丙酮酸氧化脱羧与三羧酸循环
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论述三羧酸循环的反应过程三羧酸循环,也称为柠檬酸循环或Krebs循环,是生物体内进行细胞呼吸的关键过程之一。
它在线粒体的胞质中进行,通过氧化葡萄糖产生三氧化碳和能量。
本文将详细描述三羧酸循环的反应过程,以及每个反应的具体细节。
三羧酸循环共包含八个反应步骤,每个步骤都有特定的酶催化。
首先,我们来看看第一步骤,也是整个循环的起始点——乳酸脱氢酶。
在这一步骤中,乳酸被氧化成为丙酮酸,同时产生二氧化碳和NADH。
这个反应是氧化性的,也是三羧酸循环的入口。
接下来,丙酮酸在丙酮酸脱氢酶的催化下转化为乙酰辅酶A。
这个反应中,丙酮酸失去一个羧基,生成乙醛和NADH。
乙醛进一步与辅酶A结合形成乙酰辅酶A,这是循环的关键中间产物。
在第三步中,乙酰辅酶A与柠檬酸合成酶催化下发生反应,生成柠檬酸。
这个反应是一个羧基转移反应,乙酰辅酶A的乙酰基转移到草酰乙酸上,同时释放出辅酶A。
第四步是柠檬酸异构酶的催化下,柠檬酸转化为异柠檬酸。
这个反应是一个水合脱水反应,柠檬酸的羟基和羧基发生转位,形成异柠檬酸。
然后,异柠檬酸在异柠檬酸脱氢酶的作用下,转化为α-酮戊二酸。
这个反应中,异柠檬酸失去一个羧基,并产生NADH和二氧化碳。
第六步是α-酮戊二酸脱羧酶的催化下,α-酮戊二酸转化为琥珀酸。
这个反应是一个脱羧反应,α-酮戊二酸失去一个羧基,形成琥珀酸。
接下来,琥珀酸在琥珀酸脱氢酶的作用下,转化为琥珀酸半醛。
这个反应中,琥珀酸失去两个氢原子,并产生NADH和二氧化碳。
琥珀酸半醛通过琥珀酸半醛脱氢酶的催化,转化为戊二酸。
这个反应是一个氧化反应,琥珀酸半醛失去一个氢原子,形成戊二酸。
至此,三羧酸循环的八个反应步骤全部完成。
通过这一循环,每个葡萄糖分子可以产生六个二氧化碳分子、十个NADH分子、两个FADH2分子和两个ATP分子。
这些能量载体将在细胞呼吸的后续过程中进一步参与ATP的合成。
三羧酸循环是生物体内进行细胞呼吸的重要过程之一,它不仅产生能量,还参与合成各种代谢产物。
三羧酸循环一、三羧酸循环的概念三羧基循环(tricarboxylic acid cycle),简称TCA循环。
是一个由一系列酶促反应构成的循环反应系统,在该反应过程中,首先在有氧的情况下,葡萄糖酵解产生的丙酮酸氧化脱羧形成乙酰CoA。
乙酰CoA(主要来自于三大营养物质的分解代谢)与草酰乙酸缩合生成含3个羧基的柠檬酸(citric acid),再经过4次脱氢、2次脱羧,生成4分子还原当量(reducing equivalent)和2分子CO2,重新生成草酰乙酸的这一循环反应过程称为三羧酸循环因为在循环的一系列反应中,关键的化合物是柠檬酸,所以称为柠檬酸循环(tricarboxylic acid cycle)。
由于它是由H.A.Krebs(德国)正式提出的,所以又称Krebs 循环。
二、三羧酸循环的过程三羧酸循环的过程主要分三个阶段:第一阶段:丙酮酸的生成(胞浆)第二阶段:丙酮酸氧化脱羧生成乙酰 CoA(线粒体)第三阶段:乙酰CoA进入三羧酸循环彻底氧化(线粒体)(一)、丙酮酸的生成(胞浆)葡萄糖 + 2NAD+ + 2ADP +2Pi ——> 2(丙酮酸+ ATP + NADH+ H+ )(二)、丙酮酸氧化脱羧生成乙酰辅酶A多酶复合体:是催化功能上有联系的几种酶通过非共价键连接彼此嵌合形成的复合体。
其中每一个酶都有其特定的催化功能,都有其催化活性必需的辅酶。
(三)、乙酰CoA进入三羧酸循环彻底氧化(线粒体)(1)乙酰-CoA进入三羧酸循环乙酰CoA具有硫酯键,乙酰基有足够能量与草酰乙酸的羧基进行醛醇型缩合。
