微生物酶活性试验方法
脱氢酶活性
测定方法参考：【周春生, 尹军. 一脱氢酶活性检测方法的研究[J]. 环境科学学报, 1996, 4: 400-405.】以及【环境工程微生物检验手册[M]. 中国环境科学出版社, 1990.】
（一）试验方法：
（1）水样预处理：取污泥混合液10ml，放入离心管中离心5min后去除上清液，用纯水反复清洗三次，最后向样品中加入纯水至10ml搅拌均匀。
（2）加试剂：将处理后样品转移至25ml比色管中，依次加入7.5mlTris-HCl缓冲液（PH=8.4）、2.5ml硫酸钠溶液（0.36%）、2.5ml纯水以及2.5mlTTC溶液（0.4%）、混匀。
（3）样品培养：将比色管置于37℃条件下水浴恒温振荡器中培养，培养5min 后吸取5ml于离心管内，加0.5ml甲醛固定以作样品空白；
（4）终止酶反应：继续培养30min，然后向管中加入2ml甲醛终止酶反应；（5）样品萃取：将样品培养液以5.5ml为1份分装在四个离心管中，连同样品空白对照管一道离心5min, 弃去上清液向各离心管内加6ml丙酮, 研磨搅拌混合,
于37℃条件下萃取TF10min后；
（6）比色分析：将萃取液进行离心5min,用1cm的比色皿取上清液显色液, 于
波长485nm处进行比色, 记录吸光值,根据样品显色液与样品空白的吸光值之差, 查标准曲线, 进而计算出TF的生成速度, 即脱氢酶活性(mg/(L*h))
（二）试剂：
（1）0.4％三苯基四氮唑氯化物溶液（氯化三苯基四氮唑，TTC）:4g-2、3、5-氯化三苯基四氮唑，稀释至1L至容量瓶中，棕色瓶保存；
（2）Tris-HCl缓冲液：称取6.057gTris（三羟甲基氨基甲烷, 分析纯, 北京化学试剂厂），加入20ml 1mol/L HCl溶液, 再定容至1L；
（3）硫酸钠溶液（0.36%）：3.6g硫酸钠（Na2SO3）稀释至1L容量瓶中；（4）TTC标准溶液：称取0.05gTTC定容与50ml茶色容量瓶中此溶液即为
1mg/L的标准溶液。
（三）标准曲线的绘制：
（1）采用1mg/L的TTC标准溶液制备每含20、40、60、80、100、120、
140μgTTC系列溶液，即取1、2、3、4、5、6、7ml至50ml容量瓶中，稀释至50ml进行实验；
（2）用8试管，分别加入2ml Tris-HCl缓冲液、2ml纯水、2ml不同浓度的TTC，第八只不加入TTC；
（3）加入10g硫酸钠溶液，TTC被还原为红色的TF；
（4）加入5ml丙酮振荡摇匀提取TF（振荡床振荡10次）；
（5）离心5min后485nm下测吸光度；
（6）吸光度为纵坐标，TTC浓度为横坐标绘制标准曲线。
（四）计算：
TF=A*B*C
A：标准曲线上读数；B：计算时间矫正值：培养时间/60min；C分光时的稀释倍数，当分光>0,8时，稀释分光
ATP含量
测定方法参考：【环境工程微生物检验手册[M]. 中国环境科学出版社, 1990.】ATP消化后变为无
机磷，制备ATP消化液，测无机磷吸光度以确定ATP含量
（一）试验方法：
（1）活性污泥稀释1:20，曝气池稀释1:10（保证ATP量在0.1-1.0mg/L之间）；
（2）用50ml烧杯加入35ml 的（pH=7.75 0.025M Tris缓冲液）加热至沸腾；然后加入待测活性污泥溶液1ml，煮沸加热30-60s后摇动几分钟放入冰浴中，冷却后加入pH7.75 0.025M的Tris缓冲液至50ml，摇匀过滤，所得过滤液供测ATP；
（3）ATP制备液消化：去待测液1ml于比色管中，加入2.5ml10N硫酸，至于高压锅中加压128℃,15min，冷却后加入1-2滴过氧化氢，摇匀，纯水稀释，制成
消化液；
（4）取两支试管，加入消化液3ml，摇匀，另一只加入纯水3ml，各加入定磷
试剂3ml，至于45℃水浴加热25min，冷却至室温，660nm下分光；
（5）用上述曲线的吸光度在无机磷标准曲线上查出相应的无机磷含量，利用无机磷含量查Pi-ATP相关曲线，得出ATP值；
ATP含量高的污泥，微生物活性越高。
（二）试剂：
（1）无机磷溶液中间液：烘干后称取0.2195g KH2PO4稀释至500ml容量品；（2）无机磷溶液使用液：上述溶液取10ml稀释至100ml；
（3）定磷试剂：6mol/L硫酸：水：2.5%钼酸铵：10%抗坏血酸（体积比）=1：2:1:1，配置时按上述顺序加入试剂。溶液配制后当天使用，正常为浅黄绿色，若颜色不正常，则不能使用
6mol/L硫酸：取17ml浓硫酸加入83ml水中，得6mol/L；2.5%钼酸铵：2.5g钼酸铵→100ml容量瓶；10%抗坏血酸：取10g抗坏血酸→100ml容量瓶（棕色瓶冷藏）。
（4）ATP：10mgATP
（5）pH7.75 0.025M的Tris缓冲液：3.02785g稀释至500ml+35ml 1mol/L 盐酸→1000ml容量瓶
（6）10N硫酸：271.7ml浓硫酸加入700ml纯水中，冷却后，稀释至1000ml 容量瓶中；
（三）标准曲线的绘制：
1、无机磷标准曲线的绘制
（1）取KH2PO4置于烘箱中恒重后称取0.2195g，稀释至500ml容量瓶中，得无机磷浓度100ug/L；
（2）取10ml上述溶液稀释至100ml容量瓶中定容，得无机磷浓度10ug/L，取6
之试管；
试管无机磷纯水无机磷浓度加定磷试剂
2 0.2 2.8 2 3
3 0.
