食品微生物的检测技术进展
- 格式:docx
- 大小:24.52 KB
- 文档页数:11
食品检测和检验技术的新进展随着科技的发展,食品检测和检验技术也在不断地改进和创新。
从传统的化学检测到遗传学和纳米技术应用,食品检测和检验技术的新进展正在改变食品产业的全貌。
近年来,单细胞测序技术被广泛运用于食品检测领域。
单细胞测序技术可以在微小的细胞内测序,可以区分不同种类的菌落和微生物。
通过这样的技术,可以分析食品中的微生物种类和数量,以及它们对于人体的影响。
这样一来,食品厂家可以对产线上的微生物及时进行监测,从而避免食品污染。
此外,智能检测技术也正在被广泛应用于食品检测领域。
智能检测技术需要结合传感器、摄像头、数据处理等多种技术,才能进行食品质量的评估、安全性的评估等多方面的检验。
这种技术可以将大量的数据进行实时处理,可以快速、准确地获取食品的质量信息和安全信息,从而提高食品产业生产的效率和品质。
纳米技术在食品检测中也得到了广泛地应用。
纳米技术可以通过薄膜材料和分子筛、纳米金粒等化学材料来检测食品中的化学成分、营养成分等。
通过这样的技术,食品生产者可以快速、准确地检测食品成分的含量和成分的相对含量,从而掌握食品品质的信息。
此外,遗传学技术也正在食品检测中大量运用。
遗传学技术主要包括PCR(聚合酶链式反应)和DNA芯片测序技术等。
通过这样的技术,食品中的DNA分子可以被快速分离和检测。
这种技术可以检测微生物污染、基因改造储存、体细胞克隆等方面的问题,为食品检测和检验提供了便利。
总体来说,食品检测和检验技术的新进展正在不断提高食品产业的品质和安全性。
新进展的技术配合各种先进的设备,可以快速、准确地判断食品质量和食品安全。
这样一来,消费者可以放心地购买食品,食品生产厂家可以提高生产效率和生产质量。
未来,该领域将会有更多的技术进步和应用,会给食品产业带来更好的发展和前景。
引言:微生物在生物工程、食品安全、环境监测等领域中起着重要作用,因此,开发快速、准确、高效的微生物检测技术至关重要。
微生物快速检测技术是指能够在较短时间内对微生物进行快速检测和鉴定的技术。
本文将详细介绍微生物快速检测技术的原理、方法和应用。
概述:微生物快速检测技术基于先进的分子生物学、生物化学和光学仪器,在短时间内能够对微生物的存在和数量进行快速和准确的检测。
与传统的培养方法相比,微生物快速检测技术具有操作简便、结果快速、准确性高等优势。
在食品安全领域,微生物快速检测技术能够快速鉴定食品中的致病菌,提高食品的质量和安全性。
在环境监测领域,微生物快速检测技术能够迅速监测水质和土壤中的微生物,为环境保护提供有力支持。
正文内容:一、基于PCR技术的微生物快速检测1. PCR技术的原理和方法:介绍PCR技术的工作原理、步骤和所需试剂。
2. 基于PCR的微生物检测方法:详细介绍基于PCR技术的微生物检测方法,如实时荧光PCR、逆转录PCR等,以及其在食品和环境中的应用。
3. PCR技术的优势和局限性:分析PCR技术的优点和局限性,并提出未来的发展方向和改进方法。
二、基于基因芯片技术的微生物快速检测1. 基因芯片技术的原理和方法:介绍基因芯片技术的工作原理、设计和制备方法。
2. 基于基因芯片的微生物检测方法:详细介绍基于基因芯片技术的微生物检测方法,如DNA芯片、RNA芯片等,以及其在食品和环境中的应用。
3. 基因芯片技术的优势和局限性:分析基因芯片技术的优点和局限性,并提出未来的发展方向和改进方法。
三、基于质谱技术的微生物快速检测1. 质谱技术的原理和方法:介绍质谱技术的工作原理、样品制备和仪器设备。
2. 基于质谱的微生物检测方法:详细介绍基于质谱技术的微生物检测方法,如MALDI-TOF质谱、飞行时间质谱等,以及其在食品和环境中的应用。
3. 质谱技术的优势和局限性:分析质谱技术的优点和局限性,并提出未来的发展方向和改进方法。
