Cortisol中文说明书
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牛皮质醇(Cortisol)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定牛血清,血浆及相关液体样本中皮质醇(Cortisol)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛皮质醇(Cortisol)水平。
用纯化的牛皮质醇(Cortisol)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入皮质醇(Cortisol),再与HRP标记的皮质醇(Cortisol)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的皮质醇(Cortisol)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中牛皮质醇(Cortisol)浓度。
样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
小鼠皮质醇(Cortisol)ELISA检测试剂盒应用方法小鼠皮质醇(Cortisol)ELISA检测试剂盒说明书检测原理试剂盒采纳双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被皮质醇(Cortisol)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻di洗涤。
用底物TMB 显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最后的黄色。
颜色的深浅和样品中的皮质醇(Cortisol)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避开任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞快速当心地分别。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存:假如样本收集后不适时检测,请按一次用量分装,冻存于20℃,避开反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL3.37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在28℃,使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。
试验中不用的板条应立刻放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对比或者空白;依照说明书操作时样本已经稀释5倍,最结束果乘以5才是样本实际浓度。
严格依照说明书中标明的时间、加液量及次序进行温育操作。
全部液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒构成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无停止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0S5)浓度依次为:0、0.75、1.5、3、6、12ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
皮质醇(Cortisol)测定试剂盒(磁微粒化学发光免疫分析法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中皮质醇(Cortisol)的含量。
1.1型号/包装规格
规格A:100人份/盒
规格B:100人份/盒
1.2主要组成成分
定标液和质控品的浓度具有批差异性,详见标签。
2.1 外观
试剂盒中的组分应澄清,应无沉淀和絮状物。
磁分离试剂摇匀后,应为均匀悬浊液,无明显凝集。
2.2 空白限
应不大于1ng/ml。
2.3 准确度
使用纯品作回收实验,其回收率应在(85%~115%)范围内。
2.4 线性
在[1,60]ng/ml测量范围内,剂量-反应曲线线性相关系数R≥0.9900。
2.5 重复性
用不同浓度的两个样本进行检测,各重复检测10次,其变异系数CV应不大于10%。
2.6 批间差
用三个批号试剂盒检测同一份样本,则三批试剂盒之间的批间变异系数CV 应不大于15%。
2.7 特异性
用测定试剂盒测定相应浓度的交叉反应物质,应满足下表要求:
2.8溯源性
根据GB/T 21415-2008及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容,溯源至企业内部工作校准品,并与已上市产品比对赋值。
2.9 稳定性
试剂盒在规定的2℃~8℃下保存,有效期为12个月。
取到效期后的产品进行检测,结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.7项的要求。
11875116 122 100测试主要用途用于体外定量检测人血清、血浆、尿液和唾液中皮质醇。
皮质醇检测用于鉴别和治疗肾上腺功能失调。
Elecsys和cobas e免疫分析仪的检测原理是电化学发光免疫法(ECLIA)。
概述皮质醇(氢化可的松)是机体最主要的糖皮质激素,对维持机体的多项生理机能有重要作用。
与其它糖皮质激素类似,皮质醇由共同的胆固醇前体在肾上腺皮质束状带合成。
血循环中约有90%的皮质醇与皮质类固醇结合球蛋白(CBG)和白蛋白结合后进行运输。
仅有少量的游离皮质醇与其受体发生反应。
1皮质醇最重要的生理作用是提高血糖水平(提高糖异生和糖分解)、抗炎和免疫抑制反应。
皮质醇由肾上腺合成和分泌并受下丘脑-垂体-肾上腺皮质-轴的负反馈调节。
如果血中的皮质醇浓度减低,下丘脑则分泌促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)。
CRH能促进垂体释放促肾上腺皮质激素(ACTH)。
ACTH能促进肾上腺合成和分泌皮质醇。
皮质醇本身对垂体和下丘脑起负反馈作用。
此外压力能够促进皮质醇的分泌。
1血清皮质醇的浓度具有昼夜节律性变化。
1通常最高峰值出现在清晨(700nmol/L或25.4mg/dL),随后逐渐降低,到夜间可降至峰值浓度的一半左右。
因此在解释结果时,明确采血时间是很重要的。
检测患者血循环中皮质醇的含量可用于诊断肾上腺、垂体和下丘脑的机能是否正常。
2,3因此检测血清皮质醇的浓度可用监测多种疾病,如浓度明显增高的库欣氏综合征4,5或浓度明显降低的艾迪生病。
同时也可用于库欣氏综合征使用地塞米松抑制治疗或艾迪生病使用激素替代治疗的疗效监测。
库欣氏综合征实验室诊断的另一选择是检测24小时尿液中的皮质醇浓度,因为尿液中排泄的皮质醇不受昼夜节律性分泌的影响。