4 2.6 4 3
4 0.6 2.4 6 3
5 0.8 2.2 8 3
6 1.0 2.0 10 3 （3）将试管置于45℃中水浴，保温25min，冷却后660nm下比色；
（4）以吸光度作为纵坐标，无机磷含量为横坐标，绘制标准曲线；
2、ATP-无机磷曲线绘制；
（1）称取10mgATP，取少量新配的pH7.75 0.025M的Tris缓冲液，充分摇匀溶解，定容至1L,最终浓度为10mg/L；取上清液，配置从1.00-0.01mg/L系列标准液；
（2）ATP标准液的消化：去待测液1ml于比色管中，加入2.5ml10N硫酸，至于高压锅中加压128℃,15min，冷却后加入1-2滴过氧化氢，摇匀，纯水稀释，制成消化液；
（3）取两支试管，加入消化液3ml，摇匀，另一只加入纯水3ml，各加入定磷试剂3ml，至于45℃水浴加热25min，冷却至室温，660nm下分光；
（4）以吸光度为纵坐标，ATP浓度为横坐标，绘制曲线；
（5）用上述曲线的吸光度在无机磷标准曲线上查出相应的无机磷含量，然后作为纵坐标，ATP为横坐标，绘制Pi-ATP相关曲线。
脲酶活性
测定方法参考：【李振高, 骆永明, 滕应. 土壤与环境微生物研究法[M]. 科学出版社, 2008.】
根据脲酶水解时生成的氨与苯酚钠及次氯酸钠反应，形成兰色靛酚这一原理。（一）试验方法：
（1）水样预处理：取10ml待测样品经甲苯处理后，加5~10滴甲苯，盖好；（2）加试剂：15min后加10ml 10%尿素和20ml pH=6.7柠檬酸盐缓冲液（3）样品培养：将锥形瓶置于37℃条件下恒温箱，培养24h过滤；
（4）继续加试剂：取滤液1-3mg/L（视样品浓度定）与50ml比色管中，加入4ml苯酚钠溶液和3ml次氯酸钠溶液，边加边摇匀；
（5）比色分析：20min后定容，并在578nm波长下分光；
（6）计算：并在标准曲线上求氨氮的量，测出脲酶活性。
每一土样设置用水代替基质（即尿素）的对照，以除掉土壤中氨态氮引起的误差？。还需减去无土基质（尿素＋柠檬酸盐）。
（二）试剂：
（1）甲苯（分析纯）；
（2）10%尿素：尿素（分析纯）10克溶于100毫升蒸馏水中，（现配现用）；
（3）PH6.7柠檬酸盐缓冲液：368克柠檬酸（分析纯）溶于600毫升蒸馏水中；295克氢氧化钾溶于水；将二种溶液合并，调pH至6.7，并用水稀释至2L；（4）苯酚钠溶液：A液：62.5苯酚溶于少量95%乙醇，加2毫升甲醇和18.5毫升丙酮，用乙醇稀释至100毫升。B液.27克氢氧化钠溶于100毫升水中。将
微生物检验岗位工作职责 1. 目的 规范质量管理部QC微生物检验岗位的工作内容、责任及权限。 2. 范围 适用于本公司质量管理部微生物检验岗位的工作职责。 3. 内容 3.1. 工作岗位名称：微生物检验岗位。 3.2. 直接主管：QC主任 3.3. 下属岗位：无 3.4. 岗位性质：负责对进厂物料、出厂成品及生产过程中的中间产品进行微生物限度、细菌内毒素等项目的检验，车间、取样室、微生物限度检查室的环境监测中微生物监测等。 3.5. 权限：有权拒绝未经许可人员进入微生物限度检查室；有权拒绝未接受仪器操作培训的人员使用所属本室仪器。 3.6. 工作要求 3.6.1. 熟悉质检工作流程，熟悉岗位标准操作规程。 3.6.2.熟悉相关仪器设备的使用、校正和维护管理规程。 3.6.3.具备高度责任心及严谨认真诚实的工作态度。 3.6. 4.经过微生物限度检查培训的人员或相关经验中专以上毕业。 3.7. 工作内容 3.7.1.按规定对进厂物料、出厂成品及生产过程中的中间产品进行微生物限度、或无菌、或细菌内毒素等项目的检验，及时填写检验记录，出具报告单。 3.7.2.对相关的检验仪器进行管理、校正和维护。
3.7.3.负责外来小样、退回、留样品等样品进行微生物指标检验，依照规定对重点留样成品需要进行稳定性考查的微生物指标进行检验，并填写稳定性考查记录。 3.7. 4.负责对工艺用水定期抽样，及对微生物检验指标检验，填写水质检验记录。 3.7.5. 负责原辅料、内包装材料的取样。 3.7.6. 负责包装材料的取样及检验工作。 3.7.7. 按照相关规定负责对车间的环境监测中微生物测试指标进行监测，负责对取样室（车）、微生物限度检查室内的环境进行监测。 3.7.8. 完成上级主管所授权的其他管理职能。 3.7.9. 完成上司交代的其它工作任务。 3.8. 责任 3.8.1.对出具的检验结果准确可靠负责。 3.8.2. 对按质、按量、按时完成检验任务负责。 3.8.3.对仪器的正常运作负责。 直接主管签名、日期 本岗人员签名、日期
检验科岗位职责 集团文件版本号：（M928-T898-M248-WU2669-I2896-DQ586-M1988）
4.14.3检验科岗位职责 检验科主任职责 一、负责本科的业务、教学、科研及行政管理工作。 二、负责组织本科业务技术建设规划、年度以工作计划和质量体系方案的制定、实施、检查和总结。 三、负责解决本科复杂、疑难的检验、诊断及仪器设备的使用等技术问题。审签重要的诊断报告。 四、负责本科的业务训练、人才培养和技术考核工作。安排进修、实习人员的培训，并担任教学工作。 五、督促检查本科人员履行各自的职责，认真执行规章制度及技术操作常规；进行医疗安全教育，严防事故、差错。 六、负责本科医德医风建设。提出考核、晋升、奖惩和培养使用的意见。 七、负责本科人员考核、绩效发放等工作。 八、完成医院交办的其它工作。 九、副主任协助主任完成以上工作。 检验科主任（副主任）技师职责 一、在科主任的领导下，负责本专业的业务、教学、科研和仪器设备的管理工作。 二、解决本科复杂、疑难的技术问题，并参加相应的诊断工作。 三、负责业务技术的训练和考核，担任教学工作，培养主管技师解决复杂技术问题的能力。 四、掌握本专业国内外信息，指导下级技术人员工展科研和引用新业务、新技术的工作，总结经验，撰写学术论文。 五、参加临床疑难病的会诊及讨论，负责疑难检验项目的检查与室内质控及室间质评工作。 检验科主管技师职责 一、在科主任领导下进行工作。 二、熟悉各种仪器的性能和使用方法，协同科主任制定技术操作规程和质量控制措施。负责仪器的调试、鉴定、操作和维修保养，解决较复杂、疑难的技术问题，参加相应的诊断工作。 三、担任教学业工作，指导和培养技师解决较疑难技术问题的能力，担任进修、实习人员的培训，并负责其技术考核。
