近交系小耳猪骨形态发生蛋白的骨诱导活性研究
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小型猪在心血管系统、消化系统、生殖系统、老年病学、血液学、营养学、内分泌系统、皮肤、牙科、眼科、放射生物及免疫学研究中常猪和人在解剖学、生理学方面极其相似。
用猪作为实验动物。
近年来异种组织器官移植已受到医学界广泛重视,猪作为组织器官供体已显示出诱人的美好前景。
因此,实验猪越来越受到生命科学领域的关注。
但是普通猪体型大,饲育费用高,不便于实验操作和术后管理。
小型猪体型小,饲料消耗低,操作管理方便,成为更理想的实验动物材料。
在国外,二次大战以后已将猪作为实验动物广泛应用于生物医学研究,并且已培育出多种品系实验用小型猪。
我国从八十年代开始开发小型猪资源,开展了小型猪实验动物化的研究工作,目前已初步培育出几个品系,有些品系仍在纯化培育过程中。
重庆建"世界最好的猪圈" ( 2010-03-10)重庆市有一群为了科研献身的小猪,它们住在堪称“世界上最好的猪圈”里,每天生活费近50元。
日前笔者从重庆市科委获悉,国家小型猪医学生物学应用技术平台近日在大渡口区建桥工业园区建成,不久后,小型猪的生物学应用将形成产业化。
小型猪生物实验基地负责人,三医大实验动物学教研室主任、医学博士魏泓说,这个耗资8000万元的小型猪科研基地堪称“全世界最好的猪圈”。
为科研献身的小猪们住在恒温恒湿的“豪华猪圈”里,喝的是纯净水,用红外线取暖器,有自动喂食系统,一到时间,消毒过的标准化食物如鱼肝油、维生素C、矿物质就会送上来。
照顾它们的都是大学生和研究生。
据魏泓介绍,这里的母猪产子都是剖腹产,因为顺产会增加感染的几率。
据悉,这样的小香猪长不大,体重最多只有10千克~20千克。
为了表示对这些为科研“献身”的小猪的尊重,按照规定,在做实验需要杀死某一只小猪时,必须先将其麻醉,同时,他们还做出了需要杀死小猪时不能在其同伴面前进行等人性化规定。
据魏泓称,经过实验发现,小猪与人的相似度比小白鼠、猴更接近,于是,一些心血管疾病等实验都会用到它们,烧伤等创面敷面可用它们的皮代替。
骨形态发生蛋白
佚名
【期刊名称】《中国口腔种植学杂志》
【年(卷),期】2024(29)2
【摘要】属于转化生长因子-β(TGF-β)超家族的一员,包括多种相关蛋白,具有刺激间充质干细胞向软骨细胞和成骨细胞分化的特性,是最早发现的具有骨诱导作用的细胞因子。
同时,它也是细胞生长、分化、凋亡和神经发生的多功能调节因子,在胚胎发育过程中发挥重要作用。
【总页数】1页(P126-126)
【正文语种】中文
【中图分类】R78
【相关文献】
1.骨形态发生蛋白4和骨形态发生蛋白4/7基因转染对骨髓基质干细胞成骨活性差异的比较
2.重组腺病毒介导的骨形态发生蛋白9与骨形态发生蛋白2复合纳米羟基磷灰石/聚酰胺多孔支架修复桡骨缺损的比较
3.脂肪间充质干细胞过表达骨形态发生蛋白2促进骨质疏松大鼠牙槽骨缺损修复
4.骨形态发生蛋白-2和骨形态发生蛋白-7表达与脑胶质瘤复发的相关性研究
5.内皮细胞特异性骨形态发生蛋白2对血管新生的影响:生物信息学分析和实验验证
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实验动物试题及参考答案1、布氏杆菌病对生殖实验研究会带来影响,由于________,而导致实验的中断。
( )A、动物死亡B、动物的流产C、动物难产D、动物胚胎畸形答案:B2、根据我国国家技术监督局发布的实验动物环境设施监测标准,小鼠、大鼠繁育、生产设施(生产型)环境指标(静态)工作照度和动物照度是______。
( )A、150~300B、150~300C、100~200D、100~300答案:A3、确诊病毒的存在可以通过检查________、接种动物和鸡胚以及细胞、应用荧光抗体技术或免疫电镜技术、血清学等方法来确定病毒的存在。
( )A、器官B、细胞C、组织D、包涵体答案:D4、泰泽氏病多发生于________季节,与气候、青饲料等因素及饲养管理和卫生条件不良有关。
( )A、冬末至初春B、秋末至初春C、夏末至秋春D、春末至夏春答案:B5、是结核病诊断及病理研究的首选实验动物。
( )A、大鼠B、豚鼠C、犬D、家兔6、普通级犬配合饲料中维持饲料常规营养成分为______。
( )A、水份≤11 蛋白质≤14 粗脂肪≤3 粗纤维≤10-15 粗灰分≤9B、水份≤10 蛋白质≤18 粗脂肪≤4 粗纤维≤5 粗灰分≤8C、水份≤11 蛋白质≤17 粗脂肪≤3 粗纤维≤10-15 粗灰分≤9D、水份≤11 蛋白质≤20 粗脂肪≤4.5 粗纤维≤3 粗灰分≤9答案:D7、________是冬眠动物。
( )A、小型猪B、旱獭C、鼠兔D、犬答案:B8、______过量可导致小鼠繁殖紊乱和胚胎畸形。
( )A、维生素CB、维生素DC、维生素AD、维生素B族答案:C9、通过实验手段将新的遗传物质导入到动物胚细胞中,并能稳定遗传,由此获得的动物称为______。
( )A、同源突变系B、重组近交系C、转基因动物D、同源导入近交系答案:C10、小型猪的妊娠期为________ 天左右。
