农药残留速测仪快速检测农药残留的应用研究课件
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农药残留的速测技PPT课件
• 三、结果计算 结果以酶被抑制的程度（抑制率）表
示。 抑制率（%）=[ （DA0-DAt）/ DA0]×100 1 当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50% 时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲 酸酯类农药存在，样品为阳性结果。阳性 结果的样品需要重复检验2次以上。 2 对阳性结果的样品，可用其它方法进 一步确定具体农药品种和含量。
土，剪成 1cm左右见方碎片，取 5g 放入 带盖瓶中，加入 10mL 纯净水，震摇 50 次，静置 2min 以上。 • 2.取一片农药残留检测卡，用白色药片沾 取提取液，放置 10min 以上进行预反应， 预反应后的药片表面必须保持湿润。 • 3.将农药残留检测卡对折，用手捏 3min， 使红色药片与白色药片叠合发生反应。 • 4.每批农药残留检测应设一个纯净水的空 白对照卡。
农药残留的速测技术
• 农药残留是指农药使用后残存于环境、生 物体和食品中的农药母体衍生物、代谢物、 降解物和杂质的总称。造成蔬菜农药残留 量超标的主要是一些国家禁止在蔬菜生产 中使用的有机磷农药和氨基甲酸酯类农药， 如甲胺磷、氧化乐果、甲拌磷、对硫磷、 甲基对硫磷等。食用含有大量高毒、剧毒 农药残留引起的食物会导致人、畜急性中 毒事故。长期食用农药残留超标的农副产 品，虽然不会导致急性中毒，但可能引起 人和动物的慢性中毒，导致疾病的发生， 诱发癌症，甚至影响到下一代。
• 农残检测必要性
• 随着农业产业化的发展，农产品的生产越 来越依赖于农药、抗生素和激素等外源物 质。我国农药在粮食、蔬菜、水果、茶叶 上的用量居高不下，而这些物质的不合理 使用必将导致农产品中的农药残留超标， 影响消费者食用安全，严重时会造成消费 者致病、发育不正常，甚至直接导致中毒 死亡。农药残留超标也会影响农产品的贸 易。
农残兽残快速检测PPT课件
5
（4）除草剂 是专门用来防除农田杂草的药剂，如除 草醚、杀草丹、氟乐灵、绿麦隆等农药。根据它们杀 草作用可分为触杀性除草剂和内吸性除草剂，前者只 能用于防治由种子发芽的一年生杂草，后者可以杀死 多年生杂草。有些除草剂在使用浓度过量时，草、苗 都能杀死或会对作物造成药害。
（5）植物生长调节剂 是专门用来调节植物生长、发 育的药剂，如赤霉素（九二Ο）、萘乙酸、矮壮素、 乙烯剂等农药。这类农药具有与植物激素相类似的效 应，可以促进或抑制植物的生长、发育，以满足生长 的需要。
7
我国目前较为突出农药残留问题 －－是蔬菜农残
－－有
机磷农药残留尤为突出。
控制农药残危害要进行有效地监督和管理，最 为有效的方法之一是加强对蔬菜中的农药残留检测的力 度。
传统的农药分析主要是气相或液相色谱等仪器 优点：敏感(10－l2～10－6 mol／ L) 、准确 缺点：操作复杂、费时及成本高。
11
2．化肥污染物
我国化肥的长期大量施用导致： 增产 食品污染 ：硝酸盐污染和重 金属污染 环境污染：污染土壤、水源等 硝酸盐污染：主要源自氮肥的大量使用和滥用 －－ 农产品特别是蔬菜硝酸盐的积累－－是人体硝酸盐的主要来源 （摄入的80％一90％）。我国蔬菜中硝酸盐污染严重超标。 硝酸盐直接毒害和慢性危害：硝酸盐经人口腔的还原菌 还原为亚硝酸盐－－使人诱导中毒缺氧，患正铁血红蛋白症 (主要饮水引起)、婴儿先天畸形、肠原性青紫病、致畸、致癌 (诱发胃癌、肠癌、膀胱癌等)以及甲状腺肿等。 据研究我国食管癌高发区林县，食管癌发病率与当 地饮食中硝酸盐和亚硝酸盐含量有密切关系。
(一)免疫分析技术 放射免疫分析(radioimmunoassay， RIA) 酶免疫分析(enzyme immunoassay，EIA)
（4）除草剂 是专门用来防除农田杂草的药剂，如除 草醚、杀草丹、氟乐灵、绿麦隆等农药。根据它们杀 草作用可分为触杀性除草剂和内吸性除草剂，前者只 能用于防治由种子发芽的一年生杂草，后者可以杀死 多年生杂草。有些除草剂在使用浓度过量时，草、苗 都能杀死或会对作物造成药害。
（5）植物生长调节剂 是专门用来调节植物生长、发 育的药剂，如赤霉素（九二Ο）、萘乙酸、矮壮素、 乙烯剂等农药。这类农药具有与植物激素相类似的效 应，可以促进或抑制植物的生长、发育，以满足生长 的需要。
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我国目前较为突出农药残留问题 －－是蔬菜农残
－－有
机磷农药残留尤为突出。
控制农药残危害要进行有效地监督和管理，最 为有效的方法之一是加强对蔬菜中的农药残留检测的力 度。
传统的农药分析主要是气相或液相色谱等仪器 优点：敏感(10－l2～10－6 mol／ L) 、准确 缺点：操作复杂、费时及成本高。
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2．化肥污染物
我国化肥的长期大量施用导致： 增产 食品污染 ：硝酸盐污染和重 金属污染 环境污染：污染土壤、水源等 硝酸盐污染：主要源自氮肥的大量使用和滥用 －－ 农产品特别是蔬菜硝酸盐的积累－－是人体硝酸盐的主要来源 （摄入的80％一90％）。我国蔬菜中硝酸盐污染严重超标。 硝酸盐直接毒害和慢性危害：硝酸盐经人口腔的还原菌 还原为亚硝酸盐－－使人诱导中毒缺氧，患正铁血红蛋白症 (主要饮水引起)、婴儿先天畸形、肠原性青紫病、致畸、致癌 (诱发胃癌、肠癌、膀胱癌等)以及甲状腺肿等。 据研究我国食管癌高发区林县，食管癌发病率与当 地饮食中硝酸盐和亚硝酸盐含量有密切关系。
(一)免疫分析技术 放射免疫分析(radioimmunoassay， RIA) 酶免疫分析(enzyme immunoassay，EIA)
第4章 食品中常见农药兽药残留的速测技术PPT优质课件
.