环境工程微生物学 第三版_周群英 课后习题目录 第一篇微生物学基础 ............................................................ 1.第一章非细胞结构的超微生物——病毒........................................ 1.第二章原核微生物.......................................................... 3.第三章真核微生物.......................................................... 6.第四章微生物的生理........................................................... 8.第五章微生物的生长繁殖与生存因子. (12) 第六章微生物的遗传和变异 (16) 第二篇微生物生态 (20) 第一章微生物生态 (20) 第二章微生物在环境物质循环中的作用 (22) 第三章水环境污染控制与治理的生态工程及微生物学原理 (26) 第四章污、废水深度处理和微污染源水预处理中的微生物学原理 (28) 第五章有机固体废弃物与废气的微生物处理及其微生物群落 (31) 第六章微生物学新技术在环境工程中的应用 (34)
第一篇微生物学基础 第一章非细胞结构的超微生物一一病毒 1病毒是一类什么样的微生物？它有什么特点？ 答：病毒没有合成蛋白质的机构——核糖体，也没有合成细胞物质和繁殖所必备的酶系统，不具独立的代谢能力，必须专性寄宿在活的敏感宿主细胞内，依靠宿主细胞合成病毒的化学组成和繁殖新个体。其特点是：病毒在活的敏感宿主细胞内是具有生命的超微生物，然而，在宿主体外却呈现不具生命特征的大分子物质，但仍保留感染宿主的潜在能力，一旦重新进入活的宿主细胞内又具有生命特征，重新感染新宿主。 2病毒的分类依据是什么？分为哪几类病毒？ 答：依据是：病毒是根据病毒的宿主、所致疾病、核酸的类型、病毒粒子的大小、病毒的结构、有或无被 膜等进行分类的。根据转性宿主分类：有动物病毒、植物病毒、细菌病毒（噬菌体）线菌体）、藻 、放线菌病毒（噬放 类病毒（噬藻体）、真菌病毒（噬真菌体）。按核酸分类：有DNA病毒和RNA病毒。 3病毒具有什么样的化学组成和结构？ 答：病毒的化学组成有蛋白质和核酸。还含有脂质和多糖。整个病毒体分两部分：蛋白质衣壳和核酸内芯，两者构成核衣壳。蛋白质衣壳是由一定数量的衣壳粒按一定的排列组合构成的病毒外壳。核酸内芯有两种： 核糖核酸（RNA ）和脱氧核糖核酸（DNA）。 4叙述大肠杆菌T系噬菌体的繁殖过程。 答：大肠杆菌T系噬菌体的繁殖过程有：吸附、侵入、复制、聚集与释放。首先，大肠杆菌T系噬菌体以 它的尾部末端吸附到敏感细胞表面上某一特定的化学成分，或是细胞壁，或是鞭毛，或是纤毛。噬菌体侵入宿主细胞后，立即引起宿主的代谢改变，宿主细胞内的核酸不能按自身的遗传特性复制和合成蛋白质，而由噬菌体核酸所携带的遗传信息所控制，借用宿主细胞的合成机构复制核酸，进而合成噬菌体蛋白质，核酸和蛋白质聚集合成新的噬菌体，这个过程叫装配。大肠杆菌T系噬菌体的装配过程如下：先合成含 DNA的头部，然后合成尾部的尾鞘、尾髓和尾丝，并逐个加上去就装配成一个完整的新的大肠杆菌T系噬菌体。噬菌体粒子成熟后，噬菌体的水解酶水解宿主细胞壁而使宿主细胞破裂，使菌体被释放出来重新感染新的宿主细胞一个宿主细胞可释放10到1000个噬菌体粒子。 5什么叫毒性噬菌体？什么叫温和噬菌体？ 答：侵入宿主细胞后，随即引起宿主细胞裂解的噬菌体称作毒性噬菌体。 侵入宿主细胞后，不引起宿主细胞裂解的噬菌体称作温和噬菌体。 6什么叫溶原细胞（菌）？什么叫原噬菌体？ 答：含有温和噬菌体核酸的宿主细胞被称作溶原细胞。在溶原细胞内的温和噬菌体核酸，称为原噬菌体。 7解释Escherichia coli K12 （X）中的各词的含义。
1.使用油镜时，为什么要先用低倍镜观察 油镜指的是为了减少高倍镜的折光，在物镜和玻片之间滴上松节油等。所以油镜其实就是给高倍镜物 镜和玻片之间加油。而所有高倍镜之前都先要用低倍镜观察，是因为低倍镜下好找目标。低倍镜放大 10 倍，高倍镜放大40 倍，油镜放大100 倍，先用低倍镜、高倍镜，既便于找到目标，又方便调焦距。 要使显微镜视野明亮，除采用光源外，还可以采取哪些措施 加大聚光器光圈，同样设置下低倍物镜比高倍物镜视野亮 把材料切薄一点透光较好 使用滤光片，增加反差和清晰度。 向上调节聚光器。 2.怎样区别活性污泥中的几种固着型纤毛虫 大多数情况下，会遇到钟虫、柄纤毛虫、累枝虫等。三种虫形态均类似钟的形状，钟虫每个都是独 立的，相互之间没有连接；柄纤毛虫类似钟虫，量很大，只是在根部汇聚在一根柄上，可以理解成一 根柄上分出很多个钟虫；而累枝虫就像是树，一根柄上分出很多个柄，然后很多个柄上又分出很多个 “钟虫”。 用压滴法制作标本片时注意什么问题 1. 使用的载玻片和盖玻片都要干净； 2. 制成的标本片不能有气泡 4. 涂片为什么要固定，固定时应注意什么问题 如果不固定的话你进行染色后水洗去多余染料的同时会将菌体一并冲走 注意的就是不要弄死细胞咯！不知道你用什么方法，如果是用火，那就是不要烧死它们，用 载玻片背面靠近火源，过两次就好。 Over 一般我都是用酒精灯的外焰烤的但是要注意温度。温度过高挥出现变形细胞。温度已载玻片接触手背，手背不觉得烫为宜。加热只水分蒸发完全后，再在酒精灯外焰上通过两到三次，就成了。 革兰氏染色法中若只做1~4 步，不用番红染液复染，能否分辨出革兰氏染色结果为什么 能。在酒精脱色后，不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（G＋），被酒精脱色为革兰氏阴性菌。最后一步用番红染液复染，是为了让结果更清楚。 革兰氏染色原理和番红复染本身并无关系。 但是，但是， 你能指着一片空白的照片说这些细菌没有被结晶紫染色所以是阴形吗鬼 知道那里有没有细菌。 革兰氏染色在微生物学中有何实践意义 细菌大多可以按照革兰氏法划分，在杀菌方面自然管用， 还有实验方面， 比方说，实验需要G阳性细菌作为研究材料，如果最后需要杀死细菌获取什么代谢产物，已知是G阳性细菌，那就有目的地杀除了，摒除了盲目手段。
检验科工作职责 （一）检验科各级人员工作职责 1．检验科主任、副主任工作职责 2．主任检验师工作职责 3．主管检验师工作职责 4．检验师工作职责 5．检验士工作职责 6．检验科各专业组组长职责 （二）检验科各实验室工作职责 1．临检室人员岗位职责 2．生化室人员岗位职责 3．免疫室人员岗位职责 4．微生物室人员岗位职责 5．急诊检验人员岗位职责
