朝鲜白头翁总皂苷提取工艺的优化

格式：pdf
大小：226.96 KB
文档页数：4

下载文档原格式

白头翁皂苷的提取及抑菌活性试验

白头翁皂苷的提取及抑菌活性试验
刘显军;陈静;尚丽娟
【期刊名称】《中国兽医杂志》
【年(卷),期】2012(048)001
【摘要】采用乙醇法提取白头翁中总皂苷,其提取率为8.97％.经体外抑菌试验表明,白头翁和白头翁皂苷抑制大肠杆菌的数量,但对芽孢杆菌的数量无影响.
【总页数】2页(P69-70)
【作者】刘显军;陈静;尚丽娟
【作者单位】沈阳农业大学畜牧兽医学院,吉林沈阳110866;沈阳农业大学畜牧兽医学院,吉林沈阳110866;沈阳农业大学畜牧兽医学院,吉林沈阳110866
【正文语种】中文
【中图分类】S853.9
【相关文献】
1.响应面法优化超声波辅助提取白头翁总皂苷 [J], 于爽;郝婧玮;孙晓薇;高剑;李帅;杨传伟
2.微波辅助提取白头翁皂苷研究 [J], 于爽;高剑;郝婧玮;何婷婷
3.提取分离工艺对白头翁皂苷的影响 [J], 宋科标;时维静;周杰;王贵阳;韩伟
4.白头翁皂苷提取方法比较及加压提取传质动力学 [J], 赵文英;朱庆书;徐艳丽;孙彦妮
5.白头翁皂苷抗小鼠血吸虫病肝纤维化的试验 [J], 陈岩勤;高秀丽;诸葛洪祥;杨世林;李笑然;杨盛刚
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

基于DPPH自由基清除效果研究白头翁的提取工艺

基于DPPH自由基清除效果研究白头翁的提取工艺孙珊珊;杨海焱;刘悦;常福曼;苏建青【摘要】为了优化白头翁的提取工艺,以白头翁提取液对DPPH自由基的清除率作为评价指标,考查料水比、提取时间、提取次数、提取温度等不同单因素对白头翁提取液清除DPPH自由基效果的影响,并通过正交试验对单因素结果进行优化.结果表明,当料水比为1:40、提取时间为45 min、提取次数为2次、提取温度为60℃时白头翁提取液对DPPH自由基的清除率最大,可达到54.9％.由该结果可以得出,提取方法对白头翁提取液清除DPPH自由基效果具有影响,高温和长时间提取可能对白头翁提取液清除DPPH自由基的有效成分具有破坏作用.【期刊名称】《畜牧与饲料科学》【年(卷),期】2019(040)003【总页数】5页(P16-20)【关键词】白头翁;提取工艺;DPPH自由基【作者】孙珊珊;杨海焱;刘悦;常福曼;苏建青【作者单位】聊城大学农学院,山东聊城 252000;聊城大学农学院,山东聊城252000;聊城大学农学院,山东聊城 252000;聊城大学农学院,山东聊城 252000;聊城大学农学院,山东聊城 252000【正文语种】中文【中图分类】S859.4;R284.2白头翁［Pulsatilla chinensis（Bge.）Regel］属于毛茛科，为多年生草本植物，又名白头草、老冠花、野丈人等［1］。

