生物指示剂活性确认
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3M压力灭菌用生物指示剂的使用方法压力灭菌用生物指示剂1262该压力蒸汽灭菌生物培养指示剂用于压力蒸汽灭菌效果的生物监测(包括下排气锅和预真空锅);通过培养基颜色变化,反应嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活,从而判断压力蒸汽灭菌生物监测结果。
1. 将压力蒸汽灭菌生物培养指示剂放于一标准测试包中;2. 按照国家规范, 分别将测试包放于锅内不同位置;3. 灭菌完毕, 取出该生物指示剂;4. 挤破内含的安瓿, 与一支对照管一起放于56℃培养锅内培养;48小时后阅读结果。
结果阅读:1.培养后指示管不变色(呈紫色), 表示灭菌通过;2.培养后指示管变色(呈黄色), 表示灭菌不通过,(必须及时查出灭菌失败原因)。
3.同时培养的对照管应为阳性(呈黄色), 如阴性,可能的原因为: 培养条件不符合要求; 生物指示剂有问题; (应及时查出阴性原因)。
注意事项:1. 灭菌完毕, 含生物指示剂的包裹很热并有一定压力; 需至少冷却10分钟以上, 否则可能引起塑料管内的安瓿破裂, 飞溅的碎片导致损伤;2. 只有对照管为阳性, 其生物监测结果才算有效。
3. 贮存于室温: 15-30℃; 相对湿度为35-60%;避免靠近灭菌器和化学消毒剂。
1292该生物指示剂可用以121℃下排气和132℃预真空压力蒸汽灭菌锅。
3MATTESTTM压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速)在与3M ATTEST 290 培养锅共用时, 通过酶活性的灭活与否,探测嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活,从而判断压力蒸汽灭菌结果。
使用方法:1、在生物指示剂标签上注明灭菌器锅号, 负荷数量, 灭菌日期; 不要在指示剂的瓶或盖上另贴一个标签。
将生物指示剂放于一个标准测试包内,并置于最难灭菌的位置。
2、将含有生物指示剂的测试包放在灭菌器最难灭菌的位置,通常是灭菌器底层,近门或排气口上面。
3、正常装载。
4、灭菌循环完毕, 取出生物指示剂。
5、灭菌结束后,从灭菌器内取出含有生物指示剂的测试包,打开散热5分钟后才能取出生物指示剂。
生物指示剂的原理生物指示剂是一种用于检测物理、化学因素对生物体影响的工具。
它能够通过对生物体的生理、生化反应和生长发育等方面的观察,反映出环境因素的变化。
生物指示剂可以用于监测环境污染、评价生态系统的健康状况、研究生态系统的功能和相互作用等方面。
本文将从生物指示剂的原理、应用和发展等方面进行阐述。
一、生物指示剂的原理生物指示剂的原理是基于生物体对环境因素的敏感性和反应性。
生物体对环境因素的变化会产生一系列生理、生化反应和生长发育等方面的变化,这些变化可以被观察到和测量。
通过对这些变化的观察和测量,可以得出环境因素的变化情况。
生物指示剂的原理可以用以下几个方面来进行解释:1. 生物体的生理和生化反应生物体的生理和生化反应是一种对环境因素变化的直接反应。
例如,植物叶片的叶绿素含量、叶片的氮、磷含量等,都可以反映出土壤养分的状况;而动物细胞内酶的活性、血液中的生化指标等,都可以反映出环境中毒物质的影响。
2. 生物体的生长发育生物体的生长发育是对环境因素变化的一种长期反应。
例如,树木的生长速度、植物的繁殖能力等,都可以反映出环境因素的变化情况。
3. 生物体的种群结构和数量生物体的种群结构和数量是对环境因素变化的一种间接反应。
例如,某种昆虫的数量和种群结构的变化,可以反映出环境中的污染程度和生态系统的健康状况。
二、生物指示剂的应用生物指示剂可以用于监测环境污染、评价生态系统的健康状况、研究生态系统的功能和相互作用等方面。
1. 监测环境污染生物指示剂可以用于监测环境污染。
例如,可以利用苔藓、地衣等生物指示剂来检测大气中的污染物质,例如二氧化硫、氮氧化物等。
苔藓和地衣对这些污染物质十分敏感,它们的生长情况和化学成分的变化可以反映出环境中的污染程度。
