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光合细菌培养以及使用要点光合细菌：通常所说的光合细菌是一类能在厌氧光照条件下利用有机物作为供氢体兼碳源，进行不放氧光合作用的细菌。
光合细菌在自然界的碳、氮、硫循环中起着重要作用，如：（1）净化养殖水环境：迅速消除水中小分子有机物、氨氮、硫化氢、有机酸等有害物质，提高水体溶氧水平。
（2）促进养殖动物健康生长：动物摄食后，活化机体免疫系统，提高养殖动物防病抗病能力，抑制有害菌群生长。
配制过程：100公斤的光合细菌培养液的配制过程：（1）原料的选取培养器皿：透明塑料桶或者筒状加厚透明塑料薄膜。
溶液：自来水（增氧泵曝气6-12h或曝晒2-3天）或井水，防止杂菌污染。
菌种和培养基：建议直接到网上购买培养基，同时也可以购买一定量的菌种，买回来直接扩培。
（2）配制步骤①将80公斤水中加入定量的培养基，使之充分溶解，与20公斤的光合细菌菌种混合均匀后进行分装处理，密封培养。
②在温度25-35℃，自然光照下进行培养，晴天培养时间大约需要4-5天，每日观察光合细菌培养物颜色，并与原液比较，当颜色基本一致时培养完成，培养物可作为菌种继续扩培或用于净化池塘水质。
使用方法：（1）培养菌液的使用时间：光合细菌是兼性厌氧型细菌，因此使用的可以是晴天上午，也可以在阴天使用；（2）培养菌液的使用频率：成鱼养殖期施用培养菌液5斤/亩，5-6月份10-15天/次，7-9月份7-10天/次；与消毒剂、抗生素间隔4天以上使用，且光合细菌与芽孢杆菌交替使用效果更好。
注意事项：（1）pH值：培养液用水的pH值为7.5-8.0；（2）温度：温度过高时，需用遮阳网遮挡或置于树荫下培育；温度较低时，应将培养容器用厚薄膜罩住，同时使用日光灯进行人工光照，使之快速繁殖；（3）摇动频率：当使用塑料桶培育时，每天摇动1-2次，使之受光均匀；（4）液体保存：成品菌液最好存放于20℃以下避光处（新培养菌液不能直接避光保存，要先在有光的屋里放置一周以上），或尽快使用。
光合细菌的培养方法光合细菌的培养方法2010-09-11光合细菌是兼性厌氧的，不同的光合细菌用的培养基不一样我现在就在做关于光合细菌的问题，这几中细菌都是常见的细菌，培养基在许多微生物上后面都有，光合细菌的富集培养基是:NH4Cl0.1gNaHCO30.1gKH2PO40.02gCH3COONa0.1-0.5gMgSO4.7HO20.02gNaCl0.05-0.2g三生长因子1ml微量元素溶液1ml蒸馏水97mlPH7.0生长培养基加氮源(谷氨酸钠)和碳源(乙酸.丙酸.丁酸盐等)即可.其他菌的分离只要选择不同的培养基就可以选择分离啊光合细菌培养基配方氯化氨1克，磷酸氢二钾0.5克，氯化镁0.2克，氯化钠2克，酵母膏0.1克，水900毫升。
各成份溶解后15磅灭菌20分钟，然后无菌的加入过滤的碳酸氢钠5.0克/50毫升水;50毫升过滤的乙醇。
用过滤的0.1N磷酸调PH=7.0即可。
响应面设计法优化光合细菌培养基配方。
培养基成分中醋酸钠和蛋白胨对于光合细菌的生长影响最为显著，最优培养基配方为:醋酸钠1.145g/L、蛋白胨0.055g/L、碳酸氢钠0.6g/L、硫代硫酸钠0.4g/L、氯化钠0.3g/L、硫酸镁0.1g/L、磷酸二氢钾0.05g/L。
在此条件下，光合细菌生长最为良好，经过5d培养以后，培养液OD600可以达到0.5以上光合细菌(含生产工艺)优良的光合细菌菌种的外观质量是啥样?光合细菌发生剂的用法(即光合细菌的生产工艺)一、光合细菌生长所需的营养条件用"光合细菌发生剂"生产的终端产品:光合细菌液，PSB细胞浓度达到30--100亿/毫升，生产成本只要0.30元/公斤，而使用价值可达到2元/公斤，投入产出比达到1:6--12以上。
做成的液体产品，密封保存在通气干燥处，可保质达1年以上。
二、光合细菌生长所需环境条件有了营养全面的"光合细菌发生剂"，还必须有一个良好的培养环境条件，才能生产出优质产品出来。
光合细菌培养操作教程（附最新升级配方）他山之石，可以攻玉，汇集各地自配菌自制肥鱼友，总结交流经验，提高技术，以理论为依据，注重实践、接地气的数据和案例，欢迎加入实战调水肥水养殖群3再三强调、第一次扩种培养，请尽量遵守操作流程，室内灯泡光照，40瓦钨丝灯（老灯泡）、现在的温度，万万不可太阳直接暴晒，特别是2到20公斤的透明瓶培养，一定要搭遮阳网，而且网子和培养物之间至少1米的空隙、室内灯泡扩种成功以后，转入阳光培养，目前看来我试过的最理想的方案就是，搭建40公分深简易池子，如果是水泥池更好，如果是直接的砖头码的池子，铺油布，然后用透明的尼龙筒膜。