( )A、134B、124C、104D、114答案:D11、刚第弓形虫的终末宿主是________,还有一系列的中间宿主。
人乳活性成分—骨桥蛋白研究进展朱婧1综述汪之顼2陈同辛3审校1. 北京市科学技术研究院北京市营养源研究所(北京 100069);2. 南京医科大学公共卫生学院儿少卫生与妇幼保健学系(江苏南京 211166);3. 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心免疫科(上海 200127)摘要: 骨桥蛋白(OPN)是近年来备受关注的一种高度磷酸化,具有O-糖基化修饰的酸性蛋白。
根据OPN在体内的分布,可分为分泌型OPN和细胞内OPN,可由体内多种组织细胞合成或分泌,广泛存在于骨、肾、脑、肌肉等多种组织和细胞中。
近年的研究发现,乳汁尤其是初乳中分泌型OPN含量高,且分泌型OPN在生命早期的肠道生长、免疫调节、神经系统发育中发挥着重要作用。
本文综述乳汁中OPN对生命早期生长发育和健康作用的研究进展。
关键词:骨桥蛋白;肠道发育;免疫;婴幼儿Research progress in human milk active ingredient-osteopontin Reviewer: ZHU Jing1, Reviser: WANG Zhixu2, CHEN Tongxin3 (1.Beijing Institute of Nutritional Sources, Beijing Academy of Science and Technology, Beijing 100069, China;2. Department of Child and Adolescent Hygiene and Maternal and Child Health, School of Public Health, Nanjing MedicalUniversity, Nanjing 211166, Jiangsu, China; 3. Department of Immunology, Shanghai Children's Medical Center, School of Medicine, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200127, China)Abstract: Osteopontin (OPN) is a highly phosphorylated acidic protein with O-glycosylation modification and has attracted much attention in recent years. According to the distribution of OPN in the body, it can be divided into secreted OPN and intracellular OPN. It can be synthesized or secreted by a variety of tissues and cells in the body, and widely exists in bone, kidney, brain, muscle and other tissues and cells. Recent studies have found that secretory OPN is high in breast milk, especially in colostrum, and that secretory OPN plays an important role in intestinal growth, immune regulation and nervous system development in early life. This article reviews the research progress in the effects of OPN in milk on early life growth and health.Key words: osteopontin; intestinal development; immunity; infants and young childrendoi:10.3969/j.issn.1000-3606.2021.04.019母乳可提供婴儿生长发育所需的营养物质和活性成分,特别是一些与免疫保护密切相关的功能成分,包括蛋白质类,如乳铁蛋白(lactoferrin)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN);脂类,如1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯(1,3-dioleoyl-2-palmitoyl triglyceride,OPO)、乳源神经节苷脂(gangliosides milk origin,gsMO),以及母乳低聚糖(human milk oligosaccaride,HMO)等。
