TSKGEL色谱柱的清洗(中文)

水相分子尺寸排阻色谱柱TSKgel PW系列使用说明书东曹株式会社安全注意事项［注意标签］■远离火源使用易燃溶剂时，请务必小心。

否则可能会导致火灾、爆炸或中毒。

■使用环境必须通风良好如果通风不良，易燃或有毒溶剂可能会导致火灾、爆炸或中毒。

■请勿喷洒溶剂溶剂发生喷洒或泄露可能会导致火灾、触电、中毒、受伤以及腐蚀。

清除漏出的溶剂时，请佩戴合适的护具。

■请佩戴护目镜和防护手套有机溶剂和酸属于有害物质，切勿直接接触皮肤。

■请小心处理包装处理不当可能会导致产品破裂或溶剂飞溅。

■请勿将本产品用于其他目的本产品仅可用于分离和提纯，请勿用于其他用途。

■请确认化合物的安全性请确认分离和提纯后的化合物和溶剂安全可靠。

■正确废弃请根据当地法律法规正确废弃。

注请将本说明书保存在本产品附近，以便日后参阅。

目录1. 简介 (1)2. 打开包装 (1)3. 色谱柱部件 (2)4. 安装 (2)5. 维护 (3)6. 溶剂 (4)7. 流速 (6)8. 温度 (8)9. 准备样品 (8)10. 理论塔板数和不对称因子的计算方法 (9)11. 保护柱 (10)12. 故障排除 (11)13. 质量标准和质量保证 (13)1. 简介TSKgel PW系列色谱柱是东曹株式会社开发的高效液相色谱柱，主要用于水相高效凝胶过滤色谱（GFC），适用于各类水溶性物质。

该类色谱柱适用于水溶性合成聚合物、低聚物以及生物物质，如多糖、核酸、蛋白质、肽等的分析或制备。

请仔细阅读本使用说明书，确保正确、有效地使用该类色谱柱。

表1应用领域应用领域适用的色谱柱水溶性合成聚合物水溶性生物聚合物多糖G4000PW(XL)，G5000PW(XL)，G6000PW(XL)，GMPW(XL)水溶性低聚物肽G2500PW(XL)，G3000PW(XL)非离子低聚物（低聚糖）G-Oligo-PW，G2000PW核酸G-DNA-PW注：TSKgel G-Oligo-PW和G2000PW可以在较宽的pH值范围内吸附离子型样品。

硅胶基质分子尺寸排阻色谱柱清洗方法1.100%纯水以0.2mL/min的流速冲洗1.5小时.2.如果是疏水性吸附，以20%乙腈水溶液为流动相（用0.45um的有机相滤膜过滤），采用0.2mL/min的流速冲洗1.5小时.3.100%纯水以0.2mL/min的流速冲洗1.5小时.4.如果是离子性物质的吸附，以0.1mol/LPB（0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4）缓冲液+0.1mol/LNa2SO4溶液为流动相（用0.45um的水相滤膜过滤），采用0.2 mL/min 的流速冲洗1.5小时后，再以0.01g/LPABA(对氨基苯甲酸)为标准品，进样量为20uL,在UV280nm下，以0.1mol/LPB（0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4）缓冲液+0.1mol/LNa2SO4溶液为流动相检测柱效,。

5.如果是碱性物质的吸附，以pH2.5的磷酸缓冲溶液为流动相（用0.45um的水相滤膜过滤），采用0.2mL/min的流速冲洗1.5小时。

6.如果上述处理后仍未能解决问题可能是氢键的吸附，在淋洗液中添加6-8mol/L的尿素或者0.2%-0.3%的中性界面活性剂（Triton、Tween）（用0.45um的水相滤膜过滤）后以0.2mL/min的流速冲洗1.5小时。