（一）检验科各级人员工作职责 1．检验科主任、副主任工作职责 1.1 在院长、院党委领导下，负责本科的业务、教学、科研及行政管理工作。 1.2 负责组织本科业务技术建设规划、年度工作计划和诊断质量监测控制方案的制定、实施、检查和总结。 1.3 负责解决本科复杂、疑难的检验、诊断及仪器设备的使用等技术问题。参加临床会诊、抢救和疑难病例的诊断。审签重要的诊断报告。 1.4 经常检查仪器、设备的使用、以及保管和维修的情况，指定人员负责登记、统计、资料积累及保管工作。 1.5 负责本科的业务训练、人才培养和技术考核工作。安排进修、实习人员的培训，并担任教学工作。 1.6 学习、运用国内外先进技术，组织开展新业务、新技术和科研工作。总结经验，撰写学术论文。 1.7 督促检查本科人员履行各自的职责，认真执行规章制度及技术操作常规；经常进行医疗安全教育，严防事故、差错。 1.8 负责本科医德医风建设。掌握所属人员的思想、业务能力和工作表现，提出考核、晋升、奖惩和培养使用的意见。 副主任协助科主任工作，在科主任领导下，按分工履行主任职责的相应部分。 2．主任检验师工作职责 2.1 在科主任的领导下，负责本专业的业务、教学、科研和仪器设备的管理工作。 2.2 负责本科主要仪器、设备的购置论证、验收、安装和调试，定期检查和指导仪器、设备的使用和维修保养。解决本科复杂、疑难的技术问题，并参加相应的诊断工作。 2.3 负责业务技术的训练和考核，担任教学工作，培养主管技师解决复杂技术问题的能力。 2.4 掌握本专业国内外信息，指导下级技术人员开展科研和引用新业务、新技术的工作，
检验科工作制度及人员岗位职责 检验报告双签字制度 一、检验完完毕，应认真核对所检测标本、检验结果是否与病人信息是否一致，无误后方可审核报告单。 二、报告单打印应字迹清晰、无错别字、内容准确规范，不得涂改，签名字迹要能辨认。 三、进修、实习人员和无临床检验资格证的人员无签字权，也不能代替有资格的老师签字。 四、检验报告由经验丰富、技术水平和业务能力较强的人员负责审核。 五、各专业组的报告每日应认真仔细审核，发现问题及时纠正；检验结果可疑时应及时进行复检并登记，不得草率发出。 检验科工作制度 1、认真执行检验技术操作规程，保证检验质量和安全，严格执行查对制度。 2、普通检验，一般应于当天发出报告，急诊检验应在检验单上注明“急”字，随采随验，及时发出报告，对不能及时检验的标本，要妥善保藏。标本不符合要求者，应重新采集。
3、认真核对检验结果，填写检验报告单，做好登记，签名发出。检验结果与临床不符或可疑时，应主动与临床医生联系，重新检查，发现检验项目以外的阳性结果，应主动报告。 4、检验结束后，要及时清理器材、容器，经清洗、干燥、灭菌后放原处，污物及检查后标本妥善处理，防止污染。 5、采血必须坚持一人一针一管，严格无菌操作，防止交叉感染。 6、检验室应保持清洁整齐，认真执行检验仪器的规范操作规程，定期保养、检测仪器，不得使用不合格的试剂和设备。 7、建立并完善实验室质量保证体系，开展室内质量控制，参加室间质量评价活动。 8、配合临床医疗工作，开展新的检验项目和技术革新。 9、应制定检验后标本保留时间和条件，并按规定执行。废弃物处理应按国家有关规定执行。 10、加强检验室安全管理和防护，做好生物及化学危险品、防火等安全防护工作，遵守安全管理规章制度。 检验科试剂与校准品管理制度 1. 试剂与校准品采购与储存的管理 1.1成立试剂管理小组，协助科主任规范试剂管理过程中各个环节。并指定专人做
环境工程微生物学考试复习资料
精品文档 收集于网络，如有侵权请联系管理员删除 6、微生物有哪些特点？1.个体极小 2.分布广，种类繁多。3.繁殖快4.易变异 7、革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁结构有什么异同？各有哪些化学组成？ 1.革兰氏阳性菌含大量的肽聚糖，独含磷壁酸，不含脂多糖。革兰氏阴性菌含极少的聚糖，独含脂多糖，不含磷壁酸。 2.革兰氏阳性菌的细胞壁厚，结构较简单，含肽聚糖、磷壁酸、少量蛋白质和脂肪。革兰氏阴性菌的细胞壁较薄，结构较复杂，分外壁层和内壁层，外壁层分为三层：最外层脂多糖，中间层磷脂层，内层脂蛋白；内壁层含肽聚糖，不含磷壁酸。 8叙述革兰氏染色的机制和步骤 革兰氏染色的机制有以下两点：(1) 革兰氏染色与等电点的关系G+菌的等电点低于G-菌，所带负电荷更多，因此，它与结晶紫的结合力较大，不易被乙醇脱色。(2) 革兰氏染色与细胞壁的关系G+的细胞壁脂类少，肽聚糖多，G-则相反，故乙醇容易进入G-细胞，进行脱色。 8、藻类的分类依据是什么？它分为几门？ 根据藻类光合色素的种类、个体形态、细胞结构、生殖方式和生活史等，将藻类分为10门：蓝藻门、裸藻门、绿藻门、轮藻门、金藻门、黄藻门、硅藻门、甲藻门、红藻门和褐藻门。 9、真菌包括那些微生物？它们在废水生物处理中各起什么作用？ 真菌包括酵母菌、霉菌及各种伞菌。酵母菌既处理了废水，又可得到酵母菌体蛋白，用作饲料。还可以用酵母菌监测重金属。美军在对废水中氰化物的去除率达90%以上，有的霉菌还可以处理含硝基化合物的废水。真菌在处理有机废水可以用于培养食用菌的菌丝体，这样既处理了废水和固体废物，还获得了食用菌。 10、酵母菌有哪些细胞结构？有几种类型的酵母菌？ 酵母菌的细胞结构有细胞壁、细胞质膜、细胞核、细胞质及内含物。酵母菌有发酵型和氧化型两种。 11、霉菌有几种菌丝？如何区别霉菌和放线菌的菌落？ 整个菌丝体分为两部分：即营养菌丝和气生菌丝 放线菌菌落：是由一个孢子或一段营养菌丝生长繁殖出许多菌丝，并相互缠绕而成的，有的呈戎状或密实干燥多皱，整个菌落像嵌入培养基中，不易被挑取。霉菌菌落：呈圆形、绒毛状、絮状或蜘蛛网状，比其他微生物的菌落都大，菌落疏松，与培养基结合不紧，用接种环很容易挑取。 12、什么叫定向培育和驯化？ 定向培养是人为用某一特定环境条件长期处理某一微生物群体，同时不断将它们进行移种传代，以达到累积和选择合适的自发突变体的一种古老的育种方法。驯化是经过长时间地定向培养后，微生物改变了原来对营养、温度、PH 等要求，产生了适应酶，利用各营养，改变了代谢途径。 13、什么叫水体自净？可根据那些指标判断水体自净程度？ 河流接纳了一定量的有机污染物后，在物理的、化学的和水生生物等因素的综合作用后得到净化，水质恢复到污染前的水平和状态，这叫水体自净。1、P\H 指数，2、氧浓度昼夜变化幅度和氧垂曲线。 