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常见分子生物学实验方法1.DNA/RNA提取DNA和RNA提取是进行分子生物学实验的第一步。
常见的提取方法包括酚/氯仿法、离心法、基于载体的提取等。
这些方法可以从细胞、组织或血液中提取出高质量的DNA或RNA用于后续实验。
2.PCR扩增聚合酶链反应（PCR）是一种常用的体外DNA扩增技术，用于复制特定DNA片段。
通过PCR，可以从少量的DNA样本中扩增目标序列，并与特异性引物一起进行扩增。
PCR具有高度特异性和灵敏度，广泛应用于基因克隆、基因检测和定量分析等领域。
3.基因克隆基因克隆是指将特定目标基因从一个有机体中分离并插入到另一个有机体中。
常见的基因克隆方法包括限制性内切酶消化、连接、转化、筛选等。
基因克隆可以用于生成重组DNA、构建表达载体、设计并构建突变基因、重组蛋白质等。
4.蛋白质表达和纯化蛋白质表达和纯化是研究蛋白质功能和结构的重要步骤。
常见的表达系统包括细菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞等。
表达后，通过亲和纯化、离子交换层析、凝胶过滤等手段纯化所得蛋白质。
5.基因敲除/敲入基因敲除或敲入是通过改变目标基因的DNA序列来研究基因功能的方法。
基因敲除可以通过CRISPR-Cas9系统、RNA干扰、转座酶介导的基因敲入等方法实现。
6.DNA测序DNA测序是分析DNA序列的方法。
常见的测序技术包括Sanger测序、下一代测序（包括Illumina、Ion Torrent、PacBio等）等。
DNA测序可以应用于基因组学、转录组学、评估其中一区域的突变等领域。
7.西方印迹西方印迹是一种蛋白质检测方法，用于检测和定量特定蛋白质的存在和表达水平。
通过电泳将蛋白质分离，然后转移到膜上，并使用特异性抗体与目标蛋白质结合，最后通过酶标记二抗或荧光二抗的检测。
8.荧光定量PCR荧光定量PCR（qPCR）是一种用于定量分析DNA或RNA浓度的方法。
通过特异性引物、探针与目标序列的结合，实时检测并记录PCR扩增产物的信号，进而测定起始目标序列的数量。
分子生物学的研究方法例题和知识点总结分子生物学是一门从分子水平研究生命现象、生命本质、生命活动及其规律的科学。
它的研究方法多种多样，下面我们将通过一些例题来深入理解这些方法，并对相关知识点进行总结。
一、核酸提取与纯化核酸包括 DNA 和 RNA，是分子生物学研究的重要对象。
提取和纯化高质量的核酸是后续实验的基础。
例题：从植物叶片中提取总 DNA，需要经过哪些步骤？知识点：1、破碎细胞：使用机械研磨、酶解法等破坏细胞壁和细胞膜，释放出核酸。
2、去除杂质：通过加入蛋白酶 K 去除蛋白质，用酚/氯仿抽提去除酚类、多糖等杂质。
3、沉淀核酸：常用乙醇或异丙醇沉淀 DNA，离心后获得核酸沉淀。
4、洗涤和溶解：用 70%乙醇洗涤沉淀去除盐分，干燥后用适当的缓冲液溶解。
二、PCR 技术（聚合酶链式反应）PCR 是一种用于扩增特定 DNA 片段的技术。
例题：设计一对引物用于扩增某基因的特定片段，需要考虑哪些因素？知识点：1、引物长度：通常为 18 25 个核苷酸。
2、碱基组成：G ＋ C 含量在 40% 60%之间，避免形成稳定的二级结构。
3、特异性：引物要与目的基因特异性结合，避免与其他序列有过多的同源性。
4、退火温度：根据引物的碱基组成计算退火温度，以保证扩增的特异性和效率。
PCR 的基本步骤包括：1、变性：高温使双链 DNA 解离为单链。
2、退火：降低温度，引物与单链 DNA 结合。
3、延伸：在 DNA 聚合酶的作用下，从引物 3'端开始合成新的DNA 链。
三、基因克隆基因克隆是将目的基因插入到载体中，导入宿主细胞进行复制和表达。
例题：简述构建重组质粒的过程。
知识点：1、目的基因获取：可以通过 PCR 扩增、从基因文库中筛选等方法获得。