2、免疫分析技术
• 免疫分析技术是将免疫反应与现代测试手段相结合而建 立的超微量分析技术，是基于抗原抗体特异性结合和反 应为基础的分析方法。
• 目前应用于农残检测的是酶免疫分析(EIA)和放射性免 疫分析(RIA)。其中酶联免疫分析技术应用最为普遍。
.
（1）酶联免疫技术（ELISA）
目前应用最广泛的免疫分析方法之一， 它将酶标记在抗体或抗原分子上形成酶标抗 体或抗原，酶作用于能呈现出颜色的底物后 ，通过仪器或肉眼进行辨别。
缺点
能够对每 检验分析周长长
一种农药进 分析步检骤 验费用高 行1、准采集确样品的定
所需设备
性2、和称取定样品量
需要消耗大量的有机溶剂、分析容天平易造成环境污染
3、捣碎样品 4、样品的提取 5、样品的净化
需要使用GC、HPLC等高昂速贵组织的捣碎大机 型仪器设备
分液漏斗等
对检验分析人员的化学分SP析E、S水PME平等 有较高要求
影响人体内神经冲动的传递。另外，氨基甲酸酯类杀虫 剂进入人体内，在胃中酸性条件下可与食物中的亚硝酸 盐和硝酸盐反应生成亚硝基化合物，具有致癌性。
.
• 我国农药在农产品的用量居高不下
不合理使用
• 导致农产品中的农药残留超标 • 食品安全、影响消费者健康、影响农产品的贸易 • 加强农残检测
.
传统农残分析技术
.
（2）兽药残留
根据联合国粮农组织和世界卫生组织（FAO/WHO）食 品中兽药残留联合立法委员会的定义，兽药残留是指动 物性产品的任何可食部分含有兽药母体化合物或其代谢 物，以及与兽药有关的杂质的残留。
青岛市民吃西瓜中毒事件
.
• 2001年，杭州的空心菜有机磷中毒事件。 • 2003年，南京蔬菜有机磷残留导致中毒的事件。 • 2007年，福建大田发生有机磷污染水源导致中毒事件。 • 2008年1月，日本发生饺子中毒事件，该饺子被化验出含甲
2、免疫分析技术
• 免疫分析技术是将免疫反应与现代测试手段相结合而建 立的超微量分析技术，是基于抗原抗体特异性结合和反 应为基础的分析方法。
• 目前应用于农残检测的是酶免疫分析(EIA)和放射性免 疫分析(RIA)。其中酶联免疫分析技术应用最为普遍。
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（1）酶联免疫技术（ELISA）
目前应用最广泛的免疫分析方法之一， 它将酶标记在抗体或抗原分子上形成酶标抗 体或抗原，酶作用于能呈现出颜色的底物后 ，通过仪器或肉眼进行辨别。
缺点
能够对每 检验分析周长长
一种农药进 分析步检骤 验费用高 行1、准采集确样品的定
所需设备
性2、和称取定样品量
需要消耗大量的有机溶剂、分析容天平易造成环境污染
3、捣碎样品 4、样品的提取 5、样品的净化
需要使用GC、HPLC等高昂速贵组织的捣碎大机 型仪器设备
分液漏斗等
对检验分析人员的化学分SP析E、S水PME平等 有较高要求
影响人体内神经冲动的传递。另外，氨基甲酸酯类杀虫 剂进入人体内，在胃中酸性条件下可与食物中的亚硝酸 盐和硝酸盐反应生成亚硝基化合物，具有致癌性。
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• 我国农药在农产品的用量居高不下
不合理使用
• 导致农产品中的农药残留超标 • 食品安全、影响消费者健康、影响农产品的贸易 • 加强农残检测
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传统农残分析技术
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（2）兽药残留
根据联合国粮农组织和世界卫生组织（FAO/WHO）食 品中兽药残留联合立法委员会的定义，兽药残留是指动 物性产品的任何可食部分含有兽药母体化合物或其代谢 物，以及与兽药有关的杂质的残留。
青岛市民吃西瓜中毒事件
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• 2001年，杭州的空心菜有机磷中毒事件。 • 2003年，南京蔬菜有机磷残留导致中毒的事件。 • 2007年，福建大田发生有机磷污染水源导致中毒事件。 • 2008年1月，日本发生饺子中毒事件，该饺子被化验出含甲
农药残留检测技术(课件)分析
底物+胆碱酯酶---水解→胆碱
胆碱+显色剂 →→→黄色溶液
（二）抑制率计算方法
通过测定果蔬中的残留农药使乙酰胆碱酯酶活性变化 的程度来测定样品果蔬中的此类残留农药毒性，仪器 测定的残留农药大小用“抑制率”来表示。抑制率是 农药对酶抑制程度的显示指标，其计算方式为:
I = ((A0-At)/A0)×100％
6、避免交叉污染，每次取不同的样品，清洗采样器具。
7、先做对照检测，再做样品检测。对照样品吸光度值 △AC应该在如下区间：实验室温度在25 °C以上时在 0.3－0.8之间；实验室温度在10 °C以下时在0.2－0.8 之间）。空白的作用除了对照作用之外，还可以判断 试剂是否失效，如果加入底物的时候比色皿中液体立 刻变成深黄，或者加入底物之后试剂不变黄，说明试 剂已经失效。
I ——— 抑制率 A0 ——— 对照的吸光度值 At ——— 样品溶液的吸光度值
（三） GB/T 5009.199-2003方法介绍
1、配试剂 缓冲液、酶试剂、显色剂、底物均按照仪器自带
的使用说明书的要求配制而成（所用水为蒸馏水或纯 净水）。除缓冲溶液可常温放置，其他试剂配置后必 须0-4℃避光保存，使用前冷却至室温，保存期不宜
泉水，天然饮用水。 4、酶液、显色剂与底物切忌长时间室温下放置，用后应
立即放入冷藏室内（0-4℃）。 5、提取液可以放置常温下保存。（从冰箱中拿出的酶液
要等他恢复到室温才能使用，不然会导致酶的活性不 够，酶的活性最适温度37摄氏度）。
5、韭菜、生姜、葱、蒜、辣椒等刺激性气味蔬菜中，含 有对酶活性有影响的物质，容易产生假阳性。处理这 类样品时，可采取整株蔬菜浸泡。
2、酶抑制率法（分光光度法）
