血液常规检查 血沉 网织红细胞
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网织红细胞计数(RC)1、检验目的网织红细胞是没有完全成熟的红细胞内残存的核糖核酸(RNA)经特殊染色后成网状结构。
网织红细胞计数的目的是有助于作骨髓造红细胞的能力。
2、检验原理网织红细胞是没有完全成熟的红细胞,其胞浆内尚存有嗜碱性的核糖核酸(RNA)物质,经煌焦油蓝或新亚甲蓝活体染色后呈浅蓝或深蓝色的网状结构。
标本采集3、标本3.1 末梢血糖采集方法:标本采集后应立即进行染色。
3.2 静脉血采集方法:用含有EDTA-K2抗凝真空采集管采集血液,标本应在4小时内进行处理,若保存4时可延迟到8小时。
4、设备和试剂4.1 日本OLYMPUS公司的CH—2显微镜。
4.2 试管、玻片、Miller窥盘(置于显微镜目镜内)等。
4.3 10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液。
5、操作步骤5.1 试管法:于小试管内滴加1滴煌焦油蓝生理盐水溶液。
5.2 假如2滴末梢血(抗凝静脉血),并与试管中混匀。
5.3 静置15——20分钟后,取1滴制成涂片。
5.4 油镜下观察1000个红细胞中网织红细胞,法定单位报告。
6、干扰因素6.1 活体染色体时间不能过短,室温过低时可置于37温箱。
6.2 每次制片2张,每张计数500个红细胞,避免分布不均匀引起误差。
6.3 试剂应定期更换,以免变质。
6.4 因操作误差大,不宜用玻片直接染色法。
7、网织红细胞绝对值计算ARC网织红细胞数/L=计数500个RBC所见网织红细胞数X 2/10008、生物参考值区间正常人网织红细胞:成人0.005——0.015 绝对值(24——84)×109/L新生儿0.03——0.06 绝对值(144——336)×109/L9、实验室解释9.1 网织红细胞数值可反映骨髓造血功能的状态,可作为贫血治疗疗效观察的指标。
9.2 减少:常见于再生障碍性贫血、苯中毒等。
9.3 增多:表示骨髓造血功能旺盛,见于溶血性贫血,出血性贫血,恶性贫血,以及缺铁性贫血和巨幼细胞贫血治疗有效时。
红细胞检查1、妊娠3个月以上血沉加快是属于生理性增高。
2、魏氏法血沉参考值:<50岁:男性0~15mm/h,女性0~20mm/h;>50岁:男性O~20mm/h,女性0~30mm/h;>85岁:男性O~30mm/h,女性O~42mm/h;儿童O~10mm/h。
3、骨髓移植后,RET大于15×109/L,表示无移植并发症;若小于15×109/L,伴中性粒细胞和血小板增高,可能为骨髓移植失败。
4、正常情况下,外周血可出现Ⅲ型和Ⅳ型网织红细胞。
若骨髓增生明显,可出现Ⅰ型和Ⅱ型网织红细胞。
5、正常正常情况下,Ⅲ型网织红细胞约占20~30%,Ⅳ型约占70~80%。
6、网织红细胞发育阶段分为4型,包括:丝球形、网型、破网型、点粒型。
7、正常成人的MCV参:80~100fl,新生儿:86~120fl。
8、高脂血症、白细胞增多症可使MCH假性增高。
9、MCV=HCT/RBC。
10、遗传性球形红细胞贫血是正常体积均一性贫血。
11、MCV减低、MCH减低、MCHC正常是属于单纯小细胞贫血,包括慢性感染、慢性肝肾疾病性贫血。
12、温氏法测血细胞比容时,离心管和注射器必须洁净干燥,以防溶血。
离心力不足时血细胞比容误差很大,不易计算MCV、MCHC。
抗凝剂应选择对血细胞体积无影响且溶解迅速,EDTA-K2效果好,亦可采用双草酸盐抗凝剂。
13、离心后血液由上之下分别为血浆层、血小板层、白细胞层和有核细胞层、还原红细胞层、带氧红细胞层。
14、点彩红细胞是红细胞内出现的异常结构,不是形态改变。
