植物组织培养复习提纲

1.植物组织培养按培养对象分为______ 、 _______ 、________ 、 ________ 、________ 等几种类型。

2.一个己停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成耒分化的愈伤组织的现象称为n tv3.不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生 _________ 来杀菌的；升汞是靠 ________ 来达到灭菌日的。

4.去除植物病毒的主耍方法是 _____ 和_______ 两种方法，当把二者结合起來脱毒效果最好5.在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以 __________ mm、带 ________ 个叶原基为好。

6.White培养基________ 浓度低，适合生根培养。

7.一个已停止分裂的成熟细胞转变为_________ 状态，并形成_________ 的现象称为“脱分化”。

8.BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进 ________ 的生长，这时_________ 占主导地位；比值高促进_________ 的生长，这时 _________ 占主导地位。

9.进行植物组织培养最基本的前提条件是 _____ 。

1、植物组织培养的理论基础是植物细胞全能性。

2、组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器、空调机、夭平、显微镜、蒸饱水发生器等。

3、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的碳源，而且还能维持培养菇渗透压4、培养基灭菌一般在-108 kPa的压力下,锅内温度达121 °C ,维持20-30 min o5、在离体叶培养中，6・BA和KT利于芽的形成:24D利于愈伤纟FI织的形成6、在离体叶组织脱分化和再分化培养屮，茎和芽的分化主要有4个途径：方•接产生不泄芽、由愈伤组织产工不定芽、胚状体形成、形成球状体或小鳞茎等途径。

7、目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径是茎尖培养脱毒。

植物组织培养复习提纲（仅供参考，关键在于全面复习掌握！）一、主要专业术语细胞全能性：在多细胞生物中每个体细胞的细胞核具有个体发育的全部基因，只要条件许可，都可发育成完整的个体。

脱分化：已经分化的植物器官、组织或细胞，当受到创伤或进行离体（也受到创伤）培养时，已停止分裂的细胞，又重新恢复分裂，细胞改变原有的分化状态，失去原有结构和功能，成为具有未分化特性的细胞。

愈伤组织：指切取植物体的一部分，置于含有生长素和细胞分裂素的培养液中培养，诱导产生的无定形的组织团块。

人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体（包括体细胞胚和性细胞胚），包裹在含有养分和具有保护功能的物质中，并在适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体。

植物快速繁殖：采取培养基配制，材料灭菌，无菌培养，幼苗转移到苗床，成苗转至大田栽种五步走的繁殖培养方式。

单倍体：体细胞中含有本物种配子染色体数(1n)的个体二倍体：体细胞中含有两个染色体组的生物个体胚乳培养：将胚乳从母体上分离出来，放在无菌的人工环境条件下使其进一步生长发育形成幼苗的技术。

连续培养：连续培养又叫开放培养，是相对分批培养或密闭培养而言的。

是采用有效的措施让微生物在某特定的环境中保持旺盛生长状态的培养方法。

胚状体：离体培养条件下，没有经过受精过程，但是经过了胚胎发育过程所形成的胚状类似物看护培养：将亲本愈伤组织或高密度的悬浮细胞同低密度细胞一起培养，以促进低密度细胞生长、分裂的培养方法。

植物种质保存：在适宜环境条件下贮存种质基因载体,使蔬菜种质保持生命力和遗传性的技术。

二、主要知识点1、植物组织培养成功的关键是什么？1.无毒无菌的环境2.生长素或生长素类似物3.通常用固体培养基(琼脂)4.先进行植物组织或器官的脱分化5.长出根来后要保证根呼吸所需氧气2、植物外植体的表面消毒剂种类1、漂白粉（1%~10%的滤液）2、次氯酸钠溶液（0.5%~10%）3、氯化汞（0.1%~1%）4、酒精（70%~75%）5、过氧化氢（3%~10%）6、新洁尔灭等。

组培复习材料一、名词解释1、培养基：是离体植物（外植体）赖以生长、分化的基础，是根据植物的需求，人工配制的含有各种营养成分的营养液。

2、液体培养：把细胞或生物体的一部分，置于液体培养基中使其发育，并不断振荡，使之均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法。

3、种子培养：是成熟种子和发育不全的未成熟种子的无菌培养。

4、叶培养：从母体植株上将叶组织（包括叶原基在内）切下，放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。

5、热处理脱毒：在一定范围内，用高温处理可部分或完全钝化植物组织中的某些病毒而不伤害或很少伤害植物本身的脱毒方法。

6、花药培养：是把花粉发育到一定阶段的花药接种到培养基上，来改变花粉的发育程序，使其分裂形成细胞团，进而分化成杯状体，然后再生植株，或形成愈伤组织，由愈伤组织再分化成植株。