在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯 酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正 相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰 胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物 质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变 化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中 是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
胆碱+显色剂 →→→黄色溶液
（二）抑制率计算方法
通过测定果蔬中的残留农药使乙酰胆碱酯酶活性变化 的程度来测定样品果蔬中的此类残留农药毒性，仪器 测定的残留农药大小用“抑制率”来表示。抑制率是 农药对酶抑制程度的显示指标，其计算方式为:
I = ((A0-At)/A0)×100％
6、避免交叉污染，每次取不同的样品，清洗采样器具。
7、先做对照检测，再做样品检测。对照样品吸光度值 △AC应该在如下区间：实验室温度在25 °C以上时在 0.3－0.8之间；实验室温度在10 °C以下时在0.2－0.8 之间）。空白的作用除了对照作用之外，还可以判断 试剂是否失效，如果加入底物的时候比色皿中液体立 刻变成深黄，或者加入底物之后试剂不变黄，说明试 剂已经失效。
I ——— 抑制率 A0 ——— 对照的吸光度值 At ——— 样品溶液的吸光度值
（三） GB/T 5009.199-2003方法介绍
1、配试剂 缓冲液、酶试剂、显色剂、底物均按照仪器自带
的使用说明书的要求配制而成（所用水为蒸馏水或纯 净水）。除缓冲溶液可常温放置，其他试剂配置后必 须0-4℃避光保存，使用前冷却至室温，保存期不宜
泉水，天然饮用水。 4、酶液、显色剂与底物切忌长时间室温下放置，用后应
立即放入冷藏室内（0-4℃）。 5、提取液可以放置常温下保存。（从冰箱中拿出的酶液
要等他恢复到室温才能使用，不然会导致酶的活性不 够，酶的活性最适温度37摄氏度）。
5、韭菜、生姜、葱、蒜、辣椒等刺激性气味蔬菜中，含 有对酶活性有影响的物质，容易产生假阳性。处理这 类样品时，可采取整株蔬菜浸泡。
2、酶抑制率法（分光光度法）
在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯 酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正 相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰 胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物 质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变 化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中 是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
农药残留速测仪快速检测农药残留的应用研究课件
1.按化学成分可分为有机氯、有机磷、氨基甲酸 酯类、拟除虫菊酯类及砷、汞、铜、硫磺等制剂。
2.按用途(yòngtú)可分为杀虫剂、杀菌剂、除草剂、植
物生长调节剂和粮食熏蒸剂等。
农药残留速测仪快速检测农药残留
5
的应用研究
第六页，共四十一页。
（四）农药(nóngyào)的毒性及种类
农药除了可造成人体(réntǐ)的急性中毒外，绝大多数对人 体(réntǐ)产生的慢性危害，多是通过污染食品的形式造成。
• 该技术方法直接、过程简单、容易掌握，但定性粗糙， 只对少数农药有效，而且由于其他生物对不同农药的 毒性反应与人畜可能不同，因此影响对农药残留量的
判断。如家蝇对毒性较低的除虫菊酯类敏感，远超过
有机磷和氨基甲酸酯类中毒或高毒的农药。
农药残留速测仪快速检测农药残留
32
的应用研究
第三十三页，共四十一页。
农药残留速测仪快速检测农药残留
9
的应用研究
第十页，共四十一页。
2、有机磷农药(nóngyào)
早期的高效高毒品种(pǐnzhǒng)：对硫磷（1605）、甲拌 磷（3911）、内吸磷（1059）
后期使用得较多的为高效低毒低残留的品种，如：乐 果、敌百虫、杀螟松、倍硫磷
毒性极低的马拉硫磷、双硫磷、氯硫磷、锌硫磷、 碘硫磷、地亚农、灭蜈松
农药残留速测仪快速检测农药残留
10
的应用研究
第十一页，共四十一页。
有机磷农药(nóngyào)主要品种
甲胺磷
S CH3
(CH3O)2P O CH C COOCH3
乙酰甲胺磷
O CH3SPNHC O CH3
O CH3
农药残留速测仪快速检测农药残留
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2.按用途(yòngtú)可分为杀虫剂、杀菌剂、除草剂、植
物生长调节剂和粮食熏蒸剂等。
农药残留速测仪快速检测农药残留
5
的应用研究
第六页，共四十一页。
（四）农药(nóngyào)的毒性及种类
农药除了可造成人体(réntǐ)的急性中毒外，绝大多数对人 体(réntǐ)产生的慢性危害，多是通过污染食品的形式造成。
• 该技术方法直接、过程简单、容易掌握，但定性粗糙， 只对少数农药有效，而且由于其他生物对不同农药的 毒性反应与人畜可能不同，因此影响对农药残留量的
判断。如家蝇对毒性较低的除虫菊酯类敏感，远超过
有机磷和氨基甲酸酯类中毒或高毒的农药。
农药残留速测仪快速检测农药残留
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的应用研究
第三十三页，共四十一页。
农药残留速测仪快速检测农药残留
