标准品和校准品的概念

标准品和校准品的概念 IMB standardization office【IMB 5AB- IMBK 08- IMB 2C】标准品和校准品的概念传统的，要使可靠或有依据，往往有一个标准品(Standard)。

以临床化学检验的比色测定为例，常作三个检测：空白、标准、测定。

用空白液调整吸光度为零，读出测定比色液和标准比色液的吸光度，分别为As和Au；已知标准液浓度为Cs。

在一定范围内，某分析物浓度和吸光度呈良好比例关系。

为了克服纯标准液和病人样品间的基体差异，20年前开始引用具有与病人样品基体相似的校准品替代标准品，用于日常工作。

由于以往在使用标准品时不强调它的专用性，国内在应用校准品时忽略了它的专用性。

任何方法或仪器、试剂使用一个校准品，严重影响检验质量。

一。

标准液的定值一般而言，检验工作使用的标准品属应用标准。

配制或供应这类标准品的或厂商具有符合质量标准的纯品。

称取一定量的纯品，然后将其溶解，在容量瓶内用溶剂稀释至容积刻度，混匀，标准液配制完成。

由称量法获得的称量值和容量法配制的容积，计算出该标准品浓度。

检定部门抽样测定，结果在规定范围内属合格。

即使测定检定结果在范围的上、下限，也不能将实测值作为标准值。

因为测定值的可靠性取决于检定方法，一般的分析方法的可靠性不如分析化学公认的称量法和容量法。

所以标准品的定值由称量和容积计算确定。

检定不合格即报废，决不可将实测值替代修正。

二。

校准品的定值1．校准值随方法而异如前述，由于纯标准液和新鲜病人标本间的基体差异，以标准液标化常用方法后，常用方法检测病人标本的结果和参考方法结果的可比性很差。

参见图2-。

为了克服基体效应，推荐使用校准品。

校准品的大多来源为人的样品混合物，如混合血清。

本身内含被检分析物，制备时可添加某些分析物增加含量。

校准品中被检分析物的含量无法由称量法和容量法确定，只能倚赖于分析方法。

校准品的校准值必须取决于分析方法或检测系列。

2．新鲜病人标本是最佳校准品?由于所有校准品都是处理过的样品，和新鲜病人标本有着基体差异。

若使用公认的参考方法去标化测定校准品，测定程序是严密的，测定值是可靠的。

但使用该测定值去校准常规的检测系列时，校准品中被检分析物参与反应时的表现明显不同于新鲜病人标本，不能将参考方法系列的准确度通过校准品传递给病人标本。

可参见图2-。

须明确的，所有用于检验中的检测方法、仪器、试剂等都是用来检测病人新鲜标本的，不是用来检测校准品这样的处理过样品。

如果先用公认的参考方法检测病人标本，再以具有参考值的病人标本去校准某检测系列（包括方法、试剂、仪器），此时该检测系列再检测其他新鲜病人标本时，这些病人标本结果的溯源性可上溯至公认的参考方法。

也即用新鲜病人标本是校准检测系列的最佳校准品。

用这种方式校准，能使同一个检测系列在不同实验室检测新鲜病人标本时，检验结果在实验室间具可比性。

一些大公司正是按照这样的认识为校准品定值。

三、原则上，以具有参考值的新鲜病人标本去校准某检测系列（包括方法、试剂、仪器）后，检测系列再去检测候选的校准品（处理过），得到的检测值为初始校准值。

以初始校准值反过来再校准组合的检测系列后，该检测系列又去检测病人的新鲜标本。

观察病人标本的检测值是否和参考方法的测定值具良好的可比性。

实践说明，只有不断地调整校准值，直至用该校准值校准指定的检测系列（加上具有校准值的校准品，即组合成检测系统）后，检测系统再检测病人标本，得到的测定值和病人标本的参考方法测定值具有满意的可比性（测定值和参考值间的偏倚≤2%）。