2、载体选择：常见的载体有质粒、噬菌体等，要根据实验需求选择合适的载体。
3、酶切和连接：用相同的限制性内切酶分别切割目的基因和载体，然后用 DNA 连接酶将它们连接起来。
分子生物学研究方法
首先，核酸提取与分析是分子生物学的基础。
通过从生物体细胞中提
取核酸，可以获得DNA和RNA的样本，为后续的实验提供原料。
核酸的分
析方法包括凝胶电泳和聚合酶链式反应（PCR）等。
凝胶电泳可以根据核
酸分子的大小和电荷差异进行分离，从而获得目标核酸的纯度和浓度信息。
PCR是一种体外扩增DNA的方法，可以在短时间内从少量的DNA模板扩增
到大量的DNA产物，为后续实验提供更多的材料。
其次，蛋白质的表达与纯化是分子生物学的另一个重要研究方法。
蛋
白质是生物体内功能的执行者，因此研究蛋白质的表达与功能对于揭示生
命活动的机理具有重要意义。
蛋白质的表达通常利用重组DNA技术，将目
标基因克隆到可表达载体中，并转化到细菌或其他表达系统中。
随后，通
过诱导表达、细胞破碎、蛋白质纯化等步骤，最终获得目标蛋白质的产物。
蛋白质的纯化方法包括亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤等多种方法，
可以根据蛋白质的性质和特点选择合适的方法进行纯化。
另外，生物信息学和计算生物学方法也是分子生物学研究的重要手段。
随着DNA测序技术的快速发展，大规模的基因组、转录组和蛋白质组数据
被不断积累，因此需要开发合适的计算方法进行存储、管理和分析这些数据。
生物信息学和计算生物学的研究方法涉及到生物数据库的建立和维护、序列比对、基因和蛋白质结构预测、分子动力学模拟等等。
这些方法可以
帮助研究人员更好地理解和分析分子生物学数据，从而揭示生命活动和疾
病发生发展的机理。
一．名词解释IP（免疫沉淀、免疫印迹）：是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。
这个实验是用特异性抗体结合细胞裂解液中的目的蛋白，洗涤后解离特异性抗体和目的蛋白质，经聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），最后用Western blot分析目的蛋白质。
这种方法可以分析溶液中的、细胞内的、结合在细胞膜上的蛋白质或者受体，但只能是定性或者半定量的实验。
NLS（核定位序列）：核定位信号是另一种形式的信号肽, 可位于多肽序列的任何部分。
一般含有4～8个氨基酸, 且没有专一性, 作用是帮助亲核蛋白进入细胞核。
可分为单一型NLS和双分型NLS。
单一型NLS，由一段连续的碱性氨基酸序列排列而成（RKKKRKV），双分型NLS，有两段碱性氨基酸被中间10~12GE 非特异性氨基酸所分割而形成，（KRPAA TKKAGQAKKKKLDK）。
SUMO（small ubiquitin-related modifier）：是一种小的泛素相关修饰蛋白，它与泛素在序列上虽只有18%相同，但在二级结构和三级结构上有惊人的相似。
SUMO家族成员都有独特的N端氨基酸序列和C端外延序列。
SUMO 化（sumoylation）的功能与泛素化（ubiquitination）不同，它并不是蛋白降解，反而加强它们的稳定性或调解它们在细胞内的定位和分布，甚至与凋亡相关。
二．问答题1.什么是近交系小鼠，它们有什么特征？有哪些常见的近交系小鼠？答：近交系小鼠：是经连续20代（或以上）的全同胞兄妹交配（或亲代与子代交配）培育而成的小鼠，品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先。
特性：①基因位点的纯合性（Homozygosity）近交系小鼠中任何一个基因位点上纯合子的概率高达99％，因而也能繁殖出完全一致的纯合子后代。
②遗传组成的同源性（Isogenicity）品系内所有动物个体都可追溯到一对共同祖先，个体在遗传上是同源的，基因型完全一致。