7、连续培养：是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。

（培养过程中，不断注入新鲜培养基，排掉等体积用过的培养基，或者抽取悬浮培养物，使培养物的营养物质得到不断补充，从而保持其恒定体积的培养。

——8、分批培养：指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养，建立单细胞培养物的培养方式。

（细胞生长在固定体积的培养基中，当主要营养物质耗尽时，细胞的分裂和生长即停止。

）二、简答题1、MS培养基特点。

答：MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，具有高含量的氮、钾，尤其是硝酸盐用量大，还有一定数量的铵盐，其养分的数量和比例合适，不需要添加更多的有机附加物，就能满足植物组织对矿质营养的要求，加速愈伤组织和培养物的生长，当培养物就不转移时仍可维持其生存。

目前应用最广泛。

2、植物组培生产特点。

答：①和传统的生产方式相比，具有不占耕地、生产不受季节限制而且能够整年连续进行、不受灾害性天气和病虫害影响的特点；②具有人为可控性，可采用更适合于植物生长的“培养基”代替土壤提供养分和生长调节物质；③具有很高的生产效率。

植物组织培养知识点归纳教学提纲第⼀章1、植物组织培养：是指在离体条件下，利⽤⼈⼯培养基对植物的器官、组织、细胞、原⽣质体等进⾏培养，使其长成完整植株2、外植体：在植物组织培养中，由活体（in vivo）植物上提取下来的、接种在培养基上的⽆菌细胞、组织、器官等均称为外植体。

3、愈伤组织：指在⼈⼯培养基上由外植体长出来的⼀团⽆序⽣长的薄壁细胞。

4、应⽤⼀、农业上的应⽤1. 种苗快速繁殖(rapid propagation)2.⽆病毒苗(virus free)的培养3.在育种上的应⽤(breeding)（1）倍性育种，缩短育种年限，杂种优势明显；（2）克服远缘杂交的不亲合性和不孕性（胚培养）；（3）保存种质（4）创造变异⼆、在遗传学、分⼦⽣物学、细胞⽣物学、组织学、胚胎学、基因⼯程、⽣物⼯程等⽅⾯的应⽤。

⽤于基因⼯程技术创造植物新种质。

⽤于植物⽣长发育理论研究，包括⽣理学、病理学、胚胎学和细胞与分⼦⽣物学等。

三、利⽤组织培养材料作为植物⽣物反应器第⼆章1、细胞全能性（Totipotency）：指任何具有完整的细胞核的植物细胞都拥有形成⼀个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能⼒。

2、细胞分化（cell differentiation）：指导致细胞形成不同结构，引起功能或潜在的发育⽅式改变的过程。

3、脱分化（Dedifferentiation）：指离体条件下⽣长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构和功能⽽恢复分⽣状态，形成⽆组织结构细胞团或愈伤组织的过程。

4、再分化（Redifferentiation）：指脱分化的细胞重新恢复分化能⼒，形成具有特定结构和功能的细胞、组织、器官甚⾄植株的过程。

5、植物组织培养中常遇到的问题以及解决措施⼀、污染及防治：1、真菌污染后，如果已形成孢⼦，则必须经⾼压灭菌后扔掉。

但若是细菌污染，只要及时发现，将材料上部未感菌的部分剪下转接，材料仍可使⽤。

2、⽤抗⽣素等杀菌药剂的处理，会影响植物材料正常⽣长。

植物组织培养复习资料一、名词解释。

（每个3分，共24分）１、植物组织培养：在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或发育成完整植株的技术。

又称植物离体培养。

２、细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。

3、脱分化：离体培养条件下生长的器官、组织、细胞，经过细胞分裂或不分裂而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程。

4、外植体：从活体植物上切取下来，用以进行离体培养的那部分组织或器官。

5、单细胞培养：对分离的到的单个细胞进行培养，诱导其分裂增殖，形成细胞团，再通过细胞分化形成芽、根等器官或胚状体，直至长成完整植株的技术。

6、胚状体：亦称体细胞胚。

指在组培过程中，由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。

它具有根、茎结构，能够一次性形成再生植株。

7、平板培养：是将悬浮培养的细胞接种到未固化的薄层培养基中，使其与培养基充分配合，再倒入培养皿中进行培养的方法。

8、人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒状。

9、次生代谢产物：指植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物，其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。