白头翁始载于《神农本草经》，列为下品，为常用中草药，以干燥的根入药，性苦味寒［2］，具有清热解毒、凉血止痢和燥湿杀虫等功效［3］。

白头翁主产于我国吉林、辽宁、河北、河南、山西和黑龙江等地［4］。

药理学研究表明该属植物含有100多种药理化学成分，如皂苷、黄酮、有机酸、白头翁素等［5］。

研究显示其主要药理活性成分为三萜皂苷类成分［6-7］。

氧化应激是机体自由基生成增加、抗氧化能力下降、氧化和抗氧化平衡出现紊乱，从而导致自由基在机体内积累，进而损伤DNA、细胞引起病理变化的过程［8］。

响应面法优化超声波辅助提取白头翁总皂苷

响应面法优化超声波辅助提取白头翁总皂苷于爽;郝婧玮;孙晓薇;高剑;李帅;杨传伟【摘要】采用响应面法优化了超声波法辅助提取白头翁总皂苷(pulsatilla saponin)的条件.以白头翁皂苷B4提取率为评价指标,在单因素试验的基础上,利用Box-Behnken响应面分析法,确定最佳提取条件.结果表明,超声波辅助提取白头翁总皂苷的最佳工艺参数为超声功率240 W,乙醇体积分数60%,超声时间30 min.在此条件下白头翁皂苷提取得率为5.35%.响应面法优化得到的提取工艺稳定合理,准确可靠,是提取白头翁皂苷的可行方法.%The optimization of the ultrasonic-assisted extraction of total pulsatilla saponin was studied by using the response surface methodology. The extraction rate of pulsatilla saponin B4 was the evaluation index. On the basis of single factor exper-iment, the optimum extraction condition was determined by using Box-Behnken response surface analysis method. The results showed that ultrasonic-assisted extraction and the optimum technological parameters of total saponins in Pulsatilla root were ultrasonic power of 240 W,60% ethanol, ultrasonic time of 30 min. Under these conditions the extraction rate of pulsatilla saponin was 5.35%. Response surface optimization of the extraction process was stable and reasonable, accurate and reliable, which was a feasible method to extract of pulsatilla saponin.