天然药物化学显色反应总结
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醌类化合物不同颜色反应鉴别特点及意义
香豆素显色反应的鉴别
特点
和意
义
新的酚羟基,然后再用Gibbs 或Emerson 反应加以鉴别,如为阳性反应表示C-6位无取代。
木脂素没有特征性的理化检识方法,常用的检识方法主要是针对木脂素结构中的功能基如酚羟基、亚甲二氧基及内酯结构等而进行的检识。
1.三氯化铁反应——检查酚羟基
2.Labat 反应(没食子酸、浓硫酸)——检查亚甲二氧基(阳性呈蓝绿色)
3.Ecgrine 反应(变色酸、浓硫酸)——检查亚甲二氧基(阳性呈蓝紫色)
3-OH、后黄色减褪,若有3-OH,则加枸橼酸后黄色不变,因此可用于区分黄酮和黄酮醇。
用的存在。
二酚羟基或兼有3-羟基、4-酮基或5-羟基、4-酮基结构。
而碱式醋酸铅的沉淀能力要大得多,一般酚类化合物均可与
②黄酮醇类在碱液中先呈黄色,通入空气后变为棕色。
③分子结构中有邻二酚羟基或3,4’-二羟基取代时,在碱液中不稳定,易被氧化,
按作用部位分:
作用于五元不饱和内酯
)、
C-1
7位
不
饱和内酯环的颜色反应
甲型强心苷的特征反应,因为五元不饱和内酯环上的双键位移产生C-22活性亚甲
基乙型强心苷为六元不饱和内酯环,故不能反应。
T(Girard T)或吉拉尔P(Girard P)两种试剂。
借此与不含羰基的皂苷元分离。
天然药化常见的鉴别反应(部分)一、颜色反应的对比(一)、三萜类的颜色反应1反应将样品溶于乙酸酐中,加浓硫酸-乙酸酐(1:20)数滴,可产生黄→红→紫→蓝等颜色变化,最后褪色。
2反应将样品的氯仿或醇溶液点于滤纸上,喷20%五氯化锑的氯仿溶液(或三氯化锑饱和的氯仿溶液),干燥后60℃~70℃加热,显蓝色、灰蓝色、灰紫色等多种颜色。
3反应将样品溶液滴在滤纸上,喷25%三氯乙酸乙醇溶液,加热至100℃,呈红色,逐渐变为紫色。
4反应将样品溶于氯仿,加入浓硫酸后,在硫酸层呈现红色或蓝色,氯仿层有绿色荧光出现。
5反应将样品溶于冰乙酸中,加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒,稍加热,则呈现淡红色或紫红色。
(二)、甾体类化合物的颜色反应1反应将样品溶于氯仿中,加浓硫酸-乙酸酐(1:20)数滴,可产生红→紫→蓝→绿→污绿等颜色变化,最后褪色。
也可将样品溶于冰乙酸,加试剂产生同样的反应。
2反应将样品的氯仿或醇溶液点于滤纸上,喷20%五氯化锑的氯仿溶液,干燥后60℃~70℃加热,样品斑点显蓝色、灰蓝色、灰紫色等多种颜色。
3反应将样品溶液滴在滤纸上,喷25%三氯乙酸乙醇溶液,加热至60℃,呈红色,逐渐变为紫色。
4反应将样品溶于氯仿,加入浓硫酸后,在硫酸层呈现红色或蓝色,氯仿层有绿色荧光出现。
5反应将样品溶于冰乙酸中,加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒,稍加热,则呈现淡红色或紫红色。
二、强心苷的颜色反应117位上不饱和内酯环的颜色反应甲型强心苷在碱性醇溶液中,五元不饱和内酯环上的双键移位产生C22活性亚甲基,能与活性亚甲基试剂作用而显色。
乙型强心苷在碱性醇溶液中,不能产生活性亚甲基,无此类反应。
所以,利用此类反应可区别甲、乙型强心苷。
(1)反应:又称亚硝酰铁氰化钠试剂反应。
取样品1~2,溶于吡啶2~3滴中,加3%亚硝酰铁氰化钠溶液和2氢氧化钠溶液各1滴,反应液呈深红色并渐渐退去。
(2)反应:阳性反应是反应液呈紫红色。
(3)反应:又称3,5-二硝基苯甲酸试剂反应。
自然药化常见的鉴别反应(部分)一、颜色反应的对比(一 \三苗类的颜色反应1 .Liebermann-Burchard 反应将样品溶于乙酸酎中,加浓硫酸-乙酸酎(1 : 20 )数滴,可产生黄■>红一紫一蓝等颜色变化,最终褪色。
2 .Kahldenberg 反应将样品的氯仿或醇溶液点于滤纸上,喷20%五氯化铀的氯仿溶液(或三氯化铺饱和的氯仿溶液),干燥后60℃-70℃加热,显蓝色、灰蓝色、灰紫色等多种颜色。
