食用菌多糖提取的原理及方法
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香菇多糖的提取方法及应用香菇多糖是从香菇中提取的一种多糖类化合物,具有抗肿瘤、抗病毒、降血脂、降血糖等多种药理活性。
提取香菇多糖的方法主要包括水提法、酸提法、碱提法、酶解法等多种方法。
下面将对香菇多糖的提取方法及应用做详细介绍。
1. 水提法水提法是将香菇切碎后用水浸泡,通过水提取的方法获得香菇多糖的一种提取方法。
其优点是提取过程简单,设备要求低,且操作方便。
但缺点是提取率较低,且容易受到微生物污染。
2. 酸提法酸提法是将香菇切碎后用酸性溶液浸泡,通过酸的作用来提取多糖。
酸提取的优点是提取率高,但也会产生废液排放问题,同时酸性溶液容易对蛋白质产生影响。
3. 碱提法碱提法是将香菇切碎后用碱性溶液浸泡,通过碱的作用来提取多糖。
碱提取的优点是提取率高,同时对蛋白质影响较小。
但碱性溶液的使用需要注意对环境的影响,且碱性条件下易使多糖发生降解。
4. 酶解法酶解法是通过加入酶类来促进多糖的提取,能够有效地增加提取率。
但酶类的成本较高,同时酶解条件的控制较为严格。
提取得到的香菇多糖可以通过浓缩、絮凝、沉淀及净化等方法得到纯净的多糖产品。
香菇多糖的应用广泛,主要包括以下几个方面:1. 药品领域香菇多糖具有抗肿瘤、抗病毒的作用,被广泛应用于肿瘤治疗、免疫调节、抗病毒等方面。
临床研究表明,长期服用香菇多糖可以增强人体免疫力,减少感染病毒的风险。
2. 食品工业香菇多糖可作为功能性食品添加剂,提高食品的营养价值,增加食品的功能性。
例如可以将香菇多糖添加到饼干、饮料、果冻等食品中,以增强食品的健康功能。
3. 化妆品领域香菇多糖具有较好的保湿性,被应用于化妆品中具有很好的效果,如护肤乳液、面膜等产品中。
4. 其他领域香菇多糖还可以用于环保领域,例如用于废水处理,其能够起到絮凝剂的作用,帮助去除水中的杂质,达到净化水质的效果。
总而言之,香菇多糖的提取方法多样化,可以根据需要选择适合的提取方法,提取得到的多糖产品应用广泛,涉及药品、食品、化妆品等多个领域,具有很好的开发和利用前景。
一、实验目的1. 学习蘑菇多糖的提取方法;2. 掌握蘑菇多糖的鉴定与检测技术;3. 研究蘑菇多糖的生物活性。
二、实验原理蘑菇多糖是一种生物活性物质,具有多种生物学功能,如抗肿瘤、降血糖、增强免疫力等。
本实验采用水提醇沉法提取蘑菇多糖,并对其理化性质、结构特征和生物活性进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 蘑菇子实体:香菇、金针菇等;- 无水乙醇、丙酮、正己烷等有机溶剂;- 碘液、硫酸铜溶液等试剂;- pH计、紫外分光光度计等仪器。
2. 实验仪器:- 电子天平;- 磁力搅拌器;- 烘箱;- 冷冻离心机;- 超声波清洗器;- 离心管、烧杯等实验器材。
四、实验方法1. 蘑菇子实体的预处理将蘑菇子实体洗净,去除杂质,切碎,用蒸馏水浸泡过夜。
2. 蘑菇多糖的提取将浸泡好的蘑菇子实体加入蒸馏水中,搅拌提取2小时;将提取液过滤,收集滤液;将滤液用无水乙醇沉淀,离心分离;将沉淀物用蒸馏水溶解,重复上述沉淀、离心步骤,直至沉淀物基本溶解;将溶解后的沉淀物用丙酮沉淀,离心分离;将沉淀物用蒸馏水溶解,得蘑菇多糖粗品。
3. 蘑菇多糖的鉴定与检测(1)外观鉴定:蘑菇多糖粗品为白色粉末;(2)溶解性检测:蘑菇多糖粗品可溶于水、乙醇、丙酮等溶剂;(3)分子量测定:采用凝胶渗透色谱法(GPC)测定蘑菇多糖的分子量;(4)单糖组成分析:采用高效液相色谱法(HPLC)分析蘑菇多糖的单糖组成;(5)生物活性检测:通过体外抗肿瘤、降血糖、增强免疫力等实验,检测蘑菇多糖的生物活性。
五、实验结果与分析1. 蘑菇多糖粗品的外观为白色粉末,可溶于水、乙醇、丙酮等溶剂。
2. GPC结果显示,蘑菇多糖的分子量在10-100 kDa之间。