首先柠檬酸合酶的组氨酸残基作为碱基与乙酰-CoA作用,使乙酰-CoA的甲基上失去一个h+,生成的碳阴离子对草酰乙酸的羰基碳进行亲核攻击,生成柠檬酰-CoA中间体,然后高能硫酯键水解放出游离的柠檬酸,使反应不可逆地向右进行。
该反应由柠檬酸合成酶(citrate synthase)催化,是很强的放能反应。
Tricarboxylic acid/Krebs cycle-1丙酮酸脱氢酶复合体:E1-丙酮酸脱氢酶组分(TPP,丙酮酸氧化脱羧);E2-二氢硫辛酰转乙酰基酶(硫辛酰胺,将乙酰基转移到CoA);E3-二氢硫辛酸脱氢酶(FAD,将还原型硫辛酰胺转变为氧化型)丙酮酸+CoASH+NAD+乙酰CoA+CO2+NADH丙酮酸脱氢酶复合体体的调控:①产物控制:NADH和乙酰CoA和酶作用的底物NAD+和CoA竞争酶的活性部位,乙酰CoA抑制E2,NADH抑制E3;如果NADH/NAD+和乙酰CoA/CoA的比值高,E2则处于与乙酰基结合的形式,这时不能接受在E1酶上与TPP结合着的羟乙基基团,使E1酶上的TPP停留在与羟乙基结合的状态,从而抑制了丙酮酸脱羧酶作用的进行。
②E1的磷酸化和去磷酸化是使丙酮酸脱氢酶复合体失活和激活的重要方式;E2分子上结合有两种酶,一种激酶,一种磷酸酶,激酶使E1磷酸化,磷酸酶使磷酸化的E1去磷酸化从而激活E1;Ca2+通过激活磷酸酶的作用,也使E1激活。
柠檬酸合酶:草酰乙酸+乙酰CoA+H2O柠檬酸+CoA+H+乌头酸酶:柠檬酸顺乌头酸+H2O ;顺乌头酸+H2O异柠檬酸(柠檬酸异柠檬酸)异柠檬酸脱氢酶:异柠檬酸+NAD+→草酰琥珀酸+NADH+H+;草酰琥珀酸+H+→a-酮戊二酸+CO2(异柠檬酸+NAD+a-酮戊二酸+NADH+CO2)草酰琥珀酸+H+→a-酮戊二酸+CO2a-酮戊二酸脱氢酶复合体:a-酮戊二酸+NAD++CoASH琥珀酰CoA+NADH+H++CO2琥珀酸-CoA合成酶:琥珀酰CoA+GDP+Pi琥珀酸+GTP+CoASH琥珀酸脱氢酶:琥珀酸+FAD延胡索酸+FADH2延胡索酸酶:延胡索酸+H2O苹果酸苹果酸脱氢酶:苹果酸+NAD+草酰乙酸+NADH+H+(填补反应)丙酮酸羧化酶:丙酮酸+ATP+CO2草酰乙酸+ADP+Pi+2H+(由草酰乙酸或循环中任何一种中间产物的不足而引起TCA速度有任何的降低都会使乙酰CoA浓度增加,而乙酰CoA是丙酮酸羧化酶的激动剂,结果会产生更多的草酰乙酸,从而提高TCA的速度,过量的草酰乙酸被转运到线粒体外用于合成Glc。
简述糖的有氧氧化及三羧酸循环的过程和生理意义
过程:
糖的有氧氧化是在充足氧气的存在下,糖完全氧化成二氧化碳和水,并释放大量能量的过程。
这个过程可以分为三个阶段:
1.糖酵解途径:在细胞质中,葡萄糖首先被转化为2分子丙酮酸。
2.乙酰辅酶A的生成:丙酮酸进入线粒体,在丙酮酸脱氢酶复合体的催化
下,经过氧化和脱羧作用,转化为乙酰CoA。
3.三羧酸循环和氧化磷酸化:乙酰CoA进入三羧酸循环,在这一循环中,
它与草酰乙酸结合生成柠檬酸,随后经过一系列的脱氢和底物水平磷酸化反应,最终生成2分子CO₂,并重新生成草酰乙酸。
生理意义:
1.能量供应:糖的有氧氧化是机体获取能量的主要方式,为细胞的各种生理
活动提供所需的ATP。
2.物质合成:有氧氧化过程中的许多中间代谢产物是体内合成其他生物分子
的重要原料,如氨基酸、脂肪酸和核苷酸等。
3.代谢联系:糖的有氧氧化与糖的其他代谢途径(如糖原合成、糖异生)以
及脂肪和蛋白质的代谢都有密切的联系,它们共同维持着机体内环境的稳定。
三羧酸循环三羧酸循环是由四碳原子的草酰乙酸与二碳原子的乙酰辅酶A(丙酮酸氧化脱羧的产物)缩合生成具有三个羧基的柠檬酸开始,经过一系列脱氢和脱羧反应后又以草酰乙酸的再生成结束,在循环过程中,乙酰CoA被氧化成H2O 和CO2,并释放出大量能量。
由于循环中首先生成含有三个羧基的柠檬酸,并且循环中有三个三元羧酸(柠檬酸、异柠檬酸和草酰琥珀酸),故被称为三羧酸循环或柠檬酸循环,简称TCA循环。