分子生物学的研究方法分子生物学是生命科学领域中的重要分支，研究生物大分子（如DNA、RNA、蛋白质等）的结构、功能及其在生物体内的相互作用关系。
分子生物学的研究方法随着技术的不断进步，越来越高效、精准。
本文将介绍几种常见的分子生物学研究方法。
1. PCR技术PCR技术是分子生物学中最常用的研究方法之一。
PCR技术简单来说就是以DNA为模板，通过循环加热和降温的方式使DNA 分离成两条单链，并利用DNA聚合酶合成新的DNA分子。
通过PCR技术可以扩增目标DNA片段，为其他分子生物学研究提供了重要的基础。
PCR技术的具体操作是：首先选择适当的引物，引物是一段长度为15~30个核苷酸的单链DNA，与目标DNA上的两端互补，可用来定向扩增DNA。
然后将待扩增的DNA样品与引物混合，加入适当浓度的DNA聚合酶和反应缓冲液，反复加热降温，反应若干个周期后，就可以得到扩增的DNA产物。
近年来，PCR技术不断发展，出现了许多高级变体，如RT-PCR技术和qPCR技术等。
这些技术在分子生物学、医学以及疾病诊断等领域得到了越来越广泛的应用。
2. 质谱技术质谱技术是一种分析化学技术，用于测定化合物的分子量、化学式以及数量等信息。
在分子生物学中，质谱技术主要用于分析蛋白质和核酸的结构和功能。
质谱技术的基本原理是将待测样品中的分析物（如蛋白质、核酸等）转化成气态或溶液状态下的离子，并利用质谱仪测定离子的质荷比。
通过离子的质谷比可以确定分析物的分子量、化学式以及数量等信息。
质谱技术的应用范围非常广泛，包括蛋白质组学、代谢组学以及疾病诊断等领域。
随着技术的不断进步，质谱技术也变得更加高效、精准，未来将有更多的应用。
3. 基因编辑技术基因编辑技术近年来获得了长足发展，它可以通过将基因序列中的单个碱基替换、插入或删除，来打造定制化的基因组序列。
这种技术有巨大的应用潜力，可以用于人类基因疾病的治疗以及植物、动物品种改良等领域。
基因编辑技术最常用的手段是CRISPR-Cas9系统，它是一种通过结合RNAs和酶分子来定向剪切DNA的系统。
生物学中的分子生物学研究方法引言：生物学中的分子生物学研究方法是一门重要的学科，它通过研究生物体内分子的结构、功能和相互作用，揭示生命的本质和机制。
本文将从分子生物学的基础知识、实验技术和应用领域三个方面，探讨分子生物学研究方法的发展与应用。
一、分子生物学的基础知识1. DNA的结构与功能DNA是生物体内最基本的遗传物质，它的结构和功能对于理解生命的本质至关重要。
本节将介绍DNA的双螺旋结构、碱基配对规则以及DNA的复制、转录和翻译等功能。
2. RNA的结构与功能RNA在细胞中扮演着重要的角色，包括mRNA、tRNA和rRNA等。
本节将介绍RNA的结构与功能，以及RNA在基因表达和蛋白质合成中的作用。
3. 蛋白质的结构与功能蛋白质是生物体内最重要的功能分子，其结构和功能多样性决定了生物体的形态和功能。
本节将介绍蛋白质的结构层次、蛋白质的折叠和功能以及蛋白质与其他分子的相互作用等内容。
二、分子生物学的实验技术1. DNA测序技术DNA测序技术是分子生物学研究的重要手段，它可以揭示DNA序列的信息，从而对基因组进行分析和研究。
本节将介绍传统的Sanger测序技术和新一代测序技术的原理和应用。
2. PCR技术PCR技术是一种重要的DNA扩增技术，它可以在体外快速扩增特定DNA片段，为分子生物学研究提供了强有力的工具。
本节将介绍PCR技术的原理、反应体系和应用领域。
3. 基因克隆技术基因克隆技术是分子生物学研究中常用的技术，它可以将特定基因片段插入到载体中，并在宿主细胞中进行复制和表达。
本节将介绍基因克隆技术的原理、方法和应用。
4. 蛋白质分离与鉴定技术蛋白质分离与鉴定技术是研究蛋白质结构和功能的重要手段，包括SDS-PAGE、Western blotting和质谱分析等。
本节将介绍这些技术的原理、方法和应用。
三、分子生物学的应用领域1. 基因组学基因组学是研究生物体基因组的结构和功能的学科，它包括基因组测序、基因注释和基因组比较等内容。