但需要注意尿素和表面活性剂会在柱中残留。

一般不建议此项操作。

7.冲洗完成后，使用0.1mol/LPB（0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4）缓冲液+0.1mol/LNa2SO4溶液为流动相（0.45um水相滤膜过滤），0.01g/LPABA(对氨基苯甲酸)为标准品，进样量为20uL,在280nm检测柱效。

色谱柱冲洗方法（最新版4篇）篇1 目录1.色谱柱冲洗的必要性2.色谱柱冲洗的方法2.1 水冲洗法2.2 有机溶剂冲洗法2.3 缓冲盐冲洗法2.4 反冲法3.色谱柱冲洗的注意事项篇1正文色谱柱是液相色谱系统中的核心部件，它在样品分离过程中起着至关重要的作用。

然而，在色谱柱使用过程中，柱内可能会积累一些脏物或盐析物，影响色谱柱的分离效果。

因此，对色谱柱进行定期冲洗是非常必要的。

下面我们将介绍几种常见的色谱柱冲洗方法。

首先，水冲洗法是最常用的色谱柱冲洗方法。

此方法操作简便，只需将色谱柱连接到水流系统上，使用纯水进行冲洗。

篇2 目录一、色谱柱冲洗的必要性二、色谱柱冲洗的方法1.水冲洗法2.纯有机相冲洗法3.缓冲盐冲洗法4.反冲法5.专用清洗剂冲洗法三、不同类型色谱柱的冲洗方法1.反相色谱柱2.正相色谱柱3.离子交换色谱柱4.凝胶渗透色谱柱四、色谱柱冲洗的注意事项篇2正文色谱柱是高效液相色谱系统中的核心部件，其在样品分离过程中起到关键作用。