3. HPLC分析表明,蘑菇多糖主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖等单糖组成。
4. 生物活性检测结果显示,蘑菇多糖具有抗肿瘤、降血糖、增强免疫力等生物活性。
六、实验结论本实验成功提取了蘑菇多糖,并通过鉴定与检测,证实了蘑菇多糖具有多种生物活性。
超声波法提取食用菌多糖超声波法提取食用菌多糖是利』fj超声波的高频振荡、超声波的空化效应和机械剪切效应,通过强化固体微粒向液体的传质,促进提取剂向同·液界面扩散。
另外,空化作朋产生的冲击波和射流可破坏植物细胞壁和细胞膜结构.并除去部分妨碍酶与底物接触的物质,从而增加细胞内容物通过细胞膜的穿透能力同体微粒和缔合水分子也被粉碎.变成微小的质团,从而提高lr有效成分溶出的速度ll7I,即可提高多糖的得牢。
王萍等I】81考察了超声波辅助法提取滑菇多糖的效果,寻找最佳的工艺条件,分别对液料比、超声处理时问、超声功率及水浴浸提时间4个因素进行了单因素和正交试验。
具体操作步骤为称取预处理的滑菇干燥粉碎粉末.按一定料液比加蒸馏水.在0~C环境下进行超声波处理特定时问后.于80℃水浴锅中浸提特定时间,取出后离心,抽滤。
采用苯酚一硫酸法测定多糖含量。
通过正交试验得到超声波辅助法提取滑菇多糖最佳工艺条件为:料液比为22 mL·g~,超声波时问40 min,超声波功率700 W,水提时间0.5 h。
在此条件下滑菇多糖粗品得率达13.5%。
而常规水浴浸提法提取滑菇多糖的提取时间长达6 h,且去蛋白后多糖得率也只为11.24%。
超波法提取时间短,提取效率高,并且提取过程可以在低温下进行,有效成分损失较传统方法小得多。
但超声时问不宦过长,否则可能使多糖发生断裂而降低多糖的得率。
近年来,酶法结合超声波法提取食用菌多糖的方法也得到广泛应用。
早年的研究报道认为,较高强度的超声波会致使酶失活口91。
但近年来的研究发现,适当强度的超声波不但不会使酶失活,还会增强酶的活性。
原因是超声波促进底物与酶催化部位的结合,同时促进产物进入介质,表现出酶催化活性的提高。
其次,超声波空化作用产生的冲击波改变酶分子的构象,使其更易与底物结合,提高酶催化效率l2】。
廖伟玲等[捌采用纤维素酶协同超声波法提取香菇多糖,得到最佳提取T艺条件为:酶加量1.0%,料液比1:15.超声功率为1 500 W,超声时间为60 min。
食用菌中活性多糖的提取与应用研究食用菌是一类营养丰富、具有多种医疗保健功效的食品。
其中,活性多糖是食用菌中的一种重要成分,具有抗肿瘤、免疫调节、抗氧化等多种生物活性。
因此,提取和应用食用菌中的活性多糖已经成为当前研究的热点之一。
一、食用菌中活性多糖的提取方法1、水提法水提法是常用的一种提取方法。
其操作简单,成本低廉,适用于大规模生产。
具体操作步骤为:将食用菌粉末加入适量的水中,进行浸泡,再进行煮沸、搅拌、离心等处理步骤,最终得到含有活性多糖的水提液。
2、酸碱提法酸碱提法是通过酸碱处理来提取多糖。
其优点是提取效率高,但操作过程较为复杂。
具体操作步骤为:将食用菌粉末加入适量的酸或碱中,进行浸泡,再进行煮沸、搅拌、离心等处理步骤,最终得到含有活性多糖的酸碱提液。
3、微波辅助提取法微波辅助提取法是近年来发展起来的一种新型提取方法。
其优点是操作简单、提取效率高、成本低廉。
具体操作步骤为:将食用菌粉末加入适量的水中,进行浸泡,然后利用微波辐射进行加热处理,最终得到含有活性多糖的微波辅助提取液。
二、食用菌中活性多糖的应用研究1、抗肿瘤作用食用菌中的活性多糖具有很强的抗肿瘤作用。
实验研究表明,食用菌中的多糖可以抑制肿瘤细胞的生长和增殖,促进肿瘤细胞凋亡,从而达到治疗肿瘤的目的。
2、免疫调节作用食用菌中的活性多糖还具有免疫调节作用。
实验研究表明,食用菌中的多糖可以增强机体免疫功能,促进白细胞的增殖和活性,从而增强机体对各种病原微生物的抵抗能力。
