【CN109811031A】一种新型鼠李糖乳杆菌鉴定方法【专利】
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专利名称:一种鼠李糖乳杆菌保护剂及其应用
专利类型:发明专利
发明人:毛新芳,吴美玲,贺愉岚,殷豪,刘楚琪,唐绪访,杨建华申请号:CN202010457847.8
申请日:20200526
公开号:CN111826305A
公开日:
20201027
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明提供一种鼠李糖乳杆菌保护剂,通过选用光滑鳖甲抗冻蛋白基因导入载体后表达获得TrxA‑ApAFP914重组抗冻蛋白制备鼠李糖乳杆菌保护剂,通过使用本发明提供的含有40μg/mL TrxA‑ApAF P914重组抗冻蛋白的199μL鼠李糖乳杆菌保护剂,与现有的10%甘油、Tris‑HCl、BSA相比较‑80℃、‑20℃保存鼠李糖乳杆菌的存活率均显著提升,在45℃的加热条件下鼠李糖乳杆菌的存活率也未显著降低,利用该重组蛋白对鼠李糖乳杆菌能够进行保护,对于鼠李糖乳杆菌菌种应用技术领域具有广泛的应用价值。
申请人:四川轻化工大学
地址:643000 四川省自贡市汇东学院街180号
国籍:CN
代理机构:西安亚信智佳知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人:段国刚
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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910297977.7(22)申请日 2019.04.15(83)生物保藏信息CGMCC No.16002 2018.06.22(71)申请人 内蒙古农业大学地址 010000 内蒙古自治区呼和浩特市昭乌达路306号(72)发明人 钟智 张和平 孙志宏 李伟程 高旭 (74)专利代理机构 北京高沃律师事务所 11569代理人 代芳(51)Int.Cl.C12Q 1/689(2018.01)C12Q 1/6851(2018.01)C12Q 1/06(2006.01)C12Q 1/04(2006.01)C12N 15/11(2006.01)C12R 1/225(2006.01) (54)发明名称定性和/或定量检测鼠李糖乳杆菌的特异性引物、试剂盒和方法(57)摘要本发明涉及定性和/或定量检测鼠李糖乳杆菌的特异性引物、试剂盒和方法,属于基因工程技术领域。
本发明所述特异性引物包括上游引物M9F和下游引物M9R;所述上游引物M9F的序列如SEQ ID NO.1所示;下游引物M9R的序列如SEQ IDNO.2所示。
本发明所述特异性引物能够实现对鼠李糖乳杆菌M9快速准确地定性、定量检测,特异性好、灵敏度高、稳定性好、重复性好。
权利要求书1页 说明书5页序列表2页 附图2页CN 109943655 A 2019.06.28C N 109943655A权 利 要 求 书1/1页CN 109943655 A1.用于定性和/或定量检测鼠李糖乳杆菌M9的特异性引物,其特征在于,所述特异性引物包括上游引物M9F和下游引物M9R;所述上游引物M9F的序列如SEQ ID NO.1所示;下游引物M9R的序列如SEQ ID NO.2所示。
2.基于权利要求1所述特异性引物的定性和/或定量检测鼠李糖乳杆菌M9的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的特异性引物。
专利名称:一种鉴定植物乳杆菌的方法
专利类型:发明专利
发明人:姜毓君,满朝新,诸晓强,迟涛,胡博韬,房玉国,王旻,秦兰霞,周艳秋,韩琳琳,胡惠秩
申请号:CN201010142011.5
申请日:20100408
公开号:CN101812521A
公开日:
20100825
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:一种鉴定植物乳杆菌的方法,它涉及一种鉴定方法。
本发明解决了现有植物乳杆菌的鉴定方法周期长、成本高的问题。
方法:一、用一条含有22个碱基的引物,进行PCR扩增;二、电泳检测,即实现了植物乳杆菌的鉴定。
本发明的鉴定方法周期短,仅需要2个小时左右就完成了鉴定,与现有的鉴定方法相比,本发明的鉴定方法不需要特别复杂的仪器和数据处理,就可将植物乳杆菌区分出来,鉴定成本低。
申请人:黑龙江省乳品工业技术开发中心
地址:150001 黑龙江省哈尔滨市南岗区学府路337号
国籍:CN
代理机构:哈尔滨市松花江专利商标事务所
代理人:金永焕