然而，在长时间的使用过程中，色谱柱内部可能会积累一些脏物，影响色谱柱的分离效果。

因此，对色谱柱进行定期冲洗是非常必要的。

色谱柱冲洗的方法有很多种，下面我们分别进行介绍：1.水冲洗法：这是一种最常用的色谱柱冲洗方法。

使用纯水或含有少量缓冲盐的水进行冲洗，可以有效去除色谱柱内部的脏物。

对于反相色谱柱，可以使用纯水或甲醇/水混合溶液进行冲洗。

2.纯有机相冲洗法：在冲洗色谱柱时，可以使用纯有机溶剂（如乙腈、甲醇等）来代替水相。

这种方法适用于具有疏水性的色谱柱，如 C18、C8 等。

3.缓冲盐冲洗法：在冲洗过程中，可以加入一定浓度的缓冲盐，以保持色谱柱内部的离子强度。

这种方法适用于离子交换色谱柱和凝胶渗透色谱柱。

4.反冲法：这是一种比较彻底的冲洗方法，可以有效去除色谱柱内部的沉淀物。

在反冲过程中，需要将色谱柱的流动相改为反向，并提高流速。

然而，反冲过程可能会对色谱柱造成一定程度的损伤，因此需要谨慎操作。

TSKgel SW系列色谱柱维护和修理保养TSKgel SW系列色谱柱紧要用于水相高效凝胶过滤色谱（GFC）。

该类色谱柱的设计适用于各类水溶性物质，如蛋白质、酶以及核酸等的分析或制备。

我们同时供应不锈钢色谱柱和玻璃色谱柱。

特别是玻璃色谱柱，不但是生物相容型的，而且还配有一个拥有塑料末端接头的高精度玻璃管。

一、故障排出使用TSKgel色谱柱时，依照以下说明可以避开大部分问题的发生。

但是，有些问题（如由色谱柱寿命、吸附物质、产生的气泡、填料干燥或溶剂凝固等引发的问题）一旦发生就无法清除，因此使用色谱柱时应特别当心。

1、末端接头堵塞假如压降加添或流速降低，应当从色谱柱逆向进液清洗末端接头。

假如无法清除堵塞，则必需替换新的接头。

2、替换末端接头准备一个新的末端接头，并从色谱柱上取下旧的末端接头。

注意不要碰到填料表面。

假如发觉柱头发生塌陷，该处空间应依照12.3节的说明使用TSKtop—off gel填充。

然后，请参照4.4节清除进口侧的空气。

3、柱头塌陷压力上升过快、使用的流速大于设定的限值、脉动式进液、频繁替换溶剂等都会引发柱头塌陷。

柱头塌陷会猛烈降低理论塔板数（N）（这类色谱柱的塔板数一般只有一般色谱柱的70%以下），而且比较简单导致拖尾峰。

发生此类现象时，请从色谱柱的进口侧取下末端接头，假如发觉空隙，请用TSKtop—off gel填充。

此时，特别是玻璃色谱柱，必需使用扭矩扳手以2.9 N・m的力道拧紧末端接头。

这样，应当可以恢复到更高的分别度。

假如由于某些特别原因，使用该方法无法恢复分别度，请替换为新的色谱柱。

4、色谱柱杂质吸附严重长时间重复使用色谱柱后，洗脱时间有时会发生猛烈变化。

此时，选择其他溶剂清洗色谱柱比较有效。

以下为几种典型的清洗方法。

①离子性吸附（清除离子性杂质）通过提高清洗液的盐浓度（通常0.5 mol/L）进行过柱清洗。

使用酸性水溶液，如磷酸盐缓冲液（pH 2.5）过柱清洗。

②疏水性吸附（清除疏水性杂质）在清洗液中添加甲醇、乙腈（10—20%）等水溶性有机溶剂进行过柱清洗。

凝胶色谱柱洗涤流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor.I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!详解凝胶色谱柱的洗涤流程凝胶色谱，又称分子排阻色谱，是一种广泛应用于生物化学、分子生物学等领域，用于分离大分子和小分子物质的色谱技术。

TSKHILICAFCHICIEX系列色谱柱使用冲洗方法色谱柱的冲洗方法对于保护色谱柱、延长使用寿命、提高分离效果至关重要。

下面将分别介绍TSKHILIC、AFC、HIC和IEX系列色谱柱的冲洗方法。

1.TSKHILIC色谱柱的冲洗方法：a.初次使用：先用纯水冲洗柱床两倍柱床体积，以去除柱内可能存在的盐离子和有机溶剂。

b.然后，使用10-20mL纯水/乙醇（80:20，体积比）洗脱样品洗涤剂残留物，同时保护柱内填料。

c.最后，使用纯水冲洗柱床两倍柱床体积，以去除柱床中可能存在的溶剂残留物。

2.AFC色谱柱的冲洗方法：AFC（Affinity Chromatography）色谱柱是一种亲和色谱柱，常用于分离具有特定亲和性的分析物。

以下是一种常用的冲洗方法：a.初次使用：先用公认的吸附剂（如硫酸铵）溶液冲洗柱床两倍柱床体积，以平衡柱内填料，并去除可能存在的污染物。

b.然后，使用适宜pH值的缓冲液（如磷酸缓冲液）进行冲洗，以去除填料和样品中的杂质。

c.最后，使用缓冲液冲洗柱床两倍柱床体积，以达到柱床的稳定状态。

3.HIC色谱柱的冲洗方法：HIC（Hydrophobic Interaction Chromatography）色谱柱是一种疏水相色谱柱，常用于分离疏水性物质。