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2017(056)004【总页数】5页(P707-711)【关键词】白头翁皂苷(pulsatillasaponin);超声波辅助提取;响应面法【作者】于爽;郝婧玮;孙晓薇;高剑;李帅;杨传伟【作者单位】牡丹江师范学院生命科学与技术学院,黑龙江牡丹江 157011;牡丹江师范学院生命科学与技术学院,黑龙江牡丹江 157011;牡丹江师范学院生命科学与技术学院,黑龙江牡丹江 157011;牡丹江师范学院生命科学与技术学院,黑龙江牡丹江 157011;牡丹江师范学院生命科学与技术学院,黑龙江牡丹江 157011;牡丹江师范学院生命科学与技术学院,黑龙江牡丹江 157011【正文语种】中文【中图分类】TS229中药白头翁为毛茛科植物白头翁［Pulsatilla Chinensis（Bge.）Regel］的干燥根，始载于《神农本草经》，其性味苦寒，具有清热解毒、凉血止痢、燥湿杀虫之功效［1，2］。

白头翁总皂苷及其主要成分抗肿瘤药效及其构效关系的研究

白头翁总皂苷及其主要成分抗肿瘤药效及其构效关系的研究罗颖颖;严新;谢欣序;王木兰;冯育林;杨世林;李俊【摘要】目的:研究探讨白头翁总皂苷及其4种主要成分的抗肿瘤活性,分析其构效关系.方法:采用体外对人肝癌细胞SMMC-7721和人结肠癌细胞HT-29进行体外抑瘤实验;采用人肝癌H22移植荷瘤小鼠进行体内抑瘤实验,观察分析白头翁总皂苷及其4种主要成分的抗癌药效.结果:体外抑瘤实验中,各主要成分均显示出明显的抑瘤活性,其中以白头翁皂苷B7抑瘤活性最强,其IC50为2.64 μg·mL-1(SMMC-7721细胞)和2.57 μg ·mL-1(HT-29细胞),其他依次为白头翁皂苷B3、B9和B11.白头翁总皂苷也表现出了一定的抑瘤活性.体内抑瘤实验结果与体外实验结果基本一致,只是白头翁总皂苷在整体动物实验药效更强,提示白头翁总皂苷在体内复杂环境中的抑瘤作用更明显,体现了多成分多靶点作用的特点.4个单体构效分析表明,白头翁苷元上的23位羟基化不能增强抑瘤活性,24位侧链直链式糖活性低于非直链连接的糖,直链连接中4糖数量(葡萄糖-葡萄糖-鼠李糖-阿拉伯糖)(白头翁皂苷B9)的活性强于2糖的数量(鼠李糖-阿拉伯糖)(白头翁皂苷B11).结论:白头翁皂苷成分中23位不是活性位点(药效团),24位所连接的糖的数量及其连接方式对其抑瘤活性有一定的影响.白头翁总皂苷体内活性强于体外的实验,提示总皂苷中其他成分在体内复杂环境下具有抑瘤的协同效应.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2018(020)007【总页数】6页(P791-796)【关键词】白头翁;癌症;药效;构效关系;白头翁皂苷【作者】罗颖颖;严新;谢欣序;王木兰;冯育林;杨世林;李俊【作者单位】江西中医药大学国家工程研究中心,江西南昌330006;江西本草天工科技有限责任公司,江西南昌330006;江西中医药大学第二附属医院,江西南昌330006;江西中医药大学国家工程研究中心,江西南昌330006;江西本草天工科技有限责任公司,江西南昌330006;江西本草天工科技有限责任公司,江西南昌330006;江西中医药大学国家工程研究中心,江西南昌330006;江西本草天工科技有限责任公司,江西南昌330006;江西中医药大学国家工程研究中心,江西南昌330006;江西本草天工科技有限责任公司,江西南昌330006;江西中医药大学国家工程研究中心,江西南昌330006;江西本草天工科技有限责任公司,江西南昌330006【正文语种】中文白头翁Pulsatilla chinensis(Bge.)Regel以干燥根入药，是临床常用中药，具有清热解毒、凉血止痢的作用，主要用于肠炎、热毒痢等[1]。