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(10)申请公布号 CN 102016005 A(43)申请公布日 2011.04.13C N 102016005 A*CN102016005A*(21)申请号 200980109757.1(22)申请日 2009.03.18CNCM I-3690 2006.11.09***********.03.19FRC12N 1/20(2006.01)A23L 1/30(2006.01)C12R 1/225(2006.01)(71)申请人达能日尔维公司地址法国巴黎(72)发明人伊莎贝尔·尚博阿特姆·赫列布尼科夫安妮-凯瑟琳·维兰詹弗兰科·格龙波内蒂埃里·圣丹尼斯(74)专利代理机构北京集佳知识产权代理有限公司 11227代理人顾晋伟 田旸(54)发明名称鼠李糖乳杆菌的菌株(57)摘要本发明涉及鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)的新菌株,其具有抗微生物及免疫调节特性,还涉及含有所述菌株的组合物。
(30)优先权数据(85)PCT申请进入国家阶段日2010.09.19(86)PCT申请的申请数据PCT/FR2009/000284 2009.03.18(87)PCT申请的公布数据WO2009/122042 FR 2009.10.08(83)生物保藏信息(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页 说明书 10 页 附图 2 页1.一种具有抗微生物及免疫调节特性的鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)菌株,其特征在于它是以保藏号I-3690保藏于CNCM的菌株。
2.一种具有抗微生物和/或免疫调节特性的鼠李糖乳杆菌菌株,其特征在于它能够通过诱变或遗传转化从权利要求1所述的菌株获得。
3.一种具有抗微生物和/或免疫调节特性的细胞级分,其特征在于它能够从权利要求1和2中任一项所述的鼠李糖乳杆菌菌株获得。
[19]中华人民共和国国家知识产权局[12]发明专利申请公布说明书[11]公开号CN 101407835A [43]公开日2009年4月15日[21]申请号200710046977.7[22]申请日2007.10.12[21]申请号200710046977.7[71]申请人统一企业(中国)投资有限公司地址200050上海市长宁区兆丰广场33楼共同申请人统一企业(中国)投资有限公司昆山研究开发中心[72]发明人李正华 顾瑞霞 陈顺利 余哲礼 席文博沈琴 [74]专利代理机构上海专利商标事务所有限公司代理人徐迅[51]Int.CI.C12Q 1/68 (2006.01)C12Q 1/04 (2006.01)C12N 15/11 (2006.01)权利要求书 2 页 说明书 29 页 附图 3 页[54]发明名称检测鼠李糖乳杆菌的遗传标记和方法[57]摘要本发明属于分子生物学领域,公开了可用于鉴定鼠李糖乳杆菌LV108的引物,所述引物可从鼠李糖乳杆菌LV108的基因组DNA中扩增出具有特定大小的DNA片段,而从与鼠李糖乳杆菌LV108亲缘关系接近的多种其它鼠李糖乳杆菌基因组DNA中均无法扩增获得该特定大小的DNA片段。
本发明还公开了基于所述随机引物检测待测菌株是否是鼠李糖乳杆菌LV108的方法以及含有所述引物的试剂盒。
200710046977.7权 利 要 求 书第1/2页 1.一种引物,其特征在于,所述的引物具有SEQ ID NO:19所示的核苷酸序列。
2.一种鉴定鼠李糖乳杆菌LV108的方法,其特征在于,所述方法包括: 以待测菌株的基因组DNA为模板,以权利要求1所述的引物进行PCR扩增;若扩增产物中含有650±10bp、500±10bp、和300±10bp的特异性DNA 片段,则该菌株是鼠李糖乳杆菌。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述方法进一步还包括步骤: 以待测菌株的基因组DNA为模板,以具有SEQ ID NO:4所示核苷酸序列的引物进行PCR扩增;若扩增产物中含有850±10bp的特异性DNA片段,则该菌株是鼠李糖乳杆菌;和/或以待测菌株的基因组DNA为模板,以具有SEQ ID NO:39所示核苷酸序列的引物进行PCR扩增;若扩增产物中含有800±10bp的特异性DNA片段,则该菌株是鼠李糖乳杆菌;和/或以待测菌株的基因组DNA为模板,以具有SEQ ID NO:30所示核苷酸序列的引物进行PCR扩增;若扩增产物中含有300±10bp的特异性DNA片段,则该菌株是鼠李糖乳杆菌。