10、再分化：细胞经过脱分化形成的愈伤组织再次分化，进行器官形成，产丛生芽或胚状体，形成完整植株的过程。

11、无病毒苗:指不含该种植物主要危害病毒的苗木。

二、不定项选择1、培养室里的湿度一般保持在____C_____.A 30~40%；B 50~60%；C 70~80%；D 80~90%2. 下列不属于生长素类的植物激素是____A D____。

A Kt；B IAA；C NAA；D ZT3. 影响培养基凝固程度因素有_______A B C D__.A 琼脂的质量好坏；B 高压灭菌的时间；C 高压灭菌的温度；D 培养基的PH4. 活性炭在组织培养中的作用有_______ABC_。

1、植物组织培养：在无菌条件下，对植物组织，器官，细胞原生质体等离体活材料进行培养促使其生长发育，并再生成完整植株的过程。

2、外植体：植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。

（如器官、组织、细胞、原生质体、种子等）3、愈伤组织：在离体培养的条件下，经过植物细胞脱分化和不断增殖所形成的无特定结构的细胞团或组织。

4、玻璃化现象：在组织培养过程中，培养物叶片或嫩梢呈透明或半透明的水渍状现象。

5、脱分化：一个成熟细胞转化为分生状态并形成为分化的愈伤组织的现象6、再分化：指脱分化形成的愈伤组织细胞在十一的培养条件下，又分化为胚状体，或直接分化出根和芽等器官形成完整植株的过程。

7、细胞的全能性：植物体的每一个生活细胞都具备母体的全套基因，在一定条件下可以发育成完整植株的能力。

8、人工种子：指通过组织培养技术，将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位9、植物离体培养：利用植物细胞的全能性，在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。

10、种子败育：是指由于植物自身的原因导致植物胚胎在发育过程中的任何一个阶段死亡或者即使幼胚发育为成熟种子胚、但在常规条件也不能萌发的现象。

11、双极性：表示具有双向极性电平的脉冲信号激素分类：生长素类细胞分裂素赤霉素脱落酸水杨酸植物组织培养{组织培养、器官培养？胚胎培养？细胞培养、原生质体培养}—--次生代谢物的生产、种植创新和品种选育、植物的快速繁殖、无病毒苗木的培育、人工种子的生产、种质资源的离体保存植物组织培养的大致过程是：在无菌条件下，将植物器官或组织（如芽、茎尖、根尖或花药）的一部分切下来，用纤维素酶与果胶酶处理用以去掉细胞壁，使之露出原生质体，然后放在适当的人工培养基上进行培养，这些器官或组织就会进行细胞分裂，形成新的组织。

植物组织培养复习资料第一章绪论一、概念：植物组织培养：在无菌条件下，将离体的植物器官，组织，细胞以及原生质体，培养在人工培养基上和人工控制的环境中，使其生长，分化，增殖，甚至长出新的植株的过程和技术。

外植体：在无菌条件下，离体培养于人工培养基上的，用于达到某种培养目的的原始植物材料。

培养基：根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求而人工配制的营养基质即为培养基。

细胞全能性：植物体每一个细胞都含有该植物全部的遗传信息，在合适的条件下，具有形成完整植株的能力。

脱分化：一个成熟细胞恢复到分生状态或胚性细胞状态的现象。

再分化：是脱分化细胞重新恢复细胞分化能力，沿着正常的发育途径，形成具有特定结构和功能的细胞。

二、组织培养的类型，不同分类依据。

（根据培养材料不同）可分为植株培养，胚胎培养，器官培养，组织或愈伤组织培养，细胞或原生质体培养5类；（根据培养目的）可分为试管嫁接，试管受精，试管加倍，试管育种等；（根据培养方法）可分为平板培养，微室培养，悬浮培养，单细胞培养等；（根据培养过程）可分为初代培养和继代培养；（根据培养基类型）可分为固体培养和液体培养。

三、三个发展阶段的关键人物。

1，haberlandt---于1902年提出植物细胞全能性理论，被称为“组织培养之父”。

2，white---于1943年出版《植物组织培养手册》。

3，murashine和skoog---在1962年筛选出MS培养基。

四、植物全能性表达的过程培养脱分化再分化培养五、组织培养的特点：1、植物基础学科研究的良好系统。

2、生物技术的基础。

3、经济高效，管理方便，利于自动化。

4、技术含量高，实验误差小，人工控制能力强。

5、生长周期短，生长速度快，实验重复性好。

6、实验材料经济，来源单一。

六、缺点：需要设备负复杂，投入资金多，电能消耗大；对人员技术水平要求高，对实验场所要求也高，不能代替田间试验。

第二章植物组织培养设备与培养条件一、实验室的组成及主要仪器和设备准备室：干燥箱，高压灭菌锅，电子天平，酸度计，水浴锅，冰箱。

植物组织培养是通过无菌操作，把植物的离体器官，组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养并使其发育成完整植株的科学技术。