15、靶型红细胞见于各种低色素性贫血(如珠蛋白生成障碍性贫血、HbC病)、阻塞性黄疸、脾切除后。
16、球形红细胞见于遗传性和获得性球形细胞增多症(如自身免疫溶血性贫血、直接理化损伤如烧伤等)和小儿。
17、小红细胞的直径<6um18、红细胞中央1/3为生理性淡染区占整个红细胞19、HiCN转化液PH近中性(7.2±0.2)。
【全血细胞计数】 Complete blood count计数每升血液中红细胞、白细胞、血小板数量,同时测定血细胞体积、血细胞某种物质含量等,由此判断血细胞质量有无异常。
采血部位:静脉、毛细血管抗凝剂:EDTA-K2或EDTA-K3(乙二氨四乙酸钾盐)检测方法:手工检测,仪器检测送检要求:及时送检,不可置于4C冰箱?一、红细胞相关参数:RBC Hb He;红细胞平均值(MCV MCH MCHC); RDW;形态改变(一)RBC Hb、Het:RBC:红细胞计数,单位体积外周血中红细胞的数目。
Hb:血红蛋白计数,单位体积外周血中血红蛋白的含量。
Het :血细胞比容,指红细胞在全血中所占的体积比。
临床意义:1、减少:(1) RBC和 Hb减少T贫血。
(2)根据 Hb来分级贫血:轻度 120-91g/L中度90-61g/L重度60-31g/L极度<30g/L(3)各种贫血时,RBC和 Hb减少程度可不一致。
(4)增生性贫血:骨髓增生活跃,如缺铁性贫血、溶血性贫血、失血性贫血等。
增生减低性贫血:骨髓增生低下,如再生障碍性贫血。
生理性减少:妊娠中晚期;老年人(造血功能减弱);6月至2岁婴幼儿(造血原料不足)病理性减少:红细胞生成减少(再生障碍性贫血、缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血)红细胞破坏增多(溶血性贫血)红细胞丢失过多(痔疮、寄生虫等)Ps.妊娠生理性贫血:妊娠期母体血容量增加,其中血浆的增多较红细胞更显著,血液处于相对稀释的状态,称妊娠生理性贫血。
妊娠合并巨幼红细胞性贫血:①孕妇对叶酸(VB9)需求量增大,正常妊娠每天最低需食物叶酸500-600ug,以供胎儿及母体需要。
双胎妊娠对叶酸的需求更大。
②妊娠期恶心、呕吐、食欲下降严重,叶酸摄入减少。
③孕妇有胃肠道疾病时,如慢性萎缩性胃炎、胃部分或大部分切除等,使胃黏膜壁细胞分泌的因子减少,导致VB12吸收障碍,加重叶酸和 VB12的缺乏。
④药物干扰。
通过一碳方式进行新代并用于治疗癌症的药物,如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶,可能会导致功能性叶酸缺乏的结果。
血液1.血红蛋白【正常值】男:120--160克/升,女:110--150克/升【临床意义】血红蛋白的减少,可反映贫血的程度;增加可为生理性或病理性。
2.红细胞计数【正常值】男:4.0--5.5×10*12/升,女:3.5--5.0×10*12/升【临床意义】对诊断各种贫血及真性红细胞增多症有意义。
3.网织红细胞计数【正常值】0.2--1.5% 【临床意义】对于贫血的鉴别论断及抗贫血治疗的效果观察有意义。
4.血型测定【正常值】A、B、O、AB型。
【临床意义】确定各型血型。
5.白细胞计数【正常值】成人:4--10×10*9/升,儿童:8--10×10*9/升。
【临床意义】增高:常见于各种炎症及某些血液病;减低:可见于再障及病毒感染。
6.白细胞分类【正常值】中性:0.54--0.75%,嗜酸性:0.005--0.05%,嗜碱性:0--0.01%,淋巴:0.2--0.4%,单核:0.03--0.08%.【临床意义】通过观察各类白细胞的形态及百分比,对某些感染、寄生虫病、传染病及某些血液病等的诊断和鉴别诊断有一定意义。
7.异常淋巴细胞【正常值】0.048。
【临床意义】增高,多见于传染性单核细胞增多症及其它病毒性疾病。