白头翁汤提取工艺的研究及薄层鉴别优化

白头翁汤提取工艺的研究及薄层鉴别优化张启迪;张慧;邹明;单虎【摘要】为了提高白头翁汤有效成分的提取,优化白头翁汤薄层色谱鉴别条件.本试验以出膏率来评价提取次数对该方提取的影响,以沉淀量为考察对象研究白头翁汤最佳配伍方式,从改变氨水添加顺序的角度对方中黄连、秦皮的随层色谱鉴别结果的影响进行研究.结果白头翁汤提取4次时得膏率最多为29.47％;全方提取时沉淀量最少为6％;秦皮的鉴别不需要用浓氨水预饱和处理,而黄连鉴别则需要浓氨水预饱和处理后进行展开.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2014(050)010【总页数】4页(P79-82)【关键词】白头翁汤;提取工艺;薄层鉴别;浓氨水【作者】张启迪;张慧;邹明;单虎【作者单位】青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109;青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109;青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109;青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109【正文语种】中文【中图分类】S859.3白头翁汤为清热解毒、凉血止痢的中药汤剂，始出于张仲景的《伤寒论》。

该方由白头翁15 g、黄连6 g、黄柏12 g、秦皮12 g 4味药组成。

其中，白头翁为毛莨科多年生草本植物白头翁的干燥根，具有清热解毒，凉血止痢之功效，为白头翁口服液中的君药。

黄连苦寒，泻火解燥湿厚肠，为治痢要药；黄柏清下焦湿热，2药共助君药清热解毒，尤能燥湿治痢，共为臣药[1]。

秦皮为木犀科白蜡树植物的干燥树皮，味苦，性寒，用于热痢泄泻，目生翳膜等[2]，为白头翁口服液中的佐药。

该方证原为治湿热痢疾的首选方剂[3]。

近年来随着研究者对白头翁汤的深入研究，在兽医临床上也逐渐广泛应用。

肖琛闻等[4]曾采用白头翁汤治疗鸭疫里默氏菌病，结果该方能改善症状并减少死亡率。

祝国强等[5]试验证明，白头翁汤对沙门菌接种的鸡胚有较好的保护作用。

随着该药的广泛生产使用，进一步充分提取药物有效成分、优化鉴别方法成为研究热点。

硕士论文--白头翁总皂苷碱水解产物的抗肿瘤作用及机制研究

hederacolchiside A1, pulsatilla saponin F, oleanolic acid 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1 →4)-β-D-gluco-pyranosyl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranosi de, oleanolic acid 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-
季秀美杨世林刘艳丽药物化学天然药物化学 20ห้องสมุดไป่ตู้3 年 5 月
白头翁总皂苷碱水解产物的抗肿瘤作用及机制研究
中文摘要
白头翁总皂苷碱水解产物的抗肿瘤作用及机制研究中文摘要
目的：前期工作提示白头翁总皂苷具有明显的体内外抗肿瘤作用，其碱水解产物体外抗肿瘤作用优于白头翁总皂苷。本论文将系统探讨白头翁总皂苷碱水解产物（PAHS）的抗肿瘤作用及其可能的机制。方法：采用 HPLC-ELSD 法对 PAHS 中 8 种含量较高的皂苷进行测定；采用 MTT 及集落形成实验检测白头翁总皂苷碱水解产物对人肝癌 SMMC-7721 以及人肺癌 A549 的增殖抑制作用，同时采用 Giemsa 染色观察 PAHS 对肿瘤细胞形态的改变；在体内，建立小鼠肉瘤 S180、小鼠肝癌 H22、C57 小鼠 Lewis 肺癌模型，取荷瘤小鼠血液进行血液检查并对小鼠肿瘤组织进行病理检查；在机制方面，采用 hoechest33342 染色观察 SMMC-7721 凋亡细胞形态变化；通过流式细胞仪检测 PAHS 对 7721 及 A549 细胞凋亡及周期的影响；采用 western blot 法检测线粒体通路和 PI3K 通路内重要信号分子的表达。结果：HPLC 结果表明，白头翁总皂苷碱水解产物中 8 种皂苷单体（白头翁皂苷 D、常春藤皂苷元 3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷、白头翁皂苷、 hederacolchiside A1、白头翁皂苷 F、齐墩果酸 3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基 -(1→3)-α-L- 吡喃鼠李糖基 -(1→2)-α-L- 吡喃阿拉伯糖苷、齐墩果酸 3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉）含量的总和超过 85%； MTT 及集落形成实验表明 PAHS (0.80-25.00μg/ml) 可以时间和剂量依赖

白头翁药效成分的提取

白头翁为毛茛科植物白头翁[Pulsatilla chinensis(Bgel)Regel]的干燥根，具有清热解毒、凉血止痢之功效，中医临床主要用于结肠癌、直肠癌等肠道肿瘤、宫颈癌、脑垂体瘤、甲状腺瘤、肺癌的治疗[1-2]。

白头翁的主要化学成分为三萜皂苷，含有大量的三萜类成分，其中主要的药效成分为23-羟基白桦酸[3]。

本文主要研究从白头翁中提取23-羟基白桦酸，探索改良传统的提取方法。

1白头翁药效成分的提取方法1.1方法一白头翁根茎粗粉500g ，用甲醇加热回流提取3次，合并提取液。

浓缩后倒入400mL 蒸馏水中，混悬的水液先后用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇反复萃取。