2. 评价生态系统的健康状况生物指示剂可以用于评价生态系统的健康状况。
例如,可以利用鱼类、昆虫等生物指示剂来评价水域的生态系统健康状况。
鱼类和昆虫对水质的变化很敏感,它们的数量和种群结构的变化可以反映出水域的健康状况。
生物活性物质的分离和鉴定方法生物活性物质是一类对生命有重要作用的化合物,例如药物、植物中的有效成分等。
它们的分离和鉴定方法对于药物研发、天然药物提取等方面有着重要的意义。
本文将介绍生物活性物质的分离和鉴定方法。
一、生物活性物质的分离方法1.色谱法色谱法是分离生物活性物质的一种常用方法。
它使用固/液相作为移动相,在固定的填充物上进行柱层析、薄层层析或者高效液相层析等方法将样品组分分离开来。
通过采用不同的填充物和固/液相条件,可以对不同类型的生物活性物质进行有效地分离和纯化。
2.热解法热解法是一种将不同组分分离的方法。
它利用样品中不同组分的不同挥发性,在一定的温度下进行加热,从而实现组分的分离(不同组分的沸点不同)。
利用热解法可以提取天然产物,如香草中的香草酸和香豆素等。
3.抽提法抽提法也是一种常用的天然产物提取方法。
比如常见的用于提取酮体类天然产物的氢氧化钠-酚酞法。
在酸性条件下,用酚酞指示剂标示溶液中碘对应的浓度。
将氢氧化钠溶液加入样品中,使其中的酮体迅速脱羧,生成相应的aromatic acid,同时碘氧化成碘的氧化态+5,和酚酞反应生成红色的碘酸酚酞。
其中的酮体的质量浓度可以根据酚酞的显色程度进行比色测定。
二、生物活性物质的鉴定方法1.逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)RT-PCR是一种将RNA转换为DNA的方法,在转录后将RNA 转换为DNA,通过聚合酶链式反应扩增重要DNA序列,如生长因子、转录因子、糖酵解酶和抗氧化酶等的基因。
利用RT-PCR可以快速、灵敏地检测特定基因的表达情况,同时可以扩增少量的RNA样品,是一种非常有效的生物活性物质鉴定方法。
2.质谱分析质谱分析是一种分析生物活性物质的重要工具。
它可以分析样品分子的质量和数量,并结合色谱技术以进一步分离组分。
质谱分析可以用来鉴定样品中类似生物活性物质的结构,以及尿液和血浆中的蛋白质分离等。
3.生物学活性分析生物学活性分析可以用来检测样品中具生物学最活性的成分。
环氧乙烷灭菌生物指示物选择、应用与缩短培养时间(RIT)的验证生物指示物是指一类特定的微生物和载体结合,经过特定方法制备的生物制品,这些特定微生物比普通微生物对相应的灭菌模式具有更强的耐受性,用于指示微生物的死亡情况,以反映灭菌效果。
由于生物指示物可以真实可靠的反映灭菌过程中有关时间、温度和湿度等多个因素的关系,因此广泛应用于环氧乙烷等灭菌工艺的验证与日常监控。
验证时应确认所选择的生物指示物的抗力的适宜性,否则将影响灭菌验证的效果与可靠性。
生物指示物的原理是通过检测其中的细菌芽孢是否存活来判断产品是否达到完全灭菌的效果。
产品上的微生物无法经过肉眼观察,而且无法通过灭菌后的抽样检测来确定该批次产品是否合格,是一个特殊过程。
我们只能通过生物指示物中的细菌芽孢模拟产品上带菌的最坏的情况。
生物指示物中的细菌芽孢也是微生物的一种,而且所有对灭菌效果有影响的因素都对其有作用。
同时,由于采用环氧乙烷等最终灭菌的产品,其生产过程中初始污染菌的数量是受控的,其数量远远低于生物指示物所含的菌体数量。
BI中选择的菌株比生产过程中自然环境下所发现的菌株是更难杀灭的菌株,具有更高的抗力。
如果生物指示物中的细菌芽孢全部被杀死,就等同于产品中的微生物全部被杀死。
故此,在环氧乙烷灭菌工艺里面,要确认灭菌是否合格,必须使用生物指示物,没有可以替代的手段或方法。
但是应当注意,生物指示物并不是用来指示与证实灭菌后的物品确实无菌。
也就是说即使生物指示物培养无菌生长,并不能证实或保证灭菌物品100%无菌。
生物指示物只是用来测试某一个已确认的灭菌过程和采用的的灭菌设备的有效性,这种测试的实施原理是:按照无菌保证水平对微生物致死性进行评估,以确定灭菌物品中微生物存活的概率足够低。
1生物指示物(Biological Indicators,BI)生物指示物是一类特定微生物经过确定制备方法制造的生物试剂。