3 .Rosen-Heimer 反应将样品溶液滴在滤纸上,喷25%三氯乏段乙醇溶液,加热至100℃,呈些,渐渐变为紫色。
4 .Salkowski 反应将样品溶于氯仿,加入浓硫酸后,在硫酸层呈现红色或蓝色,氯仿层有绿色荧光消失。
5.Tschugaeff 反应将样品溶于冰乙酸中,加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒,稍加热,则呈现淡红色或紫红色。
(二卜留体类化合物的颜色反应1 .Liebermann-Burchard 反应将样品溶于氯仿中,加浓硫酸-乙酸酊(1 : 20 )数滴,可产生红→紫—蓝—绿一污绿等颜色变化,最终褪色。
也可将样品溶于冰乙酸,加试剂产生同样的反应。
2 .Kahldenberg 反应将样品的氯仿或醇溶液点于滤纸上,喷20%至数维的氯仿溶液,干燥后60°C~70°C力口热,样品斑点显蓝色、灰蓝色、灰紫色等多种颜色。
3 .Rosen-Heimer 反应将样品溶液滴在滤纸上,喷25%三氯乙酸乙醇溶液,加热至60℃ ,呈红色,渐渐变为紫色。
4 .Salkowski 反应将样品溶于氯仿,加入浓硫酸后,在硫酸层呈现红色或蓝色,氯仿层有绿色荧光消失。
5.Tschugaeff 反应将样品溶于冰乙酸中,加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒,稍加热,则呈现淡红色或紫红色。
二、强心甘的颜色反应1.Cl7位上不饱和内酯环的颜色反应甲型强心昔在碱性醇溶液中,五元不饱和内酯环上的双键移位产生C22活性亚甲基,能与活性亚甲基试剂作用而显色。
Molish反应--是糖和苷类的检识反应。
样品+浓硫酸+a萘酚=界面处紫色环。
碳苷和糖醛酸与Molish阴性。
Smith降解—检测糖的种类,连接方式,氧环大小·特点:反应条件温和、易得到原苷元适用:苷元不稳定的苷和碳苷,不适合苷元上有邻二醇羟基或易被氧化的基团的苷。
样品(含稀醇)+ NaIO4=糖开裂成醛+ NaBH4=伯醇,再调pH=2,放置。
Smith裂解获得连一个醛基的苷元异羟肟酸铁反应---鉴定内酯环的存在:碱性条件下,香豆素内酯开环,并与盐酸羟胺缩合成异羟肟酸,再在酸性条件下与三价铁离子络合成盐而显红色。
酚羟基反应:具酚羟基取代的香豆素类在水溶液中可与三氯化铁试剂络合而产生不同的颜色。
酚羟基的对位未被取代,6-位上没有取代,内酯环碱化开环后,可与Gibb’s试剂、Emerson试剂反应。
Gibb’s反应:2,6-二氯(溴)苯醌氯亚胺试剂蓝色。
Emerson反应: 2%的4-氨基安替匹林和8%的铁氰化钾试剂红色。
.Feigl反应碱性加热与醛类及邻二硝基苯紫色化合物。
无色亚甲基蓝显色反应—苯醌及萘醌类的专用显色剂(蓝色斑点)与蒽醌区别。
Borntrāger`s反应,羟基醌碱性溶液颜色加深,多呈橙,红,紫红色,蓝色。
活性次甲基试剂的反应(K-C法)苯醌及萘醌类环上有未被取代的位置氨碱性 ==蓝绿色或蓝紫色。
与金属离子的反应(α-酚羟基、邻位二酚羟基;Pb2+,Mg2+)。
盐酸-镁(锌)粉反应黄酮(醇) 二氢(醇)红色至紫红色异黄酮、查尔酮无色四氢硼钠(钾)反应---二氢(醇)专属反应(红色、紫红色)锆盐-枸椽酸显色反应。
区别3,5-OH 3-OH+ZrOCl2黄色褪5-OH+ZrOCl2黄色不褪氯化锶(SrCl2)。
具邻二酚羟基生成绿-棕色、黑色沉淀Sabety反应:挥发油1 滴→1ml氯仿+5%溴的氯仿溶液→产生蓝紫色或绿色与Ehrlich试剂(对-二甲胺基苯甲醛浓硫酸)反应产生紫色或红色浓硫酸-醋酐(L-B反应):三萜-红甾体-绿三氯化锑反应:三萜显黄色、灰蓝、灰紫斑点,UV下蓝紫色荧光。