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的应用研究
第十页，共四十一页。
2、有机磷农药(nóngyào)
早期的高效高毒品种(pǐnzhǒng)：对硫磷（1605）、甲拌 磷（3911）、内吸磷（1059）
后期使用得较多的为高效低毒低残留的品种，如：乐 果、敌百虫、杀螟松、倍硫磷
毒性极低的马拉硫磷、双硫磷、氯硫磷、锌硫磷、 碘硫磷、地亚农、灭蜈松
农药残留速测仪快速检测农药残留
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的应用研究
第十一页，共四十一页。
有机磷农药(nóngyào)主要品种
甲胺磷
S CH3
(CH3O)2P O CH C COOCH3
乙酰甲胺磷
O CH3SPNHC O CH3
O CH3
农药残留速测仪快速检测农药残留
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农药残留的速测技课件
经济损失
由于农药残留超标，农产品可能会 被退回或销毁，给农民带来经济损 失。
出口受限
部分国家对农药残留有严格的限制， 超标的农产品可能无法出口。
02
农药残留速测技术概述
速测技术的定义和特点
定义
农药残留速测技术是一种快速、 简便的检测方法，用于检测农产 品中农药残留的含量。
特点
具有快速、简便、准确、灵敏度 高等优点，适用于现场快速检测 和大量样品的筛查。
将待测样品进行处理， 如提取、净化、浓缩等。
加试剂
孵育
检测
按照速测方法的要求， 向处理后的样品中加入
适量的试剂。
将加好试剂的样品进行 孵育，使待测物质与试
剂充分反应。
观察速测仪器的显示结 果，记录检测数据，判 断农药残留是否超标。
05
农药残留速测技术应用案 例
蔬菜中农药残留速测案例
案例概述
蔬菜是农药残留问题较为突出的食品之一，速测技术在蔬菜中农 药残留检测方面具有快速、简便的优势。
测。
酶抑制法主要针对有机磷和氨基 甲酸酯类农药，对其他类型农药
的检测效果较差。
免疫分析法原理
免疫分析法是利用抗原与抗体的特异性结合，通过荧光、酶或其他标记物检测农药 残留。
免疫分析法具有高灵敏度、高选择性、低成本等优点，适用于大量样品的快速筛选。
免疫分析法需要针对不同农药开发特定的抗体，因此对不同类型农药的检测存在局 限性。
04
农药残留速测技术操作流 程
样品采集与处理
采集具有代表性的样品
选择生长成熟的蔬菜、水果等农产品， 采集具有代表性的部位，避免破损和 腐烂。
样品处理
将采集的样品进行清洗，去除表面的 污垢和杂质，晾干后进行粉碎或切碎， 以便后续处理。
食品农药残留快速检测PPt(PPT56页)
酶片法 速测卡法 检测箱法 酸碱指示剂法 试剂盒法
13
农药残留快检方法：
• 2、免疫分析法 ：高等动物都有免疫功能，当细菌、 病毒和有害物等病原入侵时，能产生抵御外来物的 抗体，这就是动物的免疫反应。
• 致病的外来物被称为抗原。免疫是机体识别和排除 进入体内的抗原性异物的保护性反应。
• 免疫反应，即抗原抗体反应，不仅发生在生物体内， 在体外亦能进行，而且反应是高度特异(即对特定结 构的农药具选择性)，高度灵敏(可达pg/kg-mg/kg 水平)。
为乙酸和靛酚(蓝色），由于有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的 活性有强烈的抑制作用，因此，根据显色的不同，即可判断样品中含有 机磷或氨基甲酸酯类农药的残留情况。 • 样品处理 分为整体测定法（浸提法）和表面测定法（粗筛法）
27
• 目的要求 对照仪器操作说明书，能够熟练操作， 并能举一反三应用类似的快速检测仪。
21
光学生物传感器
• 主要由光纤和生物敏感膜组成。
传感器中
复杂样品中
敏感膜中 生物活 性成分
+ 待测组分
分子识别 生物量 （生物学信号）
换 能 反 应
光信号（荧光、磷光等）
放 大
• 显示或记录
22
其他生物传感器
•农药残留检测的还有电晶体、半导体生物传感器等。
• 石英晶体微量天平(QCM)半导体生物传感器，检 测到低于1mg/L的西维因和敌敌畏。
23
实验室快速检测
实验室快速 检测方法
色谱法
气相色谱法（GC) 高效液相色谱法（HPLC)
薄层色谱法（TLC） 色谱-质谱联用法
毛细管电泳（CE）
红外光谱法
光谱法
荧光光谱法
农药残留快速检测技术ppt课件
，对于叶菜（如韭菜、韭黄、大葱等）样品，将 叶片部分切成2cm左右长的小段；对于辣椒、生 姜等样品，将可食部分切成1cm左右见方碎片， 对于大蒜，将蒜扒皮后整瓣提取。
三、方法介绍
（2）样品提取
用电子台秤称取2.0g样品于提取瓶中，用移液器加 入10.0ml农残试剂一，用搅拌棒将样品压入页面下。然 后将提取瓶放入超声提取仪中提取3min（在超声提取仪 中预先加入500ml蒸馏水）。用移液器移取1.00ml样品 提取液于比色瓶中，至于多功能固定架上备用。
技术成熟，灵敏度高，FAO推荐方法，美国 USAD、EPA、AOAC制定了评定标准，但经 认证的有限，经EPA认证的免疫试剂盒约有4 个厂家的26种试剂盒；EPA方法4010、EPA 方法 4015 EPA方法3030等
处于研究阶段
电导型生物传感器、光寻址电位型传感器、 安培型传感器，处于研究和应用阶段，并未 广泛推广使用
一、国内农残快速检测的现状及意义
（二）快速检测实施的必要性
农残超标的主要原因： 一是生产者不严格按农药安全使用准则的要求进行
生产,使用违禁农药或使用量和安全期掌握不好。 二是施药器具喷洒的均匀性欠佳,易导致局部给药
超量所致。 由于高毒、高残留的有机磷农药如：对硫磷、甲基
对硫磷、乐果、氧乐果、敌敌畏及甲胺磷等占据了杀虫剂 产量的70％以上，并且其中70％以上的中毒事故都是由有 机磷农药引起的。
匀，放入第一通道中，计时3分钟（手动）按向上键。
★ 加入试剂（四）50µl， 倒计时3分钟（自动） ， 仪器显示△A值，空白测量完毕。