然后注水把尼龙筒膜浸泡完全，可以降温，上面再加遮阳网就很完美过夏天高温季节了、第一次培养的水源最好用池塘水和自来水经过煮沸冷却以后使用，等第一次的菌种培养成熟以后，第二次菌种数量比较多了，再做几个不同水源的直接培养，哪种水源最适合最终就确定用哪种水源关于菌种1.菌种的添加比例，第一次是百分之二十比例，也就是1：4的比例，因为第一次菌种经过长途黑暗运输，以及开始适应当地水源，所以需要按较大比例添加，当在当地培养几个世代以后，菌种比例可以适当减少，菌种和水的比例可以是1比10甚至是1比202.菌种的适应性，第一次扩大培养，由于菌种对当地水源有一个适应过程，所以第一次培养的成熟时间可能会有所延长，有可能需要天左右，当适应以后，条件适应情况下则只需要到天，当然这个因菌种种源不同有所差异的，我指的是我的菌种，其他菌种大家可以自己测试和总结。
3.菌种收到以后，由于菌种不可能大量发货，而且也没有必要大量发货，所以量一般都不是很多，所以为了百分百成功，必须精细化操作，首先给菌种采用40瓦白炽灯光照1小时左右然后再接种扩培，扩培也采用室内光照的方式培养，用40到60瓦的白炽灯最好，用2升左右的饮料瓶最理想，等自己的种群数量扩大以后，保种量在20公斤以上的时候，就可以规模化的用尼龙袋，和大透明塑料瓶室外用太阳晒。
光合细菌培养基配方及扩培方法光合细菌的培养基对光合细菌培养条件进行了优化研究，结果表明：菌株的生长温度为30℃时，最适培养光照为3000lx，最低接种浓度为6%。
培养基正交试验研究表明其最优培养基配方为：氯化铵2.00g、磷酸氢二钾0.20g、乙酸钠4.00g、碳酸氢钠2.00g、氯化钠1.00g、酵母膏0.15g、硫酸镁0.20g、T.M储液少量、蒸馏水1000mL;其中乙酸钠为最大影响因子。
酵母膏对产品品质影响较大，要求酵母膏质量稳定，无杂菌。
目前应用的光合细菌有多种配方，现介绍一种常用的配方：磷酸氢二钾(K2HPO4) 0.5g磷酸二氢钾(KH2PO4) 0.5g硫酸铵((NH4)2SO4 ) 1g硫酸镁(MgSO4.7H2O 0.5g乙酸钠 2g (或95%酒精3ml )酵母浸出汁(或酵母膏) 2g消毒海水1000m光合细菌培养基的制备1、灭菌和消毒菌种培养用的培养基应连同培养容器用高压蒸气灭菌锅灭菌。
小型生产性培养可把配好的培养液用普通铝锅或大型三角烧瓶煮沸消毒。
大型生产性培养则把经沉淀砂滤后的水用漂白粉(或漂白液)消毒后使用2、接种培养基配好后，应立即进行接种。
光合细菌生产性培养的接种量比较高，一般为20—50%，即菌种母液量和新配培养液量之比为1：4—1：1，不应低于20% ，尤其微气培养接种量应高些，否则，光合细菌在培养液中很难占绝对优势，影响培养的最终产量和质量。
3、培养管理光合细菌的培养过程中，管理工作包括日常管理操作和测试、生长情况的观察和检查以及出现问题的分析处理等三个方面。
4、日常管理和测试1)搅拌和充气：光合细菌培养过程中必须充气或搅拌，作用是帮助沉淀的光合细菌上浮获得光照，保持菌细胞的良好生长。
2)调节光照度：培养光合细菌需要连续进行照明。
在日常管理工作中，应根据需要经常调整光照度。
白天可利用太阳光培养，晚上则需要人工光源照明，或完全利用人工光源培养。
人工光源一般使用碘钨灯或白炽灯泡。
沼泽红假单胞菌的培养优化及植物病害防治研究作者：颜纲邹宁高乐天来源：《农业灾害研究》2022年第07期摘要沼泽红假单胞菌是应用较为广泛的一种光合细菌，在污水处理、农业种植、畜牧与水产养殖等领域都有较多应用。
在自然培养条件下优化培养基配方，对培养条件中对影响细菌生长的因素进行探究。
最终确定最佳C源乙酸钠添加浓度为10 g/L，最优N、P源为复合肥2（N：P：K=15：15：15），最佳添加浓度为0.5 g/L。
细菌适宜生长的培养条件为温度25℃以上、光照强度 4 000 lx以上、pH值范围为7.5～8.0。
在植物病害防治实验中，结果表明：沼泽红假单胞菌对枣锈病病原菌、根腐病病原菌、褐腐病病原菌、叶霉病病原菌具有显著的抑制效果。
关键词沼泽红假单胞菌;培养优化;植物病害防控中图分类号：X703 文献标识码：B 文章编号：2095–3305（2022）07–0028–03沼泽红假单胞菌（Rhodopseudom-onas palustris），红螺菌科，红假单胞菌属，属于光合细菌中紫色非硫细菌属的代表菌种之一，也是目前应用较广泛的光合细菌之一。
王兰等[1]利用沼泽红假单胞菌和纤细红螺菌、球形红假单胞菌的混合菌液处理虾池养殖废水，4 d后发现混合菌体对养殖废水中的COD、氨氮的去除率分别达到了72.59%、89.2%。
