狂犬病毒生物信息学分析

狂犬病病毒实验室检测方法摘要：狂犬病（Rabies）是一种重要的人兽共患传染病，由狂犬病病毒（Rabies virus，RV）感染温血动物和人后引起，近年来又有感染上升的趋势。

一种准确、灵敏、快速的实验室检测诊断方法就显得极为重要。

现就酶联免疫吸附试验（ELISA）、荧光抗体方法（FAT）、快速荧光抑制灶技术（RFFIT）、反转录－聚合酶链反应（RT-PCR）、荧光定量 RT-PCR，基因芯片技术和恒温扩增技术等狂犬病病毒实验室诊断方法做一综述。

关键词：狂犬病狂犬病病毒检测方法狂犬病（Rabies）是一种重要的人兽共患传染病，由狂犬病病毒（Rabies virus，RV）感染温血动物和人后引起，以恐水、畏光、吞咽困难、狂躁、急性致死性脑脊髓炎，进行性麻痹和最终死亡为主要临床特征。

RV可感染多种温血动物引起死亡，表现为高度嗜神经性。

脑组织感染RV后遭到破坏，使得狂犬病感染的病死率几乎 100%。

据WHO数据显示狂犬病在全世界150个国家和地区出现过狂犬病病例。

尽管狂犬病可以通过疫苗免疫进行预防，全世界每年仍有超过 5.5 万人死于该病，主要集中在亚、非、拉等发展中国家[1]。

中国狂犬病疫情较严重，居世界第2位[2~3]，近年来，狂犬病疫情呈现回升的趋势[4]。

检测狂犬病抗原抗体、分析狂犬病的流行特点，并建立高效、快速、可靠的实验室检测方法可以有效控制此病的流行。

下面主要针对RV的形态特征和分子结构及主要的检测技术进行概述。

1、狂犬病病毒形态特征RV属于弹状病毒科（Rhabdoviridae）狂犬病病毒属（Lyssavirus）血清/基因 1 型，单股负链RNA病毒。

电镜下观察病毒粒子直径为70～80nm，长160～240nm，一端钝圆，另一端平凹，整体呈子弹状[5]。

病毒有双层脂质外膜，其外面镶嵌有1072-1900个8-10nm长的纤突(spike)，为糖蛋白，每个糖蛋白呈同源三聚体形式，电镜还显示了糖蛋白具有“头”和“茎”结构。

不同亚型狂犬病毒非结构蛋白的基因结构与功能分析狂犬病是一种威胁人类健康的病毒性疾病。

目前已知狂犬病毒有两种亚型，即传统亚型和蝙蝠亚型。

两种亚型病毒的非结构蛋白在病毒复制和致病过程中起到了重要的作用，因此对这些非结构蛋白的基因结构和功能进行深入的研究可以更好地理解狂犬病毒的病理机制，为狂犬病的预防和治疗提供重要的理论支持。

传统亚型狂犬病毒的非结构蛋白主要包括L、P和N蛋白。

其中，L蛋白是病毒复制过程中的关键酶，具有RNA聚合酶活性和RNA开花酶活性。

P蛋白是L蛋白的助手，能够与L蛋白形成复合物，在病毒复制过程中发挥重要作用。

N蛋白则参与了病毒颗粒的形成和包装过程，并能够诱导宿主免疫应答。

相比传统亚型狂犬病毒，蝙蝠亚型狂犬病毒的非结构蛋白多样性更加复杂。

蝙蝠亚型狂犬病毒的L蛋白与传统亚型狂犬病毒的L蛋白在基因序列上存在显著的差异，这也造成了两者之间在RNA聚合酶和RNA开花酶活性上的差异。

此外，蝙蝠亚型狂犬病毒的P蛋白和N蛋白也与传统亚型狂犬病毒的相应蛋白存在差异。

蝙蝠亚型狂犬病毒的P蛋白中还存在着一个新颖的功能结构域，称为重要的RNA聚合酶互作（P-MBM）结构域，该结构域可以与L蛋白进行相互作用，从而协同调节RNA聚合酶复合物的形成和功能。

总的来说，非结构蛋白在狂犬病毒的致病过程中起到了重要的作用。

通过不同亚型狂犬病毒非结构蛋白的基因结构和功能的分析，我们可以更好地理解狂犬病毒的复制过程和致病机制，为狂犬病病毒的防治提供更加深入的理论基础。

未来，我们需要进一步开展相关研究，全面深入地掌握狂犬病毒的基础生物学特征，为制定针对狂犬病的有效措施提供必要的科学依据。

狂犬病病毒检测方法的研究进展
蔡翼虎;王玉芳;严雪仙
【期刊名称】《浙江畜牧兽医》
【年(卷),期】2009(34)2
【摘要】狂犬病病毒（RV）属弹状病毒科、狂犬病病毒属，病毒呈杆状，一端扁平，另一端钝圆，长180～250nm，宽75nm，基因组为12kb的单股负链RNA，从3’端至5’端依次为N、Ns、M、G、L五个结构基因，分别编码五种结构蛋白，即核蛋白（N）、磷酸化蛋白（NS）、基质蛋白（M）、糖蛋白（G）和转录酶蛋白（L）。