8.血小板计数【正常值】成人:100--300×10*9/升,儿童:120--250×10*9/升。
【临床意义】减少:可见于原发性或继发性血小板减少性紫癜、再障、急性白血病,伤寒、脾功能亢进、化学药物中毒等;增多:在临床上较少见,有特发性血小板增多症、脾切除术后等。
9.出血时间【正常值】1--3分钟。
【临床意义】延长:可见于血小板减少、血管性假性血友病。
10.凝血时间【正常值】1--5分钟(玻片法);5--10分钟(试管法)。
【全血细胞计数】Complete blood count计数每升血液中红细胞、白细胞、血小板数量,同时测定血细胞体积、血细胞内某种物质含量等,由此判断血细胞质量有无异常。
采血部位:静脉、毛细血管抗凝剂:EDTA-K2或EDTA-K3(乙二氨四乙酸钾盐)检测方法:手工检测,仪器检测送检要求:及时送检,不可置于4℃冰箱?一、红细胞相关参数:RBC Hb Hct;红细胞平均值(MCV MCH MCHC);RDW;形态改变(一)RBC、Hb、Hct:RBC:红细胞计数,单位体积外周血中红细胞的数目。
Hb:血红蛋白计数,单位体积外周血中血红蛋白的含量。
Hct:血细胞比容,指红细胞在全血中所占的体积比。
临床意义:1、减少: (1)RBC和Hb减少→贫血。
(2)根据Hb来分级贫血:轻度120-91g/L 中度90-61g/L 重度60-31g/L 极度<30g/L(3)各种贫血时,RBC和Hb减少程度可不一致。
(4)增生性贫血:骨髓增生活跃,如缺铁性贫血、溶血性贫血、失血性贫血等。
增生减低性贫血:骨髓增生低下,如再生障碍性贫血。
生理性减少:妊娠中晚期;老年人(造血功能减弱);6月至2岁婴幼儿(造血原料不足)病理性减少:红细胞生成减少(再生障碍性贫血、缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血)红细胞破坏增多(溶血性贫血)红细胞丢失过多(痔疮、寄生虫等)Ps.妊娠生理性贫血:妊娠期母体血容量增加,其中血浆的增多较红细胞更显著,血液处于相对稀释的状态,称妊娠生理性贫血。
妊娠合并巨幼红细胞性贫血:①孕妇对叶酸(VB9)需求量增大,正常妊娠每天最低需食物叶酸500-600ug,以供胎儿及母体需要。
双胎妊娠对叶酸的需求更大。
②妊娠期恶心、呕吐、食欲下降严重,叶酸摄入减少。
③孕妇有胃肠道疾病时,如慢性萎缩性胃炎、胃部分或大部分切除等,使胃黏膜壁细胞分泌的内因子减少,导致VB12吸收障碍,加重叶酸和VB12的缺乏。
④药物干扰。
通过一碳方式进行新陈代谢并用于治疗癌症的药物,如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶,可能会导致功能性叶酸缺乏的结果。
原因是,这些药物能抑制叶酸通道中的关键酶,如甲氨蝶呤抑制二氢叶酸还原酶(DHFR),5-氟尿嘧啶抑制胸苷酸合成酶(TS)。
叶酸吸收降低也能发生类似二甲双弧、消胆胺、抗痉挛药和H2阻断剂等药物中,但这些都是在饮食叶酸摄入量较低的情况下发生的。
叶酸和VB12都是合成DNA过程中重要的辅酶,叶酸缺乏导致FH4合成障碍,进一步导致DNA合成障碍,全身多种组织受累,以造血组织最为严重,引起幼红细胞增殖成熟障碍,骨髓内出现形态和功能上均异常的巨幼红细胞,寿命较短,往往过早破坏,造成贫血。
表现为头晕、疲乏无力、全身水肿、心悸、气短、皮肤黏膜苍白、腹泻、舌炎、舌乳头萎缩等。
2、增多:(1)生理性增多:新生儿(一周内)、高原生活、剧烈运动、成年男性高于成年女性。
(2)病理性增多:相对性:血浆容量减少,如严重呕吐、腹泻、出汗、烧伤、尿崩症、糖尿病酮症酸中毒、慢性肾上腺皮质功能减退、甲状腺功能亢进危象等。
绝对性:临床上称为红细胞增多症,分原发性与继发性。