以下是一种常用的冲洗方法：a.初次使用：先用有机溶剂（如乙醇）冲洗柱床两倍柱床体积，以去除柱内可能存在的水分和杂质。

b.然后，使用含盐缓冲液进行冲洗，使样品组分与填料发生疏水相互作用，以达到最佳分离效果。

c.最后，用纯水冲洗柱床两倍柱床体积，以去除盐离子和有机溶剂残留物。

4.IEX色谱柱的冲洗方法：IEX（Ion Exchange Chromatography）色谱柱是一种离子交换色谱柱，常用于分离带有不同电荷的离子。

以下是一种常用的冲洗方法：a.初次使用：先用纯水冲洗柱床两倍柱床体积，以去除柱内可能存在的杂质。

b.然后，使用合适的缓冲液（含有对应离子交换基团的缓冲液）进行冲洗，以保持样品组分在填料上的稳定吸附。

凝胶⾊谱柱怎么清洗和存放　凝胶⾊谱技术是六⼗年代初发展起来的⼀种快速⽽⼜简单的分离分析技术，由于设备简单、操作⽅便，不需要有机溶剂，对⾼分⼦物质有很⾼的分离效果。

凝胶⾊谱法⼜称分⼦排阻⾊谱法。

凝胶⾊谱主要⽤于⾼聚物的相对分⼦质量分级分析以及相对分⼦质量分布测试。

⽬前已经被⽣物化学、分⼦⽣物学、⽣物⼯程学、分⼦免疫学以及医学等有关领域⼴泛采⽤，不但应⽤于科学实验研究，⽽且已经⼤规模地⽤于⼯业⽣产。

那么，凝胶⾊谱柱应该如何进⾏清洗和存放呢？ 1.凝胶⾊谱柱的清洗。

为了不使被测物质和杂质停留在⾊谱柱中，在每次的样品分析⼯作完成之后，都应及时地清洗凝胶⾊谱柱。

⾸先要⽤对被测样品洗脱能⼒强的溶剂来洗脱凝胶⾊谱柱，以分析⼯作中常⽤的反相⾊谱分析法为例，因其先流出的物质是极性⼤的物质，此时应⽤100%的甲醇或使⽤异丙纯、四氢呋喃等极性稍弱的溶剂将吸附在柱内的极性⼩的物质洗脱下来，洗脱液的⽤量⼀般为柱体积的20倍即可。

如果流动相是缓冲溶液，则应先⽤蒸馏⽔来冲洗凝胶⾊谱柱，以冲掉凝胶⾊谱柱内的盐，然后再⽤合适的溶剂来冲洗。

2.凝胶⾊谱柱的存放。

如果凝胶⾊谱柱暂时不⽤，存放时要注意以下⼏点：1.将凝胶柱⽤蒸馏⽔冲净后充上0.02%-0.05%的叠氮钠⽔溶液封存,或三氯丁醇(0.015%) 苯基汞代盐(0.001-0.01%)将⾊谱柱封闭后低温保存(温度在5℃左右)在冰箱。

2.再次使⽤时,⽤蒸馏⽔将保护溶液冲洗掉即可使⽤。

3.如果第⼆天还要使⽤也要从系统中取下，将柱封闭后存于4~8度的冰箱中冷藏。

成都摩尔科学仪器有限公司专业提供各种规格型号的凝胶⾊谱柱，如：（SRT SEC凝胶⾊谱柱，Zenix Sec 凝胶⾊谱柱，SRT-C SEC凝胶⾊谱柱，Zenix-C SEC凝胶⾊谱柱，Mono GPC凝胶⾊谱柱，Nanofilm凝胶⾊谱柱，MS-G10凝胶⾊谱柱。

）这⼏款赛分科技研发⽣产的凝胶⾊谱柱。

能够和各⼤知名（安捷伦,沃特斯,岛津,赛默飞）品牌相提并论。

TSK-GELG4000PWXL色谱柱操作说明TSK-GEL? G4000PWXL色谱柱使用手册请使用色谱柱前仔细阅读本《使用手册》。

本使用手册包括TSK-GEL? G4000PWXL色谱柱的操作条件和说明、安装说明以及柱子保护方面的信息。

产品型号08022 7.8mm ID×30cm08035 TSKtop-off gel PWXL，1g wet gelA 操作条件参数说明1. 出货溶剂水2. 最大流速1.0 mL /min当采用高黏度的缓冲溶液，为了不超过最大压力，需要降低最大流速。