正丁醇液减压回收至干，得浸膏。

薄层色谱展开剂为CHCl 3-CH 3OH-H 2O(6.5∶3.5∶1，下层)，显色剂为香草醛-浓H 2SO 4。

纸层析展开剂为n-BuOH-HOAc-H2O(4:1:5，上层)，显色剂为苯胺-邻苯二甲酸。

经硅胶柱层析，依次用氯仿-甲醇-水（100∶10∶1→100∶60∶10）进行梯度洗脱，得到皂苷Ⅰ。

1.2方法二取白头翁粉末500g ，以95%乙醇Soxhlet 氏提取器中连续抽提6h 。

旋干乙醇提取物，溶解于水中。

以乙醚萃取，去除油溶性杂质。

水层加入浓硫酸（调节至硫酸浓度约为5%），加热水解得配基粗制品。

所得配基粗制品沉淀经过滤、洗涤、干燥后，于乙醇中结晶。

硅胶柱色谱分离该物质。

对重结晶产物薄层层析，薄层层析硅胶G （200至400目），展开剂为乙酸乙酯-油醚-乙酸(1∶5∶0.05)→乙醇-乙酸（1∶1），显色剂为碘蒸气。

查看其组成成分的种类，以便决定是否进行柱层析分离。

2实验方案设计结合以上所述及实验条件所限，以方法二为基础进行改进。

由于中药提取物多为混合物，所以增加了硅胶柱色谱分离混合物的步骤，并且由于所做配基较少，产物重结晶损失较大，而其乙酰衍生物较易重结晶，故而进行了乙酰化的反应。

同时可通过乙酰化反应产物的分析，进一步验证23-羟基白桦酸的存在。

白头翁水溶性物质的提取工艺研究

白头翁水溶性物质的提取工艺研究蒋红;刘锦;王宏军;卢荣荣;张雪伟;龙元桃;王婉冰【摘要】为了探究白头翁水溶性物质的提取工艺，本研究采用单因素试验和L9（34）正交试验，考察料液比、提取时间、提取次数和提取温度对水溶性物质浸膏率的影响，从而优选白头翁水溶性物质的最佳提取工艺条件。

结果表明，白头翁水溶性物质提取的最佳工艺条件：料液比为1：17，100℃提取6 h，提取6次，白头翁水溶性物质浸膏率为21.12%。

本研究为白头翁水溶性多糖的研究奠定了基础。

%This thesis was designed to optimize the extraction technology of water-soluble materi-al from Radix Pulsatilla. Three main influencing factors including solid-liquid ratio, extracting time and times of extraction were investigated by the single factor test and the orthogonal test using extraction rate as the indexes. The results showed that the optimum extracting conditions of water-soluble material from Radix Pulsatilla extraction were the solid-liquid ratio of 1:17, ex-traction time of 6h and extracting 6 times in 100 ℃ water. U nder these conditions, the extraction rate was 21.12%. This study laid the foundation for the research of water-soluble polysaccharide from Radix Pulsatilla.【期刊名称】《现代畜牧兽医》【年(卷),期】2014(000)001【总页数】4页(P10-13)【关键词】白头翁;浸膏率;提取工艺【作者】蒋红;刘锦;王宏军;卢荣荣;张雪伟;龙元桃;王婉冰【作者单位】辽宁医学院，辽宁锦州 121001;辽宁医学院，辽宁锦州 121001;辽宁医学院，辽宁锦州 121001;辽宁医学院，辽宁锦州 121001;辽宁医学院，辽宁锦州 121001;辽宁医学院，辽宁锦州 121001;辽宁医学院，辽宁锦州 121001【正文语种】中文【中图分类】S859.4白头翁（Pulsati l la chinensis）为毛莨科植物，分布在吉林、辽宁、河北、山东、河南、山西、陕西、黑龙江等省的山岗、荒坡及田野间，具有清热解毒、凉血止痢的功效，可用于治疗热毒血痢、阴痒带下、阿米巴痢疾等疾病[1-2]。