中药化学显色反应大汇总试剂 颜色变化 鉴别类型1%钒酸铵的 浓硫酸溶液莨菪碱及阿托品 显红色, 士的宁显蓝紫 色, 奎宁显淡橙色莨菪碱、士的宁、奎宁 含少量甲醛的浓硫酸吗啡显紫红色 可待因显蓝色吗啡、可待因1%钼酸钠或 钼酸铵的浓硫 酸溶液吗啡显紫色渐转 棕色 小檗碱显棕绿色 利血平显黄色渐 转蓝色乌头碱显黄棕色 吗啡、小檗碱、利血平、乌头碱二硫化碳、硫 酸铜试剂、氢 氧化钠棕色沉淀 麻黄碱、伪麻黄碱铜络盐反应硫酸铜试剂、氢氧化钠溶液呈蓝紫色;加乙醚分层:乙醚层紫红色,水麻黄碱、伪麻黄碱层为蓝色碘化铋钾试剂反应碘化铋钾黄色至橘红色无定形沉淀生物碱碘化汞钾试剂反应碘化汞钾类白色沉淀生物碱碘-碘化钾试剂反应KI-I2红棕色无定形沉淀生物碱硅钨酸试剂反应硅钨酸淡黄色或灰白色无定形沉淀生物碱饱和苦味酸试剂2,4,6-三硝基苯酚黄色沉淀或结晶生物碱雷氏铵盐试剂反应雷氏铵盐红色沉淀或结晶生物碱(季铵碱)漂白粉显色反应漂白粉(或通入氯气)水溶液由黄色转变为樱红色小檗碱氯化汞沉淀反应氯化汞的乙醇溶液莨菪碱:黄色沉淀,加热后沉淀变为红色东莨菪碱:白色沉淀莨菪碱、东良菪碱Vitali反应发烟硝酸、苛性碱深紫色,渐转暗红色,最后颜色莨菪烷类结构中具有莨菪酸部分者消失过碘酸氧化乙酰内酮缩合反应(D DL反应)过碘酸、乙酰内酮显黄色樟柳碱分子的羟基莨菪酸(具有邻二羟基结构)总结二:章反应名称试剂颜色或沉淀变化鉴别类型节航Molish反浓硫酸和a-萘糖和苷和应酚Feigl反应醛类、邻二硝基生成紫色化合物醌类苯无色亚甲蓝无色亚甲蓝乙醇在白色背景下呈现苯醌及萘醌显色试验溶液出蓝色斑点Kesting-Cr乙酰乙酸酯、丙蓝绿色或蓝紫色苯醌及萘醌aven反应二酸酯Borntrager碱性溶液红至紫红色羟基蒽醌反应金属离子络Pb2+、Mg2+ Pb2+:生成沉淀析a-酚羟基或邻二酚合物反应出羟基颜色异羟肟酸铁盐酸羟胺 反应 显红色 内酯环三氯化铁反三氯化铁试剂 应蓝绿色酚羟基Gibb 反应 Gibb 试剂1」 蓝色酚羟基对位的活泼 氢Emerson 反应氨基安替比林和红色铁氰化钾酚羟基对位的活泼 氢盐酸-镁粉 反应 盐酸、镁粉 橙红色至紫红色黄酮、黄酮醇、二氢 黄酮、二氢黄酮醇 四氢硼钠反 应NaBH 4的甲醇 液红色至紫色二氢黄酮类化合物磷钼酸试剂磷钼酸试剂 反应 棕褐色二氢黄酮类化合物锆盐反应2%二氯化锆甲 醇溶液生产黄色3-羟基 锆络合物不褪色 5-羟基 显著褪 色3-羟基或5-羟基的存在镁盐 乙酸镁甲醇溶液天蓝色荧光二氢黄酮、二氢黄酮 醇香 豆 素黄 酮 类黄色至橙黄色乃至黄酮、黄酮醇及异黄褐色酮氯化锶(Sr氯化锶绿色至棕色乃至黑具有邻二酚羟基的C12)色沉淀黄酮类三氯化铁反三氯化铁试剂呈现明显的颜色含有氢键缔合的酚硼酸显色反硼酸亮黄色5-羟基黄酮及2’羟应基查尔酮萜环烯醚萜苷酸、碱、羰基化蓝色或深红色,有环烯醚萜苷类类反应合物、氨基酸些变黑地黄、玄参总结三章节反应试剂颜色变化鉴别类型皂苷Liebermann乙酐-浓硫黄一红—蓝—紫—绿皂苷反应酸一褪色Liebermann醋酐、浓硫最后呈红色或紫色三萜皂苷类-Burchard 酸-醋酐最终呈蓝绿色甾体皂苷类反应三氯乙酸反三氯乙酸溶加热至60℃-红色甾体皂苷类应液渐变为紫色加热至100℃-红色三萜皂苷类渐变为紫色三氯甲烷-浓浓硫酸、三三氯甲烷层呈现红色皂苷硫酸反应氯甲烷或蓝色,硫酸层有绿色的荧光五氯化锑反五氯化锑的蓝色、灰蓝色或灰紫皂苷应三氯甲烷溶色斑点液芳香醛-硫酸香草醛显色灵敏甾体皂苷类或高氨酸反应甾体Liebermann醋酐、浓硫红一紫-蓝-绿-污甾体母核、胆母核-Burchard 酸-醋酐绿,最后褪色汁酸反应Salkowski 三氯甲烷、硫酸层显血红色或蓝甾体母核、胆反应浓硫酸色,三氯甲烷层显绿汁酸色荧光Tschugaev 冰醋酸、氯紫红一蓝一绿甾体母核、胆反应化锌、乙酸汁酸氯三氯化锑反三氯化锑的灰蓝色、蓝色、灰紫甾体母核、胆应三氯甲烷溶色汁酸液三氯乙酸-氯三氯乙酸-洋地黄毒苷元-黄色洋地黄类强胺T反应氯胺T试剂荧光心苷元羟基洋地黄毒苷元一 亮蓝色荧光 异羟基洋地黄毒苷元 一蓝色荧光Legal 反应 亚硝酰铁氰 呈深红色并渐渐退去C-17位上的化钠试剂不饱和内酯 环Raymond间二硝基苯 蓝紫色 C-17位上的反应试剂不饱和内酯 环Kedde 反应3,5-二硝基红色或紫红色C-17位上的苯甲酸试剂不饱和内酯 环Baljet 反应 碱性苦味酸 橙色或橙红色C-17位上的试剂不饱和内酯 强心 Keller-Klian 冰醋酸、三 乙酸层显蓝色 苷i (K-K )反应氯化铁占吨氢醇(x 占吨氢醇试 红色anthydrol )剂反应甲型 强心 苷环a-去氧糖a-去氧糖的定量分析a-去氧糖对-二甲氨基对-二甲氨灰红色斑点苯甲醛反应基苯甲醛试 剂过碘酸钠-对 过碘酸钠、深黄色斑点a-去氧糖硝基苯胺反对硝基苯胺 应 Pettenkofer 蔗糖、浓硫 紫色 胆汁酸 反应 酸 Gregory Pa 硫酸、糠醛 蓝色 胆酸的含量scoe 反应 测定Hammarste 铬酸溶液 胆酸显紫色,鹅去氧 胆酸与鹅去 n 反应胆酸不显色氧胆酸改良hamm乙酸、浓盐 胆酸显紫色,去氧胆 胆酸、去氧胆arsten 反应酸酸和鹅去氧胆酸不显 酸与鹅去氧 色胆酸胆汁 酸。
