南京大学实验报告果蝇的单因子杂交实验

单因子分离规律验证

实验目的

1.熟悉以果蝇为材料进行遗传学杂交实验的基本方法；

2.验证遗传的基本规律——分离规律

预备知识

遗传是自然界极其复杂的生命现象，只有通过少数有相对性状差异的类型之间进行杂交，并分析这些性状在亲本和杂种子代中的表现，才易于在复杂的遗传现象中找到遗传的基本规律。分离规律、自由组合规律、连锁规律等都是采用这种杂交实验的方法发现的。

在果蝇杂交中，有相对性状的品系之间进行杂交，杂种F1表现为显性，杂种F1形成配子时，带有显隐杂合等位基因的一对同源染色体对等分离，等位基因也随着分离，产生两种不同配子，因此，不论显性性状还是隐性性状都将在F2中按一定的比例在不同的个体上重新出现。实验原理

本实验采用黑体与野生型的交配收集并统计F2代的方式，通过验证其后代比例是否为野生：黑体=3:1的比例，来验证单因子的分离定律。

实验材料

野生型黑腹果蝇、黑体果蝇

解剖镜、毛笔、麻醉瓶、白瓷板、标签、吸水纸、培养瓶(4瓶/人)、乙醚、75%乙醇

实验步骤

②亲本果蝇的培养。

②处女蝇的收集：

清除成虫后10小时内进行收集，收集的处女蝇分品系单独培养，如一次收集数量不够，可

再作第二、第三次收集。

PS：处女蝇的收集非常重要。果蝇交配一次后，雄蝇的精子会贮存在雌蝇体内陆续使雌蝇的卵受精，如果杂交不用处女蝇，会造成杂交后代的实验结果不准确。

③选处女蝇分正交（++♀/bb♂）

反交（bb♀/++♂）两个杂交组合，分别置于新鲜培养瓶中，每瓶5～6对，贴上标签，注明亲本类型，实验日期，姓名，学号等，然后置于22℃～25℃培养箱中培养。

③一周后，清空亲本果蝇。

PS：清空亲本的操作是因为子一代是杂合子，其自交才是杂交实验，测出准确的分离比。

⑤二周后，观察F1果蝇体色，看是否与预期结果相符。

⑥取5-6对F1果蝇放入新鲜培养瓶中，每种组合放两瓶。

⑦三周后，清空F1果蝇。

PS：清空F1是因为之后的实验结果需要来自F2的计数，若F1混在其中会影响实验结果。亲本是野生型（显性纯合子），与子一代交配不算杂交，会影响实验结果。

⑧四周后，F2成蝇长出，统计各类果蝇数，2～3天后再统计一次，统计过的果蝇处死。

⑨在表格中记录实验结果。

注意事项（也是影响实验成败的一些关键因素）

1）进行杂交的亲本必须是纯种，自交不产生分离，这样的个体才能作为杂交的亲本。

2）必须防止意外的杂交，雌蝇应选用孵化后12小时内的处女蝇。

3）正确记录杂交子代每种类型的个体数，并且尽可能获得较大的杂交群体，以正确可靠地反映出遗传规律。

4）保持相对稳定的环境条件，使杂交性状的表现不致因不同的条件影响而改变。

实验结果

F1代：

由F1代实验结果可知，在黑体与灰体性状中,灰体对黑体为显性。

F2代：

自由度df=2-1=1

P=0.05时查表得x2为3.84,实验所求得的X2值与查表所得的X2相比较时，0.26<3.84，统计学上认为在5%显著水准上差异不明显，故野生型与突变型F2代之比为3:1。孟德尔遗传定律得到验证。