此时，校准品的校准值可以确认。

1．校准值不是测定值，是纠正的调整值(CorrectedValue)厂商的校准品定值方案极为严密。

为了便于说明问题，以某公司的定值方案为例，定值的校准品是人血清。

1）准备一批血清样品，内含被检分析物含量不同，可反映所需的病人结果可报告范围。

将它们离心、过滤，分装后深低温保存。

由参考实验室用公认的参考方法和标准品或参考品，对这些血清检测定值。

这些血清是公司的一级“参考品”，参考方法对血清的定值犹如参考值，是确定校准品校准值的依据。

2）制备一大批侯选校准品。

由参考实验室也为之定值。

邀请多家具有指定的相同型号仪器的实验室（包括公司的实验室）参与工作。

指定使用公司某型号的试剂盒（批号任意）及检测程序。

校准目标是：公司提供的仪器、试剂和方法系列（加上校准品即为检测系统）对病人样品的检测结果和参考方法对病人样品检测结果具可比性。

首先，用侯选校准品的定值对检测系列校准后，检测一级参考品的血清。

由于侯选校准品和病人样品间的基体差异，以它的参考实验室定值对检测系统校准后，检测系统对病人样品的检测结果必然和这些血清已有的参考值有偏倚。

要使组成的检测系统实现校准目标，唯一方法是调整侯选校准品的校准值。

经反复检测和调整、统计，最终实现校准目标时的校准值，为该校准品的定值。

这个校准品是公司的一级校准品，是公司内部具有可溯源性的第一代的校准品，不外售。

3）以后公司在生产供应给客户的校准品时，生产质量规格相同于一级校准品，定值方案也相同于上述步骤；但此时分发给各实验室的一级校准品已具有了真正校准该检测系统的校准值。

各实验室的检测系统被一级校准品校准后，检测一级参考品血清和新校准品。

首先确认各系统对一级参考品血清检测结果和原有的血清参考值具良好的可比性，说明一级校准品有效。

再以新校准品的定值去校准各系统后，各系统再检测一级参考品血清和一级校准品，观察检测结果。

若能实现校准目标，校准确认，则新校准品的定值为它的校准值。

在实践中血清结果往往仍然出现偏倚，必须对新校准品的定值略作调整，反复检测，直至实现校准目标，调整的最佳值为该批校准品的校准值。

此时这批校准品可供市售。

4）为使公司供应的各批校准品间具可比性，以后对每批新校准品定值时，须使用已上市的校准品、即将过期的校准品、以及即将上市的校准品当作控制品，随同一级校准品和一级参考品血清一起被检测。

它们的检测结果须和原校准值的偏倚小于某规定的范围（如不大于2%），方可认可这批校准品的校准值（这即为校准认可的要求）。

5）用这样的程序制备的校准品，专用于指定的某公司型号的仪器、试剂、方法和检测程序组成的检测系统。

因此校准品只能为这样的系统服务，起校准作用，不能对其他系统作校准。

2．具多个校准值的校准品?专门供应试剂盒的厂商，为了使他们的试剂盒用于各种类型、型号的仪器和方法，也同时为客户提供校准品。

说明书告诉客户，使用他们的校准品，按公司指定校准您原系统的校准值去校准系统，可以使新组合的检测系统（原仪器、方法、检测程序，新试剂和新校准品）的病人标本检测结果和原配套检测系统的病人标本检测结果具可比性。

由于各公司的原检测系统，从试剂、校准品、仪器都有各自特点，形成了各检测系统间的差异。

而这类试剂厂商专门针对客户不同检测系统，在替用他们的试剂时强调了替换后必须用他们的校准品，而且必须按校准品说明书上原系统名称下指定的校准值校准新系统，可使新系统对病人样品的检测结果和原系统结果具可比性。

同一个校准品适用于不同系统必须有不同的校准值，这样的做法充分说明校准值的专用特性。

决不能一个校准品、一个校准值、一种试剂盒用于各种不同的仪器；也不能一个校准品、一个校准值，用于不同的、已具有原试剂配套的仪器系列；无论哪一种方式均使病人样品的检测结果不可靠，也不具有溯源性。