天然药化常见的鉴别反应(部分)一、颜色反应的对比(一)、三萜类的颜色反应反应将样品溶于乙酸酐中,加浓硫酸-乙酸酐(1:20)数滴,可产生黄→红→紫→蓝等颜色变化,最后褪色。
反应将样品的氯仿或醇溶液点于滤纸上,喷20%五氯化锑的氯仿溶液(或三氯化锑饱和的氯仿溶液),干燥后60℃~70℃加热,显蓝色、灰蓝色、灰紫色等多种颜色。
反应将样品溶液滴在滤纸上,喷25%三氯乙酸乙醇溶液,加热至100℃,呈红色,逐渐变为紫色。
反应将样品溶于氯仿,加入浓硫酸后,在硫酸层呈现红色或蓝色,氯仿层有绿色荧光出现。
反应将样品溶于冰乙酸中,加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒,稍加热,则呈现淡红色或紫红色。
(二)、甾体类化合物的颜色反应反应将样品溶于氯仿中,加浓硫酸-乙酸酐(1:20)数滴,可产生红→紫→蓝→绿→污绿等颜色变化,最后褪色。
也可将样品溶于冰乙酸,加试剂产生同样的反应。
反应将样品的氯仿或醇溶液点于滤纸上,喷20%五氯化锑的氯仿溶液,干燥后60℃~70℃加热,样品斑点显蓝色、灰蓝色、灰紫色等多种颜色。
反应将样品溶液滴在滤纸上,喷25%三氯乙酸乙醇溶液,加热至60 ℃,呈红色,逐渐变为紫色。
反应将样品溶于氯仿,加入浓硫酸后,在硫酸层呈现红色或蓝色,氯仿层有绿色荧光出现。
反应将样品溶于冰乙酸中,加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒,稍加热,则呈现淡红色或紫红色。
二、强心苷的颜色反应位上不饱和内酯环的颜色反应甲型强心苷在碱性醇溶液中,五元不饱和内酯环上的双键移位产生C22活性亚甲基,能与活性亚甲基试剂作用而显色。
乙型强心苷在碱性醇溶液中,不能产生活性亚甲基,无此类反应。
所以,利用此类反应可区别甲、乙型强心苷。
(1)Legal反应:又称亚硝酰铁氰化钠试剂反应。
取样品1~2mg,溶于吡啶2~3滴中,加3%亚硝酰铁氰化钠溶液和2mol/L氢氧化钠溶液各1滴,反应液呈深红色并渐渐退去。
(2)Raymond反应:阳性反应是反应液呈紫红色。
(3)Kedd反应:又称3,5-二硝基苯甲酸试剂反应。
天然药物化学显色反应总结
醌类化合物不同颜色反应鉴别特点及意义
醌类化合物可以通过不同的反应类型进行鉴别,包括Feigl反应、Bornträge反应、Kesting-Craven反应和活性亚甲基试剂反应。
这些反应试剂包括碳酸钠、甲醛、邻二硝基苯、醋酸镁和碱液等。
不同的反应类型会产生不同的颜色反应,如紫色、蓝色、红、紫红和蓝绿等。
这些颜色反应可以用于鉴别不同的醌类化合物,如苯、萘、菲、蒽醌等。
香豆素显色反应的鉴别特点和意义
香豆素可以通过Gibbs或Emerson反应进行鉴别。
这些反应可以判断香豆素的C-6位是否有取代基的存在。
如果反应呈阳性,表示C-6位无取代。
此外,木脂素也可以通过检测其结构中的功能基进行检测,如酚羟基、亚甲二氧基及内酯结构等。
常用的检测方法包括三氯化铁反应、Labat反应和Ecgrine 反应等。
黄酮类化合物的还原显色反应
黄酮类化合物可以通过不同的反应类型进行鉴别,包括盐酸-镁粉反应、四氢硼钠、铝盐、铅盐、锆盐、镁盐、氯化锶、三氯化铁、硼酸显色反应和碱剂显色反应等。
这些反应可以鉴别黄酮、二氢黄酮、黄酮醇、二氢黄酮醇等不同的化合物。
不同的反应类型会产生不同的颜色反应,如橙红、紫红、红、黄色络合物等。
这些颜色反应可以用于鉴别不同的黄酮类化合物,如二氢黄酮、二氢黄酮醇、5-羟基黄酮及2-羟基查耳酮类等。