当改变溶剂，采用的流速为最大流速的25%。

3. 标准流速 0.3-0.6mL/min4. 最大压力 20kg/cm2=300psi5. pH范围 2.0-12.06. 盐浓度≤ 0.5Molar7. 有机浓度≤ 20%。

低流速下采用梯度洗脱有机溶剂的浓度可以达到50%。

8. 温度 10-80℃ 当低于10℃时降低流速.9. 清洗溶剂1) 高盐浓度缓冲液（ 0.5-1.0M），或2) pH 2-3 或pH 9-12缓冲液，或3) 含有乙腈或甲醇的缓冲液，或4）含有尿素或SDS的缓冲液注意:根据样品性质选择清洗溶剂.例如采用1）除去碱性聚合物，2）除去疏水蛋白质等。

10. 储存长时间不使用色谱柱时，请保存在含有0.05%的NaN3缓冲溶液或20%的乙醇溶液中。

如果是过夜保存，色谱柱可在系统中过夜，但需采用流动相在低流速下整夜冲洗柱子。

阻止空气进入柱子。

11 柱子保护建议使用保护柱延长分析柱的寿命。

保护柱的寿命很大程度上取决于样品的清洁度。

一般，保护柱在进行了30-40个样品进样后，峰会变宽或者有峰裂的情况下，需要更换保护柱。

12 TSKtop-off gel 有时，由于事故、样品、流动相或操作的改变，色谱柱或保护柱入口会产生一个凹位。

可采用TSKtop-off gel PWXL 来填补这些空隙。

B 说明TSK-GEL G4000PWXL色谱柱是在数据单的条件下进行的柱效测定。

反相硅胶键合相色谱柱的清洗反相硅胶键合相一般包括C18 、C8 、C4 、苯基等，当用二元混合溶剂进行等强度洗脱时。

为移去污染物，可用20 个体积的强洗脱溶剂，如甲醇、乙腈或四氢呋喃来冲洗柱子。

如果流动相中含缓冲盐溶液，为防止有机溶剂清晰造成的盐析出，阻塞管路，应首先用20 个柱体积的不含缓冲盐的水- 有机相溶剂冲洗色谱柱，然后再用强洗脱溶剂清洗柱子。

如果用强洗脱溶剂仍不能驱除污染物，可以使用更强的溶剂或混合溶剂来洗脱。

当需用一系列的有机溶剂清洗色谱柱时，应逐渐增加它们的洗脱强度，并确保溶剂之间的混溶性。

对典型的反相硅胶柱，用于洗涤无缓冲盐的体系，推荐使用以下有机溶剂清洗系统：100 ％甲醇→100 ％乙腈→75 ％乙腈+25 ％异丙醇→100 ％异丙醇→100 ％四氢呋喃清洗后，按相反的顺序冲洗色谱柱，以返回到原始的流动相。

