TEM操作流程

透射电镜细胞样品制备流程透射电镜细胞样品制备流程概述透射电镜（TEM）是一种常用于观察细胞结构和超微结构的高分辨率显微镜。

样品制备是进行TEM观察的关键步骤，正确的制备流程能够保证样品的质量和结构完整性。

流程步骤1.选择适合的细胞样品–根据研究目的选择不同类型的细胞样品，如培养细胞、动物细胞组织或植物细胞等。

–样品选择要考虑细胞生长状态、形态和结构的要求。

2.采集样品–从培养皿中取出细胞，或从动物或植物组织中切取适当大小的样品。

–注意避免样品受到污染或损坏。

3.固定样品–使用适当的固定剂，如戊二醛、冰醋酸或凝胶固定剂，对样品进行固定处理。

–固定剂的选择要根据样品类型和所需观察结构的特点。

4.去除固定剂–使用缓冲液或盐水洗涤样品，去除多余的固定剂。

–洗涤时间和次数需根据固定剂的种类和浓度进行调整。

5.后续处理–为了进一步增强对样品的对比度和分辨率，可以对样品进行染色处理。

–常用的染色剂包括重质金属盐、乙酸铀和铅染色剂等。

6.样品包埋–涂覆样品表面的浸渍剂，如环氧树脂或丙烯酸树脂。

–用于支撑样品的网格可以放置在浸渍剂中。

7.制备超薄切片–使用超薄切片机将包埋的样品切割成透明的超薄切片。

–切片的厚度通常控制在70-100纳米之间。

8.将切片转移到网格上–使用特殊工具将切片转移到电子显微镜用的网格上。

–要小心操作，避免切片受到损坏或污染。

9.干燥和稳定–将转移到网格上的切片进行脱水和干燥处理，以提高稳定性。

–常见的方法包括用醇溶液进行脱水，然后使用气体吹干。

10.开始透射电镜观察–将处理完的样品装入透射电镜，调整参数和放大倍数。

–进行细胞结构和超微结构的观察和拍摄。

结论透射电镜细胞样品制备是进行TEM观察的关键步骤。

通过选择合适的细胞样品、适当的固定、去固定剂和染色处理，以及正确的样品包埋和超薄切片制备，可以确保样品的质量和结构完整性。

准确无误的制备流程能够为细胞学研究提供可靠的数据支持。

注意事项1.样品的选择要根据研究目的和所需观察结构的特点进行。

常规生物样品TEM检测流程常规生物样品包括动物、植物、细胞、细菌等生物样品，主要用于形态学研究。

一、取样固定需在自己实验室完成取样固定：取鲜样并及时置于2.5%戊二醛溶液中，4℃过夜。

注意：（1）组织样品：样品需切成约1mm3大小（为确保植物组织样品充分固定，请通过抽真空使样品完全沉于底部）；（2）细胞样品：细胞数量至少106个，细菌类样品数量至少108个，即在1.5ml离心管中离心收集后约半颗绿豆大小。

二、网站预约流程1.制样预约登录“上海交通大学分析测试中心”官网，预约生物电镜样品制备系统（房间号E231，预约链接）。

注意：此设备每周五下午16:30开放下一周的实验，校内外同步。

根据所预约的时间至上海交通大学转化医学大楼E231实验室进行为期2天的生物样品电镜前处理（操作包括漂洗、脱水、渗透、包埋。

分析测试中心提供相关试剂）。

2.切片预约样品制备完成后，登录“上海交通大学分析测试中心”官网，预约超薄切片机，（房间号E220，预约链接：）注意：此设备每周四下午13:30开放下一周的实验，校内外同步。

3. 电镜预约（校内时段，校外顺序）务必在确认切片完成后，才能预约电镜。

3.1 如果只形貌观察，预约E116的生物型透射电镜（预约链接：）或E112的120kV透射电镜（）或E143的生物型场发射透射电镜（）。

注意：E116的生物型透射电镜和E112的120kV透射电镜每周五上午8:30开放下一周的实验。

E143生物型场发射透射电镜每周五下午13:00开放下一周的实验。

3.2 如果需要高分辨和能谱分析，则需预约E147的场发射透射电镜（预约链接：）或E145的材料型场发射透射电镜（预约链接：）。

这2台电镜每周五下午13：20开放下一周的电镜实验。

透射电镜使用流程The transmission electron microscope (TEM) is a powerful tool usedin the field of materials science and nanotechnology. 透射电镜（TEM）是在材料科学和纳米技术领域中使用的一种强大工具。