1.黄酮类化合物(1).盐酸镁粉(锌粉)反应:多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇都显示红色至紫红色,少数显示紫色至蓝色。
B环上有羟基和甲氧基颜色加深。
查尔酮、橙酮、儿茶素无此反应(2).四氢硼钠反应:二氢黄酮类化合物产生红色至紫色。
(5).碱性试剂显色反应:二氢黄酮类易在碱液中开环,转变成异构体——查尔酮显橙色至黄色。
黄酮醇类在碱液中先呈黄色进入空气显棕色。
黄酮类化合物有邻二酚羟基或3,4’二羟基取代时以被氧化:黄色-深红色-绿棕色。
2. 皂苷类(1)醋酐-浓硫酸反应(Liebermann-Burchard 反应):将样品放于醋酸酐中,加浓硫酸-醋酐(1:20)三萜皂苷:反应慢,最后出现红色甾体皂苷:反应快,最后出现绿色(2)三氯醋酸反应(Rosen-Heimer 反应):红色→紫色三萜皂苷加热到100℃才显色,甾体皂苷加热到60℃即显色。
(3)呋甾皂苷对E试剂(盐酸二甲氨基苯甲醛)显红色;对A试剂(茴香醛)显黄色。
(3)螺甾皂苷对E试剂不显色;对A试剂显黄色。
3.糖苷类化合物1)糠醛的形成反应:单糖在浓酸(4~10N)加热作用下,失去3分子水,生成具有呋喃环结构的化合物。
多糖先水解成单糖,然后再脱水生成相同的产物。
糖醛酸先脱羧,再形成糠醛。
原理:糠醛衍生物和许多芳胺、酚类可缩合生成有色物质。
由于各类糖形成糠醛衍生物的难易程度不同,产物的挥发性不同,与酚或芳胺的缩合产物呈色不同,因此用此反应鉴别糖类。
试剂:有机酸(三氯乙酸、草酸等)或无机酸(硫酸、磷酸等)酚或胺类:含有活泼亚甲基并有共轭未饱和系统的化合物,如:苯酚,萘酚,苯胺,联苯胺等。
Molish反应:浓硫酸和α-萘酚(紫色环)常用的层析显色剂:邻苯二甲酸和苯胺2)甲基化常用的方法:Kuhn改良法:在二甲基甲酰胺(DMF)溶液中用CH3I和Ag2O,或(CH3)2SO4和BaO/Ba(OH)2进行反应。
箱守法(Hakomori):在二甲基亚砜(DMSO)中用NaH和CH3I进行反应。
第二章1、生物碱常用碘化铋钾(dragendorff试剂),它与生物碱试液显棕黄色或橘红色沉淀,反应在滤纸上实验更为敏感和清晰。
2、黄铜将乙醇液加Mg粉,滴入浓盐酸后震荡在泡沫处呈桃红色,或与1%Alcl3乙醇溶液呈有色荧光。
3、皂苷、强心苷、甾体在乙酰溶液中与浓H2SO4反应后显各种红紫色,皂苷水溶液震荡时能产生大量的泡沫4、氨基酸和肽与茚三酮反应显蓝紫色。
5、蛋白质以双缩脲反应(NAOH+CUSO4)显紫红色。
6、有机酸与溴酚蓝反应呈黄色。
7、酚类与FECL3显紫色、蓝色。
8、糖与苷与菲林试剂作用有砖红色CU2O沉淀。
第三章糖苷1、Molish反应------酚醛缩合反应,单糖、低聚糖或苷,加入α—萘酚试液摇匀,再加入浓硫酸在两液面的交界面可产生紫红色或其他颜色的环。
2、氰苷类苦味酸—碳酸钠试纸条呈红色或联苯胺—乙酸铜试剂显蓝色。
3、糖的PC或TLC所用的显色剂常见的的是苯胺邻苯二甲酸试剂、三苯四铵盐试剂、间苯二酚—盐酸试剂、双甲酮—磷酸试剂等不同糖所显的颜色显色反应1、Frohde试剂:乌头碱显黄棕色,吗啡显紫色转棕色,可待因显暗绿色至淡黄色,黄连素显棕绿色,阿托品不显色。
2、Mandelin试剂:吗啡显棕色,可待因显蓝色,莨菪碱显红色。
3、Marquis试剂:吗啡显橙色至紫色可待因显红色至黄棕色。
第五章黄酮类1、还原显色反应黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇等黄酮类化合物在(Mg+Hcl)作用下生成红色至紫色。
查尔酮、紫酮类无色。
二氢黄酮类化合物在NaBH4作用下产生红色至紫色,其他黄酮化合物均不显色。
2、金属盐类的络合显色反应黄酮类化合物可与铝盐铅盐镁盐等生成有色络合物。
三氯化铝或硝酸铝溶液与黄铜类化合物生成的络合物为黄色,有荧光。
3、硼酸显色反应具有结构时,才成正反应。
有草酸存在时,可以显亮黄绿色荧光。
4、碱性试剂显色反应黄酮醇类在碱性溶液中先呈黄色通入空气后变为棕色可与其他黄酮类区别,二氢黄酮类易在碱液中开环,转变成相应的异构体查尔酮类化合物,显橙色至黄色。