一．名词解释IP（免疫沉淀、免疫印迹）：是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。
这个实验是用特异性抗体结合细胞裂解液中的目的蛋白，洗涤后解离特异性抗体和目的蛋白质，经聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），最后用Western blot分析目的蛋白质。
这种方法可以分析溶液中的、细胞内的、结合在细胞膜上的蛋白质或者受体，但只能是定性或者半定量的实验。
NLS（核定位序列）：核定位信号是另一种形式的信号肽, 可位于多肽序列的任何部分。
一般含有4～8个氨基酸, 且没有专一性, 作用是帮助亲核蛋白进入细胞核。
可分为单一型NLS和双分型NLS。
单一型NLS，由一段连续的碱性氨基酸序列排列而成（RKKKRKV），双分型NLS，有两段碱性氨基酸被中间10~12GE 非特异性氨基酸所分割而形成，（KRPAA TKKAGQAKKKKLDK）。
SUMO（small ubiquitin-related modifier）：是一种小的泛素相关修饰蛋白，它与泛素在序列上虽只有18%相同，但在二级结构和三级结构上有惊人的相似。
SUMO家族成员都有独特的N端氨基酸序列和C端外延序列。
SUMO 化（sumoylation）的功能与泛素化（ubiquitination）不同，它并不是蛋白降解，反而加强它们的稳定性或调解它们在细胞内的定位和分布，甚至与凋亡相关。
二．问答题1.什么是近交系小鼠，它们有什么特征？有哪些常见的近交系小鼠？答：近交系小鼠：是经连续20代（或以上）的全同胞兄妹交配（或亲代与子代交配）培育而成的小鼠，品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先。
特性：①基因位点的纯合性（Homozygosity）近交系小鼠中任何一个基因位点上纯合子的概率高达99％，因而也能繁殖出完全一致的纯合子后代。
②遗传组成的同源性（Isogenicity）品系内所有动物个体都可追溯到一对共同祖先，个体在遗传上是同源的，基因型完全一致。
③表型的一致性（Uniformity）由于基因型的一致，近交系个体的表型也是相同的，在实验中用较少的近交系动物就可获得具有统计意义的结果。
④对外界因素的敏感性（Sensitivity）由于近交系某些生理功能的稳定性降低，对外界环境因素变化的反应更为敏感，这使近交系更容易被制备成疾病模型动物。
供研究使用。
⑤遗传特征的可辨性（Identifiability）每个近交系都有自己的标准遗传概貌，选择适当的遗传监测方法，即可分辨各个近交系。
⑥遗传组成的独特性（Individuality）每个近交系都具有独特的遗传组成和独特的生物学特性。
由于这一特点，采用某近交系所作的实验结果往往不直接代表整个种属的反应，而必须在多个近交系作动物实验，以增加其代表性。
⑦分布的广泛性（Extensity）同一品系在不同地区不同国家都广泛存在，引种方便并利于研究结果的交流。
⑧背景资料的可查性（Accessibility）具有一份完整的研究背景资料，便于实验设计和结果分析。
国内外常用近交系小鼠：①BALB/c系：乳腺癌发病率低，与其他品系相比血压较高，对慢性肺炎敏感，对放射线特别敏感，繁殖期长。
②C57BL系：毛色黑色（隐性），乳腺癌发病率低，对化学致癌剂不敏感，全身照射后淋巴瘤发病率99～100％，干扰素产量高。
③129sv 系：毛色agouti 棕褐色（显性）④FVB 系：毛色白化⑤我国培育的小鼠近交系1946年，我国从印度Haggkine研究所引入小鼠，这是当今广泛应用的昆明种小鼠的原种。
2.简述C.elegans作为模式生物被用于研究生命科学的基本问题的优点及其局限性。
