电阻抗法白细胞检验
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电阻抗法血细胞计数原理
咱们身体里的血液就像是一个小小的“世界”,里面有各种各样的“居民”,也就是血细胞。
而电阻抗法呢,就是一种能帮我们数清楚这些“居民”数量的神奇方法。
想象一下,有一条小小的通道,就像一个小小的“城门”。
血细胞们要一个一个地通过这个“城门”。
这个“城门”两边有电极,当血细胞通过的时候,就会引起电流的变化。
比如说,红细胞比较小,它通过的时候引起的电流变化就小一点;白细胞比较大,它通过的时候引起的电流变化就大一些。
这就好像不同大小的人通过一个狭窄的门,引起的动静不一样。
通过检测这些电流变化,仪器就能分辨出通过的是哪种血细胞,然后一个一个地数清楚。
是不是很神奇?
就好像是血细胞们在参加一场“排队过城门”的游戏,而仪器就是那个超级认真负责的“计数员”。
而且哦,这个方法还挺聪明的。
它能把不同大小、不同特点的血细胞区分得清清楚楚。
比如说血小板,它是血细胞中的“小不点”,但电阻抗法也能准确地把它识别出来,不会把它和其他血细胞搞混。
再想想,如果没有这种方法,要数清楚咱们身体里那么多的血细胞,那可真是一件让人头疼的大工程!
电阻抗法就像是一个超级厉害的小助手,快速又准确地帮我们了解身体里血细胞的情况。
医生们就能根据这些数据,判断我们是不是健康,有没有生病。
比如说,如果白细胞的数量突然增多了,那可能就说明身体里有炎症,在和病菌“打仗”呢。
怎么样,朋友,是不是觉得这个电阻抗法特别有趣?下次去医院做检查,看到那些仪器的时候,说不定你就会想起今天咱们聊的这些啦!。
・继续教育园地・血细胞分析仪检测原理乐家新 周建山 兰亚婷 传统的血细胞检查完全采用手工方法,不仅操作繁琐费时,而且由于多种原因,计数结果的准确性和精密度难以保证。
1958年,库尔特采用电阻率变化与电子技术相结合的方法,发明了性能比较稳定的电阻抗法血细胞计数仪,开创了血细胞分析的新纪元。
20世纪90年代以来,随着各种高新技术在血细胞分析仪中的应用,使其检测原理不断完善,检测水平不断提高,测量参数不断增加,各种类型的血细胞分析仪已在国内外各医院广泛使用。
但从根本上讲,其检测原理大致分为两部分,即电阻抗法与光散射法。
图1 细胞计数电阻抗原理作者单位:100853北京,解放军总医院临床检验科一、电阻抗法血细胞分析技术(一)电阻抗法白细胞计数和分类原理电阻抗法白细胞计数原理是根据血细胞非传导性的性质,以对电解质溶液中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础,进行白细胞计数和体积测定。
在等渗电解质溶液(稀释液)中,有一个用于细胞计数的小孔管,其内侧充满了稀释液,并有一个内电极,其外侧细胞悬液(稀释液)中有一个外电极,小孔两侧的电极之间有稳定的电流。
细胞为相对不良导体,其导电性质比稀释液低,当有一个细胞通过小孔时,于瞬间引起了电压变化而出现一个脉冲信号。
脉冲的数量与细胞的数量成正比,脉冲的高度与细胞的体积成正比。
脉冲信号经放大、阈值调节、甄别、整形后,送入计数系统进行处理,得出被测细胞的数量。
图1显示出血细胞计数仪应用电阻抗原理进行细胞计数及体积分析的方法及过程。
目前,许多仪器除给出细胞数外,还同时提供可以表示细胞群体分布情况的图形———直方图。
可显示出某一特定细胞群的平均细胞体积、细胞分布情况和是否存在明显的异常细胞群,由脉冲累积得到。
如图2所示,左图为示波器显示的所分析细胞的脉冲大小,右图为相应的体积分布直方图,横坐标为体积,纵坐标为相对数量。
在进行白细胞分析时,仪器将体积范围从35~450fl 分为256个通道,每个通道约为1164fl ,并将每个白细胞的脉冲根据其体积大小分类并储存在相应的体积通道中。
XXXXXXX卫生服务中心(XX医院)迪瑞BCC-3000血液分析仪检验标准操作规程(SOP)文件编号:CHS-JY-01~30第A版编制:xx审核:xx批准:xx生效日期:二0XX年X月X日目录修订页BCC-3000红细胞计数1. 实验原理:本实验采用电阻抗法进行红细胞计数,红细胞通过小孔时,形成的相应的脉冲的多少即红细胞的数目。