醌类化合物不同颜色反应鉴别特点及意义判断香豆素的C -6位是否有取代基的存在,可先水解,使其内酯环打开生成一个新的酚羟基,然后再用Gibbs 或Emerson 反应加以鉴别,如为阳性反应表示C-6位无取代。
木脂素没有特征性的理化检识方法,常用的检识方法主要是针对木脂素结构中的功能基如酚羟基、亚甲二氧基及内酯结构等而进行的检识。
1.三氯化铁反应——检查酚羟基2.Labat 反应(没食子酸、浓硫酸)——检查亚甲二氧基(阳性呈蓝绿色) 3.Ecgrine 反应(变色酸、浓硫酸)——检查亚甲二氧基(阳性呈蓝紫色)和(或)5-OH ,加二氯氧锆显黄色。
若只有5-OH ,加枸橼酸后黄色减褪,若有3-OH ,则加枸橼酸后黄色不变,因此可用于区分黄酮和黄酮醇。
用于鉴别3-OH 的存在。
二酚羟基或兼有3-羟基、4-酮基或5-羟基、4-酮基结构的化合物反应生成沉淀。
而碱式醋酸铅的沉淀能力要大得多,一般酚类化合物均可与其发生沉淀反应。
①二氢黄酮易在碱液中开环,转变成相应的异构体查耳酮,显橙色至黄色。
②黄酮醇类在碱液中先呈黄色,通入空气后变为棕色。
③分子结构中有邻二酚羟基或3,4’-二羟基取代时,在碱液中不稳定,易被氧化,产生沉淀。
图9-3 强心苷的显色反应 按作用部位分:2)、C-17位不饱和内酯环的颜色反应 甲型强心苷的特征反应,因为五元不饱和内酯环上的双键位移产生C-22活性亚甲基乙型强心苷为六元不饱和内酯环,故不能反应。
作用于五元不饱和内酯环 1. Legal 反应 2. Kedde 反应 3. Raymond 反应 4. Baljet 反应用于甲型与乙型强心苷的鉴别作用于甾核1. 醋酐-浓硫酸(L-B )反应2. Salkowski (氯仿-浓硫酸)反应 3. 三氯醋酸-氯胺T(Rosenheim)反应 4. 三氯化锑(五氯化锑)反应202221OO23OOHOO CH 3OHOOCH 3OHOOCH 3OHOOHCH 2OHOH作用于a -去氧糖1. Keller-Kiliani (K-K )反应2. 对二甲氨基苯甲醛反应3. 占吨氢醇反应4. 过碘酸-对硝基苯胺反应 用于 I 型与 II 、III 型强心苷的鉴别分离含有羰基的甾体皂苷元,常用季铵盐型氨基乙酰肼类试剂,如吉拉尔T(Girard T)或吉拉尔P(Girard P)两种试剂。
第二章1、生物碱常用碘化铋钾(dragendorff试剂),它与生物碱试液显棕黄色或橘红色沉淀,反应在滤纸上实验更为敏感和清晰。
2、黄铜将乙醇液加Mg粉,滴入浓盐酸后震荡在泡沫处呈桃红色,或与1%Alcl3乙醇溶液呈有色荧光。
3、皂苷、强心苷、甾体在乙酰溶液中与浓H2SO4反应后显各种红紫色,皂苷水溶液震荡时能产生大量的泡沫4、氨基酸和肽与茚三酮反应显蓝紫色。
5、蛋白质以双缩脲反应(NAOH+CUSO4)显紫红色。
6、有机酸与溴酚蓝反应呈黄色。
7、酚类与FECL3显紫色、蓝色。
8、糖与苷与菲林试剂作用有砖红色CU2O沉淀。
第三章糖苷1、Molish反应------酚醛缩合反应,单糖、低聚糖或苷,加入α—萘酚试液摇匀,再加入浓硫酸在两液面的交界面可产生紫红色或其他颜色的环。
2、氰苷类苦味酸—碳酸钠试纸条呈红色或联苯胺—乙酸铜试剂显蓝色。
3、糖的PC或TLC所用的显色剂常见的的是苯胺邻苯二甲酸试剂、三苯四铵盐试剂、间苯二酚—盐酸试剂、双甲酮—磷酸试剂等不同糖所显的颜色显色反应1、Frohde试剂:乌头碱显黄棕色,吗啡显紫色转棕色,可待因显暗绿色至淡黄色,黄连素显棕绿色,阿托品不显色。
2、Mandelin试剂:吗啡显棕色,可待因显蓝色,莨菪碱显红色。
3、Marquis试剂:吗啡显橙色至紫色可待因显红色至黄棕色。
第五章黄酮类1、还原显色反应黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇等黄酮类化合物在(Mg+Hcl)作用下生成红色至紫色。
查尔酮、紫酮类无色。
二氢黄酮类化合物在NaBH4作用下产生红色至紫色,其他黄酮化合物均不显色。
2、金属盐类的络合显色反应黄酮类化合物可与铝盐铅盐镁盐等生成有色络合物。
三氯化铝或硝酸铝溶液与黄铜类化合物生成的络合物为黄色,有荧光。
3、硼酸显色反应具有结构时,才成正反应。