如果使用者怀疑色谱柱被严重的污染或阻塞，可将二甲基亚砜与水或二甲基甲酰胺与水，以各自50 ％的比例混合，并以低于0.5mL/min 的流速通过色谱柱。

由于污染物聚集在色谱柱头，逆向冲洗会缩短污染物在柱中迁移的距离；又因为色谱柱皆在高于操作压力下填充的，通常逆向液流不会扰动色谱柱床。

但如果色谱柱顶端过滤筛板的孔径大于柱底部过滤筛板的孔径，则固定相的微小粒子会在逆向冲洗过程通过筛板流出柱，从而会在柱中产生新的死空间引起柱床松动。

因此在逆向冲洗前，应先确认柱管两端过滤筛板的孔径一致。

除盐：对普通反相C18 键合相柱，为除去柱中含有的缓冲盐类或水溶性物质时，不应使用纯水冲洗。

因为C18 键合相像一条长链将硅胶黏结，当有有机溶剂存在时，其表面被流动相润湿，C18 长链完全展开，像海水中的海藻一样。

当纯水或缓冲溶液通过时，C18 键合相不能被浸润，键合相表面会塌陷，从而将溶剂、样品分子或无机盐分子包合。

此时仅用纯水无法将包合物洗脱出，应使用含5 ％有机溶剂的水溶液冲洗，以清除无机盐或水溶性物质。

HILIC,AFC,HIC, IEX系列色谱柱使用维护一、正相/亲水柱（Amide-80,氨基柱）1. 色谱柱启用将系统管路用纯水冲洗，然后换出厂溶剂（以出厂报告中出厂溶剂为准）冲洗系统后连接色谱柱，以0.1ml/min流速缓慢增大流速，冲洗10-20倍柱体积。

2. 色谱柱清洗溶液（1）疏水性杂质的清洗水溶性有机溶剂，如含70～95 %乙腈或甲醇的溶液。

（2）亲水性杂质的清洗水溶性有机溶剂，如含5～10 %乙腈或甲醇的溶液二、亲和色谱1.TSK gel FCR-IIIA-NPR1. 启用：不连接色谱柱，将HPLC系统预清洗。

使用前对系统内部进行清洗（在连接色谱柱前进行）1）系统内部已充分清洗的系统以1.0 mL/min的流速注入0.1 mol/L 柠檬酸水溶液大约30分钟，对系统内部进行清洗。

2）旧系统、系统内部清洗不到位的系统①以1.0 mL/min的流速注入0.1 mol/L 氢氧化钠水溶液约30分钟。

②以1.0 mL/min的流速注入纯水约30分钟。

③以1.0 mL/min的流速注入0.1 mol/L 柠檬酸水溶液大约30分钟。

在1）、2）全都用上清液洗后，请替换成洗脱溶液A，以1.0 mL/min 的流速注入约15分钟后执行空白梯度。

之后连接色谱柱，执行平衡、空白梯度，再开始测量。

2. 色谱柱清洗：请用注射器分多次注入含0.5 mol/L NaCl 的洗脱溶液或是含20 % 乙醇的洗脱溶液。

3. 保存：请替换成出厂溶剂（0.025 % ProClin® 300 + 0.65 mmol/L 柠檬酸+ 9.35mmol/L 柠檬酸三钠（pH 6.5））后冷藏保存（2～8 ℃）。

2.Protein A-5PW, TSKgel Chelate-5PW, TSKgel Heparin-5PW, TSKgelBoronate-5PW, TSKgel Tresyl-5PW1. 启用：先不接色谱柱，清洗系统，然后连接色谱柱先用超纯水清洗色谱柱，然后使用其他溶剂替换超纯水。

以以是色谱柱的冲洗程序:
1.用纯水冲洗柱子，每次冲洗50毫升，共冲洗两次。

这一步主要是去除柱子内的杂质和残留物。

2.用甲醇冲洗柱子，每次冲洗50毫升，共冲洗两次。

这一步主要是去除柱子内的水分，因为甲醇可以很好地清除水分。

3.如果需要进一步清洁柱子, 可以用异丙醇或正己烷等有机溶剂进行冲洗。

每次冲洗50升，共冲洗两次。

这一步主要是去除柱子内的有机杂质。

4.如果是反相色谱柱，分别用甲醇:水=90: 10、纯甲醇(HPLC级)、异两醇(HPLC级)、二氯甲烷(HPLC级)等溶剂作为流动相，依次冲洗，每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积，然后再以相反的次序冲洗。

5.如果是正相色谱柱，分别用正己烷(HPLC级)、异丙醇(HPLC级)、- =氯甲烷(HPLC级)、甲醇(HPLC级)等溶剂做流动相，顺次冲洗，每种流动相流经色谱柱不少于20倍的柱体积(异丙醇粘度大，可降低流速，避免压力过高)。