植物组织培养根据所培养的植物材料的不同，把组织培养分为五种类型：愈伤组织培养，悬浮细胞培养，器官培养，茎尖分生组织培养和原生质体培养。

组织或愈伤组织培养：即狭义的组织培养，是对植物体的各部分组织进行培养，在通过分化诱导形成植株。

愈伤组织：植物受伤之后，在伤口表面形成的一团薄壁细胞。

外植体：用于进行组织培养的组织，器官和细胞。

植物组织培养的理论依据：细胞全能性。

分化：细胞在形态结构和功能上发生永久性适度变化的过程。

脱分化：由失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂，形成无分化的细胞团即愈伤组织的现象。

再分化：由无分化的愈伤组织的细胞再转变成为具有一定结构，执行一定生理功能的细胞团和组织，构成一个完整的植物体或植物器官的现象。

植物细胞全能性的实现途径：必须完成两个条件——要使这些细胞处于离体条件下，解除植物体其余部分对这些细胞的抑制性影响;要给予他们适当的刺激，就是给于它们一定的营养物质和激素的作用。

植物培养的特点：培养条件可以人为控制；生长周期短繁殖率高；管理方便，利于工厂化生产和自动化控制。

植物组织培养的发展史：1.1902年，哈布兰特在细胞学说的基础上，提出细胞全能性概念。

2.1934年，美国植物生理学家White人工培养番茄根，建立了第一个活跃生长的无性繁殖系。

3.1943年，White提出了植物细胞全能性学说培养基：供微生物，植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料。

母液：将所用培养基配方的化学成分按一定比例配成的浓缩液。

称取量=扩大倍数*母液体积吸取量=配制体积/放大倍数=配制体积*培养基浓度培养基PH值过大会变硬生长素的作用具有两面性：一般低浓度促进生长，中浓度抑制生长，高浓度则杀死植物常用生长素名称：IAA 吲哚乙酸天然存在的生长素NAA 萘乙酸应用比较普遍IBA 吲哚丁酸促进发根能力较强2.4-D适用范围狭窄常用生长素作用强弱依次递减：2.4-D NAA IBA IAA常用细胞分裂素名称：6-BA（最常用）KT 激动素ZT 玉米素（效果最好但最昂贵）TAA ZT GA采用过滤灭菌花药培养的最适时期：单核靠边期GA 赤霉素常用培养基：MS培养基无机盐和离子浓度较高，为较为稳定的平衡溶液。

植物组织培养复习1、概念：组织培养：利⽤植物离体器官、组织或细胞(包括原⽣质体)，在适宜的⼈⼯培养基上和⽆菌条件下进⾏培养，使其⽣长、增殖、进⽽发育形成⼩植株的⽅法。

也称之为离体培养（In vitro culture）。

愈伤组织：原指植物在受伤后，于伤⼝表⾯形成的⼀团薄壁细胞。

在组织培养中，指在⼈⼯培养基上由外植体长出来的⼀团⽆序⽣长的薄壁细胞。

外植体：由活植物体上切取下来的可以⽤于组织培养的组织或器官2、为什么说愈伤组织是最为常见的培养⽅式？原因：⼤部分组织培养经历callus再⽣途径长出植株；callus可以⽤于悬浮培养和原⽣质体培养。

3、组织培养的类型有哪些？a按培养⽅法：固体培养、液体培养、看护培养、微室培养、包埋培养等b按培养过程：初代培养、继代培养4、组织培养在园艺业（农业）上的应⽤有哪些？a倍性育种：花药培养、胚乳培养b突变体筛选：愈伤组织培养c创造新种质：细胞融合d克服胚败育：胚培养e植物性药物和⽣物制品的⽣产5、在组织培养技术的发展中做出巨⼤贡献的⼈。