3、抗氧化作用食用菌中的活性多糖还具有很强的抗氧化作用。
实验研究表明,食用菌中的多糖可以清除自由基,减少氧化损伤,并且能够保护细胞膜和DNA等生物分子免受氧化损伤。
三、结论总之,食用菌中的活性多糖是一种非常重要的生物活性成分,具有很强的医学和保健价值。
目前,提取和应用食用菌中的活性多糖已经引起了广泛关注,并且在医药、保健品等领域得到了广泛应用。
未来,我们还需要进一步深入地研究食用菌中活性多糖的生物学特性和药理学作用机制,以期更好地发挥其医学和保健功效。
香菇多糖的提取实验报告一、实验目的本实验旨在探索从香菇中提取多糖的有效方法,并对提取得到的香菇多糖进行初步的定性和定量分析。
二、实验原理香菇多糖是一种水溶性的大分子化合物,其在热水中具有一定的溶解性。
通过热水浸提的方法,可以使香菇中的多糖溶解到水中,然后经过离心、过滤等操作去除杂质,再通过醇沉的方法使多糖沉淀出来,最后经过干燥得到香菇多糖的粗品。
三、实验材料与仪器1、实验材料新鲜香菇(市售)、无水乙醇(分析纯)、丙酮(分析纯)、石油醚(分析纯)、葡萄糖标准品、浓硫酸(分析纯)、苯酚(分析纯)等。
2、实验仪器电子天平、恒温水浴锅、离心机、旋转蒸发仪、真空干燥箱、分光光度计、容量瓶、移液管、具塞刻度试管等。
四、实验步骤1、原料预处理将新鲜香菇洗净,去除杂质和根部,切成小块,置于通风处晾干。
然后用石油醚回流脱脂2 次,每次2 小时,以去除香菇中的脂类物质。
脱脂后的香菇用丙酮回流脱色 2 次,每次 2 小时,以去除香菇中的色素。
2、热水浸提将预处理后的香菇放入圆底烧瓶中,按料液比 1:20 加入蒸馏水,在90℃的恒温水浴锅中浸提 3 小时。
期间每隔 30 分钟搅拌一次,以提高提取效率。
3、离心分离浸提结束后,将提取液冷却至室温,然后在 4000 r/min 的转速下离心 15 分钟,取上清液。
4、过滤将上清液用滤纸过滤,去除其中的不溶性杂质。
5、醇沉向过滤后的上清液中缓慢加入 3 倍体积的无水乙醇,边加边搅拌,使多糖沉淀出来。
然后将溶液置于 4℃冰箱中静置过夜。
6、离心收集将醇沉后的溶液在 4000 r/min 的转速下离心 15 分钟,收集沉淀。
7、洗涤用无水乙醇和丙酮依次洗涤沉淀,以去除其中的杂质。
8、干燥将洗涤后的沉淀置于真空干燥箱中,在 60℃下干燥至恒重,得到香菇多糖的粗品。
9、多糖的定性分析(1)苯酚硫酸法:取适量的香菇多糖粗品,用蒸馏水溶解,制成一定浓度的溶液。
然后取 1 mL 溶液,加入 1 mL 5%的苯酚溶液和 5mL 浓硫酸,摇匀后在沸水浴中加热 15 分钟,冷却至室温后,在 490 nm 处测定吸光度。
食用菌多糖提取技术简介食用菌多糖提取技术简介[ 修改时间:2011-8-20 下午 09:17:51 浏览次数:552]食用菌多糖提取技术简介2010年4月20日来源:中国食用菌商务网【按】食用菌多糖的生物活性、食药用价值及无毒副作用的特性已被认可,其研制成的药品及保健品已成为当前突破食用菌精深加工瓶颈的重大措施。
也是转变食用菌经济发展方式的重要门路,我县是中国食用菌之都。
品种多、产量高,采取提取食用菌多糖,再加工成终端产品有巨大的发展空间,今收集了六种提取多糖办法。
供大家参考:1、水提醇沉法提取食用菌多糖多糖溶于水而不溶于醇、醚、丙酮等有机溶剂。
用热水进行提取。
主要是借助于热力作用使食用菌细胞发生质壁分离,水作为溶剂渗人细胞壁和细胞质中。
溶解液泡中的物质。
使其穿过细胞壁,扩散到外部溶剂中。
刘祖同、罗信昌归纳了食用菌子实体多糖的提取工艺步骤:即食用菌子实体粉碎一脱脂肪一多糖的浸提一过滤(离心分离)一合并滤液一多糖沉淀一去蛋白质、脱色一多糖组分的分离纯化一多糖组成和结构的分析,其中,热水浸提的温度一般为90℃~100~C。
浸提时间为lh~3h,浸提次数为2次~3次。
说明此方法有较好的准确度。
水提醇沉法的优点为试验设备简单。
操作容易。