景洪市人民政府与云南邦格农业集团有限公司达成滇南小耳猪产业开发投资框架协议2009年12月14日,景洪市人民政府与云南邦格农业集团有限公司在锦都大酒店会议厅达成西双版纳州滇南小耳猪产业化开发项目投资框架协议。
景洪市委常委、常务副市长岩拉、云南邦格农业产业集团公司董事长李志刚出席会议。
据悉,西双版纳州滇南小耳猪产业化开发项目是景洪市人民政府为推动西双版纳州景洪特色滇南小耳猪产业化的发展,打造本地特色畜牧知名品牌,带动提升景洪市滇南小耳猪产业快速发展,促进农民增收的一个重点建设项目。
该项目建设期限为三年(2010—2012),总投资4000万元。
其中:原种猪场建设投资1600万元;扩繁场建设投资1600万元;规模户、专业户扶持建设投资500万元;专柜和餐馆建设投资300万元。
项目将建设滇南小耳猪原种猪场1个,占地面积100—120亩;建设滇南小耳猪扩繁场2个,占地面积120亩;共同扶持规模户、专业户,共计500户,户均存栏50头以上,辐射带动农户5000户,年均出栏3万头以上,年均产值达到3500万元,每年为农民增收800万元;在省内外投资建设滇南小耳猪出售专柜20个,高档餐馆10个。
在投资期限内市政府每年将在财政预算中安排100万元专项资金用于全市滇南小耳猪产业化开发,并将云南邦格农业产业集团公司视为景洪市滇南小耳猪开发唯一指定企业和确定为景洪市滇南小耳猪养殖及加工的重点企业。
目前,云南邦格农业产业集团公司现已在普文镇大开河、嘎洒镇(原种猪场)建有2个扩繁场,并在景讷乡曼散村委会曼窝村小组建有1个原种场。
景洪市发改、农业、财政、环保、统计、水电、交通、土地、云南电网等9家单位负责人及云南邦格农业产业集团公司相关人员参加会议2008至2009年西双版纳滇南小耳猪繁育基地建设项目绩效审计情况的公告(二O一O年五月二十七日公告)根据《中华人民共和国审计法》第二条和第十六条的规定及我局2010年审计项目计划,2010年4月9日至4月30日,我局对州种猪场2008年至2009年西双版纳滇南小耳猪基地建设投资项目绩效情况进行了审计,西双版纳州种猪场能够配合审计工作,并对提供的会计资料、证明材料的真实性和完整性负责。
小型猪动物模型在医学领域中的研究应用张贺;王承利;王洋;陈克研;苏鹏;孙倩【摘要】The swine are similar with human beings at the anatomy and the physiology. There are many advantages of miniature pigs models on medical domain, such as small figures, lower food consumption, more convenient management. The miniature pigs are the perfection as animal models. It has been summarized that the species of miniature pigs domestic and overseas , and the application of miniature pigs as animal models on the cardiovascular system, the digestive system, the cosmetology, the surgery, the organ transplantation and the oral cavity system.%猪在解剖学和生理学等方面与人极其相似.小型猪作为实验动物模型应用于医学研究领域,其优点是:体型小,饲料消耗低,管理操作方便,特别是经过人工培育的各品系小型猪能够配合试验,应激小,基因纯合度较高,成为理想的动物模型.作者综述了小型猪的国内外品种、品系,及其作为动物模型在心血管系统领域、消化系统领域、皮肤整形领域、外科领域、器官移植领域、口腔系统领域的研究与应用.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2012(039)007【总页数】4页(P263-266)【关键词】小型猪;动物模型;品种;品系;临床应用【作者】张贺;王承利;王洋;陈克研;苏鹏;孙倩【作者单位】沈阳军区总医院实验动物科,辽宁沈阳110016;沈阳军区总医院实验动物科,辽宁沈阳110016;沈阳军区总医院实验动物科,辽宁沈阳110016;沈阳军区总医院实验动物科,辽宁沈阳110016;沈阳军区总医院实验动物科,辽宁沈阳110016;沈阳军区总医院实验动物科,辽宁沈阳110016【正文语种】中文【中图分类】S828.9猪与人的基因纯和度为95%,而且在解剖学、疾病发生机理等方面存在很大的相似性,其在生命科学研究领域的重要地位被人们广为关注。
・实验研究・近交系小耳猪骨形态发生蛋白的骨诱导活性研究△夏胜利 杨庆秋 胡侦明 张宝华 劳汉昌 曾养志3 摘 要 目的:探讨近交系西双版纳小耳猪骨形态发生蛋白骨诱导活性。