6这种方法能够准确的区分健康人与库欣氏综合征患者。
尿液中排泄的皮质醇均未与转运蛋白结合,因此被称为尿游离皮质醇(UFC)。
通常尿游离皮质醇与血中具有生物活性的游离皮质醇具有一定的比例关系。
兔子皮质醇(Cortisol)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用!预期应用ELISA法定量测定兔子血清、血浆或其它相关生物液体中皮质醇(Cortisol)含量。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗皮质醇(Cortisol)抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗皮质醇(Cortisol)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的皮质醇(Cortisol)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板:一块(96孔)2.标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为180ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成180ng/ml,90ng/ml,45ng/ml,22.5ng/ml,11.25ng/ml,5.63ng/ml,2.82ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制90ng/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)180ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml 样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3.样品稀释液:1×20ml。
4.检测稀释液A:1×10ml。
5.检测稀释液B:1×10ml。
6.检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7.检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B1:100稀释。
EK8100-01Cortisol Competitive ELISA Kit检测试剂盒(酶联免疫吸附法)Catalog NumberEK8100-48EK8100-96定量检测血清、血浆和细胞培养上清中的皮质醇(Cortisol)浓度。
本产品仅用于科学研究,非诊断试剂,不能用于临床诊断。
一、产品介绍1.背景介绍皮质醇,也称为醋酸氢化可的松或化合物F,是糖皮质激素中的一种类固醇激素。
在人类中,它由肾上腺中的肾上腺皮质束状带产生,在压力和低血糖时释放,可作为压力的一个生物标志物。
皮质醇的产量与ACTH依赖的昼夜节律相关,在早晨达到峰值,随后逐渐降低。
皮质醇在很多基质中可被检测到,如血液、粪便、尿液和唾液。
血清中90-95%的皮质醇与蛋白结合,包括皮质类固醇结合球蛋白和血清白蛋白。
皮质醇主要参与代谢和免疫。
在代谢方面,它可促进糖异生、肝糖原沉积和降低葡萄糖利用率。
在免疫方面,作为重要的抗炎因子,在过敏、免疫抑制和疾病抵抗中发挥重要作用。
异常的皮质醇水平与许多状况有关,包括前列腺癌、抑郁症和精神分裂症。
身体组织中皮质醇过高是库欣综合征的诱因。
2.检测原理本试剂盒采用固相竞争酶联免疫吸附检测技术。
兔抗小鼠抗体预包被在高亲和力的酶标板上。
皮质醇特异性的单克隆抗体加入至孔中,经过孵育,与固相抗体结合。
洗涤后,加入辣根过氧化物酶标记的皮质醇和未标记的皮质醇或样本,竞争结合单克隆抗体上有限的结合位点。
在洗涤去除未结合的物质后,加入显色底物,颜色反应的深浅与皮质醇的浓度成反比。
加入终止液终止反应,在450nm波长(参考波长570-630nm)测定吸光度值。
本试剂盒已验证人、小鼠和大鼠血清样本,但其它物种的皮质醇预计也可被检测。
3.试剂盒检测的局限1)请在本试剂盒标示的有效期内使用。
2)试剂盒的试剂不能与其他批号的试剂或其他来源的试剂混合使用。
3)任何标准品稀释、操作人员、移液技术、洗涤技术、孵育温度、试剂盒保存时间的改变,都将影响结合反应。
批准文号:国药准字S1*******使用前请详细阅读此说明书皮质醇放射免疫分析药盒说明书Cortisol Radioimmunoassay Kit北京北方生物技术研究所一、概述及临床意义皮质醇(Cortisol, 缩写为:Cor.)是一种主要由肾上腺皮质束状带分泌的糖皮质激素,属于21碳类甾体激素,分子量363D。
人每日分泌量有昼夜节律性变化,一般早晨分泌量多。
准确测定皮质醇的含量,对下丘脑垂体—肾上腺皮质轴功能试验及其病理、生理研究和临床诊断有重要意义。
对柯兴氏综合症,原发性付肾皮质机能低下症(阿狄森氏病)鉴别诊断特别有效。
本药盒用于测定血清中皮质醇的含量。
血清样品不用稀释,不用预处理,血清或血浆直接加样。
采用放射免疫分析技术,具有用血样量少,操作方法简便,检验周期短,测定结果重复性好等优点。
二、测定原理应用竞争机制原理,标准或样品中的Cor.和加入的125I-Cor.共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。
125I-Cor.与抗体的结合量与标准或样品中Cor.的含量呈一定的函数关系。
用免疫分离试剂(PR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,并计算相应结合率B/B0。
用已知标准Cor.含量与对应结合率作图,即得标准抑制曲线。
从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中Cor.的含量。
1四、试剂的配制、使用方法和保存1.Cor.标准品:将0标准1ml蒸馏水溶解,其余标准分别准确地加入0.5ml 蒸馏水溶解。
溶解15分钟后摇匀方可使用。
溶解后其浓度分别为0、10, 50, 100, 200, 500ng/ml。
标准复溶后2~8℃保存可稳定42天,冻干品-20℃保存有效期内稳定。
2.125I-Cor.标记物:冻干品用缓冲液溶解。
100管标记物加缓冲液10ml, 50管标记物加5ml,加样前摇匀。
100管标记物放射性不大于111KBq(3μCi),2~8℃避光保存可稳定42天。
皮质醇(Cortisol)测定试剂盒(电化学发光免疫分析法)结构组成:试剂盒由磁分离试剂(M)、试剂a(Ra)、试剂b(Rb)和定标品(Cortisol-Cal)(选配)组成。
组成及含量见下表:预期用途:本试剂盒用于体外定量测定人体血清样本中皮质醇(Cortisol)的含量。