①继发性:血中EPO增多所致。
(缺氧/其他疾患→EPO↑→RBC↑)。
EPO可代偿性增加,因血氧饱和度减低引起,红细胞增多程度与缺氧程度成正比。
生理性EPO代偿性增加见于胎儿、新生儿、高原地区居民。
病理性则见于严重慢性心肺疾病,如COPD、肺源性心脏病、发绀型先天性心脏病,以及携氧能力低的异常血红蛋白病等。
EPO非代偿性增加,可见于某些肿瘤或肾脏疾患,如肾癌、肝细胞癌、卵巢癌、肾胚胎瘤、肾上腺皮质腺瘤、子宫肌瘤以及肾盂积水、多囊肾等。
②原发性:称为真性红细胞增多症,是一种原因未明的以RBC增多为主的骨髓增生性疾病,目前认为是多能造血干细胞受累所致。
特点是RBC持续性显著增多,可高达(7-10)×10*12/L,Hb(180-240)g/L,全身总血容量增加,白细胞和血小板也不同程度增多。
本病属于慢性和良性增生,部分患者可转变为白血病等。
3、Hct:可反映红细胞的增多或减少,但受血浆容量改变和红细胞体积大小的影响。
(1)增高:各种原因所致血液浓缩,HCT常达0.5以上。
临床上测定脱水患者的HCT作为补液参考。
也可见于真性红细胞增多症等,可达0.6以上,甚至0.8.(2)减低:见于各种贫血。
由于贫血类型不同,红细胞体积大小也有不同,血细胞比容的减少与红细胞数目的减少不一定成正比。
(二)红细胞平均值:MCV:平均红细胞比容,指每个红细胞的平均体积(fl)。
MCV=Hct/RBCMCH:平均红细胞血红蛋白量,指每个红细胞所含Hb平均量(pg)。
MCH=Hb/RBCMCHC:平均红细胞血红蛋白浓度,指每升血细胞中平均含Hb浓度(g/L)。
MCHC=Hb/Hct(三)RDW:红细胞体积分布宽度,反映外周血红细胞体积异质性的参数,由血细胞分析仪测量而获得。
可用RDW-CV即红细胞体积大小的变异系数表示,也可用RDW-SD方式。
临床意义:12、用于缺铁性贫血的诊断和鉴别诊断:早期诊断--在缺铁性贫血发生之前,隐性缺铁期病人RDW增高。
鉴别诊断--缺铁贫、轻型β珠蛋白生成障碍性贫血均表现为小细胞低色素性贫血,而缺铁贫患者RDW增高,珠蛋白生成障碍患者RDW88%为正常。
(四)红细胞形态改变:正常形态:双凹圆盘状,无核,向心性浅染,直径6-9um。
正常形态可见于正常人、再障、急性失血性贫血、白血病等。
临床意义:1、大小异常:小红细胞---直径<6cm,见于低色素性贫血,如缺铁性贫血等。
大红细胞---直径>10um,见于溶血性贫血、巨幼红细胞性贫血。
巨红细胞---直径>15cm,常见于叶酸或VB12缺乏所致的巨幼红细胞性贫血。
大小不均---见于病理造血,反映骨髓中红细胞系增生明显旺盛,在增生性贫血如缺铁贫、溶血性贫血、失血性贫血等贫血达中度以上时,均可见某种程度的红细胞大小不均,巨幼贫尤为明显。
形态异常:球形细胞---主要见于遗传性球形细胞增多症,也可见于自身免疫性溶血性贫血。
涂片中此种细胞约占20%以上才有诊断意义。
椭圆形细胞---正常人血涂片中约1%椭圆形细胞,遗传性椭圆形细胞增多症患者有严重贫血时可达15%以上,一般高于25%-50%才有诊断价值。
巨幼贫可见巨椭圆形细胞。
口形细胞---正常人血涂片中偶见,如多达10%以上,常见于遗传性口形红细胞增多症。
少量可见于DIC及酒精中毒。
靶形细胞---珠蛋白生成障碍性贫血、异常血红蛋白病,靶形细胞常占20%以上。
少量也可见于缺铁性贫血、其他溶血性贫血以及黄疸或脾切除后病例。
镰状细胞---常见于镰状细胞贫血。
泪滴形细胞---见于骨髓纤维化,也可见于珠蛋白生成障碍性贫血、溶贫。
棘形细胞--见于棘形细胞增多症(先天性无β脂蛋白血症),也见于脾切除后、酒精中毒性肝病、尿毒症等。
裂细胞---又称红细胞形态不整、红细胞异形症,指红细胞发生各种明显的形态学改变。