微生物检测技术的发展趋势是什么在当今的科技时代,微生物检测技术正经历着日新月异的变革,这些变革不仅影响着我们对微生物世界的理解,也在医疗、食品、环境等众多领域发挥着至关重要的作用。
那么,微生物检测技术的发展趋势究竟是什么呢?首先,快速检测成为了一个关键的发展方向。
在过去,传统的微生物检测方法往往需要耗费大量的时间,从样本采集到培养、鉴定,整个过程可能需要数天甚至更长时间。
这对于一些紧急情况,如传染病爆发、食品安全突发事件等,显然是远远不够的。
因此,快速检测技术的需求日益迫切。
目前,基于免疫学和分子生物学的快速检测方法正逐渐崭露头角。
例如,免疫层析技术可以在短时间内检测出特定的微生物抗原或抗体,操作简便,结果直观。
还有聚合酶链式反应(PCR)技术,它能够快速扩增微生物的特定基因片段,从而实现对微生物的快速鉴定。
这些技术的应用大大缩短了检测时间,从过去的几天缩短到几个小时甚至更短,为及时采取应对措施赢得了宝贵的时间。
其次,高灵敏度和高特异性的检测技术也是发展的重点。
随着对微生物检测要求的不断提高,不仅要能够快速检测出微生物的存在,还要能够准确地鉴定到种甚至菌株水平,并且能够检测到极低浓度的微生物。
新一代的测序技术在这方面展现出了巨大的潜力。
通过对微生物的基因组进行测序,可以获得极其详细的遗传信息,从而实现对微生物的精准鉴定和分型。
此外,微流控芯片技术的发展也为提高检测的灵敏度和特异性提供了新的途径。
微流控芯片能够将复杂的检测过程集成在一个微小的芯片上,实现对微量样本的精确处理和检测。
再者,多技术融合是微生物检测技术发展的一个显著趋势。
单一的检测技术往往存在一定的局限性,而将多种技术结合起来,可以发挥各自的优势,实现更全面、更准确的检测。
比如,将免疫检测技术与PCR技术相结合,可以先通过免疫检测初步筛选样本,再对阳性样本进行PCR确认,这样既提高了检测效率,又保证了检测的准确性。
还有将微生物培养技术与现代分析技术相结合,在培养微生物的同时,实时监测其代谢产物或生理指标的变化,从而更深入地了解微生物的特性。
食品安全监测中快速检测技术发展趋势食品安全是人们关注的重要问题之一,食品中的各种安全问题直接关系着人们的生命健康。
随着科技的发展,食品安全监测中的快速检测技术也在不断改进和创新。
本文将探讨食品安全监测中快速检测技术的发展趋势。
1.传感器技术的发展传感器是食品快速检测技术中的重要组成部分,可以快速、准确地检测食品中的各种污染物。
随着纳米科技的发展,纳米传感器正在逐渐进入食品安全领域。
纳米传感器具有更高的灵敏度和更小的尺寸,可以实现更快速、更精确的检测。
此外,生物传感器和光学传感器等技术也在食品安全监测中得到了广泛应用。
2.基于光谱技术的快速检测方法光谱技术是快速检测食品中污染物的一种重要方法。
近年来,近红外光谱(NIR)和拉曼光谱技术在食品安全监测领域取得了重要的进展。
这些技术可以通过食品样品的光谱特征来分析样品中的成分和污染物含量。
这种非破坏性检测方法不需要样品的前处理,能够快速、准确地分析大量的样品。
3.基于生物学方法的快速检测技术生物学方法是快速检测食品中有害微生物和污染物的重要手段。
分子生物学技术,如聚合酶链反应(PCR)和实时荧光定量PCR,可以快速检测食品样品中目标微生物的存在和数量。
此外,基于抗原-抗体反应原理的免疫传感器和生物芯片技术也在食品快速检测中得到了广泛应用。
4.快速筛查技术的应用对于大规模食品安全监测中的样品,快速筛查技术具有重要的意义。
快速筛查技术可以通过简单、迅速的方法初步判定样品是否存在问题,再通过更精确的检测方法进行确认。
例如,基于质谱仪的快速筛查方法可以快速检测食品中的农药残留和毒素。
此外,基于红外成像和图像处理的技术也可以实现对食品样品进行快速筛查。
5.大数据与人工智能在食品安全检测中的应用大数据和人工智能技术的发展为食品安全监测提供了新的思路和方法。