崔艺久等[2]对沼泽红假单胞菌的培养基和培养条件进行了优化以获得类胡萝卜素，在培养7d 后，类胡萝卜素最大产量达2.863 mg/g。
杨素萍等[3]探究了沼泽红假单胞茜Z菌株光合产氢的主要影响因素，研究结果表明：在标准状况下，菌株的最大产氨速率可达19.4 mL/（L·h）。
易力等[4]从洛河水域分离筛选得到2株光合细菌，分别为沼泽红假单胞菌、万尼氏红微菌，这2种菌对模式菌株金黄色葡萄球菌和大肠杆菌都具有较好的抑制作用，且沼泽红假单胞菌对大肠杆菌的抑制效果优于万尼氏红微菌，后者对金黄色葡萄球菌的抑制效果优于前者。
光合细菌培养操作教程（附最新升级配方）他山之石，可以攻玉，汇集各地自配菌自制肥鱼友，总结交流经验，提高技术，以理论为依据，注重实践、接地气的数据和案例，欢迎加入实战调水肥水养殖群3再三强调、第一次扩种培养，请尽量遵守操作流程，室内灯泡光照，40瓦钨丝灯（老灯泡）、现在的温度，万万不可太阳直接暴晒，特别是2到20公斤的透明瓶培养，一定要搭遮阳网，而且网子和培养物之间至少1米的空隙、室内灯泡扩种成功以后，转入阳光培养，目前看来我试过的最理想的方案就是，搭建40公分深简易池子，如果是水泥池更好，如果是直接的砖头码的池子，铺油布，然后用透明的尼龙筒膜。
然后注水把尼龙筒膜浸泡完全，可以降温，上面再加遮阳网就很完美过夏天高温季节了、第一次培养的水源最好用池塘水和自来水经过煮沸冷却以后使用，等第一次的菌种培养成熟以后，第二次菌种数量比较多了，再做几个不同水源的直接培养，哪种水源最适合最终就确定用哪种水源关于菌种1.菌种的添加比例，第一次是百分之二十比例，也就是1：4的比例，因为第一次菌种经过长途黑暗运输，以及开始适应当地水源，所以需要按较大比例添加，当在当地培养几个世代以后，菌种比例可以适当减少，菌种和水的比例可以是1比10甚至是1比202.菌种的适应性，第一次扩大培养，由于菌种对当地水源有一个适应过程，所以第一次培养的成熟时间可能会有所延长，有可能需要天左右，当适应以后，条件适应情况下则只需要到天，当然这个因菌种种源不同有所差异的，我指的是我的菌种，其他菌种大家可以自己测试和总结。
3.菌种收到以后，由于菌种不可能大量发货，而且也没有必要大量发货，所以量一般都不是很多，所以为了百分百成功，必须精细化操作，首先给菌种采用40瓦白炽灯光照1小时左右然后再接种扩培，扩培也采用室内光照的方式培养，用40到60瓦的白炽灯最好，用2升左右的饮料瓶最理想，等自己的种群数量扩大以后，保种量在20公斤以上的时候，就可以规模化的用尼龙袋，和大透明塑料瓶室外用太阳晒。
光合细菌的培养及应用方法光合细菌是一类能够进行光合作用的细菌，通过光合作用将光能转化为化学能并合成有机物质。
尽管光合细菌的数量和种类相对较少，但它们在生态系统的功能和应用方面具有重要作用。
光合细菌在环境修复、生物能源产生、食品工业以及医学领域中都存在重要应用。
为了进行对光合细菌的有效培养和应用，下面介绍光合细菌的培养及应用方法。
一、光合细菌的培养方法1. 培养基选择和制备：光合细菌可以使用富含碳源、氮源和无机盐的培养基进行培养。
例如，常用的培养基可以包括Gao's培养基和Harrison培养基。
培养基的pH应在6.5-7.0之间，温度应保持在适宜的生长温度范围内。
2.培养条件的调节：培养条件对光合细菌的生长和光合作用非常重要。
光合细菌需要光照以进行光合作用，所以需要提供适当的光照条件。
一般来说，白天至少需要12小时的光照，光照强度一般在1000-2000勒克斯之间。
此外，还需要调节培养基的气体成分，保持适当的氧气和二氧化碳浓度。
3.培养方法的选择：光合细菌可以选择液体培养和固体培养两种方法。
液体培养适合大规模培养和实验目的，而固体培养适合用于分离和纯化光合细菌。
4.培养物的处理：在培养过程中，需要定期检查培养物的生长情况和纯度。
如果发现有杂菌污染，需要进行分离和纯化处理。
5.培养物的保存：光合细菌的保存可以使用冻存法或冻干法。
冷冻保存的方法可以将光合细菌保存在-80℃以下，而冻干法则需要先将培养物冷冻，然后在真空下去除冷冻水。
二、光合细菌的应用方法1.环境修复：光合细菌具有分解有毒物质和污染物质的能力，可以通过光合作用将有害物质转化为无害的物质。
因此，光合细菌可以应用于环境修复领域，例如处理废水和土壤修复。
2.生物能源产生：光合细菌可以利用太阳能合成有机物质，并产生氢气或甲烷等能源物质。
这些能源物质可以应用于生物能源产生领域，为可再生能源的开发提供新的途径。
3.食品工业：光合细菌可以产生一些有益的物质，例如胶体、营养酵素等，可以应用于食品工业中。