（10）答：优点：（1）经济以德，便于实验室培养（2）繁殖速度快（3）全身透明，可清楚直观的观察发育过程（4）雌雄同体的生活史类型，可以产生大量的“自交后代”（5）雄性个体可用于杂交（遗传交配）（6）加入甘油作为防冻介质，线虫可长期保存于—80℃/液氮中（7）19000个基因，基因冗余少（8）复杂程度低，但具有组织和器官的分化（9）基因组已经完全测序（10）相关信息和资源丰富局限性（不足）：（1）生物化学研究困难（2）至今仍没有线虫相关的可用细胞系（3）特殊组织解剖分析困难3.什么叫免疫共沉淀。
（10）答：免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）：是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。
是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。
其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。
如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。
这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。
其优点为：（1）相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的，处于天然状态；（2）蛋白的相互作用是在自然状态下进行的，可以避免人为的影响；（3）可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。
缺点为：（1）可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质－蛋白质相互作用；（2）两种蛋白质的结合可能不是直接结合，而可能有第三者在中间起桥梁作用；（3）必须在实验前预测目的蛋白是什么，以选择最后检测的抗体，所以，若预测不正确，实验就得不到结果，方法本身具有冒险性。
实验流程为：（1）转染后24-48 h 可收获细胞，加入适量细胞裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上裂解30min, 细胞裂解液于4°C，最大转速离心30 min后取上清；（2）取少量裂解液以备Western blot分析，剩余裂解液加1μg相应的抗体加入到细胞裂解液，4°C缓慢摇晃孵育过夜；（3）取10μl protein A 琼脂糖珠，用适量裂解缓冲液洗3 次，每次3,000 rpm离心3 min；（4）将预处理过的10μl protein A 琼脂糖珠加入到和抗体孵育过夜的细胞裂解液中4°C 缓慢摇晃孵育2-4h，使抗体与protein A琼脂糖珠偶连；（5）免疫沉淀反应后，在4°C 以3,000 rpm 速度离心3 min，将琼脂糖珠离心至管底；将上清小心吸去，琼脂糖珠用1ml裂解缓冲液洗3－4次；最后加入15μl的2×SDS上样缓冲液，沸水煮5分钟；（6）SDS-PAGE, Western blotting或质谱仪分析。
三、简述题1.C-elegans两种转基因技术？该技术可用于解决什么问题？答：两种转基因技术：（1）显微注射法转基因该方法是将外源基因或体外构建的目的基因在显微操作仪下用极细的微吸管直接注射到活细胞中，已经成功的应用于大的青蛙卵、线虫、培养的哺乳动物细胞、哺乳动物胚胎、植物原生质和组织。
（2）粒子轰击法转基因（基因枪法）是物理性导入DNA得方法，用包裹DNA 的金属小颗粒轰击受体组织,使DNA 实现穿壁并被导入众多细胞中,称为“基因枪法”(或微粒轰击技术) . 包裹着DNA 的金属粒加速到一个很高的速度后(通常需要部分真空以减少颗粒的速度损失) 穿透受体组织,一般可以穿透2～3 层细胞。
解决的问题：（1）通过挽救一个突变表型（用野生型复制）来确定一个基因的功能（2）通过目的基因的报告者建立表达模式（3）借助过表达野生型基因或者突变基因来干扰生物过程（4）建立人类疾病的动物模型（5）生产药用蛋白（6）提高动物的抗病性、培育抗病品种（7）提高动物的生产性能3. 简述02年诺贝尔奖的研究贡献。