准确度高,成本低廉。
一次性投入较小。
适用于大规模的工业生产。
但提取效率低且费时,劳动强度大。
产品纯化困难且括性损失较大,随着工业技术的发展。
一些现代高新技术被应用于食用菌多糖的提取。
2,酸碱浸提法提取食用菌多糖原理是通过酸碱液的充分作用。
使食用菌细胞、细胞壁充分吸水胀膨而破裂,从而使食用菌多糖充分游离出来,提高得率。
田光辉等以灵芝为材料考察了酸碱盐介,酸碱介质能够明显提高多糖的提取率。
但以酸作为介质时对糖苷键具有一定的破坏作用,降低多糖的得率。
还会对容器造成腐蚀,除弱酸外一般不宜采用。
采用稀碱液浸提后既能节省时间,又能减少原材料及试剂的消耗。
且提取的多糖含量高。
但碱提后的溶液浓度增大。
银耳多糖的提取工艺一、实验目的1、了解银耳多糖制备的基本原理。
2、掌握糖类物质提取的基本操作技术。
二、实验原理银耳是真菌的一种,是我国传统的珍贵药材之一,具有滋阴润肺、益胃生津等功效。
常用于治疗虚劳咳嗽、阴伤燥咳、虚热口渴等症。
银耳多糖是银耳的主要药效成分,银耳中含有的多糖类物质则具有明显提高机体免疫功能,抗炎症和抗放射等作用。
1、制备(提取)原理:银耳多糖易溶于水,但不溶于乙醇。
因此本实验采用沸水抽提、氯仿-正丁醇法除蛋白和乙醇沉淀分离制得银耳多糖粗品。
然后再进行定性分析。
2、分析(鉴定)原理:Molish反应多糖在浓硫酸或浓盐酸的作用下,脱水形成糠醛及其衍生物,其与α-萘酚反应,作用生成紫色的化合物。
原理是羰基与酚类进行了缩合,这样,糖与浓酸作用后,再与α-萘酚反应,就能生成紫色的化合物。
因此,阴性反应证明没有糖类物质的存在;而阳性反应,则说明有糖存在的可能性,需要进一步通过其他糖的定性试验才能确定有无糖的存在。
斐林试剂质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡蓝色的氢氧化铜沉淀。
氢氧化铜与加入的葡萄糖在加热的条件下,能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀,而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。
用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液的颜色变化为:浅蓝色棕色砖红色(沉淀)。
三、实验试剂和器材1、银耳子实体2、乙醇3、乙醚4、丙酮5、Ssvag试剂:氯仿:正丁醇=6、Molish试剂:取5g α-萘酚用95%乙醇溶解至100mL,临用前配置,棕色瓶保存。
7、斐林试剂:甲液质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液;乙液质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液;临用时临时配置,将4~5滴乙液滴入2mL甲液中,配完后立即使用。
四、仪器和器材烧杯试管分液漏斗容量瓶电炉石棉网纱布离心机真空干燥箱电子天平五、实验步骤1、制备步骤(1)取银耳子实体10g加水300mL,直火提取1h,提取过程中不断用玻棒搅拌。
食用菌草灰菇中多糖的提取分离及其生物活性研究随着人们对健康的关注越来越高,食用菌的营养和药用价值日益受到重视。
草灰菇是一种常见的食用菌,具有丰富的营养价值和药用价值。
其中的多糖是其重要的活性成分之一,具有抗肿瘤、降血糖、调节免疫等多种生物活性。
因此,研究菇类多糖的提取分离及其生物活性,对于拓展食用菇的开发利用具有重要意义。
一、草灰菇提取多糖的方法1. 水提醇沉法水提醇沉法是一种简单易行的提取方法,其主要原理是通过对菌类多糖在水中的稀释溶液中加入足量醇类沉淀剂,沉淀出多糖物质。
此法提取得到的多糖含量较高,但因为水溶液无法稳定,其纯度较低。
2. 离子交换法离子交换法是一种基于离子交换树脂进行的多糖提取方法。