★ 要求△A大于0.100。若小于则增加（二）用量或者增加显 色时间。
三、方法介绍
3、样品处理 ★ 样品提取瓶+2.0克待测样品+10.0ml（一）。 ★ 超声提取3分钟，取出。
三、方法介绍
（2）样品提取
用电子台秤称取2.0g样品于提取瓶中，用移液器加 入10.0ml农残试剂一，用搅拌棒将样品压入页面下。然 后将提取瓶放入超声提取仪中提取3min（在超声提取仪 中预先加入500ml蒸馏水）。用移液器移取1.00ml样品 提取液于比色瓶中，至于多功能固定架上备用。
技术成熟，灵敏度高，FAO推荐方法，美国 USAD、EPA、AOAC制定了评定标准，但经 认证的有限，经EPA认证的免疫试剂盒约有4 个厂家的26种试剂盒；EPA方法4010、EPA 方法 4015 EPA方法3030等
处于研究阶段
电导型生物传感器、光寻址电位型传感器、 安培型传感器，处于研究和应用阶段，并未 广泛推广使用
一、国内农残快速检测的现状及意义
（二）快速检测实施的必要性
农残超标的主要原因： 一是生产者不严格按农药安全使用准则的要求进行
生产,使用违禁农药或使用量和安全期掌握不好。 二是施药器具喷洒的均匀性欠佳,易导致局部给药
超量所致。 由于高毒、高残留的有机磷农药如：对硫磷、甲基
对硫磷、乐果、氧乐果、敌敌畏及甲胺磷等占据了杀虫剂 产量的70％以上，并且其中70％以上的中毒事故都是由有 机磷农药引起的。
匀，放入第一通道中，计时3分钟（手动）按向上键。
★ 加入试剂（四）50µl， 倒计时3分钟（自动） ， 仪器显示△A值，空白测量完毕。
★ 要求△A大于0.100。若小于则增加（二）用量或者增加显 色时间。
三、方法介绍
3、样品处理 ★ 样品提取瓶+2.0克待测样品+10.0ml（一）。 ★ 超声提取3分钟，取出。
农药残留检测技术课件ppt
3min后记录空白样的△AC值。
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
样品样的操作步骤及要求：
取样步骤及要求： ①称取菜样1g〔要求一种菜样要从不同植株取样，从叶片
部位取（果实蔬菜用刀顺皮削下），剪成1cm左右见方碎 片，混匀后用镊子称取1g（记录），放入烧杯或提取瓶中 （编号）〕。 ②取5ml缓冲溶液加入编好号的样品瓶中（记录）。 ③用手或借助仪器振荡1-2min（计时）。 ④振荡完成后静置3-5min（计时）。
上海博纳CL-BIII八通道残留农药测定仪 等 特点： 精确度高、稳定性强 易于操作
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
三、农残速测仪介绍
（一）原理
农药对胆碱酯酶（检测试剂）的活性有抑制作用，这样 就抑制了胆碱酯酶催化显色剂水解发生显色反应，通过 对显色反应的测定来实现农药残留量的测量。由此可判 定果品蔬菜样品中的残留农药的含量。 正常情况：
放入仪器中，按样品检测键，3min后记录实验结果。
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
3、结果的判定
结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，样品为阳
2、实验操作
空白样操作步骤及要求： ①取2.5ml缓冲溶液加入试管中（记录）。 ②分别加入0.1ml酶液（记录），0.1ml显色剂（记录）
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
样品样的操作步骤及要求：
取样步骤及要求： ①称取菜样1g〔要求一种菜样要从不同植株取样，从叶片
部位取（果实蔬菜用刀顺皮削下），剪成1cm左右见方碎 片，混匀后用镊子称取1g（记录），放入烧杯或提取瓶中 （编号）〕。 ②取5ml缓冲溶液加入编好号的样品瓶中（记录）。 ③用手或借助仪器振荡1-2min（计时）。 ④振荡完成后静置3-5min（计时）。
上海博纳CL-BIII八通道残留农药测定仪 等 特点： 精确度高、稳定性强 易于操作
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
三、农残速测仪介绍
（一）原理
农药对胆碱酯酶（检测试剂）的活性有抑制作用，这样 就抑制了胆碱酯酶催化显色剂水解发生显色反应，通过 对显色反应的测定来实现农药残留量的测量。由此可判 定果品蔬菜样品中的残留农药的含量。 正常情况：
放入仪器中，按样品检测键，3min后记录实验结果。
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
3、结果的判定
结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，样品为阳
2、实验操作
空白样操作步骤及要求： ①取2.5ml缓冲溶液加入试管中（记录）。 ②分别加入0.1ml酶液（记录），0.1ml显色剂（记录）
蔬菜农药残留的快速检测技术
化值； l △At---样品溶液反应3min吸光度的变化值；
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蔬菜农药残留的快速检测技术
结果判定
l 结果以酶被抑制的程度(抑制率)表示。当蔬菜 样品提取液对酶的抑制率≥50％时，表示蔬菜 中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在， 样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检 验2次以上。对阳性结果的样品，可用其它方 法进一步确定具体农药品种和含量。
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蔬菜农药残留的快速检测技术
酶抑制率法（分光光度法）
l 1.3 底物：取25.0mg硫代乙酰胆碱，加3.0ml 蒸馏水溶解，摇匀后置4 ℃冰箱中保存备用。 保存期不超过两周。