14、水体污染指标有哪几种？污化系统分为那几“带”？各“带”有什么特征？1.BIP 指数2.细菌菌落总数3.总大肠菌群 多污带：位于排污口之后的区段，水呈暗灰色，很浑浊，含有大量有机物，BOD 高，溶解氧极低，为厌氧状态。 α-中污带：在多污带下游，水为灰色，溶解氧少，为半厌氧状态，有机物减少，BOD 下降，水面上有泡沫和浮泥，有氨、氨基酸及H2S ，生物种类比多污带稍多。 β-中污带：在α-中污带之后，有机物较少，BOD 和悬浮物含量低，溶解氧浓度升高，NH3和H2S 分别氧化为NO3-和SO42-，两者含量均减少。 寡污带：在β-中污带之后，标志着河流自净作用完成，有机物全部无机化，BOD 和悬浮物含量极低，H2S 消失细菌极少，水的浑浊度低，溶解氧恢复到正常含量。 15、什么叫水体富营养化？评价水体富营养化的方法有几种？ 人类将富含氮、磷的城市生活污水和工业废水排放入湖泊、河流和海洋，使水体中的氮、磷营养过剩，促使水体中的藻类过量生长，使淡水中发生水华，使海洋中发生赤潮，叫富营养化。观察蓝细菌和藻类等指示生物、测定生物的现存量、测定原初生产力、测定透明度和测定氮和磷等导致富营养化的物质。 16、什么叫活性污泥？它有哪些组成和性质？ 活性污泥(activesludge)是由各种微生微、真菌、原生动物、微型后生动物和各种有机无机的固体物质混凝交织在一起的一种绒粒.即生物群体及它们所依附的有机物质和无机物质的总称．微生物群体主要包括细菌，原生动物和藻类等．由外到内水解细菌、发酵细菌、氢细菌和乙酸菌、甲烷菌、硫酸盐还原菌、厌氧原生动物其中产甲烷丝菌是厌氧活性污泥的中心骨架。 17、叙述好氧活性污泥净化污水的机理？1.在氧化的条件下，活性污泥绒粒中的絮凝性微生物吸附污水中的有机物。2.活性污泥绒粒中的水解性细菌水解大分子有机物为小分子有机物，同时，微生物合成自身细胞。污水中的溶解性有机物直接被细菌吸收，在细菌体内氧化分解，其中间代谢产物被另一群细菌吸收，进而无机化。3.原生动物和微型后生动物吸收和吞食未分解彻底的有机物及游离细菌。 42、叙述氧化塘和氧化沟处理污水的机制 氧化塘和氧化沟一般用于三级深度处理，用以处理生活污水和富含氮、磷的工业废水。有机污水流入氧化塘，其中的细菌吸收水中的溶解氧，将有机物氧化分解为H2O 、CO2、NH3、NO3-、PO43、SO42-。细 菌利用自身分解含氮有机物产生的NH3和环境中的营养物合成细胞物质。在光照条件下，藻类利用H2O 和CO2进行光合作用合成糖类，再吸收NH3和SO42-合成蛋白质，吸收PO43-合成核酸，并繁殖新藻体。 43、菌胶团、原生动物和微型后生动物在水处理过程中有哪些作用。菌胶团的作用： 1、有很强的生物絮凝、吸附能力和氧化分解有机物的能力 2、菌胶团对有机物的吸附和分解，为原生动物和微型后生动物提供了良好的生存环境 3、为原生动物、微型后生动物提供附着栖息场所 4、具有指示作用 原生动物和微型后生动物的作用 1、指示作用 2、净化作用 3、促进絮凝作用和沉淀作用 44、叙述生物膜法净化污水的作用机制 生物膜在滤池中是分层的，上层生物膜中的生物膜生物和生物膜面生物及微型后生动物吸附污水中的大分子有机物，将其水解为小分子有机物。同时生物膜生物吸收溶解性有机物和经水解的小分子有机物进入体内，并进行氧化分解，利用吸收的营养构建自身细胞。上层生物膜的代谢产物流向下层，被下层生物膜生物吸收，进一步被氧化分解为CO2和H2O 。老化的生物膜和游离细菌被滤池扫除生物吞食。通过以上微生物化学和吞食作用，污水得到净化。 45、什么叫活性污泥丝状膨胀？引起活性污泥丝状膨胀的微生物有哪些？ 由于丝状细菌极度生长引起的活性污泥膨胀称为活性污泥丝状膨胀。经常出现的有诺卡氏菌属、浮游球衣菌、微丝菌属、发硫菌属、贝日阿托氏菌属等 46、促使活性污泥丝状膨胀的环境因素有哪些？ 1、温度 2、溶解氧 3、可溶性有机物及其种类 4、有机物浓度 47、为什么丝状细菌在污水生物处理中能优势生长？ 因为几乎所有的丝状细菌都能吸收可溶性有机物，尤其是低分子的糖类和有机酸。在运行过程中，有机物因缺氧不能降解彻底，积累大量有机酸，为丝状细菌创造营养条件，使丝状细菌优势生长。 48、如何控制活性污泥丝状膨胀？ 1、控制溶解氧 2、控制有机负荷 3、改革工艺 49、污水为什么要脱氮除磷？ 在水体中氮、磷量过多，危害极大，最大的危害是引起水体富营养化，在富营养化水体中，蓝细菌、绿藻等大量繁殖，有的蓝细菌产生毒素，毒死鱼、虾等水生生物和危害人体健康，由于它们的死亡、腐败，引起水体缺氧，使水源水质恶化。不但影响人类生活，还严重影响工、农业生产。 50、微生物脱氮工艺有哪些？ A|O 、A2\O 、A2\O2、SBR 等 51、叙述污水脱氮原理？ 脱氮是先利用好氧段经硝化作用，由亚硝化细菌和硝化细菌的协同作用，将NH3转化为NO2--N 和NO3--N 。再利用缺氧段经反硝化细菌将NO2--N （经反亚硝化）和NO3--N （将反硝化）还原为氮气，溢出水面释放到大气，参与自然界氮的循环。水中含氮物质大量减少，降低出水的潜在危险性。 52、什么叫捷径反硝化？何谓短程硝化-反硝化？在生产中它有何意义？ 捷径反硝化：即通过限制充氧量和缩短曝气时间等条件，抑制硝化细菌生长，促使亚硝化细菌优势生长，迅速将氨氧化为HNO2 后，随即利用有机物将HNO2 还原为N2的过程。捷径反硝化不仅可缩短曝气时间，减少能耗，还节省碳源，从总体上节省运行费用。 Q10：温度每升高10度酶促反应速率相应升高的因数。
《环境工程微生物学》期末考试试卷（A卷） （2002-2003年度上学期） 姓名班级学号成绩 一、选择题（单选或多选，20×2=40） 1、对微生物的概念，以下最正确、最完整的叙述是。 A、微生物是一类个体微小、结构简单，必须借助显微镜才能观察清楚的生物。 B、微生物是一类结构简单，具有单细胞结构，必须借助显微镜才能观察清楚其结构的生物。 C、微生物是一类个体微小、结构简单，具有单细胞结构，必须借助显微镜才能 观察清楚其结构的最低等生物。 D、微生物是一类个体微小、结构简单，具有单细胞、简单多细胞结构或非细胞 结构，必须借助显微镜才能观察清楚其结构的最低等的生物 2、生物五界分类系统包括。 A、原核生物界、原生生物界、真菌界、动物界、植物界。 B、病毒界、原核生物界、真核生物界、动物界、植物界。 C、原核生物界、真核生物界、真菌界、动物界、植物界。 D、病毒界、原核生物界、真核生物界、动物界、植物界。 3、以下微生物属于环境工程微生物范畴的是。 A、病毒、蓝细菌、真细菌、粘细菌。 B、原生动物、蓝细菌、真核藻类、放线菌、粘细菌。 C、微型后生动物、酵母菌、霉菌、真细菌。 D、病毒、螺旋体、细菌、放线菌、 真菌、原生动物、微型后生动物。