方法:用改良的Urist 提取法从近交系小耳猪四肢皮质骨中提取纯化BMP ,行SDS 2PA GE 蛋白电泳检测其分子量。
将BMP 2mg 、5mg 2种剂量分别植入2组小鼠右侧股部肌袋中,于术后7、14和28d 取材,X 线摄片后行组织学观察、碱性磷酸酶检测。
结果:(1)SDS 2PA GE 显示小耳猪BMP 相对分子量主要集中于66K D 、48K D 、36K D 、27K D 、22K D 及14K D 附近;(2)X 线检测实验组BMP 植入区及阴性对照组均未发现有明显的高密度影;(3)AL P 活性检测显示5mg 组、2mg 组及阴性对照组之间有显著性差异(P <0.01),5mg 组AL P 活性高于2mg 组及阴性对照组(P <0.01)。
(4)组织学观察BMP 5mg 组于术后7d 有大量间充质细胞增生聚集,第14d 有大量软骨细胞、类骨组织及少量新骨形成,第28d 可见板层骨及骨髓。
结论:研究结果显示小耳猪骨形态发生蛋白具有肯定的骨诱导活性。
关键词 小耳猪; 骨形态发生蛋白; 骨诱导中图分类号 R687 文献标识码 A 文章编号 1005-8478(2003)06-0402-04Study on the Activity of Osteogenesis of Small 2ear Porcine Bone Morphogenetic Protein ∥XIA S heng 2li ,YA N G Qing 2qiou ,HU Zhen 2ming ,et al.Depart ment of Orthopaedics ,the Second A f f iliated Hospital of Kunming Medical College ,Kun 2ming 650101Abstract Objective :To investigate the osteogenic activity of bone morphogenetic protein (BMP )of Banna small 2ear pig Methods :BMP were separated and purified from cortical bone of limbs of small 2ear pig through Urist improving method and MW was determined by SDS 2PA GE.36Balb/c mice were divided into 2groups at random ,then 2mg and 5mg sepBMP were separately implanted in the right thigh muscle pouch of mouse.The s pecimens harvested at 7,14and 28days after implantation were processed for measuring bone inducing activity by histological analysis and alkaline phosphatase (AL P )assay after roentgenography.Results :(1)SepBMP contained polypeptide fragments with MW at 66×103K D ,48×103K D ,36×103K D ,27×103K D ,22×103K D and 14×103K D as shown in SDS 2PA GE.(2)Roentgenographs showed no singnificant high density im 2ages at the site of implantations of all mice.(3)AL P assay showed that there was significant difference (P <0.01)among three groups and the AL P activities of 5mg group was higher than that of 2mg and the contral group (P <0.01).(4)Histological ob 2servation showed that in 5mg group there were a large amount of quantity of mesenchymal cells proliferated and gathered on day 7after implantation.Cartilage formation was induced within 2weeks and lamellar bone includin g bone marrow was seen within 4weeks.Conclusion :The results of this study suggest that the sepBMP possesses certain osteoinduction properties.K ey w ords Small 2ear pig ; Bone morphogenetic protein ; Osteogenesis△基金项目:本课题为国家自然基金资助项目(项目编号:30060080)作者单位:昆明医学院第二附属医院骨科,云南 6501013云南农业大学,昆明作者简介:夏胜利(19712),男,安徽淮南人,现为昆明医学院硕士研究生,主治医师。