有草酸存在时,可以显亮黄绿色荧光。
4、碱性试剂显色反应黄酮醇类在碱性溶液中先呈黄色通入空气后变为棕色可与其他黄酮类区别,二氢黄酮类易在碱液中开环,转变成相应的异构体查尔酮类化合物,显橙色至黄色。
中国药科大学《天然药物化学》显色反应整理(1)Vitali反应紫色(2)DDL反应黄色(3)沉淀反应书本P155糖Molish反应(试剂:浓硫酸,α-萘酚。
常用色谱显色剂:邻苯二甲酸和苯胺)糠醛衍生物和许多芳胺、酚类及具有活性次甲基的基团化合物缩合成有色的化合物香豆素:(1)异羟肟酸铁反应--------内酯的显色反应碱性条件下,香豆素内酯开环,并与盐酸羟胺缩合成异羟肟酸,再在酸性条件下与三价铁离子络合成盐而显红色。
(2)与酚类试剂的反应具有酚羟基,可与FeCl3试剂产生颜色反应;若酚羟基的对位未被取代,或6-位上没有取代,其内酯环碱化开环后,可与Gibb’s试剂、Emerson试剂反应。
机制如下:Gibb’s反应:符合以上条件的香豆素乙醇溶液在弱碱条件下,2,6-二氯(溴)醌氯亚胺试剂与酚羟基对位活泼氢缩合成蓝色化合物。
Emerson反应:符合以上条件的香豆素的碱性溶液中,加入2%的4-氨替比林和8%的铁氰化钾试剂与酚羟基对位活泼氢缩合成红色化合物。
醌类颜色反应:取决于其氧化还原性质以及分子中的酚羟基的性质。
(1)Feigl反应----醌的通性,所有具醌核的化合物均可反应。
(方法、机理:见书312页)醌类化合物在碱性条件下,经加热能迅速与醛类及邻二硝基苯反应,生成紫色化合物(2)无色亚甲蓝显色试验----可区别蒽醌与苯醌萘醌苯醌和萘醌因醌核上有活泼质子,可反应,而蒽醌无。
无色亚甲基蓝溶液,样品在白色背景上作为蓝色斑点出现。
(3)与碱的反应(Bornträger反应----可区别含羟基的蒽醌与蒽酚衍生物反应、机理、应用:见书313页。
羟基醌类在碱性溶液中发生颜色变化,会使颜色加深。
多呈橙、红、紫红色及蓝色。
例如羟基蒽醌类遇碱显红~紫红色的反应称Bornträger反应(4)与活性次甲基试剂的反应----可区别蒽醌与苯醌萘醌(Kesting-Craven法)反应、机理、应用:见书313页。
名称试剂条件阳性反应鉴别结构碘化铋钾KBiI4稀酸水溶液黄至橘红色沉淀生物碱碘化汞钾K2Hg4同上白色沉淀同上碘-碘化钾KI-I2同上红棕沉淀同上硅钨酸SiO.12WO3.nH2O同上淡黄或灰白同上磷钼酸H3PO4.12MO3.nH2O同上白色,黄褐沉淀同上苦味酸2,4,6-三硝基苯酚酸或中性黄色同上雷氏铵盐NH4[Cr(NH3)2(SCN)4]同上红色同上Molishα-萘酚-浓硫酸浓硫酸产生有色化合物糖硼酸(钼酸,碱土金属)络合邻二羟基Feigl醛类及邻二硝基苯碱,加热紫色化合物醌类无色亚甲蓝无色亚甲蓝蓝色苯醌,萘醌专用显色剂Bornträger碱单OH、非邻,橙-红;1,4,紫;邻二,蓝羟基蒽酮Kesting-Craven 活性次甲基(乙酰乙酸酯etc)碱性蓝绿色或蓝紫色苯醌,萘醌专用显色剂与金属离子乙酸镁蒽醌:1,4 紫;1,2蓝;其他 橙-红/二氢黄酮(醇),天蓝色荧光;黄酮(醇),异黄酮-(橙)黄,褐色蒽醌OH基取代/黄酮类区别对亚硝基二甲苯胺对亚硝基二甲苯胺紫绿蓝灰等蒽酮异羟月亏酸铁异羟月亏酸铁碱-酸红色内酯三氯化铁三氯化铁绿,墨绿沉淀。
蓝(黑)(沉淀)水鞣;绿→缩合酚羟基重氮化试剂红,紫红酚羟基(邻对位无取代)Gibb's反应2,6-二氯苯醌氯亚胺(gibb's试剂)碱蓝色酚羟对位无取代Emerson Emerson试剂(4氨基安替比林和铁氰化钾)红色酚羟对位无取代Labat反应浓硫酸-没食子酸蓝绿色亚甲二氧基盐酸-镁粉浓盐酸-镁粉橙红-紫红(少数蓝)NaBH4NaBH4,1min,浓酸紫,紫红二氢黄酮三氯化铝三氯化铝颜色加深(紫外天蓝荧光)酚羟基锆盐-枸橼酸ZrOCl2-枸橼酸3OH,5OH鲜绿色,加枸橼酸5OH 