注意使用溶剂的次序不要颠倒，用甲醇冲洗完后，再以相反的次序冲洗至正己烷，所有的流动相必须严格脱水。

6.如果是离子交换色谱柱，长时间在缓冲溶液中使用和进样，将导致色谱柱离子交换能力下降，用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生，反之，用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生。

以上信息仅供参考，如果还有疑问，建议咨询专业人士。

色谱柱冲洗方法范文色谱柱是色谱分析中非常重要的组成部分，它起到分离、富集和纯化物质的作用。

随着色谱分析的发展，色谱柱的种类也越来越多，选择合适的冲洗方法对于延长色谱柱的使用寿命和提高分离效果非常重要。

下面将介绍几种常见的色谱柱冲洗方法。

1.水冲洗法水冲洗法是一种常见的色谱柱冲洗方法。

当色谱柱上的样品残留物或杂质堵塞柱子或降低分离效果时，可以通过水冲洗来清洁柱子。

具体操作是将色谱柱连接到系统中，使用纯水或者蒸馏水作为移动相，通过一段时间的冲洗来清洗柱子。

在冲洗过程中，可以调整冲洗流速和时间以及冲洗液的浓度来达到最佳的冲洗效果。

需要注意的是，水冲洗的时候要注意温度，避免将水温过高或过低，以免造成色谱柱损坏。

2.溶剂冲洗法溶剂冲洗法是利用溶剂的性质对色谱柱进行冲洗的方法。

根据需要冲洗的样品性质和柱上残留物的特点，选择合适的溶剂进行冲洗。

比较常用的溶剂冲洗方法有乙醇冲洗法、甲醇冲洗法和酸碱冲洗法等。

具体操作是将溶剂连接到色谱柱上，用一个较高浓度的溶剂进行冲洗。

这种方法适用于非极性或弱极性溶剂的冲洗，可以有效去除柱上的杂质。

3.反向冲洗法反向冲洗法是指利用与柱上残留物有亲和力的溶剂进行冲洗的方法。

这种方法通常适用于极性或离子性化合物的冲洗。

具体操作是将反向移动相连接到色谱柱上，并以较高浓度的反向移动相浸泡柱子一段时间，使残留物解离或溶解。

这种方法具有较好的选择性和分离效果，在去除残留物的同时，不会损害柱子的分离性能。

4.温度冲洗法温度冲洗法是通过加热或降低柱子的温度来清洗色谱柱的方法。

在不同温度下，残留物和杂质的溶解度和亲和性不同，可以通过调整温度来达到最佳的冲洗效果。

比较常用的温度冲洗方法有高温冲洗和低温冲洗。

高温冲洗适用于有机溶剂或高沸点溶剂的冲洗，可以加速残留物的溶解和去除；低温冲洗适用于水溶性溶剂的冲洗，通过降低温度可以减少溶剂的挥发和残留物的沉淀。

综上所述，选择合适的色谱柱冲洗方法对于延长色谱柱的使用寿命和提高分离效果非常重要。

阴离子交换色谱柱TSKgel DEAE-NPR 使用说明书东曹株式会社填料键合二乙氨基乙基官能团的无孔亲水性离子交换树脂离子交换容量：＞0.06 mequiv./mL粒径：2.5 μm色谱柱货号：0013075尺寸：4.6 mm（I.D.）×3.5 cm（L）出厂溶剂：超纯水pH值范围2～10盐浓度的范围小于1 M流速范围小于1.6 mL/min一般推荐的流速为1.0～1.5 mL/min。