l 1.4 乙酰胆碱酯酶：根据酶的活性情况，用缓 冲溶液溶解，3min的吸光度变化△Ao值应控 制在0.3以上。摇匀后置4℃冰箱中保存备用， 保存期不超过四天。
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蔬菜农药残留的快速检测技术
PR-3 便携式农药残毒快速检测仪
l 操作步骤 l 1.接通电源，右侧开关拨至“开”，打开上盖
按“START”键预热； l 2.当预热达到设置反应温度TEMP时，听到
“哗”一声，屏幕显示“TEMP1”，预热结束， 等待倒计时； l 3.去试纸外膜，插入试纸（白片在下端），在 白片上分别加1-2滴提取液；
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蔬菜农药残留的快速检测技术
PR-3 便携式农药残毒快速检测仪
l 4.再次按“START”键，单片电脑开始“TEMP1”倒计 时；
l 5.当听到连续“哗、哗、哗”声，屏幕显示“CLOS”， 提示合上前盖，进入“TEMP2”倒计时；
l 6.当听到六声“哗、哗、哗”音，本次操作结束，打 开上盖观察试纸颜色变化；
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蔬菜农药残留的快速检测技术
结果判定
l 结果以酶被抑制的程度(抑制率)表示。当蔬菜 样品提取液对酶的抑制率≥50％时，表示蔬菜 中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在， 样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检 验2次以上。对阳性结果的样品，可用其它方 法进一步确定具体农药品种和含量。
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蔬菜农药残留的快速检测技术
酶抑制率法（分光光度法）
l 1.3 底物：取25.0mg硫代乙酰胆碱，加3.0ml 蒸馏水溶解，摇匀后置4 ℃冰箱中保存备用。 保存期不超过两周。
l 1.4 乙酰胆碱酯酶：根据酶的活性情况，用缓 冲溶液溶解，3min的吸光度变化△Ao值应控 制在0.3以上。摇匀后置4℃冰箱中保存备用， 保存期不超过四天。
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蔬菜农药残留的快速检测技术
PR-3 便携式农药残毒快速检测仪
l 操作步骤 l 1.接通电源，右侧开关拨至“开”，打开上盖
按“START”键预热； l 2.当预热达到设置反应温度TEMP时，听到
“哗”一声，屏幕显示“TEMP1”，预热结束， 等待倒计时； l 3.去试纸外膜，插入试纸（白片在下端），在 白片上分别加1-2滴提取液；
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蔬菜农药残留的快速检测技术
PR-3 便携式农药残毒快速检测仪
l 4.再次按“START”键，单片电脑开始“TEMP1”倒计 时；
l 5.当听到连续“哗、哗、哗”声，屏幕显示“CLOS”， 提示合上前盖，进入“TEMP2”倒计时；
l 6.当听到六声“哗、哗、哗”音，本次操作结束，打 开上盖观察试纸颜色变化；
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20
二、适合我国的农药残留快速检测方法
• 生化检测
酶抑制法
速测卡 速测仪
免疫分析法 主要为酶免疫法
• 生物检测
发光菌检测法 敏感家蝇检测法
• 化学比色法
21
酶抑制法
酶抑制技术是研究比较成熟、应用最广 泛快 速的农药残留检测技术，是根据有机磷和氨基甲 酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶（AChE)的特异性生 化反应建立起来的农药残留的微量和痕量快速检 测技术。
10
2、有机磷农药
早期的高效高毒品种：对硫磷（1605）、甲拌磷 （3911）、内吸磷（1059）
后期使用得较多的为高效低毒低残留的品种，如： 乐果、敌百虫、杀螟松、倍硫磷
毒性极低的马拉硫磷、双硫磷、氯硫磷、锌硫磷、 碘硫磷、地亚农、灭蜈松
11
甲胺磷
有机磷农药主要品种
S CH3
(CH3O)2P O CH C COOCH3
（六）传统农残分析技术的优缺点
优点
能够对每一种农药进行准确 的定性和定量
缺点 检验分析周长长
检验费用高
分析步骤 1、采集样品 2、称取样品 3、捣碎样品 4、样品的提取 5、样品的净化 6、样品的浓缩 7、样品的定性、定量检测
需要消耗所大需设量备 的有机溶剂、 容易造成环境污染
分析天平
需要使用高速组G织C捣碎、机 HPLC等昂贵 的大型仪分液器漏斗设等 备 对检验分析人员的化学分析 SPE、SPME 等
14
• 主要表现为植物性食物残留，尤其是含有芳香物 质的植物
• 如：水果、蔬菜，特别是叶菜类如小白菜、大白 菜、鸡毛菜、甘蓝、芹菜、韭菜、芥菜、花菜、 绿花菜、茼蒿、枸杞菜和黄瓜等
15
3、氨基甲酸酯类农药
• 西维因、杀灭威、速灭威、叶蝉散等 • 除草剂：敌草隆、敌稗 • 在作物上的残留时间为4d，在动物的肌肉和脂肪
22
1、速测卡法
23
速测卡检测结果
“-”阴性（蓝色） “+”弱阳性（淡蓝） “++”强阳性（白色）
24
2、速测仪
原理:在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶 正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。酶 催化乙酰胆碱水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物 质。
用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化，计 算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否含有有机磷 或氨基甲酸酯类农药的存在。