褪色3/5OH氨性氯化锶SrCl2,氨气绿色-棕色-黑色沉淀邻二酚羟基乙酸铅(碱性-酚类都可)乙酸铅黄-红色沉淀邻二、3/5羟基碱性黄酮→橙;查耳酮、橙酮、二氢△→(紫)红;黄酮醇空气→棕色;邻三酚→暗绿纤维沉淀与蛋白质蛋白质沉淀鞣质与重金属盐醋酸铅等NaOH溶液沉淀鞣质与生物碱生物碱同上同上与三氯化铁三氯化铁参照18与铁氰化钾氨溶液铁氰化钾氨溶液深红转棕双键加成HX,Br2,亚硝酰氯(Tilden试剂)结晶(溴红色退去),紫蓝绿含薁类双键伯胺、仲胺常用六氢吡啶结晶萜烯的亚硝基衍生物DA反应顺丁烯二酸酐结晶共轭二烯亚硫酸氢钠加成亚硫酸氢钠结晶(加成物,酸或碱下复原)醛,甲基酮或环酮C<8吉拉德试剂加成吉拉德试剂(带季铵的酰肼)水溶加成物(酸下还原)含羰基萜硝酸银的氨溶液硝酸银的氨溶液银镜反应醛基等还原2,4-二硝基苯/氨基脲/羟胺结晶形沉淀醛酮无水甲醇-浓硫酸无水甲醇-浓硫酸紫或蓝薁类乙酸酐-浓硫酸乙酸酐-浓硫酸三萜:黄-红/甾体:红-紫-蓝-绿-污绿甾体/三萜母核五氯化锑五氯化锑的三氯甲烷60°-70°蓝色,灰蓝,灰紫同上三氯乙酸三氯乙酸100℃/60℃红色渐变紫同上三氯甲烷-浓硫酸三氯甲烷-浓硫酸硫酸→红/紫;三氯甲烷 绿荧同上冰乙酸-乙酰氯两者+氯化锌淡红/紫红同上legal反应亚硝酰铁氰化钾深红/蓝活性亚甲基raymond反应间二硝基苯紫红/蓝同上Kedde反应3,5-二硝基苯甲酸紫红/红同上Baljet碱性苦味酸橙红/红同上K-K反应三氯化铁→浓硫酸蓝2-去氧糖呫吨氢醇呫吨氢醇试剂水浴红2-去氧糖A试剂红色F环闭环或开环E试剂黄色F环开环原理应用酸下产生难溶复盐或络合物生物碱鉴定同上同上同上同上同上同上及含量测定同上同上同上同上同上同上及分离季铵碱浓硫酸下,糖形成的糠醛衍生物与α-萘酚缩合成有色化合物糖,苷p95糖(呋喃糖>单糖>吡喃糖)苷醌起传递电子媒介作用醌类蒽醌化合物区别蒽醌上OH基苯醌,萘醌专用显色剂蒽醌OH基取代/黄酮类区别羰基对位C-H2活泼氢蒽酮定性碱下开环,与盐酸羟胺缩合生成异羟亏酸,酸下与铁离子络合香豆素鉴别香豆素/黄酮酚OH/挥发油中酚类(蓝、蓝紫、绿)香豆素C6无取代酚羟对位无取代木质素中特殊基团查耳酮,花色素,橙酮酸下变色黄酮(醇),二氢黄酮(醇)阳性被NaBH4还原与锆盐络合黄酮类羟基萜烯/挥发油与脂溶性非羰基萜分离挥发油羰基挥发油羰基挥发油羰基甾体/三萜母核鉴别及区别同上甾体/三萜母核鉴别及区别同上同上活性亚甲基同上同上同上强心苷强心苷甾体皂苷区别。
醌类化
同颜色
反应鉴
别特点
及意义
香豆素
显色反
应的鉴
别特点
和意义
判断香豆素的C-6位是否有取代基的存在,可先水解,使其内酯环打开生成一个新的酚羟基,然后再用Gibbs或Emerson反应加以鉴别,如为阳性反应表示C-6位无取代。
木脂素没有特征性的理化检识方法,常用的检识方法主要是针对木脂素结构中的功能基如酚羟基、亚甲二氧基及内酯结构等而进行的检识。
1.三氯化铁反应——检查酚羟基
2.Labat反应(没食子酸、浓硫酸)——检查亚甲二氧基(阳性呈蓝绿色)3.Ecgrine反应(变色酸、浓硫酸)——检查亚甲二氧基(阳性呈蓝紫色)表6-3 黄酮类化合物的还原显色反应
3-OH、5-OH
的
存在。
若有3-OH和(或)5-OH,加二氯氧锆显黄色。
若只有5-OH,加枸橼酸后黄色减褪,若有3-OH,则加枸橼酸后黄色不变,因此可用于区分黄酮和黄酮醇。
用于鉴别3-OH的存在。
二酚羟基或兼有3-羟基、4-酮基或5-
羟基、4-酮基结构的化合物
反应生成沉淀。
而碱式醋酸铅的沉淀能力要大得多,一般酚类化合物均可与其发生沉淀反应。
①二氢黄酮易在碱液中开环,转变成相应的异构体查耳酮,显橙色至黄色。
②黄酮醇类在碱液中先呈黄色,通入空气后变为棕色。
③分子结构中有邻二酚羟基或3,4’-二羟基取代时,在碱液中不稳定,易被氧化,产生
沉淀。
1)、甾体母核的显色反应
图9-3 强心苷的显色反应
2)、C-17位不饱和内酯环的颜色反应 甲型
强心苷的特征
反应,因为五元不饱和内酯环上的双键位移产生C-22活性亚甲基乙型强心苷为六元不饱和内酯环,故不能反应。
3)、α-去氧糖反应 作用于五元不饱和内酯环
分离含有羰基的甾体皂苷元,常用季铵盐型氨基乙酰肼类试剂,如吉拉尔T(Girard T)或吉拉尔P(Girard P)两种试剂。
借此与不含羰基的皂苷元分离。
氨基酸的显色反应
蛋白质的显色反应
表10-3 生物碱沉淀反应类型及特点
表3-2 苷的显色反应。