讨论]转贴：标准物质与核查标准的概念与应用近期论坛上，网友<不会游泳的鱼>发起的《国家标准品和质控品的区别》的讨论，很有意思。

许多朋友的帖子也是说的很明白。

经过思考，我也写了一篇讨论帖子，题目是《标准物质与核查标准的概念与应用》。

我为什么选用“标准物质和核查标准”名称，它与“标准品和质控品”是不是一回事，等等，请朋友们看看我的帖子后，就会知道其中的缘由。

一、关于标准物质—标准品我用ELISA试剂盒为例题，介绍情况如下。

1试剂生产厂家，每个项目（如HBsAg、抗—HCVEIA等）的申请报批就不说了。

获得生产许可证后就可以进入批生产。

每生产一个批号的产品，就要申报、等待国家检定所派员现场抽样、同时贴上封条封存该批号的全部库存产品、等待检定结果报告。

2检定所按时用已知血清型确定为阳性和阴性的组合血清盘（标准血清盘）进行检定检测，然后发出检定结果报告。

说明：（1）检定所用的已知血清型确定为阳性和阴性的组合血清盘（标准血清盘），应当是国家级标准物质—标准品。

（2）鉴定报告：包括阴性符合率、阳性符合率、…等等。

3生产商接到报告、并由检定所派员现场启封、按数量发给试剂盒合格证标签、每盒贴上合格封口标签和防伪标签。

验贴完毕后，即可发货给用户单位。

以上是简要介绍用国家级标准品检定EIA产品的过程，用以提示：什么是标准物质（标准品）及其用途。

4我在95年前后，用过部临检中心提供的标准血清盘（部级、应相当于二级标准物质）和2NCU/ml的核查标准—质控血清，做过一批HCV试剂质量评价的实验。

有如下发现：（1）5个商家的试剂，检测2NCU/ml质控血清有1家试剂不能检出阳性（假阴性、阳性漏检）；（2）与部中心的标准血清盘（总计60份）中的预期已知抗原片段抗体阳性（33份）和预期阴性血清（27份）检测结果的不一致性。

以预期阳性标准血清为例，包括两类情况：第一种是：每个商家的试剂都有如下检测的不一致性，即：有的预期阳性标准血清未检出（漏检、假阴性），有的预期阴性标准血清误报阳性（假阳性、非特异性反应）；第二种是：不同商家试剂之间的“异同性”，即：有些预期阳性标准血清，各商家试剂检测“同为阳性”，另有一些预期阳性血清，出现不同商家试剂报告阴、阳结果错位的“异同性”。

预期阴性的标准血清，也有上述的两种相似的“异同性”检测结果。

当年，我写了一篇稿子、题名为《丙型肝炎抗体筛检异同性与EIA试剂质量评价方法探析》，刊登在<预防医学情报杂志>（1997年第13卷第2期，75页）上，欢迎查阅。

5当时，我还发现另一个有趣的现象，即：用底物TMB的试剂，对预期阳性血清检出率高、但是对预期阴性血清的假阳性率也高；反之，用OPD为底物的试剂，对预期阴性血清的假阳性率低（特异度高）、但是，对预期阳性血清的假阴性率也高（灵敏度低）。

这个“有趣”的现象，当年我曾有关注，一是，底物TMB的质量很重要，用进口正牌TMB配制为底物的试剂，对预期阴性血清的假阳性率明显低于采用所谓国产TMB自行配制底物试剂。

其间，我用过法国、荷兰正牌TMB为底物的丁肝、丙肝试剂，其阴性与阳性血清的无色与显色的目测视觉“一目了然、清清楚楚”，罕有“似阴非阴、似阳非阳”；很少见“可疑”样本。

一晃10年过去了，不知道现在国产TMB的EIA试剂对阴性与阳性样本的显色效果是否已有改进？二、核查标准（质控品）概念1什么是核查标准（或质控品）：以下引自《实验室认可与管理基础知识》书中讲解如下。