生物指示物对于某种灭菌工艺具有特定的耐受性(USPS1035《Biological indicators for Sterilization》)。
生物指示剂监测阳性处理流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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生物指示剂使用方法生物指示剂是一种用来检测生物体活性、生长情况或生物学过程的工具。
根据不同的应用目的和需要,生物指示剂可以是细菌、酵母、植物细胞等。
下面将详细介绍生物指示剂的使用方法。
首先,使用生物指示剂前需要准备好培养基,并确保培养基的成分符合需要。
培养基是供生物指示剂生长发育所必需的营养物质,可通过配制或购买得到。
通常的培养基成分包括碳源、氮源、生长因子、无机盐等。
根据具体需求,可以添加适当的药品或抗生素以防止细菌污染。
接着,取出所需的生物指示剂,可以是培养基上生长的细菌或培养好的酵母细胞等。
要保证生物指示剂的纯度和活性,可以通过无菌技术操作来确保。
然后,在制备好的培养基上均匀涂布生物指示剂。
可以使用吸管、滴管或移液器等工具将生物指示剂均匀涂布在培养基表面。
为了确保涂布的均匀性,可以采用十字交叉或螺旋形涂布法,将生物指示剂涂布在培养基的不同位置。
接下来,将涂布好生物指示剂的培养基放置在适当的温度和湿度条件下进行培养。
不同的生物指示剂对培养条件有不同的要求,需要根据实验和应用目的进行合理调整。
通常情况下,细菌和酵母的培养温度为30-37摄氏度,湿度为相对湿度80-90%。
在培养过程中,需要定期观察生物指示剂的生长情况和表现。
可以通过目测、显微镜观察或光密度测定等方法来评估生物指示剂的活性和生长情况。
观察指标可以根据实验目的和应用需求来确定,例如细菌生长的菌落形态、颜色、大小等。
最后,根据实验或应用的需要,可以选择在生物指示剂生长达到一定程度后进行各种实验或应用。
例如,可以用生物指示剂来测试特定物质的抗菌活性、抗真菌活性、细胞毒性等。
需要注意的是,在使用生物指示剂的过程中,应该注意无菌操作,避免外源性细菌或真菌的污染。
同时,要严格按照实验室和安全卫生要求进行操作,避免对人体和环境造成危害。
总结起来,生物指示剂的使用方法包括准备培养基、涂布生物指示剂、培养、观察和实验等步骤。
通过合理操作和观察,可以使用生物指示剂来检测生物体活性、生长情况或生物学过程。
荣仁药业
1.目的:规范本公司生物指示剂活性确认操作,保证测试结果准确、可靠。
2.范围:适用于本公司购买的生物指示剂。
3.职责:中心化验室管理人员、QA人员负责监督本规程的执行;QC微生物实验员按本规定严格执行。
4.内容:
4.1生物指示剂活性确认
取同一批次的生物指示剂2支,将塑料瓶中的菌纸片取出一同放进1支装有4个玻璃珠和5.0ml的0.9%无菌氯化钠溶液的试管中。
将试管振摇5-10分钟,直到菌纸片浸渍成浆状,再往试管中加入5.0ml0.9%无菌氯化钠溶液,再振摇1分钟。
振摇完毕后立即从中吸取1.0ml溶液至0.9%无菌氯化钠溶液9.0ml的试管中,作为1号管,同法制2号管。
将1号管于80℃水浴中放置15min,作为热处理。
分别将1号和2号管做连续10倍稀释(10-1、10-2、10-3),然后吸取后两个稀释级(10-2、10-3)的菌悬液1ml,各加入两个无菌平皿中,然后倒入15~20ml冷却至50℃左右的胰酪大豆东琼脂培养基,混合后待冷却。
倒置平皿在56℃下培养48小时。
QC-SOP(B)007-00 第1页共2页
荣仁药业
培养结束后,计数每个平皿碟上的菌落数,计算热处理组和未处理组各稀释液中的平均菌落数,然后计算出生物指示剂纸片上平均实际活菌数和活芽孢数。
生物指示剂合格标准:每条带菌纸片上的平均活菌数不小于制造商标明的平均数的95%,同时纸片上的活芽孢数也不小于活菌数的一半,则该批次生物指示剂判定为合格。
将结果记录在“生物指示剂的活性确认表”上,每批购买的生物指示剂均应进行本项检查。
经确认批次的生物指示剂若用于验证,还应将该表附在相应的验证文件中。
5、附件:
QC-SOP(B)007-00 第2页共2页。