4、关于细菌的形态和大小的描述，以下正确的是。 A、细菌的形态包括球菌、杆菌、螺旋菌、丝状菌。 B、杆菌有长杆菌、短杆菌、弧杆菌、链杆菌和芽孢杆菌之分。 C、在任何情况下，细菌的形态都是稳定的。 D、多数球菌的直径为0.5~2.0μm。 5、以下物质属于细胞质内含物的是。 A、细胞膜 B、核糖体 C、荚膜 D、异染粒 E、气泡 6、荚膜具有的功能包括。 A、荚膜可以维持细菌的细胞形态。 B、荚膜为鞭毛提供支点，使鞭毛运动。 C、荚膜是细菌在其表面分泌的一种粘性物质，它可以保护细菌免受干燥的影响； 当营养缺乏时可以作为碳源和氮源被利用。 D、细菌的荚膜有生物吸附的作用，将废水中有机物、无机物及胶体吸附在细菌体表面上。 7、细菌在固体培养基上的菌落特征是细菌分类鉴定的重要依据，描述菌落特征应包括。 A、菌落的形态 B、菌落的大小 C、菌落的光泽 D、菌落的颜色 E、菌落的质地及透明度 F、菌落的边缘特征 8、古菌具有的特点有。 A、古菌有精确的方角和垂直的边构成直角几何形态的细胞； B、古菌的细胞膜组分大多数是脂蛋白，蛋白质是酸性的；
《环境工程微生物学》课程综合复习资料 一、填空题 1、我国大耜提出的六界分类系统为：、、、、、。 2、病毒的分类依据有多种,按照核酸分类，病毒可分为、。 3、细菌的原生质体包括，和三大部分。 4、根据古菌的生活习性和生理特性，古菌可分为、、三大类型。 5、在《伯杰氏系统细菌学手册》中，将古菌分为五大类群：、、、、。 6、放线菌的革兰氏染色反应：除为外，其余均为。 7、在废水生物处理中起重要作用的三种原生动物包括，和。作为指示生物，指示处理效果差的是和。 8、真菌中的、和在有机废水和有机固体废物的生物处理中都起着积极作用。 9、从化学组成来看，酶可分为和两类。 10、、、、四种元素是所有生物体的有机元素。 11、微生物最好的碳源是，尤其是、，它们最易被微生物吸收和利用。 12、环境工程微生物学中,根据形态特点，细菌可分为四种形态,即、、、。 13、按培养基组成物的性质不同，可把培养基分为、、。 14、好氧活性污泥的组成中，微生物成分主要是。 15、菌种复壮法有、、三种。 16、污水生物处理法很多，根据微生物与氧的关系分为和两类。 17、原生动物可划分为四个纲，即、、和。 18、在污废水生物处理中，原生动物和微型后生动物的作用体现在：、和。 19、现在普遍接受的五界分类系统为：、、、、。 20、部分细菌有特殊结构：、、、、和。 21、20世纪70年代开始在水平上研究生物的研究生物的进化和系统发育。沃斯以的相关性，将一类有别于细菌的、在特殊环境的单独列出，与细菌和真核生物并列于系统发育树中。 22、细胞质膜的化学组成包括、、。 23、微生物学家根据rRNA序列的不同，将所有细胞生物分为三大域，即、、。 24、根据专性宿主分类，病毒可分为、、、、、。
检验科工作职责 -标准化文件发布号：（9556-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII
检验科查对制度 一、建立健全查对制度，杜绝医疗事故，减少差错发生。 二、每次检验，检验师应对结果进行复核，并签上姓名。遇疑难问题，应及时报告科主任。 三、采集标本时： 1、门诊病人：认真查对科别、姓名、性别、年龄、检测项目、标本（质、量）。 2、住院病人：认真查对科别、住院号、床号、姓名、性别、检测项目、标本（质、量），同一病人，多张申请单时，认真查对各申请单的临床资料是否一致。 四、检验时，认真查对仪器性能、试剂质量、检验项目与标本是否相符。 五、检验后，认真查对检验目的、结果、是否缺项等。 六、发报告单时，认真查对科别、姓名及检验项目。 七、血型及输血检验时，认真查对病人姓名、性别，标本、血袋编号、标签是否完整，标本和诊断血清是否符合要求，献血员姓名，血型、Rh血型及血交叉试验结果，血袋是否有破损及血液质量。试验结果除肉眼观察外，必须用显微镜观察结果，以防弱凝集遗漏。复核者应认真核
对一次标签、血型、Rh血型及交叉试验结果后，签上核对者姓名。 检验标本管理制度 一、标本一律凭单采集，做好五查五对（科别、床号、姓名、性别、检验项目），临床科室送的标本要核对检验单、检查项目和标本采集是否符合要求。 二、检验标本分类进入各项检测程序，并严格做好编号和核对，缓检标本应核对后妥善保存。 三、检验后的标本应按规定，根据不同要求和条件限时保留备查，特殊标本特殊保存。 四、凡有传染性的标本，应按传染性标本管理规定须经灭菌处理后才能弃去。 差错事故登记报告制度 一、严格执行检验工作查对制度，包括：采集，收集标本、化验单的科别、床号、姓名、检验目的、检验标本的质量和量；检验时的项目、所用的试剂、编号；检验结束时的检验结果、登记；发报告时的科别等。 二、要做过细的工作，严防检验标本丢失或损坏，尤其是脑脊液、胸腹水液等重要标本，收到后应立即登记并检验，防止漏检、错检；生化检验标本验后应保留24小
微生物实验室岗位职责 实验室主任职责 1.负责本科室的业务和行政管理工作。 2.制定本科室各类业务工作计划，组织实施，协调完成各项检测任务，提 高检验人员的技术水平，拓展业务。 3.负责安排与监督指导科室检测工作，复核检测报告，监督检测资料整理 归档。 4.监督执行各项规章制度的实施，对本检验室进行考核。 5.完成领导下达的工作任务。 安全监督员职责 1.严格按照SOP文件做好检验人员的个人安全防护监督及人员健康监测， 保证检验人员在工作期间无生物安全事故发生。 2.管理所有个人防护装备及救护用品。 3.定期进行实验室安全巡查，对实验室生物安全、水、电、气、消防及防 盗安全进行检查并做好巡查记录，及时提出纠正意见并监督实施。 质量监督员职责 1.监督质量体系的运行情况，发现问题及时向检测人员汇报，做好书面记 录，提出纠正要求并进行跟踪验证。 2.监督本实验室检验方法、规程和操作规范的有效性和正确使用。定期检 查环境条件、仪器设备、质控图等记录是否符合要求。当质量监督员发