2. 标本采集:2.1 标本种类:新抽取的抗凝血或手指末梢血2.2 标本要求:2.2.1 抗凝剂采用EDTA.K2抗凝2.2.2 用手指末梢血作红细胞检验时,稀释液量为0.70ml,样品量为20μl,如手指有冻疮,则主张采用耳垂血。
3. 标本储存:2小时内完成检验,室温放置下不超过8小时,4-8℃保存不超过48小时。
4.标本运输:室温运输5. 标本拒收标准:污染,凝固标本不能作测定6.试剂6.1试剂名称:迪瑞血细胞分析试剂6.2 生产厂家:长春迪瑞医疗科技股份有限公司6.3 试剂组成试剂1:无氰溶血剂试剂2:稀释液试剂3:清洗液试剂4:探头清洗液试剂5:关机液(酶清洗液)6.4 试剂储存条件及有效期:储存温度为5-30℃,有效期为一年,开封后的使用期限为60天。
7. 仪器设备7.1 仪器名称:DIRUI三分类血细胞分析仪7.2 仪器厂家:长春迪瑞医疗科技股份有限公司7.3 仪器型号:BCC-30008 操作步骤8.1 全血模式:8.1.1 上下颠倒试管将内容物充分混匀。
8.1.2 轻轻取下盖子,防止血液溅出。
8.1.3 将试管正确放到采样针下,使采样针可吸入混匀后的样本。
8.1.4 按计数键,样品开始吸取。
8.1.5 当采样针抬起后,移开试管。
8.1.6 当分析结束后,采样针复位,准备下一个样品,重复上述步骤。
8.2 末梢血模式:8.2.1 充分混匀预稀释液样本。
8.2.2将试管正确放到采样针下,使采样针可吸入混匀后的样本。
8.2.3按计数键,样品开始吸取。
8.2.4当采样针抬起后,移开试管。
电阻抗法血液分析仪检测原理电阻抗电阻抗法血液分析仪检测原理 2009-8-7 9:52 【大中小】电阻抗法血细胞计数原理又名库尔特原理。
1. 红细胞检测原理:将等渗电解质溶液稀释的细胞悬液置入不导电的容器红细胞检测原理中,将小孔管(也称传感器)插进细胞悬液中。
小孔管内充满电解质溶液,并有一个内电极,小孔管的外侧细胞悬液中有一个外电极。
当接通电源后,位于小孔管两侧电极产生稳定电流,稀释细胞悬液从小孔管外侧通过小孔管壁上宝石小孔(直径<100um,厚度约75um)向小孔管内部流动,使小孔感应区内电阻增高,引起瞬间电压变化形成脉冲信号,脉冲振幅越高,细胞体积越大,脉冲数量越多,细胞数量越多,由此得出血液中血细胞数量和体积值。
三分类血球分析仪工作原理示意图2. 白细胞分类计数原理根据电阻抗法原理,经溶血剂处理的、脱水的、不同体积的白细胞通过小孔时,脉冲大小不同,将体积为35~450fl 白细胞,分为256 个通道,其中,淋巴细胞为单个核细胞、颗粒少、细胞小,位于35~90fl 的小细胞区,粒细胞(中性粒细胞)的核分多叶、颗粒多、胞体大,位于160fl 以上的大细胞区,单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、原始细胞、幼稚细胞等,位于90~160fl 的单个核细胞区,又称为中间型细胞。
仪器根据各亚群占总体的比例,计算出各亚群细胞的百分率,医学教育网整理并同时计算各亚群细胞的绝对值,显示白细胞体积分布直方图。
3.血红蛋白测定原理当稀释血液中加入溶血剂后,红细胞溶解并释放出血红蛋白,血红蛋白与溶血剂中的某些成分结合形成一种血红蛋白衍生物,在特定波长(530~550nm)下比色,吸光度变化与稀释液中Hb 含量成正比,最终显示Hb 浓度。
不同类型血液分析仪,溶血剂配方不同,所形成血红蛋白衍生物不同,吸收光谱不同,如含氰化钾的溶血剂,与血红蛋白医学教育网整理作用后形成氰化血红蛋白,其最大吸收峰接近540nm。
电阻抗法检测血细胞原理电阻抗法是一种常用于检测和计量生物体内电导率和电阻率的方法。
这种方法可以用来测量人体血液中的血细胞数量和其他相关参数,如血液粘度等。
下面是电阻抗法检测血细胞的原理和应用的详细介绍。
血液是人体内循环系统中最为重要的液体之一,主要由红细胞、白细胞和血小板等构成。