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010776941.X(22)申请日 2020.08.05(71)申请人 厦门惠盈动物科技有限公司地址 361000 福建省厦门市集美区灌口大道3108号(72)发明人 庄若飞 林松泉 林章秀 李惠静 庄建军 (74)专利代理机构 厦门市精诚新创知识产权代理有限公司 35218代理人 李宁(51)Int.Cl.C12N 1/20(2006.01)C12N 1/02(2006.01)C12N 1/04(2006.01)C12N 11/10(2006.01)C12R 1/225(2006.01)(54)发明名称一种鼠李糖乳杆菌菌粉的制备方法(57)摘要本发明提供了一种鼠李糖乳杆菌菌粉的制备方法,将鼠李糖乳杆菌发酵培养液通过菌体浓缩富集再与保护剂混合均匀后,通过喷雾干燥制备得到菌粉制剂。
其中发酵液鼠李糖乳杆菌活菌数可达1.0*1010CFU/mL以上,喷雾干燥所得菌粉活菌数达1.0*1011CFU/g以上。
本发明的制备方法解决了高成本、低活菌、保质期短等问题,用海藻糖与海藻酸钠做保护剂,可以把菌粉与外界环境隔绝,同时很好的解决了因脱脂奶粉暴露空气中,吸潮、发粘等现象,且菌液干燥的过程即为菌体包被过程。
制备的鼠李糖乳杆菌菌粉制剂,具有高活菌数、能耐胃酸、胆盐,且能有效抑制有害菌的生长,改善肠道微生态环境。
权利要求书1页 说明书6页CN 111826324 A 2020.10.27C N 111826324A1.一种鼠李糖乳杆菌菌粉的制备方法,其特征在于:第一步,菌种活化与种子液制备从-80℃冰箱取出2mL菌种冻存管,接种于装液量900mL/1L的液体MRS培养基,于恒温摇床180rpm/min,30-40℃厌氧培养18-24h;第二步,发酵液制备将上述鼠李糖乳杆菌种子液按5%接种量接种进入一级发酵液,装液量为90L/100L,30-40℃,180rpm/min,厌氧条件下培养18-24h;后将一级发酵液移种进入二级发酵液,装液量为1000L/1500L,30-40℃,180rpm/min,厌氧条件下培养18-36h;所述一级发酵液与二级发酵液培养基配置如下:葡萄糖30-50g/L、酿酒酵母提取物10-20g/L、磷酸氢二钾2-5g/L、硫酸锰0.05-0.1g/L、氯化铵2-5g/L、碳酸钙5-10g/L,培养基于121℃灭菌20min,通水冷却至30-40℃备用;第三步,发酵液浓缩、包被上述发酵液经10nm规格陶瓷膜过滤设备处理,得到菌体浓缩液,其固含量为10-30%;再按菌体浓缩液所得重量,加入5-10%脱脂奶粉、1-5%海藻糖作为保护剂及0.2-0.5%海藻酸钠作为包被剂,溶解、混合均匀;第四步,喷雾干燥采用离心式喷雾干燥设备,条件设置为进风温度110-120℃,出风温度60-80℃,该条件下得到的干粉即为菌粉。
专利名称:一株鼠李糖乳杆菌及其应用专利类型:发明专利
发明人:张阳,潘芬,蒋彪,杨帆,湛剑龙申请号:CN201910686679.7
申请日:20190729
公开号:CN110295130A
公开日:
20191001
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明属于益生菌技术领域,具体涉及到一株具有调节肠道菌群和抗过敏功能的鼠李糖乳杆菌及其应用。
所述鼠李糖乳杆菌具体为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)nbk‑W120,保藏编号为CGMCC No.16873,该菌株既可以维持机体肠道菌群的稳态,又具有抗过敏功能的鼠李糖乳杆菌及其应用,口服该鼠李糖乳杆菌一段时间,能有效调节机体肠道菌群,预防和控制过敏。
申请人:诺佰克(武汉)生物科技有限公司
地址:430090 湖北省武汉市汉南区纱帽街育才路551号第四幢第二层
国籍:CN
代理机构:北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人:栗华楠
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(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202210256797.6(22)申请日 2022.03.16(83)生物保藏信息CCTCC No:M2020600 2020.10.19(71)申请人 镇江天益菌工生物有限公司地址 212132 江苏省镇江市新区港南路300号5幢(72)发明人 陶旭 贾长生 郦军虎 李珮铷 (74)专利代理机构 南京中律知识产权代理事务所(普通合伙) 32341专利代理师 沈振涛(51)Int.Cl.C12N 1/20(2006.01)A61K 35/747(2015.01)A61P 31/04(2006.01)A23C 9/123(2006.01)A23L 2/38(2021.01)A23L 11/50(2021.01)A23L 13/40(2016.01)A23L 19/00(2016.01)A23L 33/135(2016.01)C12R 1/225(2006.01) (54)发明名称一种能够预防和或治疗幽门螺杆菌感染的鼠李糖乳杆菌及其应用(57)摘要本发明公开了一种能够预防和或治疗幽门螺杆菌感染的鼠李糖乳杆菌及其应用,所述鼠李糖乳杆菌经鉴定为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus),菌株名为LiGG,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2020年10月19日,保藏编号为CCTCC No:M2020600。