狂犬病是由狂犬病病毒引起的急性自然疫源性传染病，主要侵害中
枢神经系统，动物表现极度兴奋，狂燥不安和意识障碍，最后麻痹死亡，所有温血动物均可感染，为人畜共患的急性传染病，一旦发病，病死率高达100％。

【总页数】2页(P12-13)
【作者】蔡翼虎;王玉芳;严雪仙
【作者单位】桐乡市畜牧兽医局,浙江桐乡,314500;衢州市衢江区畜牧兽医局;衢州
市衢江区畜牧兽医局
【正文语种】中文
【中图分类】S852.63
【相关文献】
1.猪伪狂犬病毒分子生物学检测方法研究进展 [J], 于新友;李天芝;高鹏;王金良
2.猪伪狂犬病病毒的检测方法研究进展 [J], 顾凡;黄山;刘鹏娟;黄剑波;卓秀萍;朱玲
3.狂犬病病毒实验室检测方法研究进展 [J], 杨妍梅;冯若飞;马忠仁
4.猪伪狂犬病病毒强毒株鉴别检测方法研究进展 [J], 李娇;谢金文;李峰;沈志强
5.伪狂犬病毒分子生物学检测方法研究进展 [J], 万娟
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狂犬病病毒培养技术研究进展第一篇：狂犬病病毒培养技术研究进展狂犬病病毒培养技术的研究进展狂犬病作为一种几乎100%致死的人兽共患传染病，对人类的危害已经存在了4000多年，至今仍无有效的治疗药物，可行的控制策略只有暴露前免疫和暴露后预防。

其中暴露前免疫主要是针对动物而言，因为人的狂犬病来源于动物，只要动物的狂犬病免疫预防有效，可完全控制人狂犬病的发生；而暴露后预防主要用于人，因为人一旦被带毒动物咬伤，必须及时进行全程的暴露后预防才能防止感染狂犬病病毒。

不论是暴露前免疫，还是暴露后预防，都离不开安全、有效、廉价的疫苗。

人和兽用狂犬病疫苗的发展，都依赖于病毒培养技术的不断进步，尤其是微载体、发酵技术和无血清培养基的广泛应用，把狂犬病病毒的增殖滴度提高到了一个新的水平，同时降低了生产成本，从而使高质量的细胞纯化疫苗逐渐占领市场。

无论是传统的体内培养技术，还是现在的细胞培养技术，以及新型的细胞发酵和生物反应器，目前都广泛应用于狂犬病病毒的实验室研究或疫苗生产。

本文主要就狂犬病病毒培养技术的发展和新技术的应用现状综述如下。

体内培养技术体内培养技术利用了狂犬病病毒的嗜神经特性，具有敏感性好的优点，可以提高病毒检测的阳性率，而且易于操作，适用于不具备组织培养条件的实验室。

其中，小鼠脑内接种是实验室最常用的狂犬病诊断和病毒培养技术之一，其他动物如大鼠、羊、兔等，过去主要用于狂犬病神经组织疫苗的生产。

禽胚胎培养技术主要是利用鸭胚和鸡胚进行狂犬病病毒培养，如鸡胚传代致弱的Flury-HEP、Flury-LEP和Kelev毒株。

1.1 脑内培养技术小鼠脑内接种是最常用的狂犬病病毒脑内培养技术，最早用于狂犬病野毒株的分离培养是在1925年[5]。

1955年，该技术开始用于疫苗生产，Fuenjalida和Palacios用新生鼠脑制备出人用组织疫苗（SMBV），该疫苗曾在南美洲使用了40多年，最终因使用后会引起严重的神经综合症而被迫停产[1]，但是小鼠脑内接种技术却一直延用至今。

课程：分子免疫学题目：狂犬病病毒简介及致病机理学院：生命科学学院姓名：朴佳芳学号： ********** 2016年 11月25日狂犬病病毒简介及致病机理摘要狂犬病又称恐水症，为狂犬病病毒引起的一种人畜共患的中枢神经系统急性传染病。

多见于狗、狼、猫等食肉动物。

人多因被病兽咬伤而感染。

临床表现为特有的狂躁、恐惧不安、怕风恐水、流涎和咽肌痉挛，终至发生瘫痪而危及生命为一种古老的侵害中枢神经系统、可引起严重脑脊髓炎的烈性人畜传染病，一旦发病，病死率几乎为100％。