血细胞的数量、大小、形状和浓度等特性反映了人体的健康状况,因此测量血细胞的变化对于疾病诊断和治疗具有重要意义。
电阻抗法是一种依据物质导电能力差异的测量方法。
传统上,电阻抗法使用直流电进行测量。
直流电在通过生物体时,由于细胞膜的电阻和电容效应,会产生电荷的聚集和流动。
聚集的电荷会形成细胞周围的电场,而细胞内的电场则是由细胞内部的离子流动形成的。
这种不同电场的差异会产生阻抗。
通过测量传感器上的这种阻抗,可以推断出生物体内的电导率和电阻率,并进一步计算出血细胞的浓度和其他参数。
现代的电阻抗法仍然使用电极,但是通常使用交流电而不是直流电进行测量。
交流电在通过生物体时,会由于组织的导电和储电效应而产生相位差。
测量这种相位差可以获得血液的电导率和介电常数。
血液中血细胞的存在会改变电流通过的路径和速度,从而导致电阻抗的变化。
通过测量这种电阻抗变化,可以推断出血细胞的数量和相关参数。
1.非侵入性:电阻抗法可以通过皮肤表面与生物体接触的电极完成测量,无需刺破皮肤。
这降低了病人的痛苦和感染的风险。
2.速度快:电阻抗法可以在短时间内获得血细胞数量的测量结果,适用于急诊和临床实时监测等场景。
3.精度高:通过使用多个电极,电阻抗法可以对血细胞数量进行更精确的估计,并快速检测出可能存在的异常情况。
4.可靠性强:电阻抗法已经得到了广泛的研究和实践验证,其测量结果具有较高的可靠性和准确性。
5.多功能性:电阻抗法可以用于血细胞数量的测量,也可以用于其他血液相关参数的估计,如血浆黏度等。
总结起来,电阻抗法是一种基于测量血液中电导率和电阻率的方法,通过测量阻抗的变化来推断血细胞的数量和相关参数。
血细胞分析仪五分类检测技术及原理血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一,随着科学技术日新月异的发展,血细胞分析的技术也从几年前的三分类转向现在的五分类,从二维空间进而转向三维空间,同时现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了先进的技术,如鞘流技术、激光技术等。
下面就五分类血细胞分析仪器的检测方法及其应用加以说明。
1 采用阻抗、激光散射和荧光染色技术检测法直流电阻抗法(DC)用于测量细胞体积大小。
激光散射产生的前向散射光、侧向散射光和侧向荧光可用于探测白细胞体积大小、细胞内含物的情况(细胞核以及颗粒情况),侧向荧光则可以反映细胞内脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的含量,特有的嗜酸性粒细胞检测溶血剂Str-matolyzer-EO可将除了嗜酸细胞以外的所有细胞溶解或萎缩,含有完整嗜酸细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。
在嗜碱细胞通道中,使用特殊溶血剂Strmatolyzer-BA可将除了嗜碱细胞以外的所有细胞溶解或萎缩,含有完整嗜碱细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。
幼稚细胞检查通道(IMI)可以根据幼稚细胞膜比成熟细胞膜表面含有脂质较少的现象,在细胞稀释悬液中加入硫化氨基酸,由于占位不同,结合在幼稚细胞表面的氨基酸较多,对溶血剂有抵抗作用,当加入溶血剂后成熟细胞易被溶解,而幼稚细胞不易被破坏,可通过电阻法检测出来。
综合各个测量方法,得到白细胞五分类的图形和数据。
这种技术主要应用在Sysmex研制和开发的SE-9000、SE-9500、XE-2100、XT-1800等系列血液分析仪中。
2 电阻抗和射频电导联合检测法这种方法是分别采用四个检测系统来检测不同类型的细胞:(1)淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞检测系统:在细胞悬浮液中加入溶血剂使红细胞溶解,而使白细胞保持完整,细胞浆及核形态近似于生理状态,当这些细胞通过检测系统时,对白细胞进行电阻抗法(测量细胞体积)和射频电导法(检测细胞核和颗粒密度)的联合检测,结果将细胞分成淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞三个群体。