6、⼀个正规的组织培养实验室应具备哪些基本仪器？有何⽤途？烘箱，冰箱，灭菌锅，超净⼯作台，酸度计，摇床，显微镜，天平，培养箱。

玻璃器⽫，微孔过滤器，细胞计数器，接种⽤具。

7、⼀个正规的组织培养实验室应具备哪些房间？洗涤室（区），制备室（区），灭菌室（区），贮放室（区），操作室（区），培养室（区），观察室（区），药品室（区）8、详细叙述组织培养过程中的基本技术规程洗涤，灭菌，⽆菌操作~9、培养基的类型有哪些？a按性质分：基本培养基，完全培养基b按状态分：固体培养基，液体培养基10、培养基的主要成分有哪些？各有何作⽤？a⽆机营养成分：⼤量元素（氮，磷，钾，钙，镁，硫）微量元素（硼、锰、锌、钼、铜、钴、氯、铁）b有机营养成分：含氮有机物（维⽣素、氨基酸）碳源和能源，植物激素c其他成分：活性炭，琼脂，抗⽣素，缓化剂11、配制培养基的基本步骤及注意事项有哪些？选择，配置（取样，加成分，测PH）12、什么是⼈⼯种⼦？有哪些特点与优点？⼈⼯种⼦：(artificial seeds)亦称体细胞种⼦。

绪论课程基本情况植物组织培养：植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养并使其发育成完整植株的科学技术。

简称组培。

也称离体培养或试管培养。

理论依据——植物细胞全能性：任何有完整细胞核的植物细胞，具有全部的遗传信息，在一定条件下均具有发育成一个完整植株的潜在能力。

动植物细胞分化差异。

植物细胞全能性必须满足的条件：1、要使这些细胞处于离体条件下，解除植物体其余部分对这些细胞的抑制性影响；2、要给予它们适当的刺激，就是给予它们一定的营养物质和激素的作用。

植物组织培养过程（无菌环境操作）：外植体→（脱分化）→愈伤组织→（再分化）→试管苗→→植株外植体（离体器官）：由活植物体上切取下来的可以用于组织培养的组织或器官（包括胚、芽茎尖、叶、花瓣等）。

初代培养：指外植体的最初培养。

继代培养：将初代培养得到的培养体移植于新鲜培养基中进行再培养，称为继代培养脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞经过离体培养，产生无结构的愈伤组织或细胞团的过程。

再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化出根或芽等器官的过程。

组织培养类型：根据所培养的植物材料的不同：组织培养；细胞培养；器官培养；胚胎培养；原生质体培养愈伤组织：原来是指植物在受伤之后，在伤口表面形成的一团薄壁细胞。

在组织培养中，它是指在培养基上由培养物产生的无序的薄壁细胞团。

愈伤组织培养：将一个细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过去分化形成愈伤组织，并在体外培养使之再分化成植株的技术。

（最常用）悬浮细胞培养：不断搅动或摇动的液体培养基中培养单细胞或小细胞团的培养方式。

（主要目的生产有用产物）。

器官培养：对植物的根、茎、叶片、花器等各个器官进行离体培养。

（用于苗木快速繁殖）。

茎尖分生组织培养：使用茎尖无病毒分生组织为材料进行培养。

（脱毒培养）。

原生质体培养：去除细胞壁、裸露的原生质体的培养。

（创建种间或属间新品种）。

根据培养过程：初代培养；继代培养；生根培养：根据培养基的物理状态（培养条件）：固体培养；液体培养；半固体培养；双层培养：器官再分化两种方式：器官发生型；胚胎发生型器官发生型：由愈伤组织不同部位产生不定芽或不定根，通常是单极性。

植物组织培养复习资料1、植物组织培养：在⽆菌和⼈⼯控制的环境条件下，利⽤⼈⼯培养基，对植物的胚胎、器官、组织、细胞、原⽣质体等进⾏离体培养，使其再⽣发育成完整植株的过程。

由于外植体已脱离了母体，植物组织培养⼜叫植物离体培养。

2、植物组织培养的特点：⽆菌条件下进⾏；多数情况下是利⽤成分完全不确定的⼈⼯培养基进⾏时；材料为离体状态；可以不断增殖，并通过调整成分控制实验的⽬的；在封闭的容器中进⾏，⽓体通过封⼝材料进⾏交换；环境、温度、光照强度都可⼈为控制。

3、植物组织培养的类型：按培养对象分：植株培养：对完整植株材料的离体⽆菌培养；胚胎培养：从果实或⼦房中分离出成熟或未成熟的胚进⾏离体⽆菌培养的技术；器官培养：以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体⽆菌培养技术；组织培养：对植物体的各部分组织如茎尖分⽣组织、形成层、⽊质部、韧⽪部、表⽪组织、胚胎组织和薄壁组织等，或对植物器官培养产⽣的愈伤组织进⾏培养，⼆者均通过再分化诱导形成植株；细胞培养：对植株器官或愈伤组织上分离出的单细胞、花粉单细胞或很⼩的细胞团进⾏培养，形成单细胞⽆性系或再⽣植株的技术；原⽣质体培养：对⽤酶、物理等⽅法除去植物细胞壁的、裸露的、有活性的原⽣质体团进⾏培养的技术；按培养过程分：初代培养、继代培养；按培养基的物理状态分：固体培养、液体培养。