（四）农药的毒性及种类
农药除了可造成人体的急性中毒外，绝大多数对 人体产生的慢性危害，多是通过污染食品的形式 造成。
某些农药对人和动物的遗传和生殖造成影响，产 生畸形和引 起癌症等方面的毒素作用。
7
1、有机氯农药
• 容易在人体内蓄积 • 慢性毒性作用，主要表现在侵害肝、肾及神经系统，
乙酰甲胺磷
O C H3SP N H C O C H3
O C H3
12
ห้องสมุดไป่ตู้
乐果
O (CH3O)2P SCH2CONHCH3
一六0五
S (C2H5O)2P O
NO2
13
• 急性毒性：有机磷农药化学性质不稳定，分解快， 在作物中残留时间短。
• 抑制血液和组织中胆碱酯酶的活性，引起乙酰胆碱 在体内大量积聚而出现一系列神经中毒症状，如神 经功能紊乱、出汗、震颤，精神错乱、语言失常等。
中的明显蓄积时间约为7d • 残留量很低
16
氨基甲酸酯类杀虫剂进入人体内，在胃中酸 性条件下可与食物中的亚硝酸盐和硝酸盐反应生 成亚硝基化合物，具有致癌性。
17
（五）传统农残分析技术一般过程
分析步骤 1.采集样品
所需设备
2.称取样品
分析天平
3.捣碎样品 分析步骤
1、采集样品
4.样品2、称的取样品提取 3、捣碎样品
31
4、发光菌检测法
农药与细菌作用后可影响细菌的发光程度， 通过细菌发光情况，可测出农药残留量。
29
• ELISA法基本原理是预先结合在固相载体上的抗 体或抗原分子与样品中的抗原或抗体分子在一定 条件下进行免疫学反应。
• 该法因不需昂贵仪器设备，对人体无害等优点而 被广泛采用，具有灵敏、特异、快速、稳定以及 易于自动化操作等特点。
30
目前，ELISA方法常用的固相载体是96孔聚苯乙烯 酶标板，常用的酶是辣根过氧化物酶，常用的底 物是邻苯二胺和四甲基联苯胺等。
25
农药残留快速测试仪
26
速测仪检测结果
判定依据
说明
抑制率小于等于50
合格
抑制率大于50
超标，说明含有有机磷 或氨基甲酸酯类农药
抑制率与农药残留量成正相关，抑制率越高说明残留量 越高
27
免疫分析技术
• 免疫分析技术是将免疫反应与现代测试手段相 结合而建立的超微量分析技术，是基于抗原抗体 特异性结合和反应为基础的分析方法。
动物实验证实有致畸、致癌作用 • 我国1983年停止生产，1984年停止使用这类农
药
8
Cl
Cl
Cl
H
Cl
Cl
Cl
六六六，BHC
C Cl3
Cl
CH
Cl
滴滴涕，DDT
9
➢ 滴滴涕：减少了蛋壳的厚度，从而降低了小鸟 的孵出率。
➢ 二恶英：进入机体后几乎不被排泄、沉积在肝 脏和脂肪组织中。属于剧毒物质，毒性比氰化 钾高50—1000倍，致癌毒性比黄曲霉毒素高 10倍，会引起基因突变，影响繁殖力和智力发 育。
氮吹仪、旋转蒸发器等
水平有较高要求 GC、HPLC、GC-MS、HPLC-MS 等
检验分析过程繁琐、影响因 子复杂、不易掌控
19
传统的农残化学分析主要是气相或液相色谱等仪器
优点：敏感(10－l2 ～10－6 mol／L) 、准确
缺点：操作复杂、费时及成本高。 难以满足需求 －－怎么办？ －－发展适合我国的快速检测技术
4、样品的提取
5.样品5、样的品的净净化 化
6、样品的浓缩
6.样品的浓缩 7、样品的定性、定量检测
高速组织所需设捣备 碎机
分离漏斗分析天等平 高速组织捣碎机 分液漏斗等
SPE、SSPE、PSPMME 等E等
氮吹仪、旋转蒸发器等
氮吹仪、旋转蒸发仪等 GC、HPLC、GC-MS、HPLC-MS 等
7.样品的定性、定量测定 GC、HPLC、GC-MS等
• 目前应用于农残检测的是酶免疫分析(EIA)和放射 性免疫分析(RIA)。其中酶联免疫分析技术应用 最为普遍。
28
3、酶联免疫技术
ELISA是一种以酶作为标记物的免疫分析方法， 也是目前应用最广泛的免疫分析方法之一，它将 酶标记在抗体／抗原分子上形成酶标抗体／酶标 抗原，酶作用于能呈现出颜色的底物，通过仪器 或肉眼进行辨别。
二、适合我国的农药残留快速检测方法
• 生化检测
酶抑制法
速测卡 速测仪
免疫分析法 主要为酶免疫法
• 生物检测
发光菌检测法 敏感家蝇检测法
• 化学比色法
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酶抑制法
酶抑制技术是研究比较成熟、应用最广 泛快 速的农药残留检测技术，是根据有机磷和氨基甲 酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶（AChE)的特异性生 化反应建立起来的农药残留的微量和痕量快速检 测技术。
10
2、有机磷农药
早期的高效高毒品种：对硫磷（1605）、甲拌磷 （3911）、内吸磷（1059）
后期使用得较多的为高效低毒低残留的品种，如： 乐果、敌百虫、杀螟松、倍硫磷
毒性极低的马拉硫磷、双硫磷、氯硫磷、锌硫磷、 碘硫磷、地亚农、灭蜈松
11
甲胺磷
有机磷农药主要品种
S CH3
(CH3O)2P O CH C COOCH3
（六）传统农残分析技术的优缺点
优点
能够对每一种农药进行准确 的定性和定量
缺点 检验分析周长长
检验费用高
分析步骤 1、采集样品 2、称取样品 3、捣碎样品 4、样品的提取 5、样品的净化 6、样品的浓缩 7、样品的定性、定量检测
需要消耗所大需设量备 的有机溶剂、 容易造成环境污染
分析天平
需要使用高速组G织C捣碎、机 HPLC等昂贵 的大型仪分液器漏斗设等 备 对检验分析人员的化学分析 SPE、SPME 等
14
• 主要表现为植物性食物残留，尤其是含有芳香物 质的植物
• 如：水果、蔬菜，特别是叶菜类如小白菜、大白 菜、鸡毛菜、甘蓝、芹菜、韭菜、芥菜、花菜、 绿花菜、茼蒿、枸杞菜和黄瓜等
15
3、氨基甲酸酯类农药
• 西维因、杀灭威、速灭威、叶蝉散等 • 除草剂：敌草隆、敌稗 • 在作物上的残留时间为4d，在动物的肌肉和脂肪
22
1、速测卡法
23
速测卡检测结果
