙醇E、稀释复红-碘液-乙醇-结晶紫正确答案：C4.患者男,37 岁。
下呼吸道标本做细菌培养,在普通培养基及血平板上3℃培养24 小时,生长出光滑、不透明、灰白色、易从培养基上推动的菌落。
该菌为革兰阴性双球菌,无芽孢、无鞭毛,氧化酶阳性,触酶阳性,产 DNA 酶,还原硝酸盐和亚硝盐酸该菌为(2013 年初级师)A、脑膜炎奈瑟菌B、卡他布兰汉菌C、淋病奈瑟菌D、肺炎链球菌E、葡萄球菌正确答案：B5.下列细菌中硫化氢阳性的一组为(2015 年中级师)A、黏质沙雷菌、奇异变形杆菌、肺炎克雷伯菌B、弗劳地枸橼酸菌、肺炎克雷伯菌、痢疾志贺菌C、伤寒沙门菌、大肠埃希菌、阴沟肠杆菌D、奇异变形杆菌、伤寒沙门菌、痢疾志贺菌E、弗劳地枸橼酸菌、奇异变形杆菌、伤寒沙门菌正确答案：E6.关于性菌毛的特点,下列叙述错误的是(2014 年初级师)(2014 年中级师)A、数量少 0~4 根B、比普通菌毛长C、仅见于少量阳性菌D、带有性菌毛的细菌称为雄性菌E、具有致育性正确答案：C7.下列细菌中属条件致病菌的是(2014/2018 年中级师)A、结核分枝杆菌B、铜绿假单胞菌C、霍乱弧菌D、金黄色葡萄球菌E、伤寒沙门菌正确答案：B8.不属于志贺菌血清群的是(2013 年初级士)A、宋内B、福氏C、鲍氏D、彦岛E、痢疾正确答案：D9.细菌的 ONPG 试验阳性呈现的颜色是(2015 年初级师)A、红色B、蓝色C、黄色D、紫色E、绿色正确答案：C10.白喉棒状杆菌致病主要靠(2019 年中级师)A、黏附素B、内毒素C、侵袭性物质D、外毒素E、英膜正确答案：D11.在半固体培养基中,沿接种线生长,接种线清晰,培养基澄清的细菌是(2013年中级师)A、大肠埃希菌B、铜绿假单胞菌C、阴沟肠杆菌D、肺炎克雷伯菌E、伤寒沙门菌正确答案：D12.患者女,22 岁。
其他主治系列-临床医学检验【代码：352】-微生物学和微生物学检验（一）厌氧菌[单选题]1.无芽孢厌氧菌的特点是A.只能用抗酸染色B.形态特征有鉴别意义C.主要引（江南博哥）起外源性感染D.菌体内形成异染颗粒E.占临床检出厌氧菌的90%正确答案：E参考解析：研究发现无芽孢厌氧菌无论在种类和数量上均大大多于有芽孢厌氧菌，占临床检出厌氧菌的90%。
[单选题]2.血平板上能形成双溶血环的细菌是A.肉毒梭菌B.炭疽杆菌C.产气荚膜梭菌D.破伤风梭菌E.金黄色葡萄球菌正确答案：C参考解析：多数产气荚膜梭菌株在血平板上可产生双层溶血环，内环完全溶血是由于θ毒素的作用，外环不完全溶血是由于α毒素的作用。
[单选题]3.关于肉毒梭菌特点不正确的是A.肉毒毒素是毒性最强的细菌毒素B.肉毒毒素阻止胆碱能神经末梢释放乙酰胆碱，导致肌肉麻痹C.食入含肉毒毒素的食物引起中毒D.革兰染色阳性，形成芽孢，有荚膜E.肉毒中毒死亡率高正确答案：D参考解析：肉毒梭菌为革兰阳性粗短杆菌，有周身鞭毛，无荚膜，在20～25℃时形成椭圆形芽孢，呈网球拍状。
肉毒毒素是目前已知毒物中毒性最强者，其毒性比氰化钾强1万倍。
该毒素阻止胆碱能神经末梢释放乙酰胆碱，导致肌肉麻痹。
人食物毒素18～72小时后发病，表现为头晕头痛、复视、眼睑下垂、咽肌麻痹、吞咽困难，重者死于呼吸困难与心力衰竭。
[单选题]4.以下描述错误的是A.乳杆菌能使阴道呈酸性，抑制某些致病菌的生长，不导致人类疾病B.双歧杆菌在人体内起到调节和维持人体微生态平衡的作用C.优杆菌是口腔与肠道正常菌群，可引起心内膜炎D.坏死梭杆菌常分离自青年人扁桃体周围脓肿，为革兰阳性梭杆菌E.痤疮丙酸杆菌是皮肤上的优势菌群，是血培养常见污染菌正确答案：A参考解析：乳杆菌与龋齿的形成有密切关系。
[单选题]5.下列描述哪项是错误的()A.病原菌致病力的强弱度称为毒力B.毒力主要由侵袭力和毒素所决定C.破伤风毒素属于内毒素D.侵袭力是指病原菌突破宿主机体的防御功能，并能在体内定居、繁殖和扩散的能力E.霍乱肠毒素属于外毒素正确答案：C参考解析：破伤风毒素属于外毒素。