见于红细胞因机械或物理因素损伤,为微血管病性溶血的表现,如DIC、血栓性血小板减少性紫癜、溶血尿毒症综合征、恶性高血压以及心血管创伤性溶血性贫血,也可见于严重烧伤患者。
红细胞缗线状形成---涂片中红细胞呈串珠叠连,常见于多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症等。
2、染色反应异常:低色素性---提示血红蛋白含量明显减少。
常见于缺铁贫、珠蛋白生成障碍贫、铁粒幼细胞性贫血、某些血红蛋白病。
高色素性---提示血红蛋白含量明显增高。
常见于巨幼红细胞性贫血,球形细胞也呈高色素性。
嗜多色性---红细胞呈淡灰蓝或紫灰色,是一种刚脱核的红细胞,体积稍大,属未完全成熟红细胞,活体染色即网织红细胞。
正常人外周血中约占1%,增多反应骨髓造血功能旺盛,红系增生活跃,见于增生性贫血,尤以溶贫最为多见。
3、结构异常:成人外周血中红细胞凡有结构者,均属于异常红细胞。
有核红细胞---正常成人有核红细胞均存在于骨髓之中,外周血涂片中除在新生儿可见到有核红细胞外,成人出现均属于病理现象。
主要见于各种溶血性贫血、红白血病、髓外造血(如骨髓纤维化)及其他(如骨髓转移癌、严重缺氧等)。
染色质小体---Howell-Jolly body 红细胞内含有含有圆形紫红色小体,直径约0.5-1um,一个或数个,是核的残余物,亦可出现于晚幼红细胞中,此小体多见于溶血性贫血、巨幼贫、红白血病及其他增生性贫血。
嗜碱性点彩---basophilic stippling红细胞内含有细小嗜碱性点状物质,是核糖体凝集而成。
有时与嗜多色性并存,也可发现于有核红细胞胞质内。
大量增加并成粗颗粒状点彩,多见于铅中毒,也可见于骨髓增生旺盛的其他贫血如巨幼贫。
卡波环---Cabot ring成熟红细胞内出现一条很细的淡紫红色线状体呈环形或8字形,可能是纺锤体的残余物或是胞质中脂蛋白变性所致。
提示严重贫血、溶血性贫血、巨幼贫、铅中毒或白血病等。
二、白细胞相关参数:WBC、DC(一)WBC:白细胞计数,指单位体积外周血中白细胞总数。
正常健康成人为(3.5-9.5)×10*9/L.白细胞总数的增多或减少主要受中性粒细胞数量的影响,淋巴细胞等数量上的改变也会引起白细胞总数变化。
(二)Neutrophil:N,中性粒细胞,在外周血中可分为Nst(中性杆状核粒细胞)和Nsg(中性分叶核粒细胞),以分叶核为主,胞体呈圆形,直径10-13um,胞质丰富,染粉红色,含较多细小均匀的淡粉红色中性颗粒。
胞核深紫红色,染色质紧密呈块状,核为杆状或分叶状。
Ps.粒细胞在人体的分布:骨髓=分裂池(原、早幼、中幼)+成熟池(晚幼、杆状)+储存池(分叶、部分杆状)外周血=循环池+边缘池1、正常情况下,外周血中的N以2-3叶核为主。
骨髓中粒细胞数目是外周血中10倍左右。
2、循环池:进入外周血的成熟粒细胞有一半随血液而循环,受骨髓释放和边缘池的影响。
3、边缘池:进入外周血的另一半成熟粒细胞,粘附于微静脉血管壁,边缘池与循环池粒细胞保持动态平衡。
由于多种原因影响,边缘池和循环池的粒细胞可一过性的从一方转向另一方,使WBC大幅波动。
临床意义:1、N↑:多数情况下,N↑伴随着WBC↑,但二者也可能不一致。
(1)生理性:日间变化(下午较早晨更高)妊娠后期及分娩剧烈运动、激动、严寒酷热等。
此类波动在30%甚至50%无意义,定时和连续随访才有意义。
(2)病理性:机理为缺氧、细菌内毒素、肿瘤坏死产物等→边缘池释放增加、骨髓产生和释放增加。
①急性感染:化脓性球菌最为常见(金葡、溶血性链球菌、肺炎链球菌等)。
但在某些极重度感染时,WBC总数反而减低。
②严重组织损伤及大量血细胞破坏:如严重外伤,较大手术后,大面积烧伤,急性心肌梗死,严重血管内溶血后12-36小时,WBC总数和N可增多。