选择性接收多糖成分,同时去除其他有机物的混杂物。
此法提取的多糖物质比较纯净,可直接进行生物活性研究。
二、草灰菇多糖的生物活性1. 抗肿瘤活性草灰菇多糖作为其主要的抗肿瘤活性成分之一,在物理和化学性质方面具有增强机体免疫力、促进淋巴细胞增值、活化巨噬细胞、产生巨噬细胞因子等多个作用机制。
研究表明,草灰菇多糖能明显抑制人类肝癌细胞、胃癌细胞、结肠癌细胞、肺癌细胞等肿瘤细胞的增殖,具有很大的潜力作为抗肿瘤药物的开发利用。
2. 降血糖活性草灰菇多糖具有一定的降血糖活性,常用于糖尿病等代谢性疾病的治疗。
草灰菇多糖通过调节胰岛素受体、增加胰岛素分泌量、提高肝酶的活性等方式实现降血糖的作用。
3. 调节免疫活性草灰菇多糖不仅可提高人体的免疫力、调节免疫系统失调等问题,而且还具有促进生长、增重、抗休克、增加求偶和性多能的细胞繁殖等作用。
其中,FAP-1可促进巨噬细胞的吞噬能力,Β-Glucan则可激活免疫细胞,产生免疫效应,且更能迅速识别病原体并释放相应的免疫物质。
三、总结食用菌具有丰富的营养和药用价值,尤其是其中的多糖具有丰富的生物活性。
草灰菇多糖已经成为研究的热门之一,其提取分离及其生物活性的研究,将进一步拓展菌类资源的开发利用,为人类的健康做出积极的贡献。
香菇多糖的分离纯化(水提醇沉法)香菇多糖的提取、纯化(水提醇沉法)一、实验目的了解并掌握水提醇沉法提取香菇多糖的原理和方法。
二、实验原理提取香菇多糖的方法有:水提醇沉法(热水浸提法)、碱浸提法和酶解法。
水提醇沉法是最常见的方法。
香菇多糖溶于水。
热水浸提时,香菇的组织细胞破裂,多糖成分浸出,再用乙醇沉淀香菇多糖。
料液比、温度、时间、PH值、乙醇浓度、提取次数都是影响提取效果的重要因素。
最佳提取条件为:料液比1:40(30~40倍均可),提取温度为80~95℃,提取时间2h,提取时的乙醇浓度为75%,PH 值6.0~8.0,提取次数为2次。
三、材料和仪器材料:香菇(取子实体)、蒸馏水、无水乙醇、Sevage试剂、(Sevage试剂配制:取三氯甲烷和正丁醇,按照5﹕1进行混合,放置在棕色瓶中备用。
)仪器:分析天平、高速离心机、离心试管、冷冻干燥机、磁力搅拌器、恒温水浴锅、烧杯等。
四、实验步骤1、提取:将干燥的香菇子实体粉碎后,加入30倍的蒸馏水,用沸水提取2h,过滤,滤渣再按第一次提取工艺提取1次,将上清液合并后于80℃下浓缩。
在冷却后的浓缩液中加入一定量95%的乙醇,使乙醇的浓度为75%,室温下放置过夜,离心,将收集到的沉淀用真空冷冻干燥机冻干,放到后4℃冰箱中保存、备用。
2、sevage法除蛋白:称取得到的样品10g(含水率9.7%)充分溶解于100mL蒸馏水中。
加入一定体积的Sevage试剂,用磁力搅拌器剧烈搅拌20 min 左右,离心,分离粗多糖中蛋白质杂质。
重复2次。
3、乙醇沉淀:往除过蛋白的多糖溶液(上清液)中缓慢加入95%的乙醇,至乙醇体积占溶液总体积的75%,边加边搅拌,使多糖均匀沉淀。
放在4℃冰箱中6h,6000r/min 离心10min,弃去上清液,将沉淀在溶解于蒸馏水中,重复以上过程3次,将最后得到的溶液放在-40℃的冷冻干燥机中冻干,制得香菇粗多糖。
五、含量测定(苯酚-硫酸法)1、标准曲线的绘制精确称取100 mg 葡萄糖,溶解定容于100 mL容量瓶中,得含1 mg/mL葡萄糖的对照品储备溶液,备用。
酶解法提取食用菌多糖食用菌多糖是由l0个以上的单糖以糖苷键连接而成的高分子多聚物,存在于食用菌的菌丝体、子实体和发酵液中。
食用菌多糖有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和抗感染活性【1,同时还有增强免疫、抗氧化、降低血糖、抗溃疡、抗衰老、抗辐射等方面的生物活性和生理功能食用菌组成复杂,除多糖外还含有蛋向质、纤维素、半纤维素和果胶等物质,这些物质的存在会影响多糖的浸L叶J.因此在多糖提取过程巾适当加人酶制剂如水解纤维素的纤维素酶、水解果胶质的果胶酶等有利于多糖的浸,在提高溶出效率的同时,为后续捉取液的精制创造有利条件{l0】。