通过收集、分析和处理大量的数据,能够快速发现食品安全问题的存在和变化趋势。
借助人工智能技术,可以建立食品安全预警模型,实现对食品质量和安全的实时监测与预测。
2024年食品微生物学总结范文食品微生物学是研究食品中微生物分布、生长、代谢及其对食品质量和食品安全的影响的学科。
在2024年,随着科技的不断进步和社会的发展,食品微生物学在食品行业中发挥着越来越重要的作用。
以下是对2024年食品微生物学的总结及展望。
一、研究技术的进步在2024年,食品微生物学的研究技术得到了不断的创新和改进。
传统的微生物培养、染色等方法在速度、准确性和灵敏度方面得到了大幅度的提升。
新兴的技术如高通量测序、蛋白质组学、代谢组学等的应用使得对食品样品中微生物的种类和数量进行高效检测成为可能。
这些新技术的应用提高了食品微生物学研究的水平,也为食品行业的质量检测和食品安全提供了更有效的手段。
二、食品安全的保障食品安全一直是社会关注的焦点之一。
在2024年,食品微生物学的研究成果和技术的进步为食品安全的保障提供了有力的支持。
首先,食品微生物学的研究为食品安全标准的制定提供了科学依据。
通过研究食品中微生物的种类和数量等信息,可以建立更合理的食品安全标准,从而更好地保障消费者的健康。
其次,食品微生物学的研究成果可以指导食品生产中的微生物控制措施。
通过研究食品中微生物的生长条件和影响因素,可以制定更有效的防控策略,减少食品中病原微生物的污染,降低食品安全风险。
同时,食品微生物学的研究在食品安全事件的调查和溯源中也发挥了重要作用。
通过对食品样品中微生物的分析和比对,可以追踪到食品污染源头,加强食品安全事件的追责和防范。
三、功能性微生物的应用除了对有害微生物的研究和控制,食品微生物学还越来越重视有益微生物的应用。
在2024年,功能性微生物的应用将成为食品行业的重要趋势。
功能性微生物是指具有益生作用或其他生物活性的微生物,如乳酸菌、益生菌等。
研究表明,功能性微生物可以改善食品的口感、储存性能和营养价值,对人体健康有益。
在2024年,食品行业将更广泛地应用功能性微生物于食品生产中,例如将益生菌添加到乳制品中,提高乳酸菌发酵产品的品质和营养价值。
食品中大肠杆菌生物检测方法的研究进展一、简述大肠杆菌作为食品中常见的微生物污染指标,其快速、准确的检测方法一直是食品安全领域的研究热点。
随着生物技术的不断发展,大肠杆菌的生物检测方法取得了显著进展。
这些方法不仅提高了检测速度和灵敏度,而且有助于更深入地了解大肠杆菌的生物学特性和污染途径。
本文将简述食品中大肠杆菌生物检测方法的研究进展,包括传统检测方法的优缺点、新型生物检测技术的开发与应用,以及未来发展方向。
传统的大肠杆菌检测方法,如多管发酵法和平板计数法,虽然操作简便、成本较低,但存在检测周期长、灵敏度低、易受干扰等缺点。
研究者们一直致力于开发新型的生物检测方法,以克服传统方法的不足。
基于分子生物学、免疫学、生物化学等原理的新型生物检测技术不断涌现,如脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点可变数衔接重复序列分析(MLVA)、气相色谱(GC)和高效液相色谱法(HPLC)、ATP生物发光技术、PCR检测技术等。
这些新型生物检测方法具有检测速度快、灵敏度高、特异性强等优点,能够在短时间内实现对大肠杆菌的准确检测。
PFGE和MLVA等技术可以实现对大肠杆菌的分子分型,有助于追踪污染来源和传播途径;GC和HPLC等色谱技术则可以通过分析大肠杆菌的代谢产物来评估其污染程度;ATP生物发光技术和PCR检测技术则具有快速、简便的特点,适用于现场检测和大规模筛查。
新型生物检测方法在实际应用中仍面临一些挑战,如技术成本较高、操作复杂、对实验条件要求严格等。
未来的研究应致力于优化这些技术的性能,提高实用性。