现检测人员使用了不正确标准，操作不当，环境条件不符合时，有权暂停检测工作，并要求有关人员进行纠正。 检验员职责 1.按SOP文件开展检测工作，如实填写检验原始记录，正确报告，按时完 成检测任务，保证检测数据诚实准确。 2.积极参加人员业务培训，不断提高技术水平。 3.当检测设备、环境条件等不符合要求时，有权暂时不进行检测活动。 设备管理员职责 1.负责职责范围内所有使用仪器设备的保管和日常维护，熟习其性能及操 作规范。 2.负责仪器购置申请、建立档案、维护记录、定期检查和报废申请工作， 做好使用、维护及报废记录。 试剂耗材管理员职责 1.做好试剂耗材的申购、验收、保管、分发、登记工作。 2.做好各种耗材的入库登记和使用情况记录。 3.对各类耗材应科学分类科学管理，建立电子档案，便于查找，努力为检 验人员做好服务工作。 样品接收员职责 1、负责检查待接受样品包装是否完整，样本数量、质量是否符合检验要求。 2、负责核实样品送检单的内容。 3、负责做好接收登记，并标记本实验室统一编号放置待检。 样品保管员职责
检验科工作制度及人员岗位职责 检验科工作制度及人员岗位职责 检验报告双签字制度 一、检验完完毕，应认真核对所检测标本、检验结果是否与病人信息是否一致，无误后方可审核报告单。 二、报告单打印应字迹清晰、无错别字、内容准确规范，不得涂改，签名字迹要能辨认。 三、进修、实习人员和无临床检验资格证的人员无签字权，也不能代替有资格的老师签字。 四、检验报告由经验丰富、技术水平和业务能力较强的人员负责审核。 五、各专业组的报告每日应认真仔细审核，发现问题及时纠正;检验结果可疑时应及时进行复检并登记，不得草率发出。 检验科工作制度 1、认真执行检验技术操作规程，保证检验质量和安全，严格执行查对制度。 2、普通检验，一般应于当天发出报告，急诊检验应在检验单上注明“急”字，随采随验，及时发出报告，对不能及时检验的标本，要妥善保藏。标本不符合要求者，应重新采集。 3、认真核对检验结果，填写检验报告单，做好登记，签名发出。检验结果与临床不符或可疑时，应主动与临床医生联系，重新检查，发现检验项目以外的阳性结果，应主动报告。 4、检验结束后，要及时清理器材、容器，经清洗、干燥、灭菌后放 原处，污物及检查后标本妥善处理，防止污染。 5、采血必须坚持一人一针一管，严格无菌操作，防止交叉感染。
6、检验室应保持清洁整齐，认真执行检验仪器的规范操作规程，定期保养、检测仪器，不得使用不合格的试剂和设备。 7、建立并完善实验室质量保证体系，开展室内质量控制，参加室间质量评价活动。 8、配合临床医疗工作，开展新的检验项目和技术革新。 9、应制定检验后标本保留时间和条件，并按规定执行。废弃物处理应按国家有关规定执行。 10、加强检验室安全管理和防护，做好生物及化学危险品、防火等安全防护工作，遵守安全管理规章制度。 检验科试剂与校准品管理制度 1. 试剂与校准品采购与储存的管理 1.1成立试剂管理小组，协助科主任规范试剂管理过程中各个环节。并指定专人做好试剂的登记入库、出库、清点盘存、保管、报废等工作，做到账册实物相符。 1.2请购试剂必须填写请购单，科主任审查签字，然后交院采购中心统一采购。 1.3各实验室组长要按实际用量，以保证检验质量和节约开支为原则，有计划地请购试剂，以免造成试剂的无故浪费。 1.4试剂进货要做到来源渠道正规、货物优质、有批准文号、生产日期及供货单位加盖红印的《经营许可证》、《生产许可证》、《注册证》 复印件和法人委托书及业务员的身份证明。以上资料统一由采购中心专人登记保管。
环境工程微生物学复习 考试必备 文档编制序号：[KK8UY-LL9IO69-TTO6M3-MTOL89-FTT688]
绪论1、微生物的含义：微生物是肉眼看不到的，必须在电子显微镜或光学显微镜才能看见的所有微小生物的统称。 2、分类地位：五界系统：1969年魏克提出微生物五界分类系统：（1）原核生物界：细菌、放线菌、蓝绿细菌（2）原生生物界：蓝藻以外的藻类及原生动物（3）真菌界（酸性土壤中真菌较多）：酵母菌、霉菌（4）动物界（5）植物界。三域系统：（1）古菌域（Archaea）：“三菌”产甲烷菌、极端嗜盐菌、嗜热嗜酸菌（2）细菌域（Bacteria）：细菌（化）、蓝细菌（光）、放线菌（化）、立克次氏体（寄生）、支原体（人工培养基，最小）、衣原体（寄生）、螺旋体（原核，是细菌与原虫的过度）“三体”支原体、立克次氏体、衣原体（3）真核生物域（Eukarya）：真菌、藻类、动物、水生植物（原生动物、真菌、藻类） 3、按细胞结构的有无分为分为：非细胞结构微生物（病毒、类病毒：类病毒是比病毒小的超小微生物）和细胞结构微生物。 按细胞核器、有丝分裂的有无分为：原核和真核 4、分类单位：域界门纲目科属种（柱） 5、微生物的特点：（1）体积小，比表面积大（2）分布广，种类繁多（3）吸收多，转化快（4）生长旺，繁殖快（5）适应性强（6）易变异 6、解释EscherichiacoilK12（λ）中的各词的含义。 答：溶原性噬菌体的命名是在敏感菌株的名称后面加一个括弧，在括弧内写上溶原性噬菌体λ。大肠杆菌溶原性噬菌体的全称为EscherichiacoilK12
（λ），Escherichia是大肠杆菌的属名，coil是大肠杆菌的种名，K12是大肠杆菌的株名，括弧内的λ为溶原性噬菌体。解释EscherichiacoilK12（λ）中的各词的含义。 答：溶原性噬菌体的命名是在敏感菌株的名称后面加一个括弧，在括弧内写上溶原性噬菌体λ。大肠杆菌溶原性噬菌体的全称为EscherichiacoilK12（λ），Escherichia是大肠杆菌的属名，coil是大肠杆菌的种名，K12是大肠杆菌的株名，括弧内的λ为溶原性噬菌体。 第一章：病毒 1、病毒的特点以及分类： （1）大小在微米以下，故在光学显微镜下看不见，必须在电子显微镜。（小） （2）可合成蛋白质的机构——核糖体，也没有合成细胞物质和繁殖所必备的酶系统，不具独立的代谢能力。（简） （3）必须专性寄生在活的敏感宿主细胞内，依靠宿主细胞合成病毒的化学组成和繁殖新个体。（寄） （4）在宿主体外却呈现不具生命特征的大分子物质，但仍保留感染宿主的潜在能力，一旦重新进入活的宿主细胞内又具有生命特征，重新感染新的宿主。 2、病毒的分类依据是什么分为哪几类病毒 答：病毒是根据病毒的宿主、所致疾病、核酸的类型、病毒粒子的大小、病毒的结构、有或无被膜等进行分类的。 根据专性宿主分类：有动物病毒、植物病毒、细菌病毒（噬菌体）、放线菌病毒（噬放线菌体）、藻类病毒（噬藻体），真菌病毒（噬真菌体）。