酶解法的一般方法为按一定料液比加入样品干粉和生物酶、蒸馏水,在合适温度和pH值下酶解一定时间,然后升温灭酶,在合适的温度下提取一定时间,离心取上清液,即可测定多糖含量I⋯。
以下分别介绍单一酶法和复合酶法在食用菌多糖提取巾的应用。
1.1 单一酶法提取食用菌多糖单一酶法是指一种酶来辅助提取食用菌多糖,从而提高多糖提取率。
常用的酶有蛋白酶、纤维素酶和果胶酶等。
蛋白酶可破坏蛋白质的肽键,水解细胞中的游离蛋白质.破坏其空问结构,使其变得松散。
同时蛋白酶还可水解蛋白聚糖和糖蛋白中的蛋向质,降低其对多糖的结合率,使多糖更易浸}H。
刘青娥I⋯彳F推荐的最佳提取条件下分别考察了果胶酶、纤维素酶和木瓜蛋白酶对袖珍菇多糖提取效率的影响,以直接水提法为对照,结果显示木瓜蛋白酶酶解法有最佳提取效果,多糖提取率提高了95%,试验考察了酶解温度、酶用量、pH和酶解时问对木瓜蛋白酶法多糖得率的影响.得的结果是酶解温度为50℃左右时多糖提取率最高,随着温度的升高,多糖提取率下降;木瓜蛋白酶朋量为2.O%。
冈浓度增加到2.0%以后,再增加酶用量多糖提取率基本不再增加;最佳酶解pH 值为5.2,因酶对pH值较为敏感,适当的pH值可维持酶活性中心的最佳空问构象,促进酶与底物的结合,提高反应速率:多糖得率随着酶解时间的延长而增加,超过100 rain时有所下降,是由于酶解时间太长会引起糖结构变化甚至碳环裂解,致使多糖得率降低。
一、实验目的1. 学习香菇多糖的提取方法。
2. 掌握香菇多糖的提取工艺及操作流程。
3. 了解香菇多糖的提取原理及影响因素。
二、实验原理香菇多糖(Lentinan)是一种具有多种生物活性的多糖,具有增强免疫力、抗癌、抗炎、抗氧化等作用。
本实验采用热水提取法提取香菇多糖,利用香菇子实体中的多糖成分在热水中的溶解度较高,通过加热、搅拌、过滤等步骤,将香菇多糖从子实体中提取出来。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:市售香菇、蒸馏水、95%乙醇、Sevage溶液、CTAB、硼酸-硼砂缓冲液、肉毒碱、尿素、水等。
2. 实验仪器:真空干燥箱、研钵、烧杯、石棉网、电炉、台秤、离心机、真空干燥器、超滤器、紫外可见分光光度计等。
四、实验步骤1. 香菇预处理:将香菇洗净,切除根部,菌伞切成小块,放入真空干燥箱(低温)烘干。
2. 粉碎:将烘干的香菇小块放在研钵里研磨成粉末。
3. 提取:称取20g香菇粉末,置于250ml烧杯中,加入100ml蒸馏水,于石棉网上加热至沸,并不断搅拌,煮沸30min后,抽滤。
4. 滤渣提取:滤渣再用100ml蒸馏水溶液煮沸30min,抽滤。
5. 合并滤液:将两次滤液合并,加热浓缩至20ml,溶于100ml 95%乙醇,搅拌并冷却至室温,静置1h。
6. 离心:将混合液以4000r/min的转速离心10min,得到的沉淀放在真空干燥器中干燥,得到粗香菇多糖。
7. 除蛋白:将得到的粗糖50ml 100热水溶解,加Sevage溶液10ml,剧烈震动10min,静置10min,4000r/min离心10min,取上层清液,加Sevage溶液反复操作5次。
8. 纯化:将提取的粗糖置于烧杯中,加蒸馏水50ml溶解,向溶液中加入等体积0.15mol/l的CTAB与硼酸-硼砂缓冲液处理,静置10min,4000r/min离心得沉淀。
9. 超滤:在0.2MPa压力条件下,采用超滤法对香菇多糖提取液进行分级纯化。
10. 冷冻干燥:将纯化后的香菇多糖进行冷冻干燥,得到干燥的香菇多糖。
酶解法提取食用菌多糖食用菌多糖是由l0个以上的单糖以糖苷键连接而成的高分子多聚物,存在于食用菌的菌丝体、子实体和发酵液中。