It allows researchers to see the internal structure of materials at a very high resolution, down to the atomic level. 它允许研究人员以非常高的分辨率，甚至到原子水平，看到材料的内部结构。

The process of using a TEM involves several steps, each of which is essential for obtaining accurate and meaningful results. 透射电镜的使用过程涉及几个步骤，每个步骤对于获得准确和有意义的结果都是至关重要的。

Firstly, the sample preparation is crucial in the TEM imaging process. 首先，样品制备在透射电镜成像过程中至关重要。

The sample must be thinly sliced to allow electrons to pass through it, and it must be free from any contaminants or artifacts that could affect the imaging process. 样品必须切成薄片，以便电子可以穿过它，并且必须没有任何可能影响成像过程的污染物或人为伪迹。

This often involves using specialized tools such as microtomes to achieve the desired thickness, as well as careful handling to prevent any damage to thesample. 这通常涉及使用专门的工具，如显微切片机，以达到所需的厚度，以及谨慎处理，以防止对样品造成任何损害。

双束电镜FIB制备TEM样品流程（赛默飞双束电镜制备透射样品操作步骤及参数）双束电镜（FIB-TEM）制备透射电子显微镜（TEM）样品是一种常见的技术，用于研究材料的微观结构和组成。

在这个过程中，双束电镜将离子束和电子束结合起来，以在材料表面切割出一块具有所需特征的样品，并使用离子束修整和形成成TEM样品。

1.样品准备：a.研磨样品：使用砂纸和研磨液研磨样品的表面，以去除粗糙度和损伤层。

b.清洗样品：使用超声波清洗器将样品浸泡在去离子水中，以去除杂质。

2.样品粘附：a.选择适当的聚合物材料将样品固定在支撑剂上，例如丙烯酸甲酯聚合物。

b.将其固定在样品针或样品夹上。

3.聚焦离子束和电子束：a.使用电镜系统进行初步聚焦，以获得适当的放大倍数和对焦清晰度。

b.使用碳纳米管或金属标记物对样品进行标记，以在后续操作中定位。

4.切割样品：a.在样品表面选择需要进行切割的区域。

b.调整离子束的加速电压和电流以实现所需的切割速率和深度。

c.用离子束切割样品，形成所需的形状和尺寸。

5.修整样品：a.使用离子束缩小和精修样品的尺寸和形状。

b.调整离子束参数，以达到所需的表面光洁度和纵深。

6.清洗样品：a.使用离子束在样品周围清除杂质和残留物。

b.使用高压气体将离子束清洗后的样品吹干。

7.金属镀覆：a.使用离子束沉积金属薄层，以保护样品的表面，并提高导电性。

b.选择适当的金属材料和沉积厚度。

8.报废样品：a.使用离子束割断样品与支撑剂之间的连接，将样品从支撑剂上剥离。

b.必要时进行作废样品处理。

在实施上述步骤时，应控制以下参数：-离子束加速电压和电流：用于控制切割速率和深度，以及样品表面的修整。

-电子束聚焦参数：用于放大和对焦样品。

-离子束缩小参数：用于修整样品的尺寸和形状。

-金属沉积厚度：用于保护样品表面和提高导电性。

