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第1篇一、实验目的1. 探究不同细菌和真菌对常见抗生素的敏感性差异。
2. 了解抗生素对细菌和真菌生长的影响，为临床合理使用抗生素提供参考。
二、实验材料1. 细菌：大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）2. 真菌：白色念珠菌（Candida albicans）、曲霉菌（Aspergillus niger）、黑曲霉菌（Aspergillus niger var. niger）3. 抗生素：青霉素（Penicillin）、头孢菌素（Cefalexin）、链霉素（Streptomycin）、氟康唑（Fluconazole）4. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、沙堡培养基5. 实验仪器：恒温培养箱、细菌培养箱、显微镜、电子天平、移液器、无菌操作台等三、实验方法1. 细菌和真菌的分离纯化（1）将细菌和真菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基和沙堡培养基上，37℃恒温培养24小时。
（2）挑取单菌落，分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基和沙堡培养基上，37℃恒温培养24小时，得到纯化的细菌和真菌。
2. 抗生素敏感性实验（1）将纯化的细菌和真菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基和沙堡培养基上，37℃恒温培养24小时。
（2）用无菌移液器吸取适量菌液，用生理盐水稀释至10^-4、10^-5、10^-6浓度。
（3）将稀释后的菌液分别滴加到含有不同抗生素的琼脂平板上，每个平板设置3个重复。
（4）37℃恒温培养24小时，观察并记录抑菌圈直径。
3. 数据分析（1）采用GraphPad Prism 8软件对实验数据进行统计分析。
（2）计算抑菌圈直径的平均值和标准差。
（3）根据抑菌圈直径，判断细菌和真菌对不同抗生素的敏感性。
四、实验结果1. 细菌对常见抗生素的敏感性（1）大肠杆菌对青霉素、头孢菌素和链霉素敏感；对氟康唑不敏感。
（2）金黄色葡萄球菌对青霉素、头孢菌素和链霉素不敏感；对氟康唑敏感。
细菌真菌图片列表Partial linkage and细菌肽聚糖图解（Diag革兰氏阳性和革兰氏阴"典型" 细菌细胞图解（假单胞菌 pseudomonasinfluenza Ah5n1_bird_flu肠球菌enterococcuscell-chilodonella-unbacterie-penicilliumbacterie-bacillus-cnbact-salmonellabact-filamenteuse-oxbact-escherichia-col杆状菌 bacillus副溶血性弧菌 VibrioStreptococcus pyogenStreptococcus pneumoStreptococcus Group细菌真菌图片列表Shigella flexnarii肠炎沙门氏菌Salmonel绿脓杆菌 Pseudomonas白粉菌 Powdery Milde脑膜炎双球菌 Neisser淋球菌 Neisseria gon结核杆菌 Mycobacteri鸟分枝杆菌 MycobacteMalazzesia furfur嗜肺军团杆菌(legione流感嗜血杆菌 HaemophHEp-2 tissue culture兰伯氏贾第虫和细菌 GEnterococcus faecaliE. coli O157H7 attac肠出血性大肠杆菌 E.隐孢子虫 Cryptospori空肠弯曲菌(CampylobaCampylobacter coli百日咳博德特氏菌 Bor细菌真菌图片列表有荚膜的细菌梭状芽孢杆菌隐球菌弧状菌炭疽杆菌青霉素抑制试血平板菌落形态炭疽杆菌血涂片镜检炭疽杆菌（BAP ）炭疽杆菌（普通平板）炭疽杆菌（芽孢形成）放线杆菌蜡样芽孢杆菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌卫星现象流感嗜血杆菌菌落特征流感嗜血杆菌纯培养的流感嗜血杆菌乳酸杆菌葡萄球菌细菌真菌图片列表球菌螺旋菌链球菌2（可引起肺炎、链球菌弧状菌分裂后的大肠杆菌（带肺泡巨噬细胞吞噬大肠肺泡巨噬细胞吞噬大肠肺泡巨噬细胞吞噬大肠带有纤毛的大肠杆菌大肠杆菌（O157：H7菌棒状杆菌（可引起炭疽蘑菇有性生活史地衣支原体和细菌杆菌放大图示内壁普通细菌的分裂蓝菌光学显微镜放大图细菌结构图。
表1 肠杆菌科细菌天然耐药表*变形菌属，普罗维登斯菌属和摩根菌属有可能由于非碳青霉烯酶导致的亚胺培南MIC升高的情况，检测为敏感的菌株，应该报告为敏感。
+斯氏普罗威登斯菌应该对庆大霉素、奈替米星和妥布霉素天然耐药，但对阿米卡星没有天然耐药。
注：3代头孢菌素，头孢吡肟，氨曲南，替卡西林/克拉维酸，哌拉西林/他唑巴坦和碳青霉烯类抗生素没有天然耐药。
肠杆菌科细菌同样对克林霉素、达托霉素、夫西地酸、糖肽类（万古霉素、替考拉宁）、利奈唑胺、奎奴普汀-达福普汀、利福平和大环内脂类（红霉素、克拉霉素和阿奇霉素）天然耐药。
然而，大环内脂类也有例外（沙门菌数和志贺菌属对阿奇霉素没有天然耐药）。
表2 非-肠杆菌科细菌天然耐药表*由于舒巴坦对这种菌具有活性，因此，鲍曼/醋酸钙不动杆菌可出现对氨苄西林-舒巴坦敏感。
＋嗜麦芽窄食单胞菌对四环素存在固有耐药，但对多西环素和米诺环素则否。
注：非发酵革兰阴性细菌对1代头孢菌素（头孢噻吩、头孢唑啉）、2代头孢菌素（头孢呋辛）、头霉素（头孢西丁、头孢替坦）、克林霉素、达托霉素、夫西地酸、糖肽类（万古霉素、替考拉宁）、利奈唑胺、大环内酯类（红霉素、阿奇霉素、克拉霉素）、青霉素、奎奴普汀-达福普汀和利福平等也存在固有耐药。
表3 葡萄球菌天然耐药表注：1、革兰阳性细菌对氨曲南、多粘菌素B/粘菌素和萘啶酸也存在固有耐药。
2、耐苯唑西林金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌（耐甲氧西林葡萄球菌[MRS]）被认为对其他β-内酰胺类药物，即，青霉素类、β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂复合物、头孢烯类（除具有抗-MRSA活性的头孢菌素）和碳青霉烯类耐药。
这是因为大多数情况下由MRS引起的感染用β-内酰胺类治疗疗效不佳，或由于没有令人信服的临床数据证明这些药物的临床疗效。
表4 肠球菌属天然耐药表*警告：对于肠球菌，头孢菌素、氨基糖苷类（除了高水平耐药筛选外）、克林霉素和复方新诺明（SXT）在体外可表现有活性，但临床上无效，因此，不应报告敏感。