电阻抗法血液分析仪检测原理电阻抗电阻抗法血液分析仪检测原理 2009-8-7 9:52 【大中小】电阻抗法血细胞计数原理又名库尔特原理。
1. 红细胞检测原理:将等渗电解质溶液稀释的细胞悬液置入不导电的容器红细胞检测原理中,将小孔管(也称传感器)插进细胞悬液中。
小孔管内充满电解质溶液,并有一个内电极,小孔管的外侧细胞悬液中有一个外电极。
当接通电源后,位于小孔管两侧电极产生稳定电流,稀释细胞悬液从小孔管外侧通过小孔管壁上宝石小孔(直径<100um,厚度约75um)向小孔管内部流动,使小孔感应区内电阻增高,引起瞬间电压变化形成脉冲信号,脉冲振幅越高,细胞体积越大,脉冲数量越多,细胞数量越多,由此得出血液中血细胞数量和体积值。
三分类血球分析仪工作原理示意图2. 白细胞分类计数原理根据电阻抗法原理,经溶血剂处理的、脱水的、不同体积的白细胞通过小孔时,脉冲大小不同,将体积为35~450fl 白细胞,分为256 个通道,其中,淋巴细胞为单个核细胞、颗粒少、细胞小,位于35~90fl 的小细胞区,粒细胞(中性粒细胞)的核分多叶、颗粒多、胞体大,位于160fl 以上的大细胞区,单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、原始细胞、幼稚细胞等,位于90~160fl 的单个核细胞区,又称为中间型细胞。
仪器根据各亚群占总体的比例,计算出各亚群细胞的百分率,医学教育网整理并同时计算各亚群细胞的绝对值,显示白细胞体积分布直方图。
3.血红蛋白测定原理当稀释血液中加入溶血剂后,红细胞溶解并释放出血红蛋白,血红蛋白与溶血剂中的某些成分结合形成一种血红蛋白衍生物,在特定波长(530~550nm)下比色,吸光度变化与稀释液中Hb 含量成正比,最终显示Hb 浓度。
不同类型血液分析仪,溶血剂配方不同,所形成血红蛋白衍生物不同,吸收光谱不同,如含氰化钾的溶血剂,与血红蛋白医学教育网整理作用后形成氰化血红蛋白,其最大吸收峰接近540nm。
白细胞计数一、实验目的:掌握手工法白细胞计数原理、计算方法及临床意义,熟悉仪器法白细胞计数的基本步骤,对照手工法和仪器法的优点和缺点,熟悉计数板结构和基本用法。
二、实验器械:计数板,显微镜,全自动血细胞分析仪,一次性定量采血管,一次性采血针,盖玻片,小试管,刻度吸管,75%酒精,碘酒等。
三、实验试剂:1,手工法:2%冰乙酸;2,仪器法:血细胞稀释液。
四、实验原理:1,手工法:即显微镜计数法。
2%冰乙酸一方面破坏红细胞,另一方面保持白细胞形态完整。
2,仪器法:电阻抗法或激光散射法。
五、实验操作:(一)手工法:1,准备:加0.38ml2%冰乙酸于小试管中;2,采血:消毒皮肤,一次性采血针采血,第一滴血弃去,轻轻挤压,用一次性定量采血针采手指血20ul,认真消毒。
3,稀释:立即将20ul全血轻轻注入0.38ml2%冰乙酸里,轻轻反复抽取数次,洗净吸管内的残余血液,轻轻摇动试管,充分混匀,血液被稀释20倍。
4,充池:用吸管吸取已充分混匀的稀释液注入计数池中,静置2~3分钟,待白细胞完全下沉稳定后进行计数。
5,计数:在低倍镜下,调暗光进行读数,计数四角4个大方格中所有的白细胞数,1个大方格含有16个小方格,计数时按一定顺序,以免重计或漏计,总白细胞数为a。
6,计算:WBC=(a/4)·20/0.1ul(二)仪器法:按稀释键,取稀释液到样品中,如上法采血20ul,注入仪器血细胞稀释液中,轻轻摇动样品杯,充分混匀,静置5分钟后若无悬浮物即可进行仪器计数。
六、实验结果:1,手工法:WBC=XXXXX2,仪器法:(仪器报告图)七、实验注意事项:1,严格一人一针管,避免交叉感染;2,实验各个阶段及所用器材须洁净;3,稀释时反复抽取的动作须轻微,避免吸球内杂质污染稀释液;4,充池一次完成,避免产生气泡和细胞分布不均;5,采血迅速,避免凝固,血凝固后不能计数且不能上机。