4、植物组织培养在农林中的应⽤：植株离体快繁、⽆病毒苗⽊培育、次⽣代谢物的产⽣、培育新品种或创造新品种、植物种质资源的离体保存、⼈⼯种⼦、基因⼯程的应⽤。

5、外植体：植物组织培养中作为离体培养材料的器官或组织的⽚段。

在继代培养时，将培养的组织切段移⼊新的培养基时，这种切段也称外植体。

6、愈伤组织：指在植物受伤后的伤⼝处或在植物组织培养中外植体切⼝处产⽣的⼀团不定形的薄壁组织。

7、脱分化：指离体培养条件下⽣长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂，逐渐失去原来的结构和功能⽽恢复分⽣状态，形成⽆组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程。

《植物组织培养》复习提纲一、名词解析1、植物组织培养：是将植物的离体材料无菌培养，使其生长‘分化’增值，再长出完整植株或生产次生代谢物质的技术。

2、植物器官培养：是以植物的根、叶、花、果实等植物器官为外植体进行的离体培养。

3、细胞全能性：4、植物组培苗工厂化生产：5、微繁技术：6、外植体：7、脱分化：8、灭菌：9、无菌操作：10、根芽激素理论：11、器官培养：12、褐变：13、玻璃化：14、无菌的范畴：15、污染：16、愈伤组织：二、填空选择1、超净工作台按气流的组织形式，可分为垂直层流和水平层流两种工作台。

2、在利用植物组织培养实际生产过程中，理论上年生产量(Y)决定于每瓶苗数(m)、每周期增殖倍数(X)和年增殖周期数(n)，其公式为 Y=mX n。

3、MS培养基中，蔗糖浓度一般为 1％～5％，琼脂浓度一般为 0.6%～0.8% ，pH值一般调到 5.0～6.0 ，常用和调节pH。

4、在外植体接种前应该进行严格的灭菌，所用的消毒剂氯化汞的浓度一般为 0.1％～1％，是由重金属汞离子作用来达到灭菌的；次氯酸钙的浓度一般为，次氯酸钠的浓度一般为，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生氯气来杀菌的。

酒精的浓度一般为。

5、植物组织培养过程中培养材料的污染病原主要分为和两大类。

6、植物组织培养外植体愈伤组织的形成需要两个必须的条件，一是，二是。

7、在植物组织培养中，一个成熟细胞或分化细胞转变为分生状态的过程，即诱导形成愈伤组织的过程，叫做。

8、体细胞胚发生一般要经历4个发育阶段，分别是：、、、。

9、在MS培养基中，提供外植体生长发育所需的碳架和能源的培养基成分是（蔗）糖。

10、植物组织培养过程中，常用的生长激素有、、、，其活性强度为＞＞＞，配制成母液时多用或助溶。

11、植物组织培养过程中，常用的细胞分裂素有、、、，其活性强度为＞＞＞，配制成母液时多用助溶。

12、组织培养过程中，从外植体上诱导形成的一团无序生长的薄壁组织是。

•第一章概述•一、组织培养与生物技术•二、植物组织培养概念•三、植物组织培养发展简史•四、组织培养在观赏植物上应用概况一、组织培养与生物技术1、生物技术是通过基因重组、细胞培养、细胞融合和酶反应等人为的控制手段改变生物的遗传性状。

生物技术主要包括：基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程。

2、植物组织培养隶属于生物技术范畴。

植物组织培养在生物技术中的作用：承上启下（1）为基因转移提供适当的受体，如愈伤组织、细胞、不定芽等。

（2）为再生植株的性状表现创造条件。

基因工程、遗传转化都必须反应到整株水平才能利用，这些研究必须与植物细胞和组织培养相结合才能展现它的作用。

二、植物组织培养概念(Plant tissue culture)由于培养的对象是脱离了母体的外植体，在试管内培养，所以植物组织培养是指:①在无菌条件下，②分离植物体的一部分（外植体），接种到：③人工配制的培养基上，④在人工控制的环境条件下，⑤使其产生完整植株的过程，统称为植物组织培养。