白头翁皂苷的分离提纯

白头翁的化学成分研究[6～10 ] 始于 60 年代
初 ,共分得了约 14 种成分 ,主要为皂苷和内酯等成分 ,目前认为白头翁的有效化学成分主要为三萜皂苷。科研人员以双糖三萜皂苷为对照品用分光光度法对不同采收期白头翁的根及茎叶总皂苷分别进行测定[11 ] ,结果表明根内总皂苷含量高于茎叶 ,且开花前期含量最高。所以在早春 3～5 月采挖药材品质较好。许多中草药的主要药效成分是皂甙 ,如人参、黄芪、刺五加等 ,长期以来 ,皂甙由于具有多种生理活性和良好的药理作用 ,一直是天然有机化学和药物化学的重要研究对象。本文主要研究了白头翁皂苷分离提纯的方法。白头翁总皂苷依次通过大孔树脂层析、硅胶柱层析得到较高纯度的白头翁皂苷 Ⅲ,并利用薄层层析鉴定分离物。白头翁皂苷的分子式如图 1 所示。
取一定量的白头翁 ,粉碎成粉 ,加入 70 %的酒精浸泡 24 h ,纱布、滤纸过滤后 ,收集滤液 ,滤渣继续加入酒精浸泡 ,同上法方法循环 3 次 ,收集滤液 ,将 3 次所得滤液混合。滤液经减压浓缩为原来的体积的 1/ 5 ,再用 1/ 3 体积的石油醚萃取脱脂 ,保留水相 ,再次减压浓缩后 ,加水稀释上 AB28 柱吸附 ,反复吸附 3 次 ,6～8 倍柱体积水洗掉糖后用 5 倍柱体积 70 %酒精洗脱。然后 ,用 95 %酒精洗脱再生柱子。70 %酒精洗脱液 ,经脱色减压浓缩后蒸干。流程为
Key words :pulsatilla saponin ; t hin2layer chromatography ; macroporous resin ; silica gel column Abstract :In separating and purif ying pulsatilla saponin , t he pulsatilla saponin gained f rom alcohol solvent immersed liquid are degreased and separated t hrough macroporous resin. Then , high yield and high purit y pulsatilla saponin is obtained wit h a yield rate of 9. 4 %. Finally , decolored and separated t hrough silica gel column ,monomer saponin is obtained wit h a yield rate of 22. 8 %. Comparing wit h standard specimen , it is t he same as 32O2[α2L2rhamnppyranosy (1 →2) 2α2L2arabinopyranoside ]23β,232dihydroxyl2Δ20 (29)2lup2282O2 [α2L2 rhamnppyranosy (1 →4) 2β2D2glucopyranosyl (1 →6) ]2β2D2glucopyranoside.

白头翁汤有效成分提取工艺的研究

白头翁汤有效成分提取工艺的研究
刘文;冯果;刘梦莹;林昶;宋信莉
【期刊名称】《中国民族民间医药》
【年(卷),期】2008(017)001
【摘要】目的:优选白头翁汤有效成分提取的最佳提取方法和提取工艺.方法:以白头翁汤中的有效成分白头翁皂苷B4和盐酸小檗碱的含量为测评指标,采用单因素方差分析法与正交试验设计法优选白头翁汤有效成分的最佳提取方法和提取工艺.结果:最佳提取方法为渗漉法;最佳提取工艺条件为用80%的乙醇,以7ml/min/kg的流速,渗漉8倍量,回收乙醇.结论:优选后的提取工艺所获得的白头翁汤中的有效成分白头翁皂苷B4和盐酸小檗碱的含量高,经验证试验表明该提取工艺稳定、可行,能提高白头翁汤的有效成分的含量.
【总页数】4页(P60-63)
【作者】刘文;冯果;刘梦莹;林昶;宋信莉
【作者单位】贵阳中医学院,贵州,贵阳,550001;贵阳中医学院,贵州,贵阳,550001;贵阳中医学院,贵州,贵阳,550001;贵阳中医学院,贵州,贵阳,550001;贵阳中医学院,贵州,贵阳,550001
【正文语种】中文
【中图分类】TQ46
【相关文献】
1.白头翁汤提取工艺的研究及薄层鉴别优化
2.白头翁汤有效成分提取工艺和含量测定
3.薏苡仁中有效成分提取工艺的研究发展
4.响应面法优化黄芩中苷元类有效成分提取工艺研究
5.白头翁汤提取工艺试验研究
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

朝鲜白头翁总皂苷提取工艺的优化李海燕1,郝　宁1,许永男2,朴钟云13(11沈阳农业大学园艺学院,辽宁沈阳110866;21沈阳药科大学SK Che m icals 药物研究室,辽宁沈阳110016) 摘要　目的:通过单因素和正交试验优化朝鲜白头翁中总皂苷的超声波提取工艺。