研究方向:异种骨移植。
电话:(0871)5326727 E 2mail :victor -0930@ 近年来,骨形态发生蛋白(Bone Morphogenetic Protein ,BMP )成为骨科、口腔科及整形外科研究热点之一。
1965年Urist 成功地用牛脱钙骨基质在骨骼外组织内诱导骨形成后,发现和证实骨基质明胶含有骨诱导活性的骨形态发生蛋白。
以后有许多研究者成功的从兔、猪、鼠、羊及人的脱钙骨基质中提取出此种蛋白。
近交系版纳小耳猪是经过20余年的严格近交选育,其近交系数已高达97.9%。
稳定的遗传特性和科学的饲养使其成为进行异种骨移植的理想品种。
用近交系猪进行异种骨移植在国内外还未曾有人尝试,从近交系猪骨中提取BMP 亦未见报道,我们首次尝试对近交系版纳小耳猪骨进行BMP (Small 2ear Porcine Bone Morphogenetic Protein ,下称sepBMP )提取和成骨活性实验。
现将我们的初步研究报告如下。
1 材料与方法1.1 小耳猪骨的处理及骨基质明胶的制备小耳猪骨由云南农业大学曾养志教授提供。
参照改良的Urist 提取法1、2。
取小耳猪四肢管状骨,除去骨骺端、骨髓、骨膜,粉碎成约3~5mm 大小的骨粒,置于1¬1氯仿/甲醇中脱脂4h。
于0.6NHCL中脱钙72h,于2MCaCL2中24h, 0.5M EDTA中4h,8MLiCl中24h,以去除其它蛋白成分。
以上步骤均进行强力持续搅拌,水浴后去水制成骨基质明胶。
1.2 小耳猪BMP的提纯将骨基质明胶加入含有10mmol/L N2乙基顺丁烯二酰亚胺及0.5M CaCL2的6M尿素中抽提36h。
取上清于透析袋中用蒸馏水透析72h,水浴后经18000rpm离心30min,收集沉淀,即为sepBMP粗提物。
再将粗提物溶于含0.05M CaCL2的4M盐酸胍中,于3500rpm离心30min,上清装透析袋兑柠檬酸缓冲液透析24h,18000rpm离心80min,沉淀物用1¬1氯仿/甲醇表面洗涤10min,冷冻干燥后即得部分纯化的sepBMP,经环氧乙烷(EO)消毒4℃冷藏备用。
1.3 sepBMP的十二烷基硫酸钠2聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS2 PA GE)分析制备12%分离胶及5%浓缩胶,同时将2次提取的部分纯化sepBMP各5mg溶解后与等体积加样缓冲液混合,与低分子量Marker沸水浴4min,加样后行SDS2PA GE垂直板电泳,80V 下电泳4h后凝胶行考马斯亮蓝R250染色及脱色液脱色,并行凝胶数码照相。
低分子量Marker相对分子量为66K D、45K D、36K D、29K D、24K D、20K D和14.2K D。
以各标准蛋白质的相对迁移率为横坐标、蛋白质分子量的对数为纵坐标;在半对数坐标纸上作图,可得到一条标准曲线,根据此曲线求得待测蛋白的相对分子量。
1.4 sepBMP骨诱导活性实验采用体重20~22g雄性BALB/c小鼠36只,随机分为2组,经乙醚气体麻醉后,无菌条件下于小鼠右侧大腿后内侧行0.5cm皮肤切口,在股部肌间隙钝性分离后分别植入2mg及5mg sepBMP成为2mg组、5mg组,对侧行模拟手术作为阴性对照组。
术后常规饲养,于术后第7、14及28d处死动物。
每次每组处死6只,行双下肢X线摄片后,取sepBMP植入部位及少量周围组织,以刀片正中切开,其中一半组织用10%甲醛固定,常规石蜡包埋,4μm厚切片后行HE及Masson染色,行组织学观察;另一半组织称湿重后匀浆、离心,上清用日立7170全自动生化分析仪行AL P活性检测。
2 结 果2.1 sepBMP的SDS2PA GE蛋白电泳分析结果2次提取的sepBMP经电泳后,从电泳图谱上可见有多条区带组成,相对分子量范围为14~66K D,但主要集中于6个区带附近,其相对分子量分别为66K D、48K D、36K D、27K D、22K D及14K D,提示sepBMP是由这些组分组成的多肽复合物,其中以27K D蛋白条带最为明显。
2次提取的sepBMP的蛋白条带一致。
(见图1)图1 2次提取的sepBMP的SDS2PA GE蛋白电泳(注:M为标准蛋白Marker;A为第1次所提取蛋白;B为第2次所提取蛋白)2.2 X线观察通过对X线摄片的比较观察,各时间段所有sepBMP植入区及阴性对照组均未见明显密度增高影。
2.3 sepBMP骨诱导活性观察2.3.1 组织学观察结果HE及Masson染色结果显示sepBMP2mg组、5mg组植入小鼠肌袋第7d:sepBMP已吸收,在植入部位可见大量间充质细胞伴有少量炎性细胞浸润。