1）常规制备DNA盐析法1．用淋巴细胞分离液从抗凝血中分离出白细胞。
2．每3ml细胞悬液加10ml红细胞裂解液溶解红细胞两次，再加2ml白细胞裂解液溶解白细胞。
3．加50μl 10％SDS和70μl蛋白酶K消化蛋白质，37℃过夜或55℃3h。
4．加0.25体积饱和醋酸钠溶液，剧烈摇动15s。
5．2000r/min离心15min，收集上清。
6．加入2.5倍预冷无水乙醇沉淀DNA，－20℃过夜。
7．吸取DNA团块用70％乙醇洗3次，每次10 000r/min，10min。
再溶于适量TE缓冲液中，4℃保存。
酚抽提法1．采集EDTA抗凝血0.5ml，加双蒸水2.5ml，溶解红细胞。
2．离心10 000r/min，5min，弃上清。
3．加0.5ml生理盐水，混匀，离心10 000r/min，5min，弃上清。
4．加500μl TES，混匀，再加20％SDS 25μl，蛋白酶K 4μl置55℃水浴4h或37℃水浴过夜。
5．加等体积饱和酚，混匀，离心10 000r/min，5min，吸取上层水相，再加等体积饱和酚抽提一次。
6．加等体积氯仿：异戊醇再抽提一次。
7．吸取上层液，加1/10体积醋酸钠，2.5倍体积无水乙醇，混匀，－20℃过夜，沉淀DNA。
8．吸出DNA团块，用预冷70％乙醇洗1次，弃尽液体，真空抽干DNA，加适量TE溶解。
4℃保存。
2）限制性内切酶消化在无菌EP管中依次加入双蒸去离子水7μl，10×缓冲液2μl，限制性内切酶1μl，DNA 10μl。
反应体系含1×缓冲液、DNA 5μg、酶10U。
稍离心以混匀，37℃水浴1～1.5h。
酶解结束后向反应管中加1/10体积的终止液终止反应，冷却至4℃，准备电泳。
3）琼脂糖凝胶电泳1．配制1％琼脂糖凝胶板：取0.4g琼脂糖加40ml TBE，微波炉熔化，加少量双蒸水补充蒸发的水分，将其冷却至60℃，倒入凝胶槽内，充分凝固后拔出样品梳。
2．从制胶槽中卸下凝胶板，放入电泳槽，加入1×TBE，使其液面略高于琼脂糖板。