我国是狂犬病高发国家，每年的狂犬病病例数仅次于印度，居世界第二位。

狂犬病由狂犬病病毒属病毒引起，其中作为代表种的RV是引起狂犬病的主要病因。

近年来，随着分子生物学的发展和研究手段的进步，人们对于Rv的结构、基因功能等有了深入的认识，为狂犬病疫苗的研制和改造积累了丰富的资料和理论依据。

本文结合狂犬病和Rv最新的研究进展，对糖蛋白、细胞凋亡、感染与免疫、复制和转录等致病机理及Rv及宿主细胞对病毒感染应答方面等方面作一综述。

关键词：狂犬病狂犬病毒致病性感染Abstract Rabies, also known as fear of water, for the rabies virus caused by a zoonotic acute infection of the central nervous system. More common in dogs, wolves, cats and other carnivores. Many people infected by the disease beast bites. Clinical manifestations of the unique manic, fear of fear, fear of the wind fear of water, salivation and pharyngeal muscle cramps, and finally paralyzed and endanger life as an ancient violation of the central nervous system, can cause severe encephalomyelitis of violent human and animal infectious diseases, Once the disease, the mortality rate is almost 100%.China is a high incidence of rabies countries, the number of rabies cases each year after India, ranking second in the world. Rabies is caused by a rabies virus, in which RV as a representative species is the main cause of rabies. In recent years, with the development of molecular biology and the progress of research methods, people have a deep understanding of the structure and gene function of Rv, and accumulated rich data and theoretical basis for the development and transformation of rabies vaccine. In this paper, we reviewed the recent advances in rabies and Rv, and reviewed the pathogenesis of Rv and host cells, such as glycoprotein, apoptosis, infection and immunity, replication and transcription, and the response to virus infection.Keywords: Rabies Rabies virus Pathogenic Infection目录摘要 (1)一、狂犬病病毒的介绍和分类 (3)二、狂犬病毒的特征和传染情况 (4)（一）传染源 (5)（二）传播途径 (5)（三）传播对象 (5)三、狂犬病病毒致病机理 (6)（一）糖蛋白 (6)（二）细胞凋亡 (7)（三）感染与免疫病毒的复制 (7)（四）复制和转录 (8)参考文献 (8)狂犬病（rabies）又称恐水症（hydrophobia），为狂犬病病毒引起的一种人畜共患的中枢神经系统急性传染病。

课程论文题目：狂犬病毒ABLV编码核蛋白（N）的生物信息学分析课程名称：生物信息学姓名：秦鸽鸽学号：Y132140504学院：生命科学与工程学院专业：基础兽医学狂犬病毒ABLV编码核蛋白（N）的生物信息学分析摘要：狂犬病病毒（rabies virus，ＲＶ）是引起中枢神经系统感染的急性人畜共患传染病。

狂犬病病毒基因组是由单股负链、不分节段的RNA组成。

基因组编码病毒的核蛋白（N）、磷酸化蛋白（NS）、基质蛋白（M）、糖蛋白（G）和依赖RNA 的RNA 多聚酶（L）5 个主要结构蛋白。

N蛋白是组成病毒粒子的主要核蛋白，是诱导狂犬病细胞免疫的主要成分，常用于狂犬病病毒的诊断、分类和流行病学研究。

本文就核蛋白（N）的理化性质、蛋白质结构、系统进化关系等进行了预测和分析，预测结果表明核蛋白的一级结构稳定，为亲水性蛋白，有两个跨膜区，ABLV病毒与其它6个基因型的病毒亲缘关系较其他病毒近，但之间又有明显的距离。

关键字狂犬病毒；核蛋白；理化性质；蛋白质结构预测；系统进化分析狂犬病病毒在野生动物（狼、狐狸、鼬鼠、蝙蝠等）及家养动物（狗、猫、牛等）与人之间构成狂犬病的传播环节。

人主要被病兽或带毒动物咬伤后感染。

一旦受染，如不及时采取有效防治措施，可导致严重的中枢神经系统急性传染病，病死率高。

狂犬病是由狂犬病病毒（rabies virus，ＲＶ）引起的中枢神经系统感染的急性人畜共患传染病。

所有温血动物都可感染，狂犬病一旦发病，病死率几乎100％［1］，是人类病死率最高的急性传染病之一。

该病流行于100 多个国家和地区, 中国的狂犬病发病率占世界第二位, 仅次于印度[2]。

狂犬病病毒基因组是由11 928 或11 932 个核苷酸组成的单股负链、不分节段的RNA，分子量约4.6×106。

基因组从3′端至5′端的排列依次为N、NS、M、G、L 5 个结构基因，各基因的序列长度分别为1 421、991/804/805、1 675/2 059、2 069、6 429/6 384 个核苷酸，分别编码病毒的核蛋白（N）、磷酸化蛋白（NS）、基质蛋白（M）、糖蛋白（G）和依赖RNA 的RNA 多聚酶（L）5 个主要结构蛋白[3]。