2.1 外观2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏;2.1.2 磁分离试剂摇匀后应为棕色含固体微粒的均匀悬浊液,无明显凝集、无絮状物;2.1.3 其它液体组分应澄清,无异物,沉淀物或絮状物;2.1.4 包装标签应清晰、无磨损、易识别。
2.2 空白限应不大于0.5nmol/L。
2.3 准确度将已知浓度的Cortisol标准溶液加入到血清中,其回收率应在(85%~115%)范围内。
2.4 线性在[2.0,1750.0]nmol/L范围内,线性相关系数(r)应不小于0.9900。
2.5 精密度2.5.1 重复性在试剂盒的线性范围内,检测高、低两个水平的样品,检测结果的变异系数(CV)应不大于8%。
2.5.2 批间差在试剂盒的线性范围内,用3个批号试剂盒分别检测高、低两个水平的样品,检测结果的变异系数(CV)应不大于15%。
2.6 效期末稳定性本产品效期为15个月,试剂盒在2~8℃下保存至有效期末进行检测,检测结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5.1的要求。
2.7 溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求提供皮质醇(Cortisol)定标品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容,定标品溯源至企业工作校准品。
人皮质醇( Cortisol)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
96T检测范围:7μ g/L -200 μ g/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中皮质醇(Cortisol )含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人皮质醇(Cortisol )水平。
用纯化的人皮质醇(Cortisol )抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入皮质醇(Cortisol),再与 HRP 标记的皮质醇( Cortisol )抗体结合,形成抗体-抗原 -酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。
TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的皮质醇(Cortisol )呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中人皮质醇(Cortisol )浓度。
试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml× 1 瓶7 终止液6ml ×1 瓶2 酶标试剂6ml × 1 瓶8 标准品( 400μ g/L)0.5ml × 1 瓶3 酶标包被板12孔× 8条9 标准品稀释液 1.5ml × 1 瓶4 样品稀释液6ml × 1 瓶10 说明书 1 份5 显色剂 A液6ml × 1 瓶11 封板膜 2 张6 显色剂 B液6ml × 1/瓶12 密封袋 1 个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
200μ g/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液100μ g/L 4 号标准品150μl 的 5 号标准品加入150μl 标准品稀释液50μ g/L 3 号标准品150μl 的 4 号标准品加入150μl 标准品稀释液25μ g/L 2 号标准品150μl 的 3 号标准品加入150μl 标准品稀释液12.5μ g/L 1 号标准品150μl 的 2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
小鼠胰岛素说明书(1)小鼠胰岛素定量分析酶联免疫检测试剂盒本试剂盒仅供科研使用。
用于体外定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的胰岛素浓度。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分是否完整, 如有疑问请与上海巧伊生物科技有限公司联系,我们将提供力所能及的帮助。
如您有其它需求,请登录上海巧伊生物科技有限公司网站或致电本公司。
胰岛素简介:胰岛素是糖代谢中最主要的激素之一。
胰腺的?细胞岛细胞产生胰岛素前体蛋白,前体蛋白被加工成C肽和胰岛素。
它们以等摩尔浓度进入血循环中。
成熟的胰岛素由A、B两条链组成。
这两条链是通过两个二硫键桥接形成有功能的胰岛素分子。
血浆葡萄糖浓度的变化是胰岛素产生并分泌的最主要刺激因素,产生的胰岛素具有一些代谢调节作用。
其最主要的作用是,将外周血中糖转运到肝脏中贮存起来。
一些诸如肝糖生成障碍或在促进血糖升高的激素诸如胰高血糖素、肾上腺素、生长激素和皮质醇等作用下促进肝糖分解都可拮抗胰岛素的作用。
检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中胰岛素的浓度。
胰岛素捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的胰岛素会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
当加入与HRP耦连的抗胰岛素抗体后,抗小鼠胰岛素抗体与胰岛素接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
最后加入显色剂,若样本中存在胰岛素将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。
通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,胰岛素浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中胰岛素浓度。
小鼠胰岛素定量分析酶联免疫检测试剂盒组成:组分小鼠胰岛素预包被板标准品稀释液小鼠胰岛素标准品小鼠胰岛素抗体HRP 结合物浓缩洗涤液20× TMB底物终止液封板胶纸说明书规格(96T/48T) 12条/6条 10ml/5ml 2支/1支(冻干) 10ml/5ml30ml/15ml 10ml/5ml 5ml/3ml 3/2张 1份标本收集:1.标本的收集请按下列流程进行操作; A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可;B.血清标本应是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;C.血浆标本,推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检测,D.标本收集后请分装,冻存于-20℃,避免反复冻融。