加强食品中大肠杆菌的生态学研究和风险评估,对于制定有效的食品安全控制措施也具有重要意义。
食品中大肠杆菌生物检测方法的研究进展为食品安全领域的监测和防控提供了有力支持。
随着新型生物检测技术的不断发展和完善,相信未来我们能够更加快速、准确地检测和控制大肠杆菌污染,保障人们的饮食安全。
1. 大肠杆菌在食品安全中的重要性在《食品中大肠杆菌生物检测方法的研究进展》“大肠杆菌在食品安全中的重要性”这一段落内容可以如此撰写:大肠杆菌在食品安全中占据着举足轻重的地位,其存在与否往往直接关联着食品的卫生状况和消费者的健康安全。
食品安全检测技术的新进展与应用随着人们对食品安全问题的日益关注,在不断加强监管的同时,食品安全检测技术也在不断更新和发展。
本文将从新进展、应用和未来发展等方面来探讨食品安全检测技术的发展趋势。
一、新进展1、微生物检测技术微生物是食品中最常见的污染因素之一,因此对于微生物的检测技术是非常关键的。
传统的微生物检测方法需要耗费较长时间,而新兴的检测技术则能够快速准确地检测出微生物的污染情况。
比如PCR技术、纳米金标记技术等,都可以快速准确地检测出食品中的微生物污染情况。
2、基因编辑技术基因编辑技术的出现为增强食品营养、保持食品新鲜等提供了新的思路和手段。
它能够针对食品中的物质进行精确的编辑和改良,以更好地满足人们的需求。
比如,可以通过基因编辑来改变蔬菜中的化学成分,使其更具有营养价值,同时还能够有效防范食品中的细菌、病毒等污染物。
3、人工智能技术人工智能技术在食品安全检测方面也有着广泛的应用。
通过对大量数据的分析和比对,对食品的质量和安全进行快速、准确的检测。
同时,也能够在食品生产的各个环节中发现问题并及时解决。
二、应用情况1、食品生产企业食品生产企业是食品安全检测技术的主要应用方之一。
企业可以通过检测技术来确保生产过程中的食品质量和安全,提高产品的合格率。
同时,还可以防范和解决食品中的各种污染物,保障消费者的健康和生命安全。
2、食品检测机构食品检测机构是食品安全检测技术的重要应用主体之一。
检测机构可以通过各种检测技术对食品进行全方位的检测,并对检测结果进行分析和解读,从而快速、准确地判断食品是否安全可靠。
3、政府监管机构政府监管机构是食品安全检测技术应用的重要背景之一。
政府可以通过采用新技术,从而更好地担当起监管和管理的使命。
同时,还可以通过监测检测数据,及时了解食品中的各种污染物情况,从而保证食品的健康和安全。
三、未来发展1、智能化未来食品安全检测技术将越来越智能化。
通过大数据、人工智能、物联网等技术手段的应用,将可以实现对食品全程可追溯、实时监测,从而更好地保证食品的安全性和可靠性。
微生物检测技术的研究现状及发展趋势近年来,随着科技的不断进步和人们健康意识的提高,微生物检测技术也得到了广泛的应用和推广。
微生物检测技术主要是指对食品、药品等环境进行微生物检测,以确保产品质量和健康安全。
当前,微生物检测技术已经取得了很大的发展,但是仍然面临一些挑战和问题。
一、微生物检测技术的研究现状1. 传统检测方法传统的微生物检测方法主要是采用培养基和营养物质对微生物进行培养,然后通过肉眼观察微生物的形态、颜色和数量等指标进行判定。
这种方法的优点是简单易行,成本较低,但是缺点也非常明显,需要较长的时间和较大的空间,容易造成假阳性或假阴性结果,同时对鲜活样品不适用,且检测的准确性也存在着一定的局限性。
2. 新兴检测技术随着生物技术和分子技术的快速发展,新兴的微生物检测技术也不断涌现。
例如,PCR技术、电化学生物传感器技术、荧光定量PCR技术和质谱技术等。
这些技术在微生物检测中具有高灵敏度、准确性和快速性等优势,在食品、环保、医药等方面得到了广泛的应用。
其中,PCR技术已经成为微生物检测的主要技术之一,在省时、省力、省费的同时,具有高效、准确的检测效果。