此鼠李糖乳杆菌LiGG能够抑制幽门螺杆菌,具体体现在:(1)鼠李糖乳杆菌LiGG上清液对幽门螺杆菌的抑菌圈大小可达13.56mm;(2)鼠李糖乳杆菌LiGG可显著降低幽门螺杆菌对AGS胃癌细胞的粘附力,可见,鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)LiGG在抑制幽门螺杆菌以及制备幽门螺杆菌抑制剂方面具有巨大的应用前景。
权利要求书1页 说明书8页序列表1页 附图1页CN 114540243 A 2022.05.27C N 114540243A1.一种鼠李糖乳杆菌,其特征在于,经鉴定为鼠李糖乳杆菌(La c t o ba c i l l u s rhamnosus),菌株名为LiGG,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2020年10月19日,保藏编号为CCTCC No:M2020600。
专利名称:一种母乳源鼠李糖乳杆菌及其应用
专利类型:发明专利
发明人:康文丽,汪家琦,周洪波,潘丽娜,颜卫彬,李辉宇,戴智勇
申请号:CN202110486399.9
申请日:20210430
公开号:CN113046276B
公开日:
20220318
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明涉及微生物技术领域,公开了一种母乳源鼠李糖乳杆菌及其应用。
本发明所述鼠李糖乳杆菌保藏编号为CGMCCNO.21815。
本发明提供的鼠李糖乳杆菌AUH2101来源于中国健康母乳,不仅能产生较高浓度的乳酸和过氧化氢两种抑菌物质,对大多数抗生素敏感,还具有胃肠道条件耐受能力和良好的重金属镉耐受性及去除能力,进而使其具有良好的抑菌潜力、较低的潜在风险和良好的排镉功能,有望被开发并应用于食品行业。
申请人:澳优乳业(中国)有限公司,中南大学
地址:410299 湖南省长沙市望城区旺旺东路2号
国籍:CN
代理机构:北京集佳知识产权代理有限公司
代理人:刘猛
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专利名称:一种鼠李糖乳杆菌及其应用专利类型:发明专利
发明人:张冲,钱鹏,何厚龙
申请号:CN201910734890.1
申请日:20190809
公开号:CN110511887A
公开日:
20191129
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明公开了一种鼠李糖乳杆菌,该菌株命名为鼠李糖乳杆菌GBL01(Lactobacillus rhamnosus GBL01),已于2018年03月25日保藏于中国典型培养物保藏中心,中国.武汉.武汉大学,保藏编号为CCTCC NO:M 2018122。
本发明的菌种对于垃圾填埋场、中转站及禽畜养殖场产生的臭气具有很好的去除作用,同时对甲醛、甲苯和TVOC也有一定的去除效果,在去除臭气的同时不造成二次污染,并且由于该菌的安全性,适合在垃圾中转站、填埋场、制药厂和禽畜养殖厂等推广应用。
申请人:浙江加百列生物科技有限公司
地址:313100 浙江省湖州市长兴经济技术开发区高铁路669号国家大学科技园6号楼
国籍:CN
代理机构:杭州仁杰专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人:沈刚
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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910162463.0
(22)申请日 2019.03.05
(71)申请人 扬州大学
地址 225009 江苏省扬州市大学南路88号
申请人 丹阳市康力乳制品有限公司
(72)发明人 顾瑞霞 张玉律 张臣臣 黄玉军
陈霞 陈大卫 印伯星 管玉新
张兆俊
(74)专利代理机构 扬州苏中专利事务所(普通
合伙) 32222
代理人 沈志海
(51)Int.Cl.