光合细菌的培养方法光合细菌是一类具有光合作用能力的微生物。
过去，人们几乎不知道它的存在，直到本世纪30年代才发现它。
如今人们已揭示了它的许多奥秘，异军突起般地进入各个生产领域，为人类造福。
厌氧生物的“遗孤” 光合细菌在一切地球生物中，是够得上被称为“老资格”的。
距今25亿年前，那时地球大气层里还没有氧气的踪迹，只有水蒸气、二氧化碳、一氧化碳、甲烷、硫化氢和惰性气体等。
但是，在生命的摇篮——海洋里，已孕育着许多原性生命体，它们各有自己的生活方式：有的吃氨，有的吃硫化氢，有的吃甲烷……后来，地球上的氧气慢慢多起来了，许多不习惯于新环境的微生物，逐渐被淘汰，也有些厌氧细菌钻到地底下，将自己隐蔽起来。
光合细菌就是20亿年前厌氧微生物的“遗孤”。
光合细菌的特点一是它至今仍保持20亿年前的讨厌氧气的“性格”，平时它们深居地底、湖底、江河底和海底的污泥中，据分析每克污泥里含有105个光合细菌；二是光合细菌也能像植物那样，利用太阳光来制造养料，但是它们在光合作用过程中，不像绿色植物那样会放出氧气。
目前已发现的光合细菌不下数十种之多，但无论哪一种，迄今都还保留着20亿年前的习性，证明它们都是厌氧微生物的“遗孤”。
光合细菌的特殊本领任何一种光合细菌，都有一个光合器官。
它能分泌出跟叶绿素相同功能的物质，这些物质光合作用的效力，比叶绿素更高，能很快地把光能变成化学能。
例如有一种红色无硫细菌，它的光合器官能分泌出红色胡萝卜素，而且能利用紫外光、红外光等绿色植物所不能利用的光波。
所以，我们说光合细菌有高超的光合作用的本领。
光合细菌另一个本领，是在不同情况下，可以把一些废物如硫化氢、甲烷、脂肪酸、二氧化碳等，当作自己的食物，再通过体内分解、合成作用，制成对人类有用的东西。
有一种红色无硝菌，它在污泥中专吃废物，经过体内分解作用，能使体内含粗蛋白65.45％、脂肪7.18％、可溶性糖20.31％、纤维2.78％，还含有大量的维生素等对人类有价值的物质。
光合细菌扩培方法简介光合细菌是一类能够通过光合作用合成有机物质的微生物。
它们具有特殊的光合色素，可以利用光能将二氧化碳和水转化为有机物质和氧气。
光合细菌在生态系统中起着重要的作用，也被广泛应用于工业生产和环境保护等领域。
本文将介绍光合细菌的扩培方法，帮助读者了解如何有效地培养和研究这些微生物。
培养基选择选择适当的培养基是成功扩培光合细菌的关键。
常用的培养基包括富含碳源、氮源、矿物质和其他必需营养物质的液体或固体培养基。
针对不同种类的光合细菌，可以根据其特殊需求进行调整。
常见的液体培养基包括：液体琼脂糖培养基、液体LB培养基等。
固体培养基常使用琼脂糖固化剂制备，例如琼脂糖琼脂糖平板。
此外，还可以添加适量的胶体硅胶或其他吸附剂，用于调节培养基的粘度和透明度。
培养条件调控光合细菌对环境条件的要求较高，因此在扩培过程中需要注意调控培养条件。
以下是常见的培养条件调控方法：1.光照条件：光合细菌对不同波长和强度的光照有不同的需求。
一般情况下，使用白炽灯或荧光灯作为光源，控制光照强度为1500-2000勒克斯。
2.温度控制：不同种类的光合细菌对温度有不同的适应范围。
一般而言，常温下（25-30摄氏度）能够满足大多数种类的生长需求。
3.pH值调节：不同种类的光合细菌对酸碱度有不同的耐受范围。
通常情况下，将培养基pH值调节到7左右可以满足大多数种类的生长需求。
4.气体供应：部分光合细菌对氧气的需求较低，可以在培养过程中使用氮气替代空气，以减少氧气对其生长的抑制作用。
培养方法步骤以下是光合细菌的扩培方法的基本步骤：1.准备培养基：根据所研究的光合细菌种类选择适当的培养基，并按照说明书或标准操作程序制备。
确保培养基无菌。
2.接种：从已有的纯培养物中取一小部分，通过无菌技术将其接种到新鲜培养基中。
可以选择液体培养或固体培养，视具体实验要求而定。
3.培养条件调控：根据前述内容调控好培养条件，包括温度、pH值、光照强度和气体供应等。
光合细菌培养方法光合细菌是一类能够进行光合作用的细菌。
下面是关于光合细菌培养的10个方法及其详细描述。
1. 静止培养法：将光合细菌接种在含有适当培养基的培养皿中，并将其暴露在适当光照条件下，然后静止培养。
这种方法适用于使用较为简单的培养基和小规模的培养试验。
2. 摇床培养法：将培养皿放置在摇床上，以保持细菌培养液的充分通气与光照条件。
摇床培养法可以提高光合细菌培养效果，并使培养液均匀分布。
4. 灌溉培养法：利用注射器或带有喷雾装置的容器进行培养，通过灌溉或喷雾将含有培养基和光合细菌的溶液均匀地滴入培养皿中。