食用菌多糖有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和抗感染活性【1,同时还有增强免疫、抗氧化、降低血糖、抗溃疡、抗衰老、抗辐射等方面的生物活性和生理功能食用菌组成复杂,除多糖外还含有蛋向质、纤维素、半纤维素和果胶等物质,这些物质的存在会影响多糖的浸L叶J.因此在多糖提取过程巾适当加人酶制剂如水解纤维素的纤维素酶、水解果胶质的果胶酶等有利于多糖的浸,在提高溶出效率的同时,为后续捉取液的精制创造有利条件{l0】。
酶解法的一般方法为按一定料液比加入样品干粉和生物酶、蒸馏水,在合适温度和pH值下酶解一定时间,然后升温灭酶,在合适的温度下提取一定时间,离心取上清液,即可测定多糖含量I⋯。
以下分别介绍单一酶法和复合酶法在食用菌多糖提取巾的应用。
1.1 单一酶法提取食用菌多糖单一酶法是指一种酶来辅助提取食用菌多糖,从而提高多糖提取率。
常用的酶有蛋白酶、纤维素酶和果胶酶等。
蛋白酶可破坏蛋白质的肽键,水解细胞中的游离蛋白质.破坏其空问结构,使其变得松散。
同时蛋白酶还可水解蛋白聚糖和糖蛋白中的蛋向质,降低其对多糖的结合率,使多糖更易浸}H。
刘青娥I⋯彳F推荐的最佳提取条件下分别考察了果胶酶、纤维素酶和木瓜蛋白酶对袖珍菇多糖提取效率的影响,以直接水提法为对照,结果显示木瓜蛋白酶酶解法有最佳提取效果,多糖提取率提高了95%,试验考察了酶解温度、酶用量、pH和酶解时问对木瓜蛋白酶法多糖得率的影响.得的结果是酶解温度为50℃左右时多糖提取率最高,随着温度的升高,多糖提取率下降;木瓜蛋白酶朋量为2.O%。
冈浓度增加到2.0%以后,再增加酶用量多糖提取率基本不再增加;最佳酶解pH 值为5.2,因酶对pH值较为敏感,适当的pH值可维持酶活性中心的最佳空问构象,促进酶与底物的结合,提高反应速率:多糖得率随着酶解时间的延长而增加,超过100 rain时有所下降,是由于酶解时间太长会引起糖结构变化甚至碳环裂解,致使多糖得率降低。
食品科技植物及食用菌多糖的提取、分离纯化及结构分析白海娜(吉林化工学院生物与食品工程学院,吉林吉林 132022)摘 要:多糖是广泛存在于动植物、微生物中的一类大分子化合物,具有调节免疫力、抗癌、抗氧化、抗衰老等方面的功能作用,本文主要对植物及食用菌多糖的提取、分离纯化及结构分析进行阐述。
关键词:多糖;提取;分离纯化;结构分析多糖又称聚糖,是由分子质量从中等到高分子的聚合物,不同聚糖中单糖的同一性、链的长度、连接单糖的键类型以及链的分支程度等方面不同。
植物及食用菌多糖的结构特征以及生物活性等研究已成为食品和制药的热门研究。
与蛋白质的研究相比,多糖各方面研究还比较落后。
本文主要对植物及食用菌多糖的提取、分离纯化及结构分析进行阐述。
1 多糖的提取1.1 酶解提取该方法是由于酶具有专一性的特征,所以根据酶解反应将植物细胞壁分解成小分子物质,该小分子物质容易溶于提取溶剂,使植物细胞壁被破坏,从而使植物细胞中的有效成分溶出。
此方法的优点是不仅能使植物细胞壁中的有效成分发生降解,使其更容易被提取出来,从而达到使提取率提高或溶剂用量减少的目的;而且还可以对植物药中的部分杂质进行选择性降解,使多糖的提取分离更加容易,同时除了所需的有效成分之外其他的成分还可以收集利用[1]。
尽管该方法在多糖的提取率方面得到了提高,但是在操作过程中温度和pH的变化会严重影响所用酶的活性,且提取的成本相对较高。
1.2 微波提取微波提取多糖的方法又被称为微波萃取技术,该方法是通过微波辐射,使高频电磁波快速穿透被萃取的物质。
因为植物细胞在微波辐射能的作用下吸收了微波能,使植物细胞的内部温度升高,从而导致了组织内部的压力变大,细胞发生破裂,需要被提取的成分在能量的作用下从内部溶出。
该方法在提取多糖时的优势是操作简单、溶剂的使用量消耗少、在操作过程中不会造成污染、多糖提取率高等。