清洗色谱柱请使用0.1～0.2 N NaOH清洗色谱柱。

通常，使用进样器多次注入0.5～1 mL的0.5～0.1 N NaOH 后即可还原色谱柱。

如果该步骤无效，请使用0.5～1 mL的20～40 %的乙酸多次清洗色谱柱。

推荐使用0.1～0.2 N NaOH定期（如，每天使用后）清洗色谱柱。

色谱柱性能测试（蛋白质混合物分离度）推荐使用以下条件测试色谱柱的性能。

样品：卵白蛋白（5 μg）和大豆胰蛋白酶抑制剂（5 μg）的混合物10 μL流动相：A：20 mM的Tris-HCl缓冲溶液（pH 8.0）B：20 mM的Tris-HCl缓冲溶液+ 0.5 M NaCl（pH 8.0）线性梯度：A液→B液；10 min流速： 1.0 mL/min出厂时，DEAE-NPR色谱柱拥有6.0以上的分离度。

非常重要！！！尽管还原由于杂质的吸附导致性能下降的DEAE-NPR色谱柱并不难，但是如果小颗粒杂质夹在填料颗粒之间，这种情况柱子很难还原。

由于填料颗粒之间的空隙非常小，如果样品或流动相中存在细小的颗粒就很容易卡在中间。

因此，强烈建议使用0.2～0.5 μm孔径的过滤器过滤样品后进行分析。

另外，在泵和进样器之间安装0.2～0.5 μm孔径的在线过滤器可以有效延长色谱柱的寿命。

东曹（上海）生物科技有限公司上海市徐汇区虹梅路1801号A区凯科国际大厦1001室电话：021-3461-0856传真：021-3461-0858E-mail：**************.cn网址：/home-cnTSKgel，TSKgel SuperMultipore, TSKgel STAT，BioAssist，Lipopropak，TOYOPEARL，ToyoScreen，TOYOPEARL GigaCap，TOYOPEARL MegaCap，TOYOPAK以及EcoSEC是东曹株式会社在日本，中国，美国，欧盟等的注册商标。

色谱柱的清洗要定期清洗色谱柱，清洗的频次取决于样品的纯度。

使用过程中，偶尔有一些样品是会吸附于柱内填充物上的。

如果您正在使用的色谱柱，其某个性能指标（如：不对称因子、保留时间、理论塔板数或者分离度）发生10%或更大的变化时，请一定要注意清洗您的色谱柱。

各种TSK-GEL色谱柱都附带了验收报告单和操作条件与规格说明书。

验收报告单上给出了用于色谱柱性能验收的测试方法；操作条件和规格说明书中给出了色谱柱的使用说明。

使用验收报告单中所列举的标准样品进行柱性能的测试，并计算样品中的某个组分或多个组分的不对称因子、理论塔板数和分离度。

请留心样品的保留时间，因为其会成为今后进行比对的参照基准。

清洗所有类型的TSK-GEL液相色谱柱的基本原则1. 按照相反的流动方向进行色谱柱的清洗。

2. 不要将色谱柱与检测器连接。

3. 流速选择为最大流速的一半，并切实进行柱压的监控。

4. 如果您打算使用pH值较高或者较低的溶液进行柱清洗的话，一定要确认您所使用的色谱系统的其它部分（如：泵、泵的密封圈、进样器等等）是否适合。

5. 使用至少5个色谱柱体积（5CV）的各种清洗溶液进行清洗，各个清洗步骤之间一定要使用5个柱体积的超纯水进行冲洗。

6. 使用您正使用的实验方案中的5个柱体积的流动相进行柱子的平衡。

我们在下面的内容以及操作条件和规格说明书中推荐了适合各种类型的TSK-GEL液相色谱柱使用的清洗溶液，您可以根据柱子和样品的种类进行选择。

一般来说，低pH值的盐溶液能够清洗碱性蛋白；有机溶剂能够清洗疏水性蛋白；尿素、界面活性剂等能够清洗强吸附物质。

清洗溶液SW&SW XL系列色谱柱1. PH较低（如：pH 3.0）、浓度较高的盐溶液（如：0.5M Na2SO4）；2. 添加水溶性有机物（MeOH、ACN、EtOH，10% -20%）的极性缓冲液；3. SDS（0.1%）、尿素（8M）或胍（6M）的缓冲溶液。

注意：这些试剂很难被去除。