这样可以保持培养液的充分通气和光照条件，促进光合细菌的生长和繁殖。
5. 连续培养法：将培养基和光合细菌通过连续进出口方式流动，保持培养液的恒定环境。
这种方法可以控制培养条件，使光合细菌保持在一个稳定的生长状态，适用于长期大规模培养。
6. 二氧化碳供应法：光合细菌需要二氧化碳来进行光合作用，因此在培养过程中添加适量的二氧化碳可以提高光合细菌的生长效率。
可以通过加入含有二氧化碳的气体或添加碳酸氢钠等化学物质来供应二氧化碳。
7. 温度控制法：光合细菌对温度比较敏感，通常在合适的温度下可以促进其生长和代谢活动。
在培养过程中需要控制培养温度，保持在适宜的范围内，以获得最佳培养效果。
8. 标准化培养基：不同类型的光合细菌对培养基的要求不同。
为了获得较好的培养效果，可以使用经过精确配方和标准化处理的培养基，以提供光合细菌所需的所有必要营养物质。
9. 适应培养法：有些光合细菌对培养条件较为敏感，可能需要在其自然生境中进行适应培养。
适应培养法包括分离纯化光合细菌、逐渐调整其生长条件等步骤，以逐步适应到目标培养条件。
10. 化学预处理培养法：通过在培养基中添加化学预处理剂，如胰蛋白酶、十六烷基三甲基溴化铵等，可以提高光合细菌的培养效率和生产力。
这些预处理剂可以降低光合细菌的聚集现象，使细菌更易于生长和产生所需的代谢产物。
光合细菌的培养及应用方法光合细菌(简称PSB)是地球上最早出现具有原始光能合成体系的原核生物，是一大类在厌氧条件下进行不放氧光合作用的细菌的总称，广泛存在于地球生物圈的各处。
光合细菌在水产养殖上的应用主要有以下五个方面：作为养殖水质净化剂；作为饲料添加剂；用于鱼、虾、贝幼体的培育；作为动物性生物饵料的饵料；防治鱼病。
一、培养工具的消毒方法1．加热消毒法：利用高温杀死微生物的方法。
（1）直接灼烧：此法可直接把微生物烧死，灭菌彻底，但只适用于小型金属或玻璃工具的消毒。
（2）煮沸消毒：一般煮沸5～10分钟，适用于小型容器、工具的消毒。
（3）烘干箱消毒：亦称为恒温干燥箱消毒法。
2．化学药品消毒法：适用在批量培养中，大型容器、工具、玻璃钢水槽和水泥池中。
（1）酒精：浓度为70％的酒精常用于中、小型容器的消毒。
用纱布蘸酒精在容器、工具的表面涂抹，10分钟后，用消毒水冲洗两次即可。
（2）高锰酸钾：按300ppm配成高锰酸钾溶液，把洗刷洁净的容器、工具放在溶液中浸泡5分钟，取出，再用消毒水冲洗2次～3次即可。
二、光合细菌的培养条件1、营养条件光合细菌细胞体构成元素主要有：碳、氢、氧、氮、磷、钾、钠、镁、钙、硫和一些微量元素等，它们也是所有生物细胞构成的主要物质。
一般情况下，比重：水占80％-90％、无机盐1％-1.5％、蛋白质7％-10％、脂肪1％-2％、糖类和其它有机物1％-1.5％。
其中干细胞含碳45％-55％、氢5％-10％、氧20％-30％、氮5％-13％、磷3％-5％、其它矿物元素3％-5％。
光合细菌的细胞膜具有半透性，能选择性地让营养成分按一定需要进细胞内，在酶的作用下合成自己的细胞组分并促进分裂新的个体。
营养元素的全面合理的搭配,是培养高产光合细菌的关键。
根据这一要求,郑州@@@@生物材料公司选用多种光合细菌生长必需的原料，科学配方，经特殊加工而成的"光合细菌发生剂（培养基）"，基本符合光合细菌生长繁殖所需的营养要求，无毒无副作用，使用安全，固状结晶体便于包装和运输，而且有2年的保质期。
曹希亮倪学勤曾东周小秋摘要利用光合细菌和蜡样芽孢杆菌协同生长的特点进行混菌培养试验。
蜡样芽孢杆菌好氧，光合细菌兼性厌氧，通过两种细菌的不同添加比例，寻找一种最好的添加比例，使光合细菌活菌数在最短的时间内达到最大值。
试验过程中，采用正交试验对两种菌的比例进行了科学的组合，从而找到两种菌的最佳配比：在光合细菌1%或5%、芽孢杆菌1%的添加量的情况下，可以在最短的时间内使光合细菌菌数达到理想值。
关键词光合细菌；混菌培养；正交法中图分类号 Q93-33近年来，随着生活水平的提高，人们对畜禽产品质量的要求越来越高，绿色食品越来越受到消费者的青睐。
因光合细菌营养丰富，提高畜禽免疫力方面效果显著，而且在水产养殖方面，能净化水质，提供一部分活性氧，所以很多研究者对其尤为重视[1-3]。
但因为光合细菌培养周期长，菌数很难达到人们要求，所以，研究者采用各种方法进行了光合细菌混菌培养试验的研究。
Giraud E Z和Fleischman D（2004）研究发现,当光合细菌与根瘤菌共同培养时,可增强根瘤菌抗干扰能力，储藏的时间更长,在豆科植物上能形成更有效的根瘤,从而增加植物的产量[4]。