（王亚梅）答：２００２年诺贝尔生理学或医学奖分别授予了英国科学家悉尼·布雷内、美国科学家罗伯特·霍维茨和英国科学家约翰·苏尔斯顿，以表彰他们发现了在器官发育和“程序性细胞死亡”过程中的基因规则。
程序性细胞死亡是细胞一种生理性、主动性的“自觉自杀行为”，这些细胞死得有规律，似乎是按编好了的“程序”进行的，犹如秋天片片树叶的凋落，所以这种细胞死亡又称为“细胞凋亡”。
这３位获奖者的成果为其他科学家研究“程序性细胞死亡”提供了重要基础，后来科学家又在这一领域取得了一系列新成绩。
科学家们发现，控制“程序性细胞死亡”的基因有两类，一类是抑制细胞死亡的，另一类是启动或促进细胞死亡的。
两类基因相互作用控制细胞正常死亡。
如果能发现所有的调控基因，分析其功能，研究出能发挥或抑制这些基因功能的药物，那么就可加速癌细胞自杀，达到治疗癌症的目的，提高免疫细胞的生命力，达到抵御艾滋病的目的。
4.泛素化，哪年哪个领域的诺贝尔奖？蛋白泛素化过程？泛素化过程中E1、E2、E3、A蛋白酶体的作用。
答：２００４年诺贝尔化学奖授予以色列科学家阿龙·切哈诺沃、阿夫拉姆·赫什科和美国科学家欧文·罗斯，以表彰他们发现了泛素调节的蛋白质降解。
泛素化是对特异的靶蛋白进行泛素修饰的过程。
一些特殊的酶将细胞内的蛋白分类,从中选出靶蛋白分子。
泛素化修饰涉及泛素激活酶E1、泛素结合酶E2和泛素连接酶E3的一系列反应:(1)首先在ATP供能的情况下泛素激活酶(E1) 催化泛素C 末端的甘氨酸(Gly) , 形成泛素-腺苷酸中间产物, 激活泛素，然后激活的泛素被转移至E1酶的Cys 残基上。
(2)活化的泛素通过转酰基作用进一步转移到泛素结合酶(E2)上, 形成E2- 泛素巯基酯。
随后,E2酶和一些种类不同的泛素连接酶(E3)共同识别靶蛋白,对其进行泛素化修饰。
(3) E2- 泛素复合体接下来可以有两种方式与要降解的底物蛋白质结合: 一是直接从E2 转移给底物蛋白质形成泛素- 蛋白质复合体; 二是底物蛋白质首先与泛素连接酶(E3) 结合, 然后底物蛋白质与E2 转移的泛素结合。
E3酶的外形就像一个夹子,靶蛋白连接在中间的空隙内。
酶的左侧结构域决定靶蛋白的特异性识别,右侧结构域定位E2酶以转移泛素分子。
最终泛素- 蛋白质复合体主要是被一种沉降系数为26S 的蛋白酶体所识别降解, 少数被溶酶体和小泡内的酶降解。
同时由泛素C 末端水解酶释放泛素供再循环利用。
E1：激活泛素E2：可特意识别泛素，并与泛素结合，同时还具有识别E3的功能。
E3：特意识别靶蛋白，并将其传递给蛋白酶体降解。
E4：泛素链组装因子，结合泛素并催化E1、E2和E3的组装，对多聚泛素链的延长起重要作用。
蛋白酶体：有两个亚基α亚基主要用于底物识别，β亚基主要参与底物降解。
4.为了获得硕士学位，你需要通过生物化学的方法研究两种蛋白的相互作用。
请设计实验来获得蛋白复合物的化学计算(法)。
（10）答：要对样品进行生物化学研究，首先要进行样品结晶获得晶体晶体形成原理：形成规律——使熵最大化；使自由能最小化驱动力是非共价键——不是在溶液中形成；化学键比在溶液中强；是均匀的；把不同的分子弄乱是一种技术但并不是科学晶体形成的步骤：形成晶核——从低聚体开始；持续形成直到平衡（固液相互交换）；太多时会形成微晶体；太少时很少或者没有长晶体晶体生长——会有不同的时间、大小、数量和脆性长晶体的方法：蒸发扩散（最常用）——悬滴法；坐滴法扩散平衡——渗透；毛细现象：反扩散；微流体；立方晶相自动化——工业化规模、速度快影响晶体的因素：PH值和缓冲液类型浓度/天然沉降剂温度和温度波动离子浓度：主要盐浓度添加剂：金属盐、有机物和去垢剂配体、亚基、辅酶、抑制剂和促进剂大分子的纯度、稳定和浓度大分子来源：同源物还原或一氧化环境微生物中蛋白水解5.FXR、FGF调控胆固醇和胆酸的代谢途径？如何针对FGF降脂（胆固醇）。