电镜检测流程引言：电子显微镜（electron microscope，简称EM）是一种利用电子束代替光束进行成像的显微镜。

相比光学显微镜，电子显微镜具有更高的放大倍数和更高的分辨率，因此在各个领域都有广泛的应用。

本文将介绍电镜检测的基本流程，以及常见的几种电子显微镜的类型。

一、样品制备在进行电镜检测之前，首先需要对待检样品进行制备。

样品制备的目的是使样品具备透射电镜或扫描电镜观察的条件。

1. 透射电镜样品制备：透射电镜需要制备非常薄的样品，通常要求样品厚度在100纳米以下。

常用的样品制备方法包括切片、薄膜法、冷冻法等。

切片法是将样品切成薄片，然后使用特殊的工具将薄片转移到铜网或碳膜上。

薄膜法是通过蒸发或溅射等方法在网格或碳膜上制备一层薄膜，然后将样品放置在薄膜上。

冷冻法是将样品冷冻至极低温，然后通过切片机将样品切成薄片。

2. 扫描电镜样品制备：扫描电镜对样品的制备要求相对较低，通常只需要将样品固定在导电底座上，并进行金属镀膜以增加导电性。

常用的固定方法包括化学固定、冻干法和浸渍法。

金属镀膜通常使用金或金-铂合金进行镀膜。

二、电镜操作步骤电镜检测的操作步骤包括样品安装、对焦调节、电子束参数设置、图像获取等。

1. 样品安装：将样品安装在电镜样品台上，并确保样品与电子束的路径对齐。

透射电镜需要将样品安装在透明的网格或碳膜上，而扫描电镜则将样品安装在导电底座上。

2. 对焦调节：通过调节透射电镜的对焦环，或者调节扫描电镜的工作距离，使样品处于最佳对焦状态。

对焦时需要根据样品的特点和检测要求进行调节。

3. 电子束参数设置：根据样品的性质和检测要求，设置透射电镜或扫描电镜的电子束参数。

透射电镜的参数包括透射电镜的加速电压、聚焦电流和透射电镜的模式等；扫描电镜的参数包括扫描电镜的加速电压、孔径和扫描速度等。

4. 图像获取：根据样品的特点和检测要求，选择合适的检测模式，并进行图像获取。

透射电镜可以通过透射模式获取样品的内部结构信息，而扫描电镜可以通过扫描模式获取样品表面的形貌信息。

关WDT ，初始化时钟按键LED ，开预应用模式计数至TACCR1时，CCIFG=1进A1中断N appMode=APP_MODE?原亮变灭原灭变亮 LED 清零按键?进接口中断程序，关按键中断，WDT 设定时器模式，延时后进WDT 中断程 序，恢复按键中断去抖完成。

返回接口中断程序使能WDT 中断，开启应用模式配置Adc sensor 通道，采样转换开始。

关CPU 等待，采样完成后进ADC10中断程序，开CPUtC=采样值，ave=tC配置PWM 定时器。

timerMode=PWM_MODE采样转换开始，CPUOFF ，完成采样后①进WDT 中断程序，关WDT 中断开WDT ，开按键中断；②进ADC10中断开CPU取连续采样的8个值，求平均给ave按键？进按键中断程序，经WDT 中断程序完成去抖，开WDTtC=ave ；cU=1Timer_Mode=UART_MODE Y自动更新？YNYNY N(a)(c)cU=1？Transmit ，准备发送，TAR 计数 计时中断产生，进TimerA0中断程序已发完？关中断cU=0Transmit ，准备发送，TAR 计数 计时中断产生，进TimerA0中断程序已发完？关中断uartUpdateTimer=INTERV ALTimer_Mode=PWM_MODEtD=ave-tC设置发 出模式 最后一位？复位 右移 一位 设置发 出模式 最后一位？复位 右移 一位 N YNNYYYNYN(a)(b)(c)tD<-5?tP=COLD ，LED1灭tP!=SAME ？TACCR1值改变，PWM 波占空比改变 （红色LED 为正偏移，绿色LED 为负偏移）1242039tD>5?tP=HOTLED0灭Tp=SAME 1、2全灭YY YNNN While(1)(b)。