李勤生等（1998）采用光合细菌不同菌株、光合细菌菌株与异养菌株混合培养，试验结果发现，不同组合的混合培养物其生长量均不同程度的高于单株培养物,最高增长量高达17.4%,最低也高于对照组[5]。
本试验是在光合细菌单菌培养的基础上，进行了光合细菌和芽孢杆菌的混菌培养，目的就是提高光合细菌的生长速度，缩短培养周期，增加光合细菌的活菌数。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 菌种光合细菌（9.0×108 CFU/ml）和蜡样芽孢杆菌（1.0×109 CFU/ml）均由本实验室分离、筛选、鉴定、保存。
1.1.2 培养基1.1.2.1 光合细菌富集培养基乙酸钠 3.0 g、丙酸钠 0.3 g、NaCl 1.0 g、(NH4)2SO4 0.3 g、MgSO4 0.2 g、KH2PO4 0.5 g、K2HSO4 0.3 g、CaCl2 50 mg、MnSO4 2.5 mg、FeSO4 5 mg、酵母膏0.l g、蛋白胨10 mg、谷氨酸0.2 mg、H2O 1 000 ml，将以上组分溶于水后调pH值为7.4，然后在121.0 ℃蒸汽灭菌30 min。
光合细菌混合培养条件的优化摘要: 对沼泽红假单胞菌( Rhodopseudomonas palustris，PL1) 和球形红假单胞菌( Rhodopseuelonmnas spheroids，PL2) 混合培养条件进行了优化研究。
结果表明，混合培养的最适接种量为6%，最适初始pH 为7. 5，低氧气浓度，180 r/min 振荡 10min / d。
关键词: 光合细菌混合培养培养条件优化Optimization of Cultural Conditions for Mixed Photosynthetic BacteriaAbstract: Optimized cultural conditions of mixed photosynthetic bacteria ( Rhodopseudomonas palustris PL1，Rhodopseuelonmnasspheroids PL2) were evaluated. The results show that the optical cultural conditions mixed phothsynthetic bacteria include pH 7. 5，in-ocula 6% ，low oxygen concentration and vibration at 180 r / min for 10 min each day.Key words: Photosynthetic bacterium Mixed culture Optimized cultural conditions近年来，对光合细菌( photosynthetic bacteria，PSB)的应用研究获得了很大的进展，研究结果均表明，光合细菌在种植、养殖、新能源开发利用、医药以及环境治理方面具有十分广阔的前景［1］。
然而，光合细菌纯培养物在应用过程中的作用效率却大大低于实验室，主要是由于其在环境中适应性较低［2］，因此，许多研究者试图通过微生物的混合培养制备的菌剂，以提高其环境适应性。
光合细菌培养基优化光合细菌(PSB)是地球上最早出现的原核生物，具有原始不产氧的光能合成体系，它的生态学研究始于十九世纪中叶，100多年来取得了许多成果。
在营养中以碳、氮、磷营养因素为主的基础培养基，使光合细菌具备生命活动的能源和建造有机体的物质基础。
还需要一定量的镁、钙、钠及有关微量元素，以保证其生理代谢的正常进行。
1常用培养基配方1：NH4 C1 1.Og，CH3 COONa 3.5g，MgC1 2 0.1g，CaC12 0.1g，KH2 PO4 0.6g，K2 HPO4 0.4g，酵母膏 0.1g，水 1000mI ，pH7.2.固体培养基，由在液体培养基中加入2% 的琼脂制成.2生产条件1、培养介质：含菌量较低的清洁淡水。
地下水(井水)含菌量低，为最佳水源;清洁的地表水(河水)也可使用;含氯量较高的自来水应敞口放置一天;蒸馏水及纯净水固然很好，但成本太高。
选取水源时，最好先做几种方便取用的水源的对比试验，使用哪里的水源在培养试验中最先变成红色(生长良好)，就选用哪里的水作为生产用水。
2、酸碱度：PH值在7.5-8.5为最好，光合细菌的适应PH范围在6-10之间。
3、温度：以30-34℃为最适生长温度，其适应的生长温度范围为18-45℃,实际操作越接近最适温度范围越好。
本公司产品配方中含有抑制高温季节绿硫菌的产生，所以不惧高温，也不会大量产生绿硫菌。