方法:以白头翁皂苷B 4为对照品,采用分光光度法进行含量测定。

结果:确定皂苷的最大吸收波长为470n m,皂苷含量在0～01040mg/mL 范围内与吸光度呈良好线性关系。

最佳提取工艺为:乙醇浓度80%,超声时间40m in,料液比1∶20,超声功率80W ,提取1次。

其中乙醇浓度对总皂苷提取影响最大,此工艺条件下朝鲜白头翁中总皂苷含量为4132%。

结论:该方法提取效率高、稳定、准确、重现性好。

关键词　朝鲜白头翁;分光光度法;总皂苷;超声波;提取工艺中图分类号:R28412 文献标识码:A 文章编号:100124454(2010)0420617204O ptim i za ti on of Extracti on Techn i cs of Tot a l Sapon i n s fro m Pu lsa tilla cernuaL I Hai 2yan 1,HAO N ing 1,XU Yong 2nan 2,P I A O Zhong 2yun1(11College of Horticulture,Shenyang Agricultural University,Shenyang 110866,China;21SK Che m icals Lab of Materia Medica,Shenyang Phar maceutical University,Shenyang 110016,China )Abstract Objective:The extracti on conditi on of t otal saponins fr om Pulsatilla cenua by ultras onic wave was op ti m ized by single fact or and orthogonal experi m ents 1Methods:The largest abs orbency of saponin was intended t o be 470n m by wavelength scan method with the pulchinenoside B 4as contr ol sa mp le,the linear relati onshi p was observed bet w een the abs orbency and the content of saponin in the range of 0～01040mg/mL 1Results:The op ti m al conditi ons of extracti on was as f oll owing:80%of alcohol concentrati on,40m in of ultras onic ti m e,1∶20of s olid t o liquid rati o,80W of ultras onic power and one ti m e f or extracti on 1Among them,alcohol had the most significant effect on the extracti on of t otal saponins 1Conclusi on:The content of t otal saponins in Pulsatilla cernua was 4132%un 2der the op ti m al conditi on 1The method devel oped here is efficient,stable,accurate and repeatable 1Key words Pulsatilla cernua;Spectr ophot ometry;Total saponins;U ltras onic wave;Extracti on technics收稿日期:2009211224基金项目:中韩合作项目(SK2007005)作者简介:李海燕(19822),女,在读博士,研究方向:药用植物栽培生理;Tel:024*********,E 2mail:cj m in820518@1261com 。

3通讯作者:朴钟云,Tel:024*********,E 2mail:zyp iao@g mail 1com 。

朝鲜白头翁是毛茛科植物朝鲜白头翁Pulsa tilla cernua (Thunb 1)Bercht et Op iz 的干燥根。

具有清热解毒、凉血止痢的功效〔1〕,药理研究表明其有抗微生物、抗蔗糖酶、抗肿瘤等活性〔225〕,近年研究还发现其所含的某些活性成分对治疗老年性痴呆(阿尔茨海默病,A lzhei m er ′s disease,AD )效果显著〔3,6〕。

朝鲜白头翁主要分布于辽宁、吉林、黑龙江等地区,资源十分丰富,具有良好的开发应用前景。

因此,本实验采用超声波提取法优化朝鲜白头翁总皂苷的提取工艺,为今后朝鲜白头翁的开发和利用提供科学依据。

1　材料、仪器与试剂111　材料　朝鲜白头翁,于2008年10月采于辽宁省新宾满族自治县,经中科院应用生态研究所李锦云研究员鉴定为毛茛科(Ranunculaceae )植物朝鲜白头翁Pulsatilla cernua (Thunb 1)Bercht et Op iz 的根。

药材粉碎,过60目筛,备用。

112　仪器与试剂　754型紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司);旋转蒸发器RE 252A (上海亚荣生化仪器厂);K Q 2100DV 型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);JA5003A 电子天平;数显恒温水浴锅HH 28(国华电器有限公司);粉碎机;BS124S 电子天平(赛多利斯科学仪器有限公司);真空泵。

白头翁皂苷B 4(纯度>98%),购于上海融禾医药科技有限公司;无水乙醇、甲醇、冰乙酸、高氯酸、丙酮、三氯甲烷、乙醚、正丁醇、香草醛等均为国产分析纯。

2　总皂苷的含量测定211　对照品溶液的制备　精密称取110mg 白头翁皂苷B 4,置于10mL 的容量瓶中,用甲醇溶解,定容至刻度并摇匀,得到浓度为011mg/mL 的对照品贮备液。