tem样品制备以及浓度要求tem样品制备以及浓度要求是生物、化学等领域实验室常见的操作步骤。

为了获得高质量的tem样品，制备过程和浓度控制至关重要。

本文将详细介绍tem样品制备的流程与方法，以及各种溶液的浓度要求。

一、tem样品制备概述tem样品制备主要包括样品处理、固定、切片、染色、洗涤与脱水、透明化与包埋、切片染色、观察与分析等环节。

在实际操作中，每个环节都需要严格把控，以保证样品的质量和制备效果。

二、制备流程与方法1.样品处理：首先从实验动物或植物中获取所需的组织样品，将其浸泡在生理盐水或PBS缓冲液中，以保持细胞形态。

2.样品固定：将处理好的样品转移到固定液中，常用的固定液有戊二醛、多聚甲醛等，固定液浓度为4%。

固定过程中，应确保样品充分浸泡，以达到良好的固定效果。

3.切片：将固定好的样品进行切片，常用的切片设备有旋转切片机和冷冻切片机。

切片厚度根据实际需求和观察仪器而定，一般为50-70μm。

4.染色：将切片转移到染色液中，染色液可以是Goat Solution、抗兔/鼠IgG等，浓度为1:50-1:100。

染色过程中，需注意温度和时间控制，以保证染色效果。

5.洗涤与脱水：染色后，用PBS缓冲液轻轻洗涤切片，去除多余的染色剂。

然后进行脱水，脱水液可以采用系列酒精（70%、80%、90%、100%），每个浓度停留3-5分钟。

6.透明化与包埋：将脱水后的切片转移到透明液中，常用的透明液有丙酮、乙酸乙酯等，浓度为1:1。

透明化后，将切片转移到包埋液中，包埋液可以选择丙烯酸、环氧树脂等，浓度为1:1。

7.切片染色：将包埋好的切片进行切片染色，染色液可以是Envision、DAB等，浓度为1:50-1:100。

染色过程中，注意控制温度和时间。

8.观察与分析：将染色后的切片放置在显微镜下观察，采集图像并进行分析。

观察指标包括细胞形态、组织结构、染色深度等。

三、浓度要求1.固定液浓度：4%2.染色液浓度：1:50-1:1003.洗涤液浓度：PBS缓冲液4.脱水液浓度：系列酒精（70%、80%、90%、100%）5.透明液浓度：1:16.包埋液浓度：1:1通过以上详细的tem样品制备流程和浓度要求，可以确保获得高质量的tem样品。

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NOTE:1．场发射灯丝（30~40万）真空为1，Column小于10（一般为6）.2．样品杆（老师操作）3．CCD相机（光圈过小，光强太大，会破坏相机）TEM 简明操作程序：1．确认Column真空值小于10，再开启阀门。

点击Col. Valves Closed 按钮，使其变灰。

2．缩放样品，寻找自己感兴趣的观察区域。

缩小样品（Magnification）的同时，应放大光斑照明面积（Intensity）。

视野（5mm）。

Magnification钮：顺时针放大，逆时针缩小；Intensity钮：顺时针扩散，逆时针汇聚。

3．找到需要拍摄的区域后，将光发散至满屏，插入CCD相机（carmer inserted），按R1，将大荧光屏抬起。

(只能调焦距)4．细调Focus，至正焦略微欠焦的最佳聚焦值。

（略微白边）Focus钮：顺时针过焦，逆时针欠焦；Focus Step钮：越大，粗调，越小，细调。

5．进行拍照（start acquire），获取照片。

保存图片：保存文件夹E盘→导师全拼→日期→编号①小斧头→Save numbered →文件夹→*.文件类型为gant3②每点击一张图片→点击一次保存按钮右边的小图框（123）第四个③file→BCF(首字母)→文件夹→OK④查看相应文件夹，确定保存→删除6．拍照完毕，按R1，关闭大荧光屏；退出CCD相机；关闭阀门，点击Col. Valves Closed阀栏(物镜光栏)的使用：①大旋钮关闭（7）→打开（4）。

（在放大倍数不超过40万时可打开阀栏）。

②大旋钮上边的小旋钮调节阀栏光圈上下，右边的调节阀栏光圈左右。

③作用：去除衍射的白边，适用于低倍和高倍晶格条纹：①样品厚度小于10毫米，40万倍以上才可以看到晶格条纹。

若图像漂移严重，可将曝光时间由1改为0.5.②出现衍射环为多晶；无环时为单晶，当出现的亮点越多、越亮结晶性能越好。

若不出现亮点，为非晶。

若想看晶格条纹，需做衍射花样。

TEM水泥车作业流程入门手册
前言：TEM双机双泵水泥车对于刚参加工作的水泥车操作员来说：是神秘的，也是好奇的，怎么样学好，用好水泥车，更快更好的投入到工作岗位上，水泥车的作业流程则是新员工学习的必经之路。

TEM水泥车作业流程入门手册，是利用AutoCAD将流程以三维立体的效果，在电脑显示器上呈现出来，打破了二维示意图和水泥车实体对照操作的的局限性，使新员工能够以更直接，更实际的视野来学习作业流程。

目录：一、整体流程图
二、重力注液流程
三、增压注液流程
四、注水泥流程
五、混浆池的结构
一、整体流程
混浆池
水柜
增压离心泵
供水接头
循环离心泵供水离心泵
蝶阀
二、重力注液流程
1#
2#
3#
4#
三、增压注液流程
四、注水泥流程
五、混浆池的结构
扩散箱
混合腔
混浆池
搅拌器。