1.乙酰CoA 与草酰乙酸缩合形成柠檬酸柠檬酸合成酶Citrate synthase●ATP、NADH、琥珀酰-CoA等抑制酶活性;●草酰乙酸和乙酰-CoA激活酶活性2.柠檬酸异构化生成异柠檬酸3.异柠檬酸氧化脱羧生成—酮戊二酸●三羧酸循环中第一次氧化脱羧作用●异柠檬酸脱氢酶是三羧酸循环的限速酶a)异柠檬酸脱氢酶被Ca2+活化,它是一个别构酶.b)正调控物是ADP,ADP可增加酶和底物的亲和力。
NAD+、Ca2+和ADP有协同作用。
c)NADH和ATP可以抑制酶活性。
d)总之,细胞在具有高能状态时酶活性被抑制; 在低能状态时酶活性被激活.4. —酮戊二酸氧化脱羧成为琥珀酰辅酶A三羧酸循环中第二个氧化脱羧反应,释放大量能量,产生NADH和CO2.此酶也是一个调节酶,受其产物NADH、琥珀酰CoA和Ca2+抑制,细胞高能荷时,ATP也可反馈抑制酶的活性。
5.琥珀酰CoA转化成琥珀酸,并产生GTP这是三羧酸循环中唯一的底物水平磷酸化直接产生高能磷酸键的步骤。
6.琥珀酸脱氢生成延胡索酸●三羧酸循环中第三步氧化还原反应●琥珀酸脱氢酶是三羧酸循环中唯一掺入线粒体内膜的酶,直接与呼吸链联系。
●延胡索酸是反丁烯二酸,而不是顺丁烯二酸(马来酸),后者不能参加代谢,对有机体有毒性。
7.延胡索酸被水化生成L-苹果酸8.L-苹果酸脱氢生成草酰乙酸a、总反应式:●总反应式:CH3COSCoA+3NAD++FAD+GDP+Pi+2H2O==2CO2+CoASH+3NADH+3H+ +FADH2+GTP 1GTP = 1 ATP; 1NADH = 3ATP; 1FADH2 = 2ATP葡萄糖在分解代谢过程中产生的能量有两种形式:直接产生ATP;生成高能分子NADH或FADH2,后者在线粒体呼吸链氧化并产生ATP。
三羧酸循环糖酵解的最终产物丙酮酸,在有氧条件下进入线粒体,通过一个包括三羧酸和二羧酸的循环逐步脱羧脱氢,彻底氧化分解,这一过程称为三羧酸循环(tricarboxylic acid cycle,TCAC)。
这个循环是英国生物化学家克雷布斯(H.Krebs)首先发现的,所以又名Krebs 循环(Krebs cycle)。
1937年他提出了一个环式反应来解释鸽子胸肌内的丙酮酸是如何分解的,并把这一途径称为柠檬酸循环(citric acid cycle),因为柠檬酸是其中的一个重要中间产物。
TCA循环普遍存在于动物、植物、微生物细胞中,是在线粒体基质中进行的。
TCA循环的起始底物乙酰CoA不仅是糖代谢的中间产物,也是脂肪酸和某些氨基酸的代谢产物。
因此,TCA循环是糖、脂肪、蛋白质三大类物质的共同氧化途径。
(一)三羧酸循环的化学历程TCA循环共有9步反应(图5-6)。
1.反应(1)丙酮酸在丙酮酸脱氢酶复合体催化下氧化脱羧生成乙酰CoA,这是连结EMP与TCAC的纽带。
丙酮酸脱氢酶复合体(pyruvic acid dehydrogenase complex)是由3种酶组成的复合体,含有6种辅助因子。
这3种酶是:丙酮酸脱羧酶(pyruvic acid decarboxylase)、二氢硫辛酸乙酰基转移酶(dihydrolipoyl transacetylase)、二氢硫辛酸脱氢酶(dihydrolipoic acid dehydrogenase)。
6种辅助因子。
6种辅助因子分别是硫胺素焦磷酸(thiamine pyrophosphate,TPP)、辅酶A (coenzyme A)、硫辛酸(lipoic acid)、FAD(flavin adenine dinucleotide)、NAD+(nicotinamide adenine dinucleotide)和Mg2+。
图5-6 三羧酸循环的反应过程上述反应中从底物上脱下的氢是经FAD→FADH2传到NAD+再生成NADH+H+。