212　供试品溶液的制备　称取21000g 药材粗粉,加入80%乙醇40mL,于50℃、80W 功率条件下超声40m in,抽滤,洗涤,合并滤液。

提取液经浓缩回收溶剂后,用15mL水转移出残留物,用同体积的乙醚萃取2次,水饱和的正丁醇萃取4次,回收溶剂,用甲醇定量转移至50mL容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,定容,吸取时过0145μm滤膜。

213　总皂苷含量的测定方法　采用紫外可见分光光度法,通过香草醛2高氯酸比色法来测定总皂苷含量。

精密吸取对照品溶液和供试品溶液于具塞试管中,挥干溶剂,再分别加入5%香草醛2冰醋酸溶液012mL和高氯酸018mL,密塞摇匀,置60℃恒温水浴锅中显色15m in,取出后立即以冰水冷却5m in,加入冰醋酸4mL,摇匀,静置10m in后,以空白试管中的溶液作空白对照,于指定波长处测定吸光度,根据标准曲线回归方程计算总皂苷含量。

214　最大吸收波长的选择　取对照品溶液110 mL和供试品溶液011mL于具塞试管中,按“213”项下所述,在400～650n m范围内连续测定对照品溶液和样品溶液的吸光度,确定出最大吸收波长。

结果表明二者均在470n m处有最大吸收,吸收光谱基本一致,故确定其最大检测波长为470nm。

215　标准曲线的制备　精密量取对照品溶液011、012、014、018、116、210mL分别置于具塞试管中,按“213”项下所述,于470n m处测吸光度,以吸光度为纵坐标,对照品浓度(mg/mL)为横坐标绘制标准曲线,得标准曲线方程y=211297x+01001(R2= 019999)。

结果表明白头翁皂苷含量在0～01040 mg/mL范围内与吸光度呈良好线性关系。

216　总皂苷测定方法学考察21611　精密度试验:精密吸取对照品溶液110 mL,按“213”项下所述,重复测定6次,吸光度的RS D=0179%,表明仪器精密度良好。

21612　稳定性试验:精密吸取供试品溶液011 mL,按“213”项下所述,显色终止后分别于室温放置10、30、60、90、150、180m in后测定吸光度,RS D= 0145%,表明此法测定供试品溶液总皂苷含量至少在180m in内稳定。

21613　重现性试验:精密称取白头翁样品粉末21000g,共5份,按“212”项下方法制备供试品溶液,再按“213”项下所述,测定吸光度值,计算总皂苷含量,RS D=2189%,表明重复性良好。

21614　回收率试验:精密吸取已知总皂苷含量的朝鲜白头翁供试品溶液4份,分别加入对照品溶液适量,照“213”项下方法测定吸光度。

记录样品中皂苷含量、加入量、实测值、回收率、平均回收率。

结果平均回收率为96174%,RS D=2193%,结果表明加样回收率良好。

表1　加样回收率试验结果样品编号皂苷量/mg加入标准品量/mg理论值/mg实测值/mg回收率/%平均回收率/% 1413030102413234136210019196174 2414330102414534122094176341101010241121319239512044112501024114531982961083　提取工艺设计311　单因素试验31111　提取溶剂的选择:精密称取朝鲜白头翁粉末9份各21000g,分别加入下列有机溶剂:氯仿、95%乙醇、90%乙醇、80%乙醇、70%乙醇、50%乙醇、30%乙醇、甲醇和丙酮40mL,50℃、80W条件下超声提取40m in。

按“212”和“213”项下所述方法制备样品溶液并测定吸光度。

31112　超声时间对朝鲜白头翁总皂苷提取率的影响:精密称取朝鲜白头翁根粉末5份各21000g,分别在80%乙醇40mL,50℃、80W条件下分别超声提取20m in、30m in、40m in、50m in、90m in。

按“212”和“213”项下所述方法制备样品溶液并测吸光度。

31113　料液比对朝鲜白头翁总皂苷提取率的影响:精密称取朝鲜白头翁根粉末4份各21000g,分别在70%乙醇20、40、60、100mL,50℃、80W条件下超声提取40m in,按“212”和“213”项下所述方法制备样品溶液并测吸光度。