二、微生物检测技术的发展趋势1. 多功能化和智能化目前的传统检测方法和新兴技术的结合已经证明,微生物检测技术的主要发展趋势是多功能化和智能化。
多功能化是指对多个微生物进行识别和检测,在传统的检测方法中限于单一微生物的检测,微生物检测技术的多功能化突破了传统检测方法的瓶颈。
智能化是指利用人工智能进行微生物检测,对于复杂的检测结果进行处理和分析,实现智能化的目的。
智能化检测可以大大提高微生物检测的准确性和速度,为微生物污染的及时检测提供了有力的支持。
2. 微型化和便携化微生物检测技术的微型化和便携化是微生物检测技术的另一个重要发展方向。
微型化指的是对检测设备、仪器的微型化处理,减小检测设备的体积和重量,提高检测设备的移动性和便携性。
便携化则是指对检测设备、仪器的技术改进,使其具有更高的稳定性、准确性和灵敏度,同时可以降低检测成本,提高测试效率。
科目:题目:食品微生物的检测技术进展学院:班级:领域:学号:姓名:任课教师:食品微生物的检测技术进展摘要: 在众多食品安全相关项目中,微生物污染造成的食源性疾病仍是世界食品安全中最突出的问题。
为了更好地开展食品微生物检验和调查研究工作、提高食品的卫生质量、保证消费者饮食安全,本文从食品微生物的概述出发,分析当下食品微生物的检验内容及其检测技术、检验原理及其特点等关键词:食品微生物;检验内容;检测技术1.前言随着人们生活水平的不断提高,食品安全问题逐渐成为各国政府、公众关注的焦点问题。
在众多食品安全相关项目中,微生物及其产生的各类毒素引发的污染备受重视,微生物污染造成的食源性疾病仍是世界食品安全中最突出的问题。
加工食品所含菌的种类、数量,常随原料的生产环境及细菌学质量、工厂环境与包装工程的卫生及处理状况、制品贮运状况等而异。
食品达到细菌学的卫生条件是最终制品中不允许存在致病菌,如果存在食物中毒菌,必须达到不损害人体健康的安全水平。
由于食品微生物污染的广泛发生,严重影响人民的健康,因此食品微生物检验工作对评价食品卫生质量,保证消费者饮食卫生有着极为重要的作用。
研究灵敏度更高、特异性更强、简便快捷的食品安全检测技术和方法,建立和完善食品安全微生物检测技术和体系迫在眉睫。
在各种食品生产加工单位均设有化验室,开展食品微生物检验工作。
在食品质量监测部门,为了监督监测食品生产销售单位的食品卫生质量,也都设有专门的微生物检验室,开展食品微生物检验工作,以及对食品微生物污染的检测和调查研究工作。
2 食品微生物检验的内容和特点2.1概述食品微生物检验主要是指细菌学检验,包括细菌总数、大肠菌群和致病菌的检验。
经典的方法有固体培养基法(用于细菌总数的检验),液体培养基发酵法(用于大肠菌群的检验),由于设备简单,适用范围广,因此是最为常用的检验法。
而操作简便、快捷的膜分离培养技术在食品微生物检验中也有发展景。
经典的食品微生物检测技术耗时长、效率低、敏感性差,不能及时检出食品中的病原菌。
发展迅速、准确、高效的现代食品微生物检测技术,可以快速检出食品中的病原微生物,迅速对食品卫生质量作出评价,防止食物中毒的发生,有效地控制食源性疾病。
现代食品微生物技术研究内容主要有食源性病原菌免疫学快速检测、食源性病原菌分子生物学快速检测技术、基于培养基生理生化特征的检测技术、食源性病菌的自动化检测技术、食源性致病菌生物传感器检测技术等。
2.2食品微生物检验的特点食品微生物检验的特点归结为以下5点。
(1)食品微生物检验涉及的微生物范围广,种属多,采集食品微生物检验样品比较复杂,要求高。
(2)食品微生物检验需要一定的准确性与快速性。
(3)食品中待分离细菌数量少、杂菌量多,对检验工作干扰严重。
(4)食品中微生物检验具有数量观念。
(5)食品微生物检验具有一定法律性质。
3 食品微生物检验的发展动向食品卫生微生物鉴定的传统方法有:形态结构、细胞培养、生化试验、血清学分型、噬菌体分型、毒性试验及血清试管凝聚试验等。