4、光照强度：以3000-4000勒克斯(LX)为最佳，即每25公斤菌液需要用相当于60瓦左右的白炽灯炮作光源，而太阳光照为最好且不要成本。
5、透气性：密闭、敞口皆可培养，密闭但是留十分之一空气效果更好。
6、工具：筒状塑料农膜或透明玻璃池、敞口塑料容器(400升)、两头能接管的最小型自吸泵或水舀子、白帜灯炮、温度计3生产方法(以生产1吨光合细菌菌液为例)培养容器1、两端开口的长筒状透明塑料农膜，尽量选择厚一点的不破，尽量选择幅度宽一点的，剪成10米长一个备用2、透明玻璃连接而成的池子，类似于金鱼池，但是要做薄(30厘米厚)以方便两边采光生产过程1、第一次培养，可以得到220公斤菌种(1)在阳光充足的上午10点左右，先将准备用水160公斤(有条件可以先将水加温到30度，这样培养的速度更快，菌液质量更好。
光合细菌混合培养条件的优化摘要: 对沼泽红假单胞菌( Rhodopseudomonas palustris，PL1) 和球形红假单胞菌( Rhodopseuelonmnas spheroids，PL2) 混合培养条件进行了优化研究。
结果表明，混合培养的最适接种量为 6%，最适初始 pH 为 7. 5，低氧气浓度，180 r/min 振荡 10min / d。
关键词: 光合细菌混合培养培养条件优化Optimization of Cultural Conditions for Mixed Photosynthetic BacteriaAbstract: Optimized cultural conditions of mixed photosynthetic bacteria ( Rhodopseudomonas palustris PL1，Rhodopseuelonmnasspheroids PL2) were evaluated. The results show that the optical cultural conditions mixed phothsynthetic bacteria include pH 7. 5，in-ocula 6% ，low oxygen concentration and vibration at 180 r / min for 10 min each day.Key words: Photosynthetic bacterium Mixed culture Optimized cultural conditions近年来，对光合细菌( photosynthetic bacteria，PSB)的应用研究获得了很大的进展，研究结果均表明，光合细菌在种植、养殖、新能源开发利用、医药以及环境治理方面具有十分广阔的前景［1］。
然而，光合细菌纯培养物在应用过程中的作用效率却大大低于实验室，主要是由于其在环境中适应性较低［2］，因此，许多研究者试图通过微生物的混合培养制备的菌剂，以提高其环境适应性。
如柄杆菌( Caulobacter)与蓝细菌( Cyanobacteria) 混合培养，不仅可提高蓝细菌生物量，而且促进色素合成和积累，提高乙炔还原活力［2］; 丁酸梭菌( Clostridium butylicm) 、产气肠杆菌( Enterobacter aerogenes) 和类红球菌( Rhobactersphaerbdies) 共同培养，以甜土豆淀粉残留物为培养基，可大大提高产氢量［3］; 而对于光合细菌的混合培养方面则尚无系统研究。
本文报道沼泽红假单胞菌和球形红假单胞菌为混合培养条件优化研究，旨在为光合细菌菌剂生产提供理论依据。
1 材料与方法1. 1 菌株光合细菌菌株: 沼泽红假单胞菌 PL1 ( Rhodop-seudomonas palustris PL1 ) 和球形红假单胞菌 PL2( Rhodopseuelonmnas spheroids PL2) ，保存于湖南省植物保护研究所。
1. 2 培养基光合细菌基础培养基: CH3COONa 3. 0 g，NaCl1. 0 g，( NH4)2SO40. 3 g，MgSO40. 2 g，KH2PO40. 5g，K2HPO40. 3 g，CaCl20. 05 g，酵母膏 0. 1 g，MnSO40. 0025 g，FeSO40. 005 g，蛋白胨 0. 01 g，谷氨酸0. 0002 g，蒸馏水 1 L，pH 值 7. 5，121℃ 蒸汽灭菌 30min。
每升光合细菌基础培养基中加入 0. 15% ( W /2010 年第 6 期张国民等: 光合细菌混合培养条件的优化V) 琼脂即为固体光合细菌基础培养基。