以也称植物离体培养或试管培养。

“植物组织培养”的英文表达•Plant culture in vitro •Plant tissue culture •In test – tube culture •Micropropagation外植体（explant）:•指脱离了植物母体的用于离体培养的植物材料，统称为外植体。

•器官：根、茎、叶、花、果、茎尖等•组织：表层、皮层、髓部等•细胞：大孢子、小孢子、体细胞。

三、植物组织培养发展简史•（一）萌芽阶段•（二）理论准备阶段•（三）奠基阶段•（四）蓬勃发展阶段•（五）植物组织培养技术的逐步完善（一）萌芽阶段•1838年，德国科学家施莱登（Schleiden）和施旺(Schwann)创立了•“细胞学说”：无论植物还是动物，都是由细胞构成的。

•细胞是生物体的基本结构单位和功能单位。

如果具有与有机体一样的条件，每个细胞应该可以独立生活和发展。

组培复习资料第一章绪论1、植物组织培养：是指将植物的离体器官、组织、细胞以及去除细胞壁的原生质体，放在人工控制的无菌环境条件下培养，使其生长、分化并成长为完整植株的过程。

2、植物细胞组织培养：指在离体(in vitro)条件下利用人工培养基(medium)对植物器官、组织、细胞、原生质体等进行培养，使其长成完整植株的过程3、组织培养材料：◆器官：根、茎尖、叶、花、果实、种子等◆组织：形成层、表皮、皮层、胚、胚乳等◆细胞：大孢子、小孢子、体细胞◆原生质体基本特点：无菌、离体材料、人工培养基与培养环境4、根据组织培养材料分类：器官培养、茎尖分生组织培养、愈伤组织培养、细胞培养、原生质体培养5、组织、器官或细胞培养：指利用生物体各部分组织、器官或细胞进行离体培养，使之形成愈伤组织或完整有机体的技术。

6、愈伤组织: 指在人工培养基上由外植体（explant）形成的一团无序生长的薄壁细胞。

7、外植体（explant）: 在植物组织培养中，由活体（in vivo）植物体上提取下来，接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等。

8、脱分化（dedifferentiation）：一个成熟细胞或分化细胞转变成为分生状态的过程，即形成愈伤组织的过程。

9、再分化（redifferentiation）：植物成熟细胞经历了脱分化之后，即形成愈伤组织之后，由愈伤组织再形成完整的植株的过程。

10、原生质体培养：指将微生物或植物细胞游离成原生质体，在适宜培养条件下，依据细胞全能性使其再生细胞壁，并进行细胞分裂分化，形成完整个体的技术。

11、培养方式:固体培养、液体培养◆培养物量:大量培养、微量培养◆培养过程中是否需要光: 光培养、暗培养◆培养方法不同: 平板培养、微室培养、悬浮培养、单细胞培养◆培养器官的不同：花药培养、胚珠培养、根培养、茎尖培养12、细胞全能性（cell totipotengcy）学说：植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，在一定条件下具有发育成为完整植株的潜在能力。

《植物组织培养技术》识记部分、组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器、空调机、天平、显微镜、蒸馏水发生器、酸度计等。