“-”阴性（蓝色） “+”弱阳性（淡蓝） “++”强阳性（白色）
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2、速测仪
原理:在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶 正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。酶 催化乙酰胆碱水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物 质。
用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化，计 算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否含有有机磷 或氨基甲酸酯类农药的存在。
（四）农药的毒性及种类
农药除了可造成人体的急性中毒外，绝大多数对 人体产生的慢性危害，多是通过污染食品的形式 造成。
某些农药对人和动物的遗传和生殖造成影响，产 生畸形和引 起癌症等方面的毒素作用。
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1、有机氯农药
• 容易在人体内蓄积 • 慢性毒性作用，主要表现在侵害肝、肾及神经系统，
乙酰甲胺磷
O C H3SP N H C O C H3
O C H3
12
ห้องสมุดไป่ตู้
乐果
O (CH3O)2P SCH2CONHCH3
一六0五
S (C2H5O)2P O
NO2
13
• 急性毒性：有机磷农药化学性质不稳定，分解快， 在作物中残留时间短。
• 抑制血液和组织中胆碱酯酶的活性，引起乙酰胆碱 在体内大量积聚而出现一系列神经中毒症状，如神 经功能紊乱、出汗、震颤，精神错乱、语言失常等。
中的明显蓄积时间约为7d • 残留量很低
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氨基甲酸酯类杀虫剂进入人体内，在胃中酸 性条件下可与食物中的亚硝酸盐和硝酸盐反应生 成亚硝基化合物，具有致癌性。
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（五）传统农残分析技术一般过程
分析步骤 1.采集样品
所需设备
2.称取样品
分析天平
3.捣碎样品 分析步骤
1、采集样品
4.样品2、称的取样品提取 3、捣碎样品
31
4、发光菌检测法
农药与细菌作用后可影响细菌的发光程度， 通过细菌发光情况，可测出农药残留量。
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• ELISA法基本原理是预先结合在固相载体上的抗 体或抗原分子与样品中的抗原或抗体分子在一定 条件下进行免疫学反应。
• 该法因不需昂贵仪器设备，对人体无害等优点而 被广泛采用，具有灵敏、特异、快速、稳定以及 易于自动化操作等特点。
30
目前，ELISA方法常用的固相载体是96孔聚苯乙烯 酶标板，常用的酶是辣根过氧化物酶，常用的底 物是邻苯二胺和四甲基联苯胺等。
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农药残留快速测试仪
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速测仪检测结果
判定依据
说明
抑制率小于等于50
合格
抑制率大于50
超标，说明含有有机磷 或氨基甲酸酯类农药
抑制率与农药残留量成正相关，抑制率越高说明残留量 越高
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免疫分析技术
• 免疫分析技术是将免疫反应与现代测试手段相 结合而建立的超微量分析技术，是基于抗原抗体 特异性结合和反应为基础的分析方法。
动物实验证实有致畸、致癌作用 • 我国1983年停止生产，1984年停止使用这类农
药
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Cl
Cl
Cl
H
Cl
Cl
Cl
六六六，BHC
C Cl3
Cl
CH
Cl
滴滴涕，DDT
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➢ 滴滴涕：减少了蛋壳的厚度，从而降低了小鸟 的孵出率。
➢ 二恶英：进入机体后几乎不被排泄、沉积在肝 脏和脂肪组织中。属于剧毒物质，毒性比氰化 钾高50—1000倍，致癌毒性比黄曲霉毒素高 10倍，会引起基因突变，影响繁殖力和智力发 育。
氮吹仪、旋转蒸发器等
水平有较高要求 GC、HPLC、GC-MS、HPLC-MS 等
检验分析过程繁琐、影响因 子复杂、不易掌控
19
传统的农残化学分析主要是气相或液相色谱等仪器
优点：敏感(10－l2 ～10－6 mol／L) 、准确
缺点：操作复杂、费时及成本高。 难以满足需求 －－怎么办？ －－发展适合我国的快速检测技术
4、样品的提取
5.样品5、样的品的净净化 化
6、样品的浓缩
6.样品的浓缩 7、样品的定性、定量检测
高速组织所需设捣备 碎机
分离漏斗分析天等平 高速组织捣碎机 分液漏斗等
SPE、SSPE、PSPMME 等E等
氮吹仪、旋转蒸发器等
氮吹仪、旋转蒸发仪等 GC、HPLC、GC-MS、HPLC-MS 等
7.样品的定性、定量测定 GC、HPLC、GC-MS等
• 目前应用于农残检测的是酶免疫分析(EIA)和放射 性免疫分析(RIA)。其中酶联免疫分析技术应用 最为普遍。
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3、酶联免疫技术
ELISA是一种以酶作为标记物的免疫分析方法， 也是目前应用最广泛的免疫分析方法之一，它将 酶标记在抗体／抗原分子上形成酶标抗体／酶标 抗原，酶作用于能呈现出颜色的底物，通过仪器 或肉眼进行辨别。