1.3 热回流提取法该方法是在多糖提取方法中最为传统、也是一种操作简单的方法,此方法是根据相似相溶的原理来提取多糖,提取溶剂一般是选择用热水、酸、碱;但是该方法由于在提取过程中温度高、时间长、能量消耗高,容易引起多糖结构以及生物活性发生变化,因此若利用此方法提取多糖,会限制天然多糖产业在市场上的发展。
香菇多糖的提取香菇多糖是从香菇中提取的一种重要活性成分,具有多种保健功效和药用价值。
香菇,又称冬菇、草菇,是一种常见的食用菌类食材,被广泛用于烹饪和药用。
香菇多糖是香菇中的一种多糖类物质,具有多种生物活性,包括抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等作用。
香菇多糖的提取过程通常包括以下几个步骤:首先是将香菇进行清洗和切碎,然后用适当的溶剂(如水、乙醇等)浸泡,使多糖从香菇中溶解出来。
接着通过过滤、浓缩、沉淀等工艺步骤,将多糖提取出来并进行纯化。
最终得到的香菇多糖产品可以用于制备保健品、药品或化妆品等产品。
香菇多糖具有多种保健功效。
首先,香菇多糖具有显著的抗氧化作用,可以清除体内的自由基,延缓衰老,预防疾病。
其次,香菇多糖还具有抗肿瘤作用,可以抑制肿瘤细胞的生长和扩散,对预防和辅助治疗肿瘤具有重要作用。
此外,香菇多糖还可以调节免疫系统,增强机体免疫功能,提高抵抗力,预防感染和疾病。
除了以上几种主要功效外,香菇多糖还具有降血糖、降血脂、抗炎、抗菌等多种生物活性。
因此,香菇多糖被广泛应用于保健品、药品、化妆品等领域。
在现代社会,人们对健康和美容的需求越来越高,香菇多糖作为一种天然的功能性成分,受到了越来越多消费者的青睐。
需要注意的是,香菇多糖作为一种天然产物,虽然具有多种保健功效,但并非万能药物。
在使用香菇多糖时,应根据个人体质和健康状况适量使用,避免过量或长期大量食用,以免引起不良反应。
此外,购买香菇多糖产品时应选择正规渠道,避免购买劣质或掺假产品,以保障健康。
香菇多糖是一种具有多种保健功效和药用价值的活性成分,其提取和应用具有重要意义。
随着人们对健康的重视和需求的增加,香菇多糖作为一种天然的功能性成分,将在保健品、药品、化妆品等领域发挥越来越重要的作用。
我们期待未来在科研和生产上能够进一步挖掘香菇多糖的潜力,为人类健康和美容提供更多选择和帮助。
食用菌多糖的提取检测及应用研究进展食用菌是一种富含营养价值且被广泛食用的菌类食品。
近年来,食用菌多糖的研究引起了人们的广泛关注。
食用菌多糖指的是从食用菌中提取得到的多糖类化合物,具有丰富的生物活性和药用价值。
本文将就食用菌多糖的提取、检测及应用进行综述。
一、食用菌多糖的提取1.物理法:物理法主要是通过水浸提、热水浸提、酸碱浸提等方式提取食用菌多糖。
物理法提取的多糖含量较低,但是对菌体损伤小,适用于大规模生产。
2.化学法:化学法主要是通过酸碱法、酶解法、醇沉法等方式提取食用菌多糖。
化学法提取的多糖含量较高,但是有可能破坏多糖的生物活性。
3.生物法:生物法主要是通过微生物法和酵素法提取食用菌多糖。
生物法提取的多糖含量较高,并且对多糖的生物活性影响较小。
二、食用菌多糖的检测1.物理检测:物理检测主要是通过红外光谱、核磁共振、质谱等技术对食用菌多糖进行分析。
2.化学检测:化学检测主要是通过酸碱滴定、硫酸热解等方法对食用菌多糖进行分析。
3.生物检测:生物检测主要是通过生物传感技术对食用菌多糖进行检测,如免疫检测、酶反应等。
三、食用菌多糖的应用1.医药应用:食用菌多糖具有抗肿瘤、抗氧化、降血脂、调节免疫功能等多种生物活性,被广泛应用于药物研发、肿瘤治疗、心血管疾病防治等领域。
2.食品应用:食用菌多糖具有增加食品的营养价值、改善食品口感的作用,可用于制备功能性保健食品、调味料等。
3.化妆品应用:食用菌多糖具有保湿、美白、抗衰老等功能,可应用于化妆品的研制及生产。
总之,食用菌多糖的提取、检测及应用研究进展已经取得了一定的成果。
随着人们对食用菌多糖的认识不断深入,食用菌多糖的研究将会得到更加广泛的关注,并有望在医药、食品、化妆品等领域得到更多的应用。