近年来,随着分子生物学和微电子技术的飞速发展,快速、准确、特异检验微生物的新技术、新方法不断涌现,微生物检验技术由培养水平向分子水平迈进,并向仪器化、自动化、标准化方向发展,提高了食品微生物检验工作的高效性、准确性和可靠性。
食品微生物检验新技术有以下几种。
3.1 代谢学技术3.1.1 电阻抗法电阻抗法是近年发展起来的一项生物学技术,已经开始应用于食品微生物的检验。
其原理是细菌在培养基内生长繁殖的过程中,将会使培养基中的大分子电惰性物质如碳水化合物、蛋白质和脂类等,代谢为具有电活性的小分子物质,如乳酸盐、醋酸盐等,这些离子态物质能增加培养基的导电性,使培养基的阻抗发生变化,通过检测培养基的电阻抗变化情况,判定细菌在培养基中的生长繁殖特性,即可检测出相应的细菌。
该法目前已经用于细菌总数、霉菌、酵母菌、大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等的检测。
3.1.2 快速酶触反应及代谢产物的检测快速酶触反应是根据细菌在生长繁殖过程中可合成和释放某些特异性的酶,根据酶的特性,选用相应的底物和指示剂,反应的测定结果有助于细菌快速诊断,如美国3M Petfifilm TM微生物测试片可分别快速测定细菌总数、霉菌、酵母菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠菌群等。
3.1.3 微量生化法Bachman和Weaver在20世纪40年代后期首先开创了微量生化法的纪元。
随着人们对细菌进行快速生化特性的需求增加,使高精密度(90%)和高重现性的商业试剂盒得以快速发展。
至今,市售的微生物鉴定用试剂盒有多种,常见的有MICRO-ID、API等。
API由20个含干燥培养基的微管组成,其中的培养基用于进行酶促反应或糖发酵试验。
检验时将预处理的菌悬液加入微管中培养后观察颜色变化,并纪录,输入APILAB Plus软件得出结果。
API创建了独特的数值鉴定法,可鉴定15个系列、600多个细菌种,因此具有简单、可靠等特点。
3.2 抗体技术抗体技术中常见是酶联免疫吸附法,是一种测定抗原抗体的有效方法。
原理是将抗体包被聚苯乙烯孔,从而获得抗原,在此过程中需要借助第三种载体,即用事先与酶结合的抗体去接触抗原,从而形成抗体抗原的复合物。
再借助生色酶底物,通过判断复合物颜色的变化来记录检测结果,在操作中只需要通过肉眼观察,就可以判断菌落数量的多少。
抗体方法在食品微生物检验中应用广,根据检测技术的不同又可分为两类。
3.2.1乳胶凝集反应这利用抗原与抗体特异性结合的特性,加上人工大分子的乳胶颗粒而发生肉眼可见的凝集反应。
Aureus Test用于食品样品中金黄色葡萄球菌的检测,该试剂盒中含有对免疫抗蛋白AIg G和鞭毛蛋白敏感的聚苯乙烯乳胶粒子,因细菌蛋白A和Ig G结合,凝聚酶和鞭毛抗原结合,所以当含有金黄色葡萄球菌的样品悬浮液加入含乳胶粒子的试剂盒中时,1min内将产生凝集反应。
该法的灵敏度和特异性均较高。
3.2.2酶联免疫吸附法这是用于定性或定量测定特异抗原抗体的一种技术,它多采用“夹心式”设计,即用抗体包被的聚苯乙烯孔捕获抗原,用另一个结合了酶的抗体与抗原结合形成抗原抗体复合物,再用一种生色酶底物通过肉眼观察或比色法记录结果。
随着单克隆抗体酶联免疫技术的出现,免疫检测法的特异性明显的提高。
3.3分子生物学技术核酸探针技术在分子生物学技术中的应用十分广泛,需要借助一系列的生物知识,原理是用核苷酸形成杂交双链,进而判定杂交链中的DNA。
在检测过程中,其中一条链子的核苷酸序列号是已知的,即工作人员事先已经知道一条链子的 DNA,实验中需要用到基因探针。
在检测中,由于核苷酸中的成分含量有着很大的差异,可以分为两种探针。
一种探针能够分辨出一部分的 DNA 反应,即对某些菌落敏感,对另外的菌落不敏感;另一种探针能够分别出全部的 DNA 反应。