6、培养基成分主要包括①无机营养成分（大量元素、微量元素和铁盐）、②有机营养成分（包括维生素、氨基酸等）、③植物生长调节物质、④碳水化合物、⑤其它物质。

7、培养基最常用的碳源是蔗糖，使用浓度在1%-5% 常用3 %。

8、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的碳源，而且还能维持培养基渗透压。

9、在固体培养时琼脂是使用最方便、最好的凝固剂和支持物，一般用量为6-10g／L 之间。

10、驯化的目的：在于提高试管苗对外界环境条件的适应性，提高其光合作用的能力，促使试健壮，提高苗的移裁成活率。

11、生长素/细胞分裂素的高低决定着外植体的发育方向，其比值高：有利于根的形成和愈伤组织的形成；低：有利于芽的形成。

12、培养基灭菌一般在108 kPa的压力下，锅内温度达121 ℃，维持15-20min。

13、选择外植体时应选择①选择优良的种质、②选健壮的植株、③选最适的时期和④选取适宜的大小。

17、绝大多数培养植物再生植株时都先经过愈伤组织阶段。

18、愈伤组织形成大致经历诱导期、分裂期和分化期三个时期。

20、愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式和胚状体方式。

26、在离体叶组织脱分化和再分化培养中，茎和芽的分化主要有4个途径：直接产生不定芽、由愈伤组织产生不定芽、胚状体形成、形成球状体或小鳞茎等途径。

35、MS和H培养基适合双子叶植物花药培养；B5培养基适合豆科和十字花科花药培养；N6培养基适合禾谷类作物的花药培养。

45、原生质体培养基常用的渗透压稳定剂有糖溶液系统和盐溶液系统两种。

最常用的渗透剂是甘露醇和山梨醇。

48、目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径是茎尖培养脱毒。

50、通过茎尖培养脱毒时，常以带1-2个幼叶原基的茎尖（约0.2—0.3mm）作外植体较合适。

植物组织培养强化版题型构成：一、填空题每空一分，共30分二、名词解释5题，共10分三、简答题7题，40分四、问答题，一题共20分。

两题中任选一题做一、填空题，30分1、植物离体快速繁殖是指利用植物组织培养技术，将植物的外植体、、、等进行离体培养在短时间内获得大量遗传性一致的个体的方法。

2、原生质体分离的主要方法有：机械法、酶解法。

3、植物组织培养前外植体灭菌时常用的消毒剂的种类有：、、、对植物外植体的毒害分别表现为：、、。

4、植物组培室的空间构成？5、培养基的灭菌方法有哪些类型？紫外线灭菌，高压蒸汽灭菌，熏蒸灭菌，过滤膜灭菌6、如何调节渗透压？通常利用蔗糖来调节渗透压。

胚越小要求越高的渗透压；随着胚的发育啧要求逐步降低蔗糖浓度。

曼陀罗心型胚期要求的蔗糖浓度为0.8%，鱼类型要求蔗糖浓度为1%~0.5%甘露醇或山梨醇作为渗透压稳定剂调节7、植物生长调节剂如何配置，如何溶解？a．若不溶于水，则应先把他们溶解在很少量的适当溶剂中，然后再加蒸馏水到最终容积（生长素一般溶于1mol/L的NaOH或95%酒精中，细胞分裂素一般溶于1mol/L的HCL中。

8、影响组培苗移栽成活的主要因素有哪些？9、体细胞胚胎发生的方式有哪两种形式？10、离体植物培养的几个重要概念11、体细胞杂种的鉴定方法有哪些？形态和育性鉴定；细胞学和分子细胞学鉴定；生化鉴定；分子生物学鉴定12、花粉培养的最佳取样时间是什么？单核期，尤其是单核中，晚期（单核靠边期13、单细胞分离采用的植物材料，如何维持渗透压？二、名词解释复习1、植物组织培养：在无菌条件下，对植物组织，器官，细胞原生质体等离体活材料进行培养促使其生长发育，并再生成完整植株的过程。

12、人工种子：指通过组织培养技术，将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位。

15、体细胞杂交：在离体条件下通过两个亲本体细胞原生质体的融合以及随后将融合产物培养成杂种植株的过程。

(1) 什么是植物组织培养?植物组织培养是在无菌条件下，将植物体的任何一部分，如植物器官、组织、细胞以及原生质体等，培养在人工配制的培养基上，并给予合适的培养条件（包括营养、激素、温度、光照、湿度），使之发育成完整植株的过程。

（广义）又叫离体培养：指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞、原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

（狭义）组织培养：指用植物各部分组织，如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。

(2) 什么是"外植体"?从植物体上分离下来的用于离体培养的材料称为外植体。

(3) 按照外植体的不同，植物组织培养可以分成几类?可以分成5类1、植株培养2、器官培养（胚，花药，子房，根、茎和叶）3、组织培养（各种组织、愈伤组织）4、原生质体培养5、细胞培养（愈伤组织分离或花粉单细胞或很小的细胞团)(4) 植物组织培养有哪些特点?①培养条件可以人为控制②生长周期短，繁殖率高③管理方便，利于工厂化生产和自动化控制(5) 你认为植物组织培养技术在当前的农业生产上有什么价值?为什么?（一）快速繁殖种苗用组织培养的方法进行快速繁殖是生产上最有潜力的应用，包括花卉观赏植物、蔬菜、果树、大田作物及其他经济作物。

快繁技术不受季节等条件的限制，生长周期短，而且能使不能或很难繁殖的植物进行增殖。

（二）无病毒苗的培养植物在生长过程中几乎都要遭受到病毒病不同程度的危害，有的种类甚至同时受到数种病毒病的危害，尤其是很多园艺植物靠无性方法来增殖，若蒙受病毒病，代代相传，越染越重，甚至会造成极严重的后果。

（三）在育种上的应用植物组织培养技术为育种提供了许多手段和方法，使育种工作在新的条件下更有效的进行（四）人工种子人工种子，是指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗颗粒体。