1. 3 光合细菌混合接种液准备将实验室保存的沼泽红假单胞菌和球形红假单胞菌活化培养，分别稀释平板计数，然后，将沼泽红假单胞菌和球形红假单胞菌按菌落数1∶ 1 进行混合，即为光合细菌混合接种液。
1. 4 培养条件优化将光合细菌混合接种液接种于 450 mL 光合细菌基础培养基的盐水瓶，光照培养; 进行接种量( 2% －10%) 、培养基初始 pH( 6 －9) 、氧气含量( 空气含量 10% －50%) 及振荡培养条件( 180 r/min，5－ 20 min / d) 优化试验。
1. 5 混合光合细菌最佳培养条件下生长混合光合细菌菌液，接入含450 mL 光合细菌基础培养基的盐水瓶内，在上述优化的最佳培养条件下培养，定时检测生长情况。
1. 6 混合光合细菌生长的测定混合光合细菌生长的测定采用分光光度计法，测定光合细菌混合培养液在660 nm 的吸光值［4］，所用试验均设 3 次对照。
1. 7 数据处理数据处理采用 Microsoft Excel 2003 软件处理，所用数据均为 3 次测定的平均值。
2 结果与分析2. 1 接种量对光合细菌混合培养的影响将混合光合细菌接种液体按 2%、4%、6%、8% 、10% ( V / V) 接种量接种于 450 mL 光合细菌基础培养基的盐水瓶，置于30℃，光照强度 2 500 －3 000 lx 培养，定时取样测定生长情况。
结果如图 1所示，随着接种量的增加，混合光合细菌的生长速度相应的增加，然而，当接种量大于 6% 以后，增加不明显，因此 6%是最佳的接种量。
2. 2 培养基初始 pH 值对光合细菌混合培养的影响将混合光合细菌接种液体按 6% ( V/V) 接种量接种于 450 mL 光合细菌基础培养基( pH6 －9) 的盐水瓶，置于30℃，光照强度 2 500 －3 000 lx 培养，定时取样测定生长情况。
结果如图 2 所示，培养基 pH在 7. 0 － 8. 0 时，生长速度较快，最适合 pH 值为7. 5。
图 1 接种量对混合光合细菌生长的影响图 2 pH 值对混合光合细菌生长的影响2. 3 氧需求量对光合细菌混合发酵的影响将混合光合细菌接种液体按 6% ( V/V) 接种量接种于光合细菌基础培养基( pH6 －9) 的盐水瓶，置于30℃，光照强度2 500 －3 000 lx，不同空气含量下培养，定时取样测定生长情况。
结果如图 3 所示，随着空气含量的增加，光合细菌混合菌的生长速度减慢。
2. 4 振荡时间对光合细菌混合发酵的影响将混合光合细菌接种液体按 6% ( V/V) 接种量接种于光合细菌基础培养基( pH7. 5) 的盐水瓶，置于30℃，光照强度 2500 －3000 lx，空气含量( 10%)下培养，定时振荡并取样测定生长情况。
结果( 图4) 表明，适当的振荡有利于光合细菌混合菌的生长，最佳的振荡时间为 10 min。
2. 5 混合光合细菌的最佳生长条件下标准生长曲线测定将混合光合细菌接种液体按 6%( V/V) 接种量241生物技术通报 Biotechnology Bulletin2010 年第 6 期图 3 氧需求量对混合光合细菌生长的影响图 4 振荡时间对混合光合细菌生长的影响接种于光合细菌基础培养基( pH7. 5) 的盐水瓶，置于30℃，光照强度 2 500 － 3 000 lx，空气含量( 10%) 下培养，定时振荡( 180 r/min，10 min/d) ，定时取样测定生长情况。
结果如图 5 所示，混合光合细菌在 2 d 后进入快速生长期，4 d 后进入平衡生长期，6 d 后生物量开始下降。
3 讨论本研究对光合细菌对沼泽红假单胞菌( Rhodop-seudomonas palustris PL1 ) 和球形红假单胞菌 ( Rho- dopseuelonmnas spheroids PL2) 两菌株的混合培养条件进行了优化，在优化条件下培养，光合细菌混合菌在光照培养中繁殖速度快，培养液起初呈浑浊状，起初为淡红色，以后转为浅红色，最后呈深红色。
光合细菌混合菌在30℃连续光照条件下生长迅速，定时适当的振荡，从而达到较少发生附壁和图 5 混合光合细菌最佳生长条件下生长情况产生细胞碎片，在南方以普通白炽灯照射容易控制温度［5］。
经过 20 亿年进化，光合细菌在水圈生态系多个子生态系中生活，表现出很强的适应能力，这与光合细菌多元化代谢能力是分不开的。
所以，不同生态环境中的光合细菌对营养物质的利用能力存在一定差别［6，7］。
因此，利用不同菌株不同代谢能力，从而提高其环境适应性以达到充分发挥其某些作用特性。
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