该种检测技术的优势在于菌落微生物对于外界条件比较敏感,所以很容易区分。
但是,其不足在于要求探针对检测时间的精准度把握十分准确,否则容易错过最佳检测时间,影响试验的准确性。
3.3.1核酸探针技术将已知核苷酸序列D N A片段用同位素或其他方法标记,加入已变性的被检D N A样品中,在一定条件下即可与该样品中有同源序列的D N A区段形成杂交双链,从而达到鉴定样品中D N A的目的,这种能认识到特异性核苷酸序列有标记的单链D N A分子核酸探针或基因探针。
根据核酸探针中核苷酸成分的不同,可将其分成D N A探针或R N A探针;根据选用基因的不同分成两种,一种探针能同微生物中全部D N A分子中的一部分发生反应,它对某些菌属、菌种、菌株有特异性;另一种探针只能限制性同微生物中某一基因组D N A 发生杂交反应,它对某种微生物中的一种菌株或仅对微生物中某一菌属有特异性。
核酸探针检测技术的最大优点是:①特异性;②敏感性。
但探针检测技术中也存在一定的问题,如检测一种菌就需要制备一种探针;要达到检测量还要对样品进行一定时间的培养;探针检测是分析基因序列,对毒素污染的食品有时因样品中不含产毒菌而无法检测。
3.3.2 PCR技术PCR(Po1ymerase Chanin Reaction )是多聚酶链式反应的简称,PCR技术是由Kleppe 等人在1971年首先提出的。
该方法通过对人工难以培养的微生物相应DNA片段的扩增,检测扩增产物含量, 从而快速地对食品中致病菌含量进行检测。
检测时,首先在高温下(95℃)使得蛋白质变性,DNA双链变成单链;再迅速降温( 55℃),每条DNA单链退火, 这就是所谓的热循环。
之后温度重新上升到 95℃, 开始新的循环。
经一套扩增循环(21到31次)将1个单分子DNA扩增到107分子。
整个过程可以在1h内通过自动热量循环器完成。
理论上, 只要样中含有一分子沙门氏菌的DNA, 通过PCR技术完全可以在短时间内检测到。
这种测定方法的优点是测定结果迅速、灵敏度和特异性高、检测成本低;但其存在的最大问题在于PCR 产品的污染。
PCR技术采用DNA 扩增和自动化程序对特定的致病菌进行检测,已经成功地对沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7、产单核细胞李斯特菌等致病菌进行了有效测定。
实时定量技术是近年来发展起来的新技术,这种方法既保持了PCR 技术灵敏、快速的特点,又克服了以往PCR技术中存在的假阳性污染和不能进行准确定量的缺点。
另外,还有重复性好、省力、低费用等优点。
实时定量PCR 技术是从传统 PCR技术发展而来,其基本原理相同,但定量技术原理不同。
实时定量技术应用了荧光染料和探针来保证扩增的特异性,并且荧光信号的强弱同扩增产物的量成正比,从而准确定量。
该技术在基因突变的检测、基因表达的研究、微生物的检测、转基因食品的检测等领域均有重要的应用价值。
3.4仪器法随着微生物快速检测法的不断发展,很多检验技术日趋成熟和完善,并被人们进一步开发、研制成自动或半自动微生物检测仪3.4.1旋转平板技术和激光菌落扫描仪自动旋转平板技术是在琼脂培养基表面倒一薄层样品,该仪器可使液体样品以螺旋转动方式分布,液体慢速流出后,随着平板的旋转从中心向边缘分布,样品分布非常均匀。
这种方法可广泛用于细菌、酵母、霉菌及乳类样品中。
样品倒入平板后,菌落数可以用激光菌落计数器来计数,即将光检测仪放置在仪器的底部,激光仪从上面自动扫描平板,当激光束通过菌落时,可以降低光的强度,从而检测出菌落的存在。
这样菌落数可以通过电子计数,从而不是传统的视觉计数。
电子计数快而准确,与传统计数法得到的结果相近。
3.4.2流式细胞术(FCM)该技术是用流式细胞仪对细胞悬液进行自动快速定量分析和分选的新技术,具有速快、精确度高、记数细胞量大以及参数分析等全面测量细胞和分选细胞等优点。