环境工程微生物学综合实验- 功能菌（絮凝菌）的分离、筛选与性能研究 实验须知* 一、环境工程微生物学实验目的 1. 通过实验进一步加深理解课堂讲授的理论内容。 2. 训练学生掌握微生物学最基本的操作技能，建立无菌概念并掌握无菌操作技术。 通过实验，培养学生分析问题、解决问题的能力及创新能力，提高学生的综合素质，为将来能够独立工作打下坚实的基础。 二、环境工程微生物学实验基本要求 1. 每次实验前必须对实验内容进行充分预习，弄清实验目的、原理及操作步骤，以免手忙脚乱，影响实验课效果。 2. 实验前，按内容要求仔细检查所需仪器、药品是否齐全，若有问题及时提出。 3. 整个实验过程要严格按操作步骤进行，不得马马糊糊，否则会造成错误，甚至出现事故。 4. 实验过程中要做好记录，特别是对于连续观察的实验，必须认真记下每次观察到的现象与结果，然后进行整理分析，写出实验报告。 5. 使用贵重精密仪器时要特别小心，注意保护，用毕要复原，并进行登记。实验使用的一切物品实验完毕均放回原处。损坏仪器照价赔偿。 6. 实验室要保持整洁、干净，不准大声喧哗，勿随意走动，严禁吸烟，不许吃东西，不准随便乱丢废物。 7. 实验过程中，一些易燃品如乙醇、丙酮等切勿接近火焰。如遇火险，要先切断火源，再用沙土或湿布灭火，必要时应使用灭火器。 8. 使用过的废液及琼脂培养基不得直接倒入水池内，应先进行灭菌处理，然后再将废液倒入下水道，将琼脂培养基埋掉。 9. 离开实验室前要将桌面擦净，清扫卫生，检查电源、火源、自来水、门窗
是否关闭，以确保安全。 实验一、絮凝菌分离、筛选准备实验 （器皿的包装、无菌水、培养基的制备与灭菌） 一、器皿的包装 （一）实验目的 学会微生物技术实验中所用器皿的包装方法及意义。 （二）包装方法 1.培养皿的包装 用牛皮纸或旧报纸进行包装。包好后灭菌备用。 2. 吸管的包装 在已干燥的吸管的平头端距0.5cm处，塞长约1.5cm的棉花，松紧要合适。过松，棉花易脱出；过紧，吹吸费力，甚至吹吸不动。棉花的作用是防止吸管中的细菌吸入口中，同时又防止口中的细菌吹入管中。将塞好棉花的吸管的尖端，放在裁成4cm ~ 5cm宽的长报纸条的一端，吸管与纸条约成45o角。折叠纸角，包住吸管尖端，然后以螺旋式在桌面上用力向前搓转，纸条将吸管包紧，余下的纸尾打成结。将这样包好的几根或几十根吸管放一起，再用一张牛皮纸或两张报纸包装，然后干热灭菌。 3.三角瓶的包装 在三角瓶的瓶口上塞上合适大小的瓶塞（棉塞或泡膜塑料塞），在瓶口外面包上2层至 3层报纸，扎好灭菌。若进行湿热灭菌，最好再包一层牛皮纸或铝铂，以免打湿棉塞。 二、培养基的制备与灭菌 （一）实验目的 1．掌握培养基和无菌水的制备方法。 2．掌握高压蒸汽灭菌技术。 3．了解灭菌前的准备工作。 （二）材料
检验科微生物室工作制度 1、临床细菌室守则：临床细菌室是进行细菌学实验的场所，在此完成标本接种、孵育、分离、细菌鉴定和药敏试验等工作。细菌室必须符合以下条件： 1.1细菌室必须安装严密的门窗，以防外部污浊气体和昆虫进入室内污染环境。室内禁用电扇，以避免加速气体流动，造成细菌播散。 1.2菌室必须装有供空气消毒的紫外线灯，置于离操作台面1m的高度，每天开始工作前照射20min。对紫外线灯的消毒效果要定期检查，及时更换失效的灯管。 1.3室内备有工作人员洗手使用的肥皂和自来水源。此水源不可与处理标本相关的水源共用，须设置消毒剂水盆，供操作后浸手用。 1.4室内必须常备消毒剂，如来苏或过氧乙酸，一旦发生菌液溅落试验台或地面，应能立即进行消毒处理。 1.5室内操作台须每日用消毒剂擦洗，地面至少每周用消毒剂擦洗1次。 1.6室内对接收的标本和消毒过的器具，要分别指定地点放置，特别是对无菌和有菌器具要明显分开。用过的试管、平皿必须及时高压灭菌处理。 1.7不能或不便高压灭菌的标本和废弃物品须焚化处理。 1.8细菌室根据当地的气温特点，安装空调机，以适合细菌实验工作。 1.9设置必要的消防设备。 2、无菌室守则：对无菌实验室以及在其中操作的要求如下： 2.1无菌室应完全封闭，人员出入应有两道门，其间应隔有缓冲区。无菌室与外界可开一拉门小窗，供传递器具用。 2.2在无菌室中仅限于分装无菌的培养基等操作，不进行有菌标本的分离及其它操作。 2.3用前应以紫外灯消毒30min，定期用乳酸蒸熏，彻底消毒。 2.4工作人员进入无菌室前应换专用鞋、专用衣。在无菌室内进行无菌操作时，应戴口罩，口罩每次用后消毒。 2.5无菌室应仅限操作人员进入，操作时应严格关门，其他人员可在室外观看或经拉门小窗进行协助。 2.6条件有限的实验室，可用超净工作台代替无菌实验室进行相应的操作。超净工作台应选择垂直气流通风方式。 2.7无菌室应配备空调设备，保证不因室温而影响工作。 对临床细菌检验人员的要求： 2.8负责鉴定及签发报告的主管技术人员应通晓诊断细菌学的全面知识。 2.9一般细菌室工作人员均应具备细菌传染、消毒、灭菌的知识。 2.10通晓细菌室守则，并严格遵守。 2.11负责人应不断更新知识，了解细菌学检验的新进展。
检验科工作职责 检验士职责 1、在检验师的指导下，担负各种检验工作。 2、收集和采集检验标本，发送检验报告单，在检验师的指导下进行特殊检验。 3、认真执行各项规章制度和技术操作规程，随时核对检验结果，严防差错事故。 4、负责检验药品、器材的请领、保管、检验试剂的配制、培养基的制备，做好登记、统计工作。 5、担任一定的检验器材的洗刷，做好消毒隔离工作。 检验师职责 1、在科主任领导下进行工作。 2、亲自参加检验，并指导检验士进行工作，核对检验结果，负责特殊检验的技术操作和特殊试剂的配制、鉴定、检查，定期校正检验试剂、仪器，严防差错事故。 3、负责毒剧药品，贵重器材的管理和检验试剂、材料的计划和请领、报销等工作。 4、开展科学研究和技术革新，改进检验方法，不断开展新项目，提高检验质量。 5、负责开展对本专业质量控制工作。
主管检验师职责 1、在科主任领导下，负责指导本科的检验、教学和科研工作。 2、参加部分检验工作，并检查科内的检验质量，解决业务上复杂疑难问题。 3、开展科研，担负教学工作，指导进修，实习人员的学习，做好科内各类技术人员的培养，提高工作。 4、协助科主任制定科研规划，督促实施。学习使用国内外新技术，不断改进各科检验方法。 检验科主任职责 1、在院长的领导下,负责本科的检验、教学、科研、行 政管理及质量控制工作,是管理的第一责任人。 2、制定本科工作、业务计划,并组织实施和督促检查,按 期总结汇报。 3、督促本科各级人员遵守国家法律、法规,认真执行规 章制度和技术操作规程,做好检验工作及其登记,统计和消毒隔 高工作。正确使用菌种、毒株、毒剧药品和检验仪器,审签试剂、 器材的请领、报销,经常检查安全措施,严防差错事故发生。 4、参加部分检验工作,并检查科内人员的检验质量,开展 质量控制工作。