C12Q 1/04(2006.01)
C12R 1/225(2006.01)
(54)发明名称一种新型鼠李糖乳杆菌鉴定方法(57)摘要一种新型鼠李糖乳杆菌鉴定方法,属于微生物发酵及食品加工领域,利用生长曲线对本实验室保藏的12株鼠李糖乳杆菌进行区分,严格限定菌株传代时间,对12株菌进行3次传代,使菌株的生长状态稳定,利用自动生长曲线分析仪在600nm波长处测定12株菌在不同碳源条件下的光密度值,连续测定48小时,采用主成分分析法对测得的生长曲线进行分析,综合考虑3种碳源,鉴定方法科学,原理清晰,与现有的核糖体分型技术操作流程相比,本发明操作流程为菌株纯化-同步-生长曲线测定-分析,操作简单,成本较低,建立了快捷可靠的株水平上的鼠李糖乳杆菌区
分手段。
权利要求书1页 说明书7页 附图2页CN 109811031 A 2019.05.28
C N 109811031
A
权 利 要 求 书1/1页CN 109811031 A
1.一种新型鼠李糖乳杆菌鉴定方法,其特征在于,所述鉴定方法如下:
(1)鼠李糖乳杆菌培养
利用生长曲线对12株鼠李糖乳杆菌进行区分,无菌条件下,将12株菌的菌粉接种于MRS 肉汤培养基,37℃培养24小时,将复苏的菌液在MRS固体培养基上划线纯化;
(2)鼠李糖乳杆菌形态观察
将纯化的菌落转接至MRS培养基,37℃培养24小时,收集1mL菌液,6000g离心5分钟,用纯净水重悬菌体;吸取10μL至载玻片,固定制片,染色,在光学显微镜100倍油镜下观察菌体形态;
(3)鼠李糖乳杆菌生长曲线测定
严格限定菌株传代时间,对12株菌进行3次传代,使菌株的生长状态稳定,将活化的菌液按3%的接种量接种到不同碳源的MRS肉汤培养基中,混匀后用移液枪精确吸取300μL至蜂窝培养板,每株菌做三个平行样,然后放入微生物自动生长曲线分析仪,参数设置为37℃培养48h,每隔15min读取一次数据,重复试验5次;
(4)鼠李糖乳杆菌生长曲线比较
选取所有测定的时间点及其对应的OD600nm值,利用SIMCA 14.1软件进行分类主成分分析,考察不同菌株之间的生长情况的差异,采用分类PCA的方法对各个菌株所有时间点的OD600nm值进行处理,将每一株鼠李糖乳杆菌分为一类,共12类,直观考察各组之间的相似和差异情况,样本与所选模型的相似度>0.05,记为“×”,相似度<0.05,记为“√”;
(4-1)葡萄糖作碳源,PCA分类法的比较
在葡萄糖作碳源时,PCA分类法的效果较差,151m和hsryfm1301相似度高,BG和F相似度高,Bm01和F、grx19、LV1、SP1相似度高,CRL1505和F相似度高,F和grx19、hsryfm1301、LV1相似度高,grx19和LV1、SP1相似度高,LV1和SP1相似度高,其它菌株均可区分,将12株菌分为5个类型;
(4-2)乳糖作碳源,PCA分类法的比较
在乳糖作碳源时,Bm01和F、LV1相似度高,F和grx10、grx19、LV1相似度高,其它菌株均可区分,将12株菌分为9个类型;
(4-3)蔗糖作碳源,PCA分类法的比较
在蔗糖作碳源时,只有151m和hsryfm1301相似度高,BG和grx10相似度高,其它菌株均可区分,将12株菌分为10个类型;
(5)鼠李糖乳杆菌菌株的区分
葡萄糖是大多数乳酸菌的偏爱碳源,因而葡萄糖对菌株的区分能力不佳,乳糖和蔗糖的区分能力较好,综合三种碳源下,在试验进行的12株鼠李糖乳杆菌菌株中,